9](3)分別取200mgG0/Ag，0.4mmol日落黃，1.6mmol甲基丙稀酸，4mmol二甲基丙稀酸乙二醇酯，20mg偶氮二異丁腈，加入到SOmL甲醇/水(體積比為4:1)溶液中，超聲1min分散均勻。在水浴鍋中加熱至700C磁力攪拌，同時通氮氣15min除去氧氣，密封反應(yīng)6小時。依次用甲醇，去離子水清洗去除未反應(yīng)的物質(zhì)，所得產(chǎn)物采用索氏萃取法去除模板分子，萃取溶液為400mL甲醇/乙酸(體積比為9:1)，萃取時間為96h。萃取結(jié)束后依次用甲醇，去離子水清洗，真空干燥得到GO/Ag-MIPs。
[0030](4)殼聚糖500mg和ImL冰醋酸混合后，用去離子水定溶于10mL容量瓶中，然后超聲得到混合混勻的殼聚糖溶液。取1mg GO/Ag-MIPs，加入ImL殼聚糖溶液，超聲最終得到混合均一的電極修飾材料。
[0031 ] (5 )石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極的制備:
將玻碳電極用粒徑為0.3μπι，0.05μπι的Al2O3拋光粉依次進行打磨，直到打磨成鏡面為止，用去離子水清洗干凈，自然晾干。取4yL步驟(4)制備的電極修飾材料，滴在打磨成鏡面的玻碳電極表面，自然晾干，最終得到石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極。
[0032]圖1為本實施例最終合成的石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物透射電鏡圖。從圖中可以看到表面印跡聚合物比較均一地負載在石墨稀固體基質(zhì)上，表明石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物被成功合成。
[0033]探討傳感器對配料表中未含有日落黃的橙汁和梓檬汁進行檢測:
先對橙汁，芒果汁飲料進行預處理:超聲1min，去除飲料中的可溶性氣體;取2mL果汁，用1mL 0.1M磷酸鹽緩沖溶液(pH=5.5)稀釋。將實施例2制得的石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極作為工作電極，飽和甘汞電極作為參比電極，鉑絲作為對電極的三電極體系，連接到電化學分析儀CHI800C，采用線性掃描伏安法(掃描電壓0.3-1V)分別對果汁進行掃描，記錄峰電流值。
[0034]結(jié)果得到的峰電流值都為OA，表明橙汁和芒果汁都不含日落黃；以0.1M PBS緩沖溶液(pH=5.5)為底液配置1μΜ，2μΜ，4μΜ的日落黃標準溶液，采用標準加入法測試回收率，得到回收率為94-111%;結(jié)果表明本發(fā)明制備的電化學傳感器具有良好的穩(wěn)定性和準確度。
[0035]實施例3:
(I)將10mg氧化石墨烯超聲分散于10mL乙醇中，形成穩(wěn)定的棕色的氧化石墨烯溶液。加入2mL(3-巰基丙基)三甲氧基硅烷(MPTS)，水浴鍋中磁力攪拌，加熱60°C，反應(yīng)6小時，最后用乙醇清洗未反應(yīng)的MPTS，60 °C真空干燥得到GO-MPTS。
[0036](2)取13mg硝酸銀固體溶于去離子水中，攪拌加熱至沸騰狀態(tài)后，再加入4mL質(zhì)量分數(shù)為1%的檸檬酸鈉溶液當溶液呈黃綠色時，停止加熱，繼續(xù)攪拌冷卻至室溫，得到黃綠色的銀納米粒子溶膠。取10mgGO-MPTS超聲分散于10mL去離子水中，加入2mL制得的銀納米粒子溶膠，超聲1min混合均勻。然后靜置陳化6h。用去離子水洗滌去除未成鍵的銀納米粒子，真空干燥得到GO/Ag。
[0037](3)分別取10mgGO-Ag，0.2mmol日落黃，0.8mmol甲基丙稀酸，2mmol二甲基丙稀酸乙二醇酯，1mg偶氮二異丁腈，加入到40mL甲醇/水(體積比為4:1)溶液中，超聲1min分散均勻。在水浴鍋中加熱至600C磁力攪拌，同時通氮氣15min除去氧氣，密封反應(yīng)6小時。依次用甲醇，去離子水清洗去除未反應(yīng)的物質(zhì)，所得產(chǎn)物采用索氏萃取法去除模板分子，萃取溶液為200mL甲醇/乙酸(體積比為9:1)，萃取時間為96h。萃取結(jié)束后依次用甲醇，去離子水清洗，真空干燥得到GO/Ag-MIPs。
[0038](4)殼聚糖500mg和ImL冰醋酸混合后，用去離子水定溶于10mL容量瓶中，然后超聲得到混合混勻的殼聚糖溶液。取1mg GO/Ag-MIPs，加入ImL殼聚糖溶液，超聲最終得到混合均一的電極修飾材料。
[0039 ] (5 )石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極的制備:
將玻碳電極用粒徑為0.3μπι，0.05μπι的Al2O3拋光粉依次進行打磨，直到打磨成鏡面為止，用去離子水清洗干凈，自然晾干。取4yL步驟(4)制備的電極修飾材料，滴在打磨成鏡面的玻碳電極表面，自然晾干，最終得到石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極。
[0040]圖2為本實施例制得的石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極在含有
日落黃的磷酸鹽緩沖液(pH=5.5)的循環(huán)伏安圖。從圖中可以看到電化學活性的日落黃分子具有很高的還原峰電流，表明石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極可以用于檢測日落黃。
[0041 ]探討傳感器對配料表中含有日落黃的芬達和美年達進行檢測:
將實施例3制得的石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極作為工作電極，飽和甘汞電極作為參比電極，鉑絲作為對電極的三電極體系，連接到電化學分析儀CHI800C，在飲料中檢測日落黃分子的應(yīng)用，按如下方法進行:
首先配置以0.1M磷酸鹽緩沖溶液(pH=5.5)為底液的日落黃標準溶液(濃度分別為0.6μ1，0.8口]?，14]\1，24]\1，44]\1，64]\1，84]\1，1(^]\1，124]\0，使用線性掃描伏安法(掃描電壓0.3-1￥)在三電極體系下進行測試，記錄不同標準溶液對應(yīng)的峰電流值。得到峰電流的平均值與相應(yīng)的濃度繪制成標準曲線，得到線性方程ΙΡ( 10—7Α)= - 0.796c (μΜ) - 2.633CR2 =0.998)。
[0042]實際檢測時，先對芬達，美年達飲料進行預處理:超聲lOmin，去除飲料中的可溶性氣體;取2mL飲料，用1mL 0.1M磷酸鹽緩沖溶液(pH=5.5)稀釋后，在三電極體系條件下測定其對應(yīng)峰電流值，將數(shù)值代入得到的線性方程進行計算，即可檢測飲料中日落黃的含量。
[0043]平行三次實驗，飲料芬達，美年達中檢測到日落黃的含量分別為0.0l lg/Kg，
0.016g/Kg，屬于合格產(chǎn)品。采用標準加入法進行回收實驗，回收率為87-105%。結(jié)果表明本發(fā)明獲得的石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極對食物中的日落黃具有良好的檢測能力，從而可以應(yīng)用于食品中日落黃的檢測。
【主權(quán)項】
1.一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，具體包括以下步驟: (I)制備功能化氧化石墨烯(GO-MPTS)； (2 )功能化石墨稀/銀納米粒子復合材料(GO/Ag )的制備: 首先合成銀納米粒子溶膠:取硝酸銀固體溶于去離子水中，攪拌加熱至沸騰狀態(tài)后，再加入檸檬酸鈉溶液，當溶液呈黃綠色時，停止加熱，繼續(xù)攪拌冷卻至室溫，得到黃綠色的銀納米粒子溶膠； 將步驟(I)制備的功能化石墨烯完全超聲分散溶于去離子水中，然后加入銀納米粒子溶膠，超聲后室溫下靜置;反應(yīng)結(jié)束后，洗滌干燥，得到功能化氧化石墨烯/銀納米粒子復合材料(G0/Ag); (3 )石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物(GO/Ag-MIPs )的制備: 分別將步驟(2)制得的G0/Ag固體、模板分子日落黃、功能單體甲基丙烯酸、交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯、引發(fā)劑偶氮二異丁腈，加入到甲醇與水混合溶液中超聲混合，在磁力攪拌下反應(yīng);所得產(chǎn)物洗滌干燥后，采用索氏萃取法去除模板分子;萃取結(jié)束后依次用甲醇，去離子水清洗，真空干燥得到石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物(GO/Ag-MIPs); (4 )石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物(GO/Ag-MIPs )電極修飾材料的制備: 殼聚糖和冰醋酸混合后用去離子水定溶于容量瓶中，超聲得到混合混勻的殼聚糖溶液;取步驟(3)制得的GO/Ag-MIPs，加入殼聚糖溶液，超聲最終得到混合均一的電極修飾材料； (5 )石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極的制備: 取步驟(4)制備的電極修飾材料，滴在打磨成鏡面的玻碳電極表面，自然晾干，最終得到石墨稀/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(I)中所述的制備功能化氧化石墨稀的具體方法為:將50-200mg氧化石墨稀通過超聲分散于10mL乙醇中，然后加入1-3mL(3-巰基丙基)三甲氧基硅烷(MPTS)，水浴鍋中磁力攪拌，在50-70°C下加熱反應(yīng)6h。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的檸檬酸鈉溶液質(zhì)量分數(shù)為1%;所述硝酸銀與檸檬酸鈉的質(zhì)量體積比為13mg:4mL04.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的功能化石墨稀與銀納米粒子溶膠的比例為50-200mg: l_3mL;所述超聲lOmin，室溫下靜置6h。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(3沖所述加入的GO/Ag固體50-200mg，模板分子日落黃0.1 -0.4mmo I，功能單體甲基丙稀酸0.4-1.6mmol，交聯(lián)劑二甲基丙稀酸乙二醇酯l-4mmol，引發(fā)劑偶氮二異丁腈5-20mg。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述甲醇與水混合溶液中甲醇與水的體積比為4:1;所述混合超聲1min;所述磁力攪拌為在無氧條件下;所述反應(yīng)溫度50-70°C，反應(yīng)時間為6h; 所述萃取溶液為甲醇與乙酸混合液，其中甲醇與乙醇體積比為9: I，萃取時間為96h。7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述殼聚糖與冰醋酸的比例為500mg:lmL;所述GO/Ag-MIPs與殼聚糖溶液的比例為lOmg:IrnL08.權(quán)利要求1-7任意一項所述方法得到的電化學傳感器在檢測日落黃分子中的應(yīng)用。9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用為以石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極作為工作電極，飽和甘汞電極作為參比電極，鉑絲作為對電極的三電極體系，連接到電化學分析儀檢測日落黃分子。
【專利摘要】本發(fā)明屬于材料制備和食品添加劑檢測領(lǐng)域，涉及一種檢測日落黃的電化學傳感器的制備方法及其應(yīng)用；本發(fā)明利用氧化石墨烯與銀納米粒子共價鍵結(jié)合，制備石墨烯/銀納米粒子復合材料，再以日落黃為模板分子，甲基丙烯酸為功能單體，二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)劑，偶氮二異丁腈為引發(fā)劑，采用表面印跡技術(shù)合成石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物；再以殼聚糖為修飾材料對其修飾，得到石墨烯/銀納米粒子表面印跡聚合物修飾電極；將制備成功的修飾電極作為工作電極，連接到電化學分析儀，實現(xiàn)對日落黃的檢測；利用本發(fā)明獲得的修飾電極導電性能優(yōu)，選擇性強，檢測靈敏度高，可以穩(wěn)定，快速，方便地檢測飲料中日落黃的含量，從而具有現(xiàn)場檢測的能力。
【IPC分類】C08F220/06, G01N27/30, G01N27/48, C08K9/06, C08K3/04, C08F222/14, C08K3/08
【公開號】CN105675683
【申請?zhí)枴緾N201511016226
【發(fā)明人】劉燕, 秦長春, 孟敏佳, 倪良
【申請人】江蘇大學
【公開日】2016年6月15日
【申請日】2015年12月31日