同時(shí)檢測(cè)中成藥和保健品中非法添加的42種化學(xué)藥品的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種同時(shí)檢測(cè)中成藥和保健品中非法添加的42種化學(xué)藥品的方法， 屬于食品安全領(lǐng)域，特別是食品安全檢測(cè)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著生活條件的改善和社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，越來越多的人開始關(guān)注自己的身體健 康，大部分人認(rèn)為中藥和保健食品作用緩和、毒副作用相對(duì)較小，因此人們對(duì)保健食品及的 中成藥的需求也日益增長(zhǎng)。其中尤以緩解體力疲勞（壯陽(yáng)類）、輔助降血壓類、輔助降血糖 類、改善睡眠功能類的保健食品為暢銷消費(fèi)品。
[0003] 然而，中成藥、保健食品中非法添加化學(xué)藥品的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生，個(gè)別不法商家為了 增加療效、牟取暴力，在該類產(chǎn)品中添加了可促進(jìn)療效的化學(xué)藥品，以提高產(chǎn)品的療效，欺 騙消費(fèi)者。這種中成藥、保健食品中非法添加西藥的現(xiàn)象危害嚴(yán)重，可能使中成藥原有的藥 效發(fā)生改變，消費(fèi)者的用藥安全也得不到應(yīng)用的保障。消費(fèi)者在不知情的情況下服用這些 存在非法添加化學(xué)成分的藥物可能會(huì)造成巨大的健康隱患和帶來嚴(yán)重的不良反應(yīng)，同時(shí)掩 蓋了疾病的真實(shí)情況，以致延誤病情甚至危及生命。
[0004] 因此，建立保健食品和中成藥中非法添加化學(xué)藥品的快速測(cè)定方法對(duì)保障人民健 康和打擊不法行為具有重要的意義。
[0005] 但是由于保健品中通常含有多種天然藥物成分，使得其基質(zhì)非常復(fù)雜，對(duì)非法添 加的化學(xué)品具有很強(qiáng)的隱蔽性，不易被檢出。2012年12月14日，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理 總局（CFDA)發(fā)布了保健食品中可能非法添加的物質(zhì)名單（第一批），列出了聲稱緩解體力 疲勞類（壯陽(yáng)類）、輔助降血壓類、輔助降血糖類、改善睡眠功能類中成藥和保健食品中可 能添加的化學(xué)藥品，并公布了相應(yīng)的藥品檢驗(yàn)補(bǔ)充檢驗(yàn)方法（2008016、2009024、2009029、 2009032)〇
[0006] 這些檢測(cè)方法只針對(duì)某一類保健品進(jìn)行檢測(cè)，因而存在篩查不全面，易造成漏檢， 檢測(cè)周期長(zhǎng)、成本高等問題。這些問題都給執(zhí)法帶來困難，使得相關(guān)部門難以對(duì)市場(chǎng)進(jìn)行有 效監(jiān)管。
[0007] 因此，建立高通量、簡(jiǎn)單、快速、高靈敏度和高準(zhǔn)確度的篩查方法，從而可以實(shí)現(xiàn)同 時(shí)檢測(cè)出保健食品中多種類違法添加的化學(xué)成分的需求迫在眉睫。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是提供一種新的同時(shí)檢測(cè)中成藥和保健品中非法添加的42種化學(xué) 藥品的方法，這42種化學(xué)藥品涉及緩解體力疲勞類（壯陽(yáng)類）、輔助降血壓類、輔助降血糖 類、改善睡眠功能類這四大類。
[0009] 本發(fā)明所公開的檢測(cè)方法為高效液相色譜一四級(jí)桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜 聯(lián)用檢測(cè)方法，其中高效液相色譜采用C18分析柱，柱溫選用30°C，并以甲酸水-甲醇作 為洗脫液，利用梯度洗脫的方式進(jìn)行洗脫，洗脫梯度以體積計(jì)分別為80:20、10:90、10:90、 80:20,各梯度洗脫時(shí)間分別為2min、2. Omin、4. Omin、lmin。
[0010] 所述質(zhì)譜采用離子化電噴霧，電噴霧離子源為HESI-II，毛細(xì)管溫度為350°C，鞘 氣流速50L/min，輔助氣流速6L/min，吹掃氣流速3L/min，噴霧電壓為3KV，透鏡電壓為 50V，采用正離子和負(fù)離子模式分別采集數(shù)據(jù)或者正負(fù)離子同時(shí)切換采集數(shù)據(jù)，一級(jí)全掃描 的分辨率R = 70000,掃描范圍100~1000m/z，其二級(jí)質(zhì)譜條件為分辨率R = 17500 ;AGC target :2 X IO5;最大駐留時(shí)間：100ms ;分離窗口 ：2. Om/z。
[0011] 進(jìn)一步地，我們還公開了所述待測(cè)中成藥和保健品的前處理方法為：將待檢中成 藥或保健品溶解于體積比1:1混合的甲醇水溶液中，然后將此混合物離心、過濾，收集上清 液，即為待測(cè)樣品。
[0012] 其中如果中成藥或保健品的形式為片劑，則需要將其先剝?nèi)ヌ且拢ㄈ绻校?，然?磨碎，再置于體積比1:1的甲醇水溶液中溶解。如果需要我們還可以增加一個(gè)超聲處理步 驟，加速溶解、提取。
[0013] 如果中成藥或保健品的形式為膠囊，則先取出膠囊的內(nèi)容物，然后置于體積比1:1 的甲醇水溶液中溶解。如果需要我們還可以增加一個(gè)超聲處理步驟，加速溶解、提取。
[0014] 前述的超聲處理步驟中，我們可以將混合物置于超聲波提取器中，超聲處理5分 鐘。
[0015] 如果中成藥或保健品的形式為飲料或者液體制劑，則直接將其置于體積比1:1的 甲醇水溶液中混合溶解。
[0016] 優(yōu)選地，超聲條件為50-200kw，超聲時(shí)間10-50min
[0017] 所述離心條件為600~3000r/min，離心時(shí)間為3~8min。
[0018] 在進(jìn)樣前，需要對(duì)上清液進(jìn)行過濾處理，優(yōu)選這里采用濾膜為平均孔徑為0. 45 μ m 的濾膜。
[0019] 進(jìn)一步地，我們還公開了前述檢測(cè)方法在中成藥和保健品非法添加化學(xué)藥品定 量、定性檢測(cè)中的應(yīng)用。
[0020] 當(dāng)定性檢測(cè)時(shí)，分別將標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品液，采用上述的條件進(jìn)行測(cè)定，如果在樣 品液與標(biāo)準(zhǔn)工作液的一級(jí)全掃描質(zhì)譜圖中，樣液中目標(biāo)物質(zhì)的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留 時(shí)間偏差在±2. 5%以內(nèi)；則認(rèn)為樣品液中含有所參照的標(biāo)準(zhǔn)工作液成分。
[0021] 這一定性是參照歐盟2002/657/EC中對(duì)質(zhì)譜定性的相關(guān)規(guī)定，使用高分辨質(zhì)譜 時(shí)，1個(gè)母離子可獲得的識(shí)別點(diǎn)是2. 0,1個(gè)子離子可獲得的識(shí)別點(diǎn)是2. 5。因此只需通過測(cè) 定一級(jí)母離子和二級(jí)碎片離子的精確質(zhì)量數(shù)進(jìn)行樣品定性，即可滿足歐盟2002/657/EC對(duì) 禁用藥物準(zhǔn)確定性的規(guī)定。
[0022] 當(dāng)定量檢測(cè)時(shí)，需要以不同的化學(xué)藥品的標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)液，采用外標(biāo)法繪制標(biāo) 準(zhǔn)工作曲線。其中標(biāo)準(zhǔn)曲線的橫坐標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)液濃度，縱坐標(biāo)為標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)譜響應(yīng)峰面積。
[0023] 四級(jí)桿/靜電場(chǎng)軌道肼高分辨率質(zhì)譜儀具有優(yōu)秀的定量分析能力和高分辨率精 確質(zhì)量。本研究充分利用高效液相色譜-四級(jí)桿/靜電場(chǎng)軌道肼高分辨質(zhì)譜的高靈敏度和 強(qiáng)抗干擾能力的特點(diǎn)，快速定性定量測(cè)定中藥及保健品中非法添加的化學(xué)藥品，可在IOmin 內(nèi)同時(shí)準(zhǔn)確檢測(cè)出聲稱緩解體力疲勞（壯陽(yáng)類）、輔助降血壓類、輔助降血糖類、改善睡眠 功能類共四大類42種非法添加的化學(xué)藥品。
[0024] 本實(shí)驗(yàn)所采用的高效液相色譜一四級(jí)桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方 法，樣品前處理簡(jiǎn)單，中成藥和保健品樣品只需加入適量提取溶劑提取即可進(jìn)樣分析。本發(fā) 明樣品分析時(shí)間短，檢測(cè)速度快，一個(gè)樣品僅需10. 〇min。本發(fā)明對(duì)目標(biāo)化合物的選擇性強(qiáng)， 抗干擾能力強(qiáng)，能夠排除干擾組分而從復(fù)雜基質(zhì)中提取出目標(biāo)物質(zhì)。本發(fā)明所建立的色譜 質(zhì)譜條件下進(jìn)行測(cè)定，在實(shí)驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)r能夠達(dá)到0. 99以上，回收率較高。
[0025] 本發(fā)明所建立的方法前處理過程簡(jiǎn)便，分析時(shí)間短，準(zhǔn)確可靠，靈敏度高。適用于 中成藥和保健品中非法添加化學(xué)藥品的定性確證、定量檢測(cè)，可以用于中成藥及保健食品 中非法添加藥物的篩查。為控制保健品質(zhì)量、打擊保健品行業(yè)非法添加行為提供有效依據(jù)。
【附圖說明】
[0026] 圖1為實(shí)施例1中功能飲料中非法添加的化學(xué)藥品的質(zhì)譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0027] 實(shí)施例1.功能飲料