一種快速檢測輻照含脂食品中2-十二烷基環(huán)丁酮含量的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于輻照食品的檢測領域，具體涉及一種快速檢測輻照含脂食品中2-十二烷基環(huán)丁酮含量的方法。
【背景技術】
[0002]農產品食品輻照是一種有效的殺蟲滅菌、抑制發(fā)芽和延長貨架期的保鮮技術，目前在國內外許多國家已經實現(xiàn)了商業(yè)化應用。但歐盟和日本等國對輻照食品的商業(yè)化應用仍然十分保守，對輻照食品的種類和照射劑量也有嚴格的限制法規(guī)，如歐盟僅批準了草藥、香料和植物調味料允許輻照，最大允許劑量為lOkGy，日本僅批準了馬鈴薯的輻照，最大允許劑量為0.15kGy，且不允許重復照射，我國出口到歐盟、日本等國的食品因檢出非法輻照而被扣壓港口或退貨的現(xiàn)象時有發(fā)生。我國頒布的《GB 7718預包裝食品標簽通則》規(guī)定，經電離輻射射線或電離能量處理過的食品，應在食品名稱附近標明“輻照食品”，經電離輻射或電離能量處理過的任何配料，應在配料清單中標明。因此基于落實輻照食品標簽法規(guī)，減少國際貿易糾紛，防止非法照射、重復照射等問題，開展輻照食品的檢測鑒定技術研宄十分必要。
[0003]大量研宄表明，2_十二燒基環(huán)丁酮(2-dodecylcyclobutanone，2-DCB)是含脂食品輻照后產生的特異性輻解產物。2-DCB是由食品中的棕櫚酸或棕櫚酸甘油酯經電離輻射后裂解生成，性質較為穩(wěn)定，且由于大部分食品含有母體化合物棕櫚酸，因此以2-DCB作為標識物用于鑒定食品是否經過輻照處理，已成為輻照食品鑒別的實用方法之一。
[0004]目前2-DCB測定方法為傳統(tǒng)的歐盟標準EN1785和GB/T 21926方法，即粗脂肪提取-弗羅里柱或硅膠柱凈化除脂-氣相色譜質譜檢測。此法的缺點是前處理過程較為繁瑣，涉及到常規(guī)6-8小時的索氏提取、濃縮、固相萃取柱裝載填充、凈化、再濃縮等步驟，不僅操作難度大、時間長，而且降低了 2-DCB的回收率。
[0005]加速溶劑萃取(accelerated solvent extract1n，ASE)是一種處理固體和半固體樣品的方法，通過較高溫度和壓力條件下使用有機溶劑萃取，具有有機溶劑用量少、萃取效率高的特點，且在萃取池加入合適的吸附劑對脂肪基質進行在線吸附，而2-DCB則隨萃取溶劑流入收集瓶中，此法省去了固相萃取等后續(xù)的樣品凈化步驟。

【發(fā)明內容】

[0006]針對當前在檢測輻照食品中的2-十二烷基環(huán)丁酮存在的前處理工藝復雜，檢測時間長的缺陷，本發(fā)明提出一種快速、簡便、自動化程度高的檢測方法，即基于加速溶劑萃取在線凈化技術快速提取輻照含脂食品中2-DCB的方法。
[0007]一種快速檢測輻照含脂食品中2-十二烷基環(huán)丁酮含量的方法，包括如下步驟:
[0008](I)將待提取的輻照含脂食品粉碎，粉碎后與分散劑按質量比1:1?2混合均勻，得混合物；
[0009](2)取相當于待提取的輻照含脂食品質量15?20倍的脂肪吸附劑，置于底部放有濾膜的萃取池中，在其上部加入所述混合物，再在所述混合物上補加所述分散劑填滿萃取池，所述待提取的輻照含脂食品與萃取池的質量體積比為1:20?34，優(yōu)選1: 25?34 ;
[0010](3)在萃取池中加入萃取溶劑進行加速溶劑萃取，得到萃取液；
[0011](4)將所述萃取液用干燥劑除水后，將萃取溶劑蒸出，得到含有2-十二烷基環(huán)丁酮的提取物；
[0012](5)對所述的提取物進行2-十二烷基環(huán)丁含量的檢測。
[0013]本發(fā)明中所述的輻照含脂食品為經過輻照殺菌的高脂肪含量的食品，包括但是不局限于牛肉、豬肉等動物源含脂食品，以及芝麻、腰果等植物源含脂食品。
[0014]本發(fā)明中，所述萃取溶劑為非極性或弱極性有機溶劑，優(yōu)選正己烷、正庚烷、異辛烷。
[0015]本發(fā)明中，所述分散劑為硅藻土、無水硫酸鈉；優(yōu)選硅藻土，同其他分散劑相比，硅藻土對樣品基質起到的分散和防止結塊作用效果更好。
[0016]本發(fā)明中，所述濾膜為纖維素濾膜，該種濾膜可起到截留提取液中的細小顆粒，避免堵塞管路的作用。
[0017]本發(fā)明中，所述加速溶劑萃取過程中，萃取溫度為80?125 °C，萃取壓力1200-2500psi，靜態(tài)萃取5?lOmin，萃取2-4個循環(huán)。
[0018]優(yōu)選的，本發(fā)明采用如下的方法進行提取:
[0019](I)將待提取的輻照含脂食品粉碎，粉碎后與硅藻土按質量比1:1?2混合均勻，得混合物；
[0020](2)取相當于待提取的輻照含脂食品質量15?20倍的弗羅里硅土，置于底部放有纖維素濾膜的萃取池中，在其上部加入所述混合物，再在所述混合物上補加硅藻土填滿萃取池；
[0021](3)對萃取池進行加速溶劑萃取，萃取溶劑為非極性或弱極性有機溶劑，優(yōu)選正己烷、正庚烷、異辛烷，萃取溫度80?125°C，萃取壓力1200-2500psi，靜態(tài)萃取5?lOmin，得到萃取液，萃取2-4次，用相當于萃取池體積40% -60%的溶劑沖洗萃取池，將沖洗溶劑與每次得到的萃取液混合，得混合液，對萃取池進行氮氣吹掃60s ;
[0022](4)將所述萃取混合液用無水硫酸鈉除水后，將所述萃取溶劑蒸出，得到含有2-十二烷基環(huán)丁酮的提取物；
[0023](5)用氣相色譜-質譜法(GC-MS)對2_十二烷基環(huán)丁酮的含量進行檢測。
[0024]本發(fā)明公開的2-DCB測定的前處理方法與現(xiàn)有技術公開的內容相比具有的優(yōu)點和特點在于:
[0025]現(xiàn)有的2-DCB測定前處理方法為粗脂肪提取和固相萃取柱凈化除脂，粗脂肪提取方法通常有索氏提取法、直接溶劑萃取法等，這些方法的共同缺點是溶劑消耗量大、時間長(2?8h)、效率低、不能自動化進行，固相萃取柱凈化方法通常有自制固相萃取柱或使用商品固相萃取小柱，使用自制固相萃取柱存在消耗大量溶劑、操作繁瑣、時間長等缺點，使用商品固相萃取小柱存在承載量低、凈化不完全、回收率低等缺點。本發(fā)明的方法通過加速溶劑萃取并在線吸附樣品中的脂肪，一步提純樣品中的2-DCB，回收率、精密度均達到檢測分析要求，具有提取時間短、提取效率高、自動化程度高等優(yōu)點，單個樣品的提取時間僅需20min，可以實現(xiàn)利用2-DCB對食品輻照與否進行快速準確的鑒定，同時，可高精度實現(xiàn)含脂食品中2-DCB的含量檢測，為食品質量控制提供量化指標，為食品質量安全監(jiān)測提供支持。
【附圖說明】
[0026]圖1:萃取池中樣品裝填方式示意圖其中，I為硅藻土，2為硅藻土 +樣品，3為弗羅里硅土，4為纖維素濾膜；
[0027]圖2:實施例1-2中標準品和輻照樣品中2-DCB總離子流圖其中，I為標準品；2為4.5kGy輻照牛肉；3為1.5kGy輻照豬肉。
【具體實施方式】
[0028]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0029]實施例1
[0030](I)將未福照牛肉和4.5kGy福照牛肉樣品分別絞碎，準確稱取Ig未福照牛肉樣品和Ig用4.5kGy劑量輻照的牛肉樣品，向未輻照牛肉樣品中添加濃度為20mg/L的2-DCB標準品溶液0.0lmL并混勻，將稱取好的樣品分別與2g硅藻土混合均勻。
[0031](2)稱取15g弗羅里硅土，轉移至底部放有纖維素濾膜的34mL的萃取池中，再加入待測樣品與硅藻土的混合樣品，加入硅藻土填滿萃取池后進行加速溶劑萃取(填滿后萃取池結構如圖1)。
[0032](3)萃取條件:萃取溶劑為正己烷，萃取溫度80°C，萃取壓力1200psi，靜態(tài)萃取5min，萃取2個循環(huán)，萃取完成后，用相當于萃取池體積40%的溶劑沖洗萃取池，將每次得到的萃取液與沖洗溶劑混合，得混合液，對萃取池進行氮氣吹掃60s。
[0033](4)將步驟(3)得到的混合液過無水硫酸鈉后用旋轉蒸發(fā)儀蒸干，得到提取物，在提取物中加入2mL正己烷溶解，過0.45 μ m的微孔濾膜后得到GC-MS前處理樣品，每個樣品的提取設置3個平行。
[0034]將實施例1提取的樣品經下述方法完成2-DCB的測定:
[0035]GC-MS分析檢測條件:進樣口溫度:250 °C ;進樣量:I μ L ;進樣模式:無分流進樣；溶劑延遲:6min ;載氣:氦氣；載氣流速:1.65mL/min ;色譜柱(DB-5MS):30mX0.25mmX0.25 μ m ;升溫程序:初始柱溫 55°C，保持 lmin，以 15°C /min 升溫至 300°C，保持5min ;接口溫度:280°C ;離子源溫度:230°C ;電離能量:70eV ;掃描方式:選擇離子掃描；監(jiān)測離子:m/z 98、m/z 112。
[0036]采用本發(fā)明實施例1方法得到的測定結果為:
[0037]以未輻照豬肉為基質得到本發(fā)明方法脂肪清除率為99.4%，