一種嘧菌酯檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種喀菌醋檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 喀菌醋屬于甲氧基丙締酸醋（Strobilurin)類殺菌農(nóng)藥，高效、廣譜，對(duì)幾乎所有 的真菌界（子囊菌亞口、擔(dān)子菌亞口、鞭毛菌亞口和半知菌亞口）病害如白粉病、誘病、穎 枯病、網(wǎng)斑病、霜霉病、稻攝病等均有良好的活性。可用于莖葉噴霧、種子處理，也可進(jìn)行± 壤處理，主要用于谷物、水稻、花生、葡萄、馬鈴馨、果樹、蔬菜、咖啡、草坪等。使用劑量為 25ml-50/畝?？撞荒芘c殺蟲劑乳油，尤其是有機(jī)憐類乳油混用，也不能與有機(jī)娃類增 效劑混用，會(huì)由于滲透性和展著性過強(qiáng)引起藥害，急性經(jīng)口：> 5000mg/kg;急性經(jīng)皮：> 2000mg/kg，其使用后，往往會(huì)有殘留。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種喀菌醋檢測(cè)方法。
[0004] 為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：
[0005] -種喀菌醋檢測(cè)方法，包括如下步驟：
[0006]S1、稱取樣品5.OOg-20.OOg于100血的具塞離屯、管中或200血玻璃瓶中，加20血 水及50血乙臘，充分混勻，超聲20min后，離屯、將上清液轉(zhuǎn)移或用濾紙過濾至加有6g化C1 的具塞量筒中，劇烈振蕩Imin，靜置比后取25mL上清液于lOOmL燒杯中，置于加熱板上 45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，蓋上錫錐紙，待凈化；
[0007]S2、將中性氧化侶柱依次用5mL丙酬-乙酸乙醋（體積比20 : 80)、5mL乙酸乙醋 活化，當(dāng)溶劑液面達(dá)到柱吸附層表面時(shí)，立即倒入步驟S1所得樣品溶液，用30mL燒杯接收 洗脫液；
[000引S3、用5血丙酬-乙酸乙醋（體積比20 : 80)洗刷燒杯后淋洗中性氧化侶柱，并 重復(fù)兩次，將盛有淋洗液的燒杯放在加熱板上45°C氮吹近干，用乙臘準(zhǔn)確定容至移入 進(jìn)樣瓶中，待測(cè)；
[0009]S4、將步驟S3所得的樣品W1. 0血/min過液相色譜柱，柱溫：35°C;進(jìn)樣量：20yL; 流動(dòng)相：乙臘：水=60 : 40等度洗脫。
[0010] 優(yōu)選的，所述液相色譜柱為島津Inertsil/WondaSil系列Cis柱（250mmX4. 6mm， Sum)。
[0011] 本發(fā)明具有W下有益效果：
[0012] 本發(fā)明建立了乙臘提取花生植株、±壤、花生仁、花生殼中喀菌醋的前處理方法和 液相色譜儀-紫外檢測(cè)器檢測(cè)的儀器方法。最小檢出量為0. 5ng，空白添加平均回收率為 73. 40% -106. 37 %，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1. 48% -9. 41 %，最低檢測(cè)濃度花生植株、±壤和花生 仁均為0. 05mg/kg，花生殼為0.Img/kg。本方法W50mL乙臘作為提取液，與已報(bào)道的丙酬 作為提取液相比用量較少，后期凈化較簡(jiǎn)單；與甲醇作為提取液相比，提取、鹽析后，加熱板 蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；檢測(cè)所用的儀器普及率較高，方法易推廣應(yīng)用。方法的 重現(xiàn)性，準(zhǔn)確度、精密度及檢出限均可滿足該農(nóng)藥在花生上的殘留分析要求。
【附圖說明】
[0013] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例中喀菌醋的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0014] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例中0.Img/L喀菌醋標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。
[001引圖3為本發(fā)明實(shí)施例中0. 5mg/L喀菌醋標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。
[0016] 圖4為本發(fā)明實(shí)施例中1.Omg/L喀菌醋標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。
[0017] 圖5為本發(fā)明實(shí)施例中2.Omg/L喀菌醋標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。
[001引圖6為本發(fā)明實(shí)施例中5.Omg/L喀菌醋標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖。 圖7為本發(fā)明實(shí)施例中表1的曲線方程，圖中，y= 35018X+968. 9R2= 0. 9999。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，W下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步 詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用W解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā) 明。
[0020] 實(shí)施例1
[0021] 稱取±壤20.OOg于100血具塞離屯、管中，加20血水及50血乙臘，充分混勻后，超 聲20min，然后離屯、將上清液轉(zhuǎn)移至加有6g化C1的具塞量筒中，劇烈振蕩Imin，靜置比后 取25血上清液于100血燒杯中，置于加熱板上45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，蓋上 錫錐紙，待凈化。
[002引實(shí)施例2
[0023] 稱取花生植株20.OOg于200mL玻璃瓶中，加20血水及50mL乙臘，充分混勻后，超 聲20min，用濾紙過濾至加有6g化C1的具塞量筒中，劇烈振蕩Imin，靜置比后取25血上 清液于100血燒杯中，置于加熱板上45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，蓋上錫錐紙，待 凈化。
[0024] 實(shí)施例3
[00巧]將花生仁打碎成粉，稱取樣品20.OOg于100血具塞離屯、管中，加20血水及40血乙 臘，充分混勻后，超聲20min，然后離屯、將上清液轉(zhuǎn)移至加有6g化C1的具塞量筒中，劇烈振 蕩Imin，靜置比后取20血上清液于100血燒杯中，置于加熱板上45°C氮吹近干，加入5血 乙酸乙醋浸泡，蓋上錫錐紙，待凈化。
[002引實(shí)施例4
[0027]稱取花生殼5.OOg于200血玻璃瓶中，加25血水及50血乙臘，充分混勻后，超聲 20min，用濾紙過濾至加有6g化C1的具塞量筒中，劇烈振蕩Imin，靜置比后取25血上清液 于100血燒杯中，置于加熱板上45°C氮吹近干，加入5血乙酸乙醋浸泡，蓋上錫錐紙，待凈 化。
[002引將中性氧化侶柱依次用5血丙酬-乙酸乙醋（體積比20 : 80)、5血乙酸乙醋活 化，當(dāng)溶劑液面達(dá)到柱吸附層表面時(shí)，立即倒入實(shí)施例1-4所得的樣品溶液，用30mL燒杯 接收洗脫液，用5mL丙酬-乙酸乙醋（體積比20 : 80)洗刷燒杯后淋洗中性氧化侶柱，并 重復(fù)兩次。將盛有淋洗液的燒杯放在加熱板上45°C氮吹近干，用乙臘準(zhǔn)確定容至2mL，W1. 0血/min過島津Ine;rtsil/WondaSil系列Cis柱（250mmX4. 6mm，5ym);柱溫：35°C;進(jìn)樣 量：20yL;流動(dòng)相：乙臘：水=60 : 40等度洗脫。
[0029] 將lOOOmg/L的喀菌醋標(biāo)準(zhǔn)溶液用乙臘稀釋配得5、2、1、0. 5、0.Img/L系列標(biāo)準(zhǔn)溶 液，W濃度（mg/L)-峰面積（A)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為y= 35018X+968. 9,R2= 0. 9999， 見表1和圖1-圖6。
[0030] 表1喀菌醋的標(biāo)準(zhǔn)曲線
[0032] 在上述色譜條件下，喀菌醋的最小檢出量為0. 5ng。根據(jù)添加回收率試驗(yàn)，在上述 色譜條件下花生植株、±壤和花生仁中喀菌醋的最低檢測(cè)濃度均為0. 05mg/kg，花生殼中喀 菌醋的最低檢測(cè)濃度為0.Img/kg。在上述色譜條件下，使用島津Inertsil/WondaSil系列 色譜柱，喀菌醋的相對(duì)保留時(shí)間為10.Omin。
[0033] 分別在花生植株、±壤、花生仁和花生殼的對(duì)照樣品中添加不同濃度的喀菌醋標(biāo) 樣溶液，搖勻，放置化后依樣品提取方法進(jìn)行處理，測(cè)得本方法的添加回收率見表2、表3、 表4和表5。 表2花生植株中喀菌醋的添加回收率
表3 ±壤中喀菌醋的添加回收率 CN105116090A 說明書 4/5 頁
當(dāng)添加水平為0. 05、0. 2、1.Omg/kg時(shí)，測(cè)得花生植株、±壤和花生仁的平均回收率分 別為90. 33%~103. 26%、91. 87%~106. 37%、77. 79%~83. 73%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為 2. 74%~4. 25%、1. 48%~6. 23%、5. 95%~9. 41%，當(dāng)添加水平為 0. 1、0. 2、1.Omg/kg時(shí)， 測(cè)得花生殼的平均回收率為73. 40 %~101. 88%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1. 94%~5. 55%，均符 合殘留分析要求。 W上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來 說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可W作出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，運(yùn)些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為 本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種嘧菌酯檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟： 51、 稱取樣品5. 00g-20.0 Og于IOOmL的具塞離心管中或200mL玻璃瓶中，加20mL水及 50mL乙腈，充分混勾，超聲20min后，離心將上清液轉(zhuǎn)移或用濾紙過濾至加有6g NaCl的具 塞量筒中，劇烈振蕩lmin，靜置Ih后取25mL上清液于IOOmL燒杯中，置于加熱板上45°C氮 吹近干，加入5mL乙酸乙酯浸泡，蓋上錫箱紙，待凈化； 52、 將中性氧化鋁柱依次用5mL丙酮-乙酸乙酯（體積比20 : 80)、5mL乙酸乙酯活 化，當(dāng)溶劑液面達(dá)到柱吸附層表面時(shí)，立即倒入步驟Sl所得樣品溶液，用30mL燒杯接收洗 脫液； 53、 用5mL丙酮-乙酸乙酯（體積比20 : 80)洗刷燒杯后淋洗中性氧化鋁柱，并重復(fù) 兩次，將盛有淋洗液的燒杯放在加熱板上45°C氮吹近干，用乙腈準(zhǔn)確定容至2mL，移入進(jìn)樣 瓶中，待測(cè)； 54、 將步驟S3所得的樣品以1.0 mL/min過液相色譜柱，柱溫：35°C ;進(jìn)樣量：20 y L ;流 動(dòng)相：乙腈：水-60 : 40等度洗脫。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種嘧菌酯檢測(cè)方法，其特征在于，所述液相色譜柱為島津 Inertsil/WondaSil 系列 C18柱（250mmX 4. 6mm，5 y m)。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種嘧菌酯檢測(cè)方法，將花生植株、土壤、花生仁、花生殼樣品經(jīng)乙腈超聲提取，取部分上清液濃縮近干，經(jīng)中性氧化鋁柱凈化，乙腈定容，液相色譜儀檢測(cè)，外標(biāo)法定量。本發(fā)明與已報(bào)道的丙酮作為提取液相比用量較少，后期凈化較簡(jiǎn)單；與甲醇作為提取液相比，提取、鹽析后，加熱板蒸干，不需要旋蒸，能提高工作效率；檢測(cè)所用的儀器普及率較高，方法易推廣應(yīng)用。方法的重現(xiàn)性，準(zhǔn)確度、精密度及檢出限均可滿足該農(nóng)藥在花生上的殘留分析要求。
【IPC分類】G01N30/88
【公開號(hào)】CN105116090
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510528547
【發(fā)明人】張軍鋒, 吳緒金, 馬婧瑋, 周玲, 馬歡, 劉進(jìn)璽, 李通, 祁玉峰, 周娟, 李萌, 趙艷琴, 馬瑩, 俎建英
【申請(qǐng)人】河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測(cè)技術(shù)研究所
【公開日】2015年12月2日
【申請(qǐng)日】2015年8月21日