一種基于柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸殘留量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及產(chǎn)品檢測(cè)分析領(lǐng)域，具體涉及一種柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢 測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸（PF0A)殘留量的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 全氟辛酸（Perfluorooctanicacid，PF0A)分子式為CF3 (CF2) 6C00H，是PFCs家族 中的代表性成員之一。由于其具有優(yōu)良的疏水疏油性能、高熱穩(wěn)定性、高化學(xué)穩(wěn)定性和高表 面活性等性能，作為"三防"表面整理劑廣泛地應(yīng)用于皮革生產(chǎn)中。然而，有研宄表明PF0A 廣泛存在于生物體內(nèi)和生態(tài)環(huán)境中，并具有生殖毒性、遺傳毒性、發(fā)育毒性、免疫毒性和肝 臟毒性等多種毒性，已成為引起重視的一種新型持久性有機(jī)污染物（POPs)。2004年國(guó)內(nèi)外 所關(guān)注的"杜邦不粘鍋事件"就是PF0A所引起的。歐盟指令中PF0A因被懷疑與PF0S具有 相似的危害性也將被列為受限物，而挪威污染控制管理局在2013年已經(jīng)對(duì)PF0A進(jìn)行了限 量使用。因此，皮革及其制品中PF0A含量的檢測(cè)分析具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和必要性。
[0003] 至今，對(duì)于皮革及其制品中PF0A的檢測(cè)分析尚無國(guó)家統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，浙江省發(fā)布的地 方標(biāo)準(zhǔn)DB33/T479-2009《紡織品、皮革中PF0S和PF0A的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》 可檢測(cè)皮革中PF0A含量。其它行業(yè)或?qū)W科已經(jīng)發(fā)展的PF0A檢測(cè)方法主要有HPLC-MS法、 HPLC-MS/MS法、GC-MS法等。鑒于這些方法雖檢測(cè)靈敏度高，但主要依賴高端分辨儀器，檢 測(cè)成本高，難以普及。選擇合適的衍生化試劑以及簡(jiǎn)單的前處理方法，開發(fā)不依賴于昂貴儀 器，分析成本低，易于操作和普及的分析檢測(cè)方法是環(huán)境分析化學(xué)的重要研宄方向之一。
[0004] 本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的不足和缺陷，借助于柱前衍生-高效液相色 譜-熒光檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合，提供一種可測(cè)定皮革、人造革及其制品中全氟辛酸（PF0A)的檢 測(cè)方法。本發(fā)明所提供的檢測(cè)方法是通過柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢測(cè)法實(shí)現(xiàn)的，旨 在解決現(xiàn)有方法大都依賴于高端分析檢測(cè)儀器，檢測(cè)成本高，方法難以普及應(yīng)用的問題。本 方法通過合理選擇高效液相色譜測(cè)定參數(shù)和測(cè)試步驟，采用熒光檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量， 可以實(shí)現(xiàn)皮革、人造革及其制品中PF0A含量的測(cè)定，具有經(jīng)濟(jì)有效、精密度高、抗干擾能力 強(qiáng)和檢測(cè)限低的特點(diǎn)。目前為止，國(guó)內(nèi)外采用柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢測(cè)器分析 測(cè)定皮革及其制品中PF0A的檢測(cè)方法檢測(cè)尚未見文獻(xiàn)和專利報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] -種基于柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸殘留量的檢 測(cè)方法，其特征在于所述全氟辛酸（PF0A)殘留量的測(cè)定方法是通過3-(溴乙?；┫愣顾?(3-BrAC)柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢測(cè)器測(cè)定的，測(cè)定方法具體包括以下步驟： (1)將待測(cè)樣品剪碎后置于容器中，加入有機(jī)溶劑后再置于超聲波清洗儀中超聲萃取 0. 5h~lh，濾出濾液；再加入有機(jī)溶劑，重復(fù)萃取1次，超聲時(shí)間縮短為10min~20min，再次 過濾，合并兩次濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀得濃縮的萃取液； (2) 用乙腈溶解旋蒸瓶中的萃取液，定容至1mL~3mL，渦旋振蕩3min~10min，用移 液槍準(zhǔn)確移取至10mL試管中，加入50yL~200yL衍生化試劑，加蓋密封后于50~80°C下振 搖反應(yīng)2h~5h，衍生反應(yīng)結(jié)束后迅速冷卻至室溫，置于通風(fēng)櫥中平衡1min~5min，經(jīng)0.45 Um有機(jī)濾膜過濾至樣品瓶中，得待測(cè)樣液； (3) 根據(jù)待測(cè)樣液中PF0A衍生產(chǎn)物的含量情況，選定濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn) 工作溶液和待測(cè)樣液中PF0A的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)，用高效液相色譜-熒 光檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定，如果樣液中與標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同的保留時(shí)間內(nèi)有峰出現(xiàn)，則需要確證；經(jīng) 確證分析被測(cè)物質(zhì)的色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一致，則判定待測(cè)樣品中含有PF0A; (4) 同時(shí)用高效液相色譜-熒光檢測(cè)器按步驟（1)、（2)檢測(cè)空白樣品； (5) 用外標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，按下式計(jì)算樣品中PF0A的含量： x= (C-C〇) */ /? 式中：x一樣品中PF0A的含量，單位為mg/kg; C一由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣液中PF0A的濃度，單位為yg/mL; CQ-由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白試驗(yàn)中PF0A的濃度，單位為yg/mL;f?一檢測(cè)液的最終稀釋比； m-檢測(cè)液所代表的試樣的質(zhì)量，單位為g。
[0006] 所述的一種柱前衍生_高效液相色譜_熒光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸殘留量的 檢測(cè)方法，其特征在于所述的超聲萃取有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、 二氯甲烷、四氯化碳和乙腈中的一種或幾種的混合物。
[0007] 所述的一種柱前衍生_高效液相色譜_熒光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸殘留量的 檢測(cè)方法，其特征在于所述的衍生化試劑為3-(溴乙?；┫愣顾兀?-BrAC)。
[0008] 所述的一種柱前衍生_高效液相色譜_熒光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸殘留量的 檢測(cè)方法，其特征在于所述的高效液相色譜-熒光檢測(cè)器測(cè)定時(shí)的參數(shù)條件如下： a) 色譜柱：C18 色譜柱（4.6X250mm，5ym); b) 色譜柱溫度：20°C~40°C; c) 焚光檢測(cè)器：激發(fā)波長(zhǎng)306nm，發(fā)射波長(zhǎng)420nm; d) 流動(dòng)相：60 %乙腈和乙腈，洗脫程序如表1所示； e) 流速：0? 8 ~ 1. 8ml,/min； f) 進(jìn)樣量：i〇yL; 表1高效液相色譜梯度洗脫程序
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種基于柱前衍生-高效液相色譜-巧光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氣辛酸殘留量的檢 測(cè)方法，其特征在于所述全氣辛酸（PFOA)殘留量的測(cè)定方法是通過3-(漠己酷基）香豆素 (3-BrAC)柱前衍生-高效液相色譜-巧光檢測(cè)器測(cè)定的，測(cè)定方法具體包括W下步驟： (1) 將待測(cè)樣品剪碎后置于容器中，加入有機(jī)溶劑后再置于超聲波清洗儀中超聲萃取 0. 5h~比，濾出濾液；再加入有機(jī)溶劑，重復(fù)萃取1次，超聲時(shí)間縮短為10min~20min，再次 過濾，合并兩次濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀得濃縮的萃取液； (2) 用己膳溶解旋蒸瓶中的萃取液，定容至1血~3血，禍旋振蕩3min-lOmin，用移 液槍準(zhǔn)確移取至10血試管中，加入50yL~200yL衍生化試劑，加蓋密封后于50~80°C下振 搖反應(yīng)2h~5h，衍生反應(yīng)結(jié)束后迅速冷卻至室溫，置于通風(fēng)榻中平衡1min~5min,經(jīng)0.45 ym有機(jī)濾膜過濾至樣品瓶中，得待測(cè)樣液； (3) 根據(jù)待測(cè)樣液中PFOA衍生產(chǎn)物的含量情況，選定濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，標(biāo)準(zhǔn) 工作溶液和待測(cè)樣液中PFOA的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)，用高效液相色譜-巧 光檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定，如果樣液中與標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同的保留時(shí)間內(nèi)有峰出現(xiàn)，則需要確證；經(jīng) 確證分析被測(cè)物質(zhì)的色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)一致，則判定待測(cè)樣品中含有PFOA; (4) 同時(shí)用高效液相色譜-巧光檢測(cè)器按步驟（1)、（2)檢測(cè)空白樣品； (5) 用外標(biāo)法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，按下式計(jì)算樣品中PFOA的含量： x= (C-C〇)*//m 式中；x-樣品中PFOA的含量，單位為mg/kg; C-由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣液中PFOA的濃度，單位為yg/mL; C。一由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白試驗(yàn)中PFOA的濃度，單位為yg/mL; f-檢測(cè)液的最終稀釋比； m-檢測(cè)液所代表的試樣的質(zhì)量，單位為g。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柱前衍生-高效液相色譜-巧光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氣 辛酸殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于所述的超聲萃取有機(jī)溶劑為甲醇、己醇、丙酬、己酸己 醋、S氯甲燒、二氯甲燒、四氯化碳和己膳中的一種或幾種的混合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柱前衍生-高效液相色譜-巧光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氣 辛酸殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于所述的衍生化試劑為3-(漠己酷基)香豆素（3-BrAC)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柱前衍生-高效液相色譜-巧光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氣 辛酸殘留量的檢測(cè)方法，其特征在于所述的高效液相色譜-巧光檢測(cè)器測(cè)定時(shí)的參數(shù)條件 如下： a) 色譜柱；C18 色譜柱（4. 6X250mm，5ym); b) 色譜柱溫度；20°C~40°C c) 巧光檢測(cè)器；激發(fā)波長(zhǎng)306nm，發(fā)射波長(zhǎng)420nm; d) 流動(dòng)相；60 %己膳和己膳，洗脫程序如表1所示；； e) 流速；0. 8 ~ 1. 8 血/min f) 進(jìn)樣量；1〇化； 表1高效液相色譜梯度洗脫程序_
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種柱前衍生-高效液相色譜-熒光檢測(cè)器測(cè)定皮革中全氟辛酸（PFOA）殘留量的檢測(cè)方法。其具體步驟包括：樣品超聲萃取，樣品提取液濃縮，萃取液中PFOA的衍生化反應(yīng)，膜過濾至樣品瓶中，用高效液相色譜-熒光檢測(cè)器進(jìn)行測(cè)定和確證，同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)，然后用外標(biāo)法定量測(cè)定樣液目標(biāo)化合物。本方法合理選擇高效液相色譜測(cè)定參數(shù)和測(cè)試步驟，選擇熒光檢測(cè)器并用外標(biāo)法定量，實(shí)現(xiàn)了皮革、人造革及其制品中全氟辛酸（PFOA）殘留量的精確測(cè)定。該方法具有經(jīng)濟(jì)有效、精密度高、抗干擾能力強(qiáng)和檢測(cè)限低的特點(diǎn)。
【IPC分類】G01N30-02
【公開號(hào)】CN104849373
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510277666
【發(fā)明人】林煒, 張鋒, 王春華, 俞凌云, 桑軍
【申請(qǐng)人】四川大學(xué)
【公開日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年5月27日