一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及的是中藥提取物，具體涉及一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蒙藥有著悠久的歷史，是蒙古族人民長(zhǎng)期同疾患作斗爭(zhēng)的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，并吸收藏醫(yī)、 漢醫(yī)經(jīng)驗(yàn)逐漸形成的，是中華民族醫(yī)學(xué)的一個(gè)重要組成部分，是具有民族特色的醫(yī)藥。它在 幾千年臨床醫(yī)學(xué)中被證實(shí)為一門不可缺少的學(xué)科。蒙藥材蓽撥是胡椒科植物蓽撥的近成熟 或成熟果穗，歸脾經(jīng)、胃經(jīng)、大腸經(jīng)、肺經(jīng)、膀胱經(jīng)、肝經(jīng)、腎經(jīng)。主治脘腹冷痛、嘔吐、泄瀉、偏 頭痛、鼻淵、外治牙痛、冠心病、心絞痛，是中、蒙、藏醫(yī)常用藥。
[0003] 研宄表明蓽撥能明顯抑制胃酸和胃蛋白酶的分泌，具有止痛、消炎、抗?jié)?，促進(jìn) 消化系統(tǒng)的功能。有方劑記載，蓽撥穴位敷貼可以治療胃脘證。同時(shí)在一定程度上還可以 治療腹瀉，對(duì)付痢疾，《唐太宗實(shí)錄》、《獨(dú)異志》、《定命錄》中均記載了唐太宗氣痢發(fā)動(dòng)，中醫(yī) 名藥試之無(wú)效，有人獻(xiàn)乳煎蓽撥一方，服之靈驗(yàn)的事，說(shuō)明蓽撥治腹瀉具有悠久歷史。蓽撥 還有一定的抗驚厥療效，在小鼠實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，有鎮(zhèn)靜作用，同時(shí)對(duì)于癲癇等精神疾病也用治 療效果，能維持中樞神經(jīng)的穩(wěn)定性，與一些神經(jīng)方面的藥物有相同的功效。除此之外，還有 關(guān)于蓽撥藥材治療牙痛和鼻炎的報(bào)道。因此，多項(xiàng)研宄表明，蒙藥材蓽撥用藥歷史悠久，具 有多重功效，是一味非常具有研宄價(jià)值的藥材。
[0004] 研宄發(fā)現(xiàn)蓽撥中的主要成分有胡椒堿，蓽撥寧，棕櫚酸，四氫胡椒酸，十一 碳-1-烯-3,4-甲撐二氧苯，哌啶，揮發(fā)油，芝麻素等。結(jié)合國(guó)內(nèi)外有關(guān)蓽撥的有效成分的 藥理作用的研宄發(fā)展認(rèn)為蓽撥中的有效成分胡椒堿、蓽撥寧有調(diào)血脂作用，尤其是胡椒堿 有顯著的調(diào)血脂作用，其療效顯著，未發(fā)現(xiàn)毒副作用，此后，關(guān)于蓽撥及其有效成分的調(diào)血 脂作用不斷深入。為此開展的研宄證明，蓽撥中胡椒堿能同時(shí)抑制內(nèi)源性和外源性血脂升 高，同時(shí)了解到胡椒堿也可能有毒性。但不可否認(rèn)胡椒堿在降血脂方面有很好的療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的之一是提供一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法，本發(fā)明采用超 微粉技術(shù)、超聲提取技術(shù)并結(jié)合硅膠柱層析和大孔吸附樹脂柱層析技術(shù)處理蒙藥材蓽撥， 得到一種全新的蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法，該方法操作簡(jiǎn)單，能夠?qū)⑸湏苤械亩?種藥效成分提取出來(lái)，且提高了藥效活性成分的提取率，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0006] 本發(fā)明具體涉及一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法，該方法包括以下步驟：
[0007] (I)蒙藥材蓽撥提取物的制備，包括
[0008] 1)購(gòu)買市售蒙藥材-干燥蓽撥果實(shí)進(jìn)行超微粉碎，加入乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 65-100wt %的乙醇溶液，在40_45°C下進(jìn)彳丁超聲提取，時(shí)間為4_6小時(shí)，過(guò)濾，得提取液；
[0009] (II)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分定性分析
[0010] 采用高效液相色譜對(duì)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分進(jìn)行定性分析，取上 述制備的蒙藥材蓽撥提取物溶于流動(dòng)相，通過(guò)高效液相色譜進(jìn)行分離，將得到的色譜圖同 蓽撥藥效成分標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖進(jìn)行比對(duì)，以分析該蒙藥材蓽撥提取物的成分；通過(guò)分析得 出，第（I)步中得到的蒙藥材蓽撥提取物的色譜圖能夠清楚的區(qū)分出各藥效成分的色譜 峰。
[0011] 優(yōu)選地，所述的一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法，該方法包括以下步驟：
[0012] (I)蒙藥材蓽撥提取物的制備，包括
[0013] 1)購(gòu)買市售蒙藥材-干燥蓽撥果實(shí)進(jìn)行超微粉碎，加入乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 65-100wt %的乙醇溶液，在40_45°C下進(jìn)彳丁超聲提取，時(shí)間為4_6小時(shí)，過(guò)濾，得提取液；
[0014] (II)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分定性分析
[0015] 采用高效液相色譜對(duì)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分進(jìn)行定性分析，取上 述制備的蒙藥材蓽撥提取物溶于流動(dòng)相，通過(guò)高效液相色譜進(jìn)行分離，將得到的色譜圖同 蓽撥藥效成分標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖進(jìn)行比對(duì)，以分析該蒙藥材蓽撥提取物的成分；通過(guò)分析得 出，第（I)步中得到的蒙藥材蓽撥提取物的色譜圖能夠清楚的區(qū)分出胡椒堿、蓽茇明寧堿、 二氫蓽茇明寧堿、胡椒酰胺、四氫胡椒酸、蓽茇壬二烯哌啶、蓽茇壬三烯哌啶、蓽茇十一碳三 烯哌啶、N-異丁基十八碳-2,4-二烯酰胺的色譜峰。
[0016] 優(yōu)選地，所述的一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法，該方法包括以下步驟：
[0017] (I)蒙藥材蓽撥提取物的制備，包括
[0018] 1)購(gòu)買市售蒙藥材-干燥蓽撥果實(shí)進(jìn)行超微粉碎，加入乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 65-100wt %的乙醇溶液，在40_45°C下進(jìn)彳丁超聲提取，時(shí)間為4_6小時(shí)，過(guò)濾，得提取液；
[0019] 2)將提取液經(jīng)過(guò)硅膠層析柱吸附，用水洗脫3個(gè)柱體積，棄去洗脫液，然后用有機(jī) 溶劑為洗脫液，進(jìn)行洗脫，收集該洗脫液；
[0020] 3)將上述洗脫液減壓濃縮，得干浸膏；
[0021] (II)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分定性分析
[0022] 蓽撥藥效成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：取等質(zhì)量的胡椒堿、蓽茇明寧堿、二氫蓽茇明 寧堿、胡椒酰胺、四氫胡椒酸、蓽茇壬二烯哌啶、蓽茇壬三烯哌啶、蓽茇十一碳三烯哌啶和 N-異丁基十八碳_2,4-二烯酰胺的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用流動(dòng)相溶解，即將上述物質(zhì)一起溶解于流 動(dòng)相中；
[0023] 采用高效液相色譜對(duì)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分進(jìn)行定性分析，取上 述制備的蒙藥材蓽撥提取物溶于流動(dòng)相，通過(guò)高效液相色譜進(jìn)行分離，將得到的色譜圖同 蓽撥藥效成分標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖進(jìn)行比對(duì)，以分析該蒙藥材蓽撥提取物的成分；通過(guò)分析得 出，第（I)步中得到的蒙藥材蓽撥提取物的色譜圖能夠清楚的區(qū)分出胡椒堿、蓽茇明寧堿、 二氫蓽茇明寧堿、胡椒酰胺、四氫胡椒酸、蓽茇壬二烯哌啶、蓽茇壬三烯哌啶、蓽茇十一碳三 烯哌啶、N-異丁基十八碳-2,4-二烯酰胺的色譜峰。
[0024] 優(yōu)選地，所述的一種蒙藥材蓽撥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)分析方法，該方法包括以下步驟：
[0025] (I)蒙藥材蓽撥提取物的制備，包括
[0026] 1)購(gòu)買市售蒙藥材-干燥蓽撥果實(shí)進(jìn)行超微粉碎，加入乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 65-100wt %的乙醇溶液，在40_45°C下進(jìn)彳丁超聲提取，時(shí)間為4_6小時(shí)，過(guò)濾，得提取液；
[0027] 2)將提取液經(jīng)過(guò)硅膠層析柱吸附，用水洗脫3個(gè)柱體積，棄去洗脫液，然后用甲 醇-氯仿為洗脫液，進(jìn)行洗脫，收集該洗脫液；
[0028] 3)將上述洗脫液減壓濃縮，得干浸膏；
[0029] 4)將上述干浸膏用丙酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75-80wt%的丙酮溶液溶解，上大孔吸附樹脂 柱，然后用3倍柱體積的丙酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10_20wt %的丙酮溶液洗脫，棄去洗脫液；再用丙 酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)為75-80wt%的丙酮溶液洗脫，收集該洗脫液；
[0030] 5)將上述洗脫液減壓濃縮，干燥，得蒙藥材蓽撥提取物；
[0031] (II)蒙藥材蓽撥提取物的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)成分定性分析
[0032] 色譜條件：色譜柱為C18 ;流動(dòng)相為甲醇-水溶液，甲醇與水的體積比為 50-70 : 30-50 ;檢測(cè)波長(zhǎng)為 250-350nm，柱溫為 30-45°C，流速 1.0 mL/min ;進(jìn)樣體積 50 μ L ; 采用等梯度洗脫；
[0033] 蓽撥藥效成分標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制：取等質(zhì)量的胡椒堿、蓽茇明寧堿、二氫蓽茇明寧 堿、胡椒酰胺、四氫胡椒酸、蓽茇壬二烯哌啶、蓽茇壬三烯哌啶、蓽茇十一碳三烯哌啶、N-異 丁基十八碳-2,4-二烯酰胺的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，用流動(dòng)相