一種鑒別地溝油的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及食品安全分析領(lǐng)域，具體的說是一種鑒別地溝油的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 地溝油泛指生活中存在的各種劣質(zhì)食用油，一般包括潲水油、煎炸廢油、食品及相 關(guān)企業(yè)產(chǎn)生的廢棄油脂等。地溝油是質(zhì)量極差，極不衛(wèi)生的，可引起消化不良，腹痛等疾病， 長期食用甚至可成為癌變誘因。經(jīng)濟(jì)利益驅(qū)使，不法商販將地溝油經(jīng)過堿煉、水洗、脫色、脫 臭等生產(chǎn)流程，后作為食用油銷售，給社會帶來了較大的危害。目前仍然欠缺對地溝油檢測 充當(dāng)把關(guān)作用的檢測方法。
[0003] 相關(guān)文獻(xiàn)報道，地溝油檢測方法有很多，如過氧化值、酸值、折光率、電導(dǎo)率等理化 檢測技術(shù)；脂肪酸、膽固醇、辣椒堿、鈉離子、重金屬等內(nèi)外源成分的氣相色譜、液相色譜、離 子色譜，原子吸收光譜檢測方法；紅外光譜、核磁等檢測方法。但是這些方法都是針對地 溝油中某一特定成分建立的分析技術(shù)，但是由于地溝油來源復(fù)雜，油脂生產(chǎn)工藝不同，導(dǎo)致 內(nèi)、外源物質(zhì)的組成存在不確定性，這些不確定性導(dǎo)致地溝油的鑒別很難通過檢測單一成 分獲得確定的分析結(jié)果。僅適用于特定類型的餐廚廢油脂的檢測，無法準(zhǔn)確鑒別地溝油。
[0004] 油脂中的脂肪酸主要以甘油三酯的形式存在，大約占油脂總量95%以上。雖然不 同來源的食用油脂中主要脂肪酸組成類似，但由于甘油三酯脂肪酸側(cè)鏈組成和位置的變 化，以及油脂在經(jīng)過烹調(diào)加熱后，會發(fā)生氧化、聚合等化學(xué)反應(yīng)，生成的內(nèi)源性產(chǎn)物很難通 過進(jìn)一步的精煉去除，使得油脂的組成成分存在較大差異。因此急需一種有效的方式用于 鑒別地溝油。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于一種鑒別地溝油的方法。
[0006] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
[0007] -種鑒別地溝油的方法，將待測油品上樣進(jìn)行高效液相色譜-質(zhì)譜測定，定性和/ 或定量對待測樣品中各個油脂的總離子流色譜峰，通過各個圖譜轉(zhuǎn)換成其色譜峰的相對百 分含量，將相對百分含量作為模型建立和未知樣品預(yù)測的自變量，最后經(jīng)偏最小二乘法判 別分析，進(jìn)而鑒別地溝油。
[0008] 具體為，將待測油品上樣進(jìn)行高效液相色譜-質(zhì)譜測定，采用正常油脂和地溝油 樣品作為參比上樣進(jìn)行高效液相色譜-質(zhì)譜測定，定性確定待測樣品是否含有各個油脂的 總離子流色譜峰，和/或者定量確定待測樣品各個油脂的總離子流色譜峰，通過各個圖譜 轉(zhuǎn)換成其色譜峰的相對百分含量，將相對百分含量作為模型建立和未知樣品預(yù)測的自變 量，最后經(jīng)偏最小二乘法判別分析，進(jìn)而鑒別地溝油；
[0009] 所述各個油脂的總離子流色譜峰采用面積歸一化處理，得到相應(yīng)的色譜峰的相對 百分含量。
[0010] 所述各個油脂的總離子流色譜峰為58個甘油三酯及其氧化物,具體為LnLnLn, LLnLn，LLLn，OLnLn，PLnLn，LLL，OLLn，PLLn，OLL，OOLn，PLL，POLn，OOL，POL，SLL，000,SOL，BLL以及三亞油酸甘油酯（LLL)、二亞油酸單油酸甘油酯（LOL)、二亞油酸單亞麻酸甘油酯 (LLnL)，二油酸單亞油酸甘油酯（OOL)等甘油三酯的5種亞油酰基氧化產(chǎn)物等。（其中，符號 代表：P:掠櫚酸palmiticacid;0:油酸oleicacid;L:亞油酸linoleicacid;Ln:亞麻酸 linolenicacid;S:硬月旨酸stearicacid;B:山箭酸behenicacid)
[0011] 將待測樣品溶解于丙酮中，作為上樣溶液進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜分析，將采集總離 子流圖。
[0012] 所述液相色譜測定時，采用C18填料色譜分析柱，質(zhì)譜檢測器進(jìn)行檢測，采用乙 腈-丙酮為流動相梯度洗脫。
[0013] 所述質(zhì)譜測定時,質(zhì)譜離子源采用ESI或APCI源。
[0014] 本發(fā)明的有益效果
[0015] 1.本發(fā)明采用高效液相色譜-質(zhì)譜儀對樣品進(jìn)行測定，先選擇包含58個用于鑒別 地溝油的色譜峰的指紋圖譜，將其面積歸一化處理，得到各譜峰的相對百分含量，建立了地 溝油高效液相色譜-質(zhì)譜特征色譜峰指紋圖譜數(shù)據(jù)庫，采用偏最小二乘法判別分析技術(shù)對 庫中樣品進(jìn)行分分析，建立判別模型，采用判別模型分析處理未知樣品的數(shù)據(jù)，用于鑒別未 知油為地溝油還是合格食用油。同時實現(xiàn)對地溝油的分析檢測以及分離純化。
[0016] 2.為避免化學(xué)計量學(xué)分析技術(shù)中的誤差，本發(fā)明可以通過不斷增加樣品量，完善 模型進(jìn)而提高準(zhǔn)確性和靈敏度。
[0017] 3.本發(fā)明的樣品前處理操作十分簡單，重復(fù)性好，經(jīng)簡單處理即可進(jìn)行測量，幾十 分鐘即可獲得一個樣品的高效液相色譜-質(zhì)譜圖譜，而后通過模型可以在短時間內(nèi)實現(xiàn)樣 品檢測。
[0018] 4.本發(fā)明檢測方法采用具有樣品前處理簡單、準(zhǔn)確率高、重復(fù)性好，且采用指紋圖 譜和多種成分的綜合判別分析，可以有效地減少僅針對單一成分進(jìn)行判別的錯誤率，提高 分析技術(shù)準(zhǔn)確率。
【附圖說明】
[0019] 圖IA為本發(fā)明實施例提供的正常油脂樣品高效液相色譜-質(zhì)譜總離子流圖。
[0020] 圖IB為本發(fā)明實施例提供的正常地溝油樣品高效液相色譜-質(zhì)譜總離子流圖。
[0021] 圖2為本發(fā)明實施例提供的建立的偏最小二乘法判別分析模型二維得分圖。
【具體實施方式】
[0022] 實施例
[0023] 樣品預(yù)處理：取11個地溝油樣品和5個食用油樣品200mg溶于2ml丙酮溶液，用 于LC-MS分析獲得樣品的總離子流色譜圖。其中，LC-MS操作條件：
[0024] 色譜條件：色譜柱：C18柱（250mmX4. 6mm，5iim);柱溫30°C;流動相：乙腈-丙酮 梯度洗脫；流速：l.〇ml/min;進(jìn)樣量：20iil。
[0025] 質(zhì)譜條件：離子源：APCI源，正離子檢測；高壓放電針電流：8PA;樣品錐孔電壓： 5V;源溫度：130°C;APCI加熱器溫度：500°C;脫溶劑氣流量：300L/hr;錐孔氣流量：100L/ hr;掃描范圍：200-1000m/z。
[0026] 采集樣品的總離子流色譜圖，截留甘油三酯色譜峰和甘油三酯氧化、聚合和分解 產(chǎn)物的總離子流圖色譜峰，共獲得58個色譜峰，將采集的色譜圖按面積積分，通過計算每 個峰相對總峰面積的百分比，進(jìn)行面積相對化(歸一化法）處理，計算相對百分含量。
[0027] 而后采用偏最小二乘法（SMCA-pll. 5軟件統(tǒng)計分析）（參見圖2)建立分析判別 (參見表1)模型。
[0028] 其中，數(shù)學(xué)模型采用偏最小二乘法判別，自變量為1-58個色譜峰的相對百分含量 (X11X2X3……X58),提取為2-3個主成分。
[0029] 表 1
[0030]
【主權(quán)項】
1. 一種鑒別地溝油的方法，其特征在于：將待測油品上樣進(jìn)行高效液相色譜-質(zhì)譜測 定，定性和/或定量對待測樣品中各個油脂的的總離子流色譜峰，通過各個圖譜轉(zhuǎn)換成其 色譜峰的相對百分含量，將相對百分含量作為模型建立和未知樣品預(yù)測的自變量，最后經(jīng) 偏最小二乘法判別分析，進(jìn)而鑒別地溝油。
2.按權(quán)利要求1所述的鑒別地溝油的方法，其特征在于：將待測油品上樣進(jìn)行高效液 相色譜-質(zhì)譜測定，采用正常油脂和地溝油樣品作為參比上樣進(jìn)行高效液相色譜_質(zhì)譜測 定，定性確定待測樣品是否含有各個油脂的的總離子流色譜峰，和/或者定量確定待測樣 品各個油脂的總離子流色譜峰，通過各個圖譜轉(zhuǎn)換成其色譜峰的相對百分含量，將相對百 分含量作為模型建立和未知樣品預(yù)測的自變量，最后經(jīng)偏最小二乘法判別分析，進(jìn)而鑒別 地溝油； 所述各個油脂的總離子流色譜峰采用面積歸一化處理，得到相應(yīng)的色譜峰的相對百分 含量。
3. 按權(quán)利要求1或2所述的鑒別地溝油的方法，其特征在于： 所述各個油脂的總離子流色譜峰為LnLnLn，LLnLn，LLLn，OLnLn，PLnLn，LLL，OLLn, PLLn，OLL，OOLn，PLL，POLn，00L，POL，SLL，000, SOL，BLL 以及三亞油酸甘油酯（LLL)、二亞 油酸單油酸甘油酯（L0L)、二亞油酸單亞麻酸甘油酯（LLnL)，二油酸單亞油酸甘油酯（OOL) 中的甘油三酯的5種亞油酰基氧化產(chǎn)物。
4. 按權(quán)利要求1或2所述的鑒別地溝油的方法，其特征在于： 將待測樣品溶解于丙酮中，作為上樣溶液進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜分析，將采集總離子流 圖。
5. 按權(quán)利要求4所述的鑒別地溝油的方法，其特征在于： 所述液相色譜測定時，采用C18填料色譜分析柱，質(zhì)譜檢測器進(jìn)行檢測，采用乙腈-丙 酮為流動相梯度洗脫； 所述質(zhì)譜測定時，質(zhì)譜離子源采用ESI或APCI源。
【專利摘要】本發(fā)明涉及食品安全分析領(lǐng)域，具體的說是一種鑒別地溝油的方法。將待測油品上樣進(jìn)行高效液相色譜-質(zhì)譜測定，定性和/或定量對待測樣品中各個油脂的總離子流圖色譜峰，通過各個圖譜轉(zhuǎn)換成其色譜峰的相對百分含量，將相對百分含量作為模型建立和未知樣品預(yù)測的自變量，最后經(jīng)偏最小二乘法判別分析，進(jìn)而鑒別地溝油。本發(fā)明檢測方法采用具有樣品前處理簡單、準(zhǔn)確率高、重復(fù)性好，且采用指紋圖譜和多種成分的綜合判別分析，可以有效地減少僅針對單一成分進(jìn)行判別的錯誤率，提高分析技術(shù)準(zhǔn)確率。
【IPC分類】G01N30-88
【公開號】CN104764837
【申請?zhí)枴緾N201410008886
【發(fā)明人】王世成, 王顏紅
【申請人】中國科學(xué)院沈陽應(yīng)用生態(tài)研究所
【公開日】2015年7月8日
【申請日】2014年1月8日