一種黃腐酸鈉含量測定的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑的含量測定領(lǐng)域，具體涉及一種黃腐酸鈉含量測定的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃腐酸是苯駢呋喃類物質(zhì)，是一種氧化程度高，含活性官能團(tuán)多，易被人體吸收利 用，醫(yī)療效果最好的腐植酸。其藥理作用具體表現(xiàn)為消炎止痛、收斂抗?jié)B出、抗?jié)?、改善?液循環(huán)、抗風(fēng)濕、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫機(jī)能等方面。研究還發(fā)現(xiàn)黃腐酸鈉還具有止血活血、抗腫瘤、 治療糖尿病及其并發(fā)癥等多種作用。近年來許多報(bào)道肯定了黃腐酸及其鈉鹽在消炎、抗病 毒、抗菌、抗?jié)兊确矫娴娘@著效果，其對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸炎、腰腿痛、肩周炎和一些婦 科病、難治性慢性病等疾病的療效達(dá)90 %以上。對治療小面積燒傷、幼童流行性腮腺炎、慢 性腹瀉也有很好的效果，在增強(qiáng)抗病能力的同時無毒副作用而且對皮膚無刺激性和過敏 性。因此，建立一種高效靈敏的黃腐酸鈉含量測定方法對于大生產(chǎn)及臨床合理安全用藥均 有重要意義。
[0003] 目前黃腐酸鈉原料藥的含量測定主要采用容量滴定法，而黃腐酸鈉制劑包括膠囊 劑還沒有明確報(bào)道的含量測定方法。楊獻(xiàn)紅等（容量滴定法測定黃腐酸含量，河南化工， 2006年第23卷第8期）用稀硫酸提取試樣中的黃腐酸，在硫酸溶液中，用重鉻酸鉀將黃腐酸 中的碳氧化成二氧化碳，以鄰菲羅啉為指示劑，用硫酸亞鐵銨標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液反滴定，同時做 空白試驗(yàn)，根據(jù)重鉻酸鉀消耗量和黃腐酸的碳系數(shù)計(jì)算黃腐酸的含量。1998年制定的中藥 成方制劑標(biāo)準(zhǔn)中，黃腐酸鈉的含量測定方法為:精密量取烏金石溶液5ml，精密加重鉻酸鉀 液(0.1mol/L)5ml與硫酸15ml，在沸水浴中煮沸30分鐘，取出，冷卻，加水50ml與鄰二氮菲指 示液3滴，用硫酸亞鐵銨液(0.15mol/L)滴定，至溶液顯棕紅色，并將滴定結(jié)果用空白試驗(yàn)校 正，即得;每lml的重鉻酸鉀液(O.lmol/L)相當(dāng)于3.629mg的黃腐酸；以黃腐酸計(jì)，應(yīng)為標(biāo)示 量的 90.0 ~110.1%。
[0004] 容量滴定法憑借內(nèi)眼觀察顏色變化以判斷滴定終點(diǎn)，誤差較大;背景顏色、對顏色 的敏感度都會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，專屬性較差；同時，該方法操作繁瑣、靈敏度低、重現(xiàn)性 差，無法規(guī)避酸溶性物質(zhì)的干擾，難以實(shí)現(xiàn)對藥物中活性成分含量的準(zhǔn)確測定。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種黃腐酸鈉含量測定的方法，從而解決現(xiàn)有技術(shù)中，黃腐 酸鈉含量測定的方法靈敏度低、重現(xiàn)性差、誤差大的問題。
[0006] 為了解決實(shí)現(xiàn)目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：
[0007] -種黃腐酸鈉含量測定的方法，包括以下步驟：
[0008] 1)以稀鹽酸為溶劑，將黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品配制成標(biāo)準(zhǔn)品溶液;采用紫外分光光度法， 以稀鹽酸為空白對照，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0009] 2)將供試品與稀鹽酸配制供試品溶液，以稀鹽酸為空白對照，采用紫外分光光度 法檢測吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，即得供試品溶液的濃度；
[0010] 步驟1)和步驟2)中，所述稀鹽酸由9ml濃鹽酸稀釋至1000ml制備而成（即9 - 1000ml鹽酸）。濃鹽酸為市售分析純常規(guī)商品。
[0011] 本發(fā)明中，以稀鹽酸為溶劑，一方面可以良好的模擬胃酸環(huán)境，另一方面，該溶劑 在實(shí)際檢測中的干擾因素少，準(zhǔn)確性可以得到保證;利用紫外分光光度法建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，定 量下線、精密度、線性和回收率的方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果表明，該方法具有良好的線性、準(zhǔn)確度、精 密度，非常適用于黃腐酸鈉及其膠囊制劑的含量測定。
[0012] 黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品的制備可采用以下方法:將黃腐酸粉末溶于水中，加氫氧化鈉調(diào) pH至5~6，再加入乙醇混合，靜置，回收乙醇，沸煮，加入氫氧化鈉調(diào)pH至6~8，過濾，干燥， 即得。
[0013] 優(yōu)選的，每20g黃腐酸粉末，水的加入量為400ml，乙醇的加入量為600ml。沸煮的時 間為25~35min。干燥的溫度為55°C。
[0014] 取黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品200mg，在燒杯中溶解后于100mL容量瓶中用稀鹽酸定容，即可 得到黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
[0015] 分析條件的確立:取黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液300yL于100mL容量瓶中，用9-lOOOml鹽 酸定容，在紫外分光光度計(jì)上掃描，掃描波長范圍為200~400nm，以其紫外吸收波譜的吸光 度最大值對應(yīng)的波長作為檢測波長。本發(fā)明中，黃腐酸鈉的紫外吸光度在204nm處最大。
[0016]用上述2mg/mL的黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液，配成濃度分別為4、5、6、7、8μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品 溶液，以9-lOOOml鹽酸作空白對照，于檢測波長下測其吸光度；以黃腐酸鈉的吸光度(Y)為 縱坐標(biāo)，以黃腐酸鈉的濃度(X)為橫坐標(biāo)即可建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0017] 優(yōu)選的，步驟1)中，標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度為4~8yg/mL。標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程為Y = 0.0537X+0.1515,相關(guān)系數(shù)r = 0.9998。黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液的加樣回收率大于98%，RSD 值小于1.0 % ;黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液的日內(nèi)、日間RSD值均小于2.0 %，定量限值達(dá)到0.3426μ g/mL〇
[0018] 本發(fā)明的黃腐酸鈉含量測定的方法，相關(guān)系數(shù)r = 0.9998,表明黃腐酸鈉在4.Oyg/ ml~8.0μg/ml的濃度范圍內(nèi)與吸收度有良好的線性關(guān)系。該方法中，高、中、低三種濃度(4、 6、8μg/ml)的黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的加樣回收率均大于98%，RSD值小于1.0% ;黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn) 溶液的日內(nèi)、日間RSD值均小于2.0%，證明該方法精密度高，定量限值達(dá)到0.3426yg/mL。
[0019] 本發(fā)明的黃腐酸鈉含量測定的方法，具有簡便、快速、準(zhǔn)確度和精密度高的特點(diǎn)， 同時也適應(yīng)于黃腐酸鈉膠囊制劑的含量測定。黃腐酸鈉膠囊制劑是以黃腐酸鈉為活性成 分，輔以預(yù)膠化淀粉、淀粉、微晶纖維素等填充劑，羧甲基淀粉鈉、干淀粉等為崩解劑的膠囊 制劑，所用輔料可選擇生理學(xué)上可接受的成分，優(yōu)選的，黃腐酸鈉膠囊制劑采用 CN105106235A 的組成。
[0020] 供試品為黃腐酸鈉膠囊制劑時，先將黃腐酸鈉膠囊制劑的內(nèi)容物與稀鹽酸混合， 超聲使內(nèi)容物溶解，放冷、濾過，所得濾液再與稀鹽酸配制供試品溶液。優(yōu)選的，超聲的時間 為10min以上。
[0021 ]以黃腐酸鈉膠囊制劑的標(biāo)示量為10mg/粒計(jì)，取膠囊制劑20粒，將其內(nèi)容物置于 100ml燒杯中，加入9-lOOOml鹽酸，超聲10min，使內(nèi)容物溶解，放冷，濾過，精密量取續(xù)濾 液，用溶出介質(zhì)定容至l〇〇ml，得到黃腐酸鈉標(biāo)示濃度為2mg/mL的儲備液;精密吸取2mg/ml 的儲備液，與溶劑配成濃度為4~8yg/mL的供試品溶液，測定其在檢測波長處的吸光度，代 入標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得黃腐酸鈉的濃度。
[0022] 以上述方法進(jìn)行黃腐酸鈉膠囊制劑的含量測定，較中藥成方制劑標(biāo)準(zhǔn)的氧化還原 滴定方法，不僅操作更加簡單，易于掌握，且進(jìn)一步提高了靈敏度和準(zhǔn)確度，RSD值小于1%， 有利于方便、快捷、準(zhǔn)確地對黃腐酸鈉膠囊制劑(烏金石膠囊)的含量進(jìn)行測定，規(guī)范膠囊制 劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保大生產(chǎn)的品質(zhì)穩(wěn)定和臨床合理安全用藥。
【附圖說明】
[0023] 圖1為黃腐酸鈉的紫外吸收光譜。
【具體實(shí)施方式】
[0024]下面結(jié)合【具體實(shí)施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。以下實(shí)施例中，黃腐酸原料藥購 自江蘇平光信誼(焦作）中藥有限公司；UV-1000型紫外可見分光光度計(jì)購自上海天美儀器 有限公司。
[0025] 實(shí)施例1
[0026] 本實(shí)施例的黃腐酸鈉含量測定的方法，包括以下步驟：
[0027] 1)黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配置:取黃腐酸粉末20g加入400ml蒸餾水加熱至溶解， 加氫氧化鈉調(diào)pH至5.5，加入乙醇600ml充分?jǐn)嚢韬箪o置，穩(wěn)定后取上層溶液回收其中的乙 醇，加入氫氧化鈉調(diào)pH至7,沸煮30min，過濾除去雜質(zhì)，55°C恒溫干燥，即得黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn) 品；
[0028] 取黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品200mg，在燒杯中溶解后于100mL容量瓶中用9-lOOOml鹽酸定 容，即可得到黃腐酸鈉標(biāo)準(zhǔn)品溶液；
[002