本發(fā)明屬于藥用輔料分析檢測(cè)，具體涉及一種多糖凝膠中液體石蠟含量的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

1、液體石蠟是一種典型的工業(yè)礦物油，分為工業(yè)級(jí)、食品級(jí)、化妝品級(jí)以及藥用級(jí)等，能與除蓖麻油外的大多數(shù)脂肪油任意混合。在食品中，液體石蠟常用于食品上光、防黏、防潮、消泡、密封、脫模等，能夠延長(zhǎng)水果、蔬菜、雞蛋、罐頭等的貯存和保鮮期，但其不被腸胃吸收，若長(zhǎng)期攝入可引起消化系統(tǒng)障礙及脂溶性維生素吸收障礙。在醫(yī)藥中，藥用級(jí)液體石蠟可作為一種有機(jī)溶劑與司班85(乳化劑)混合成油相，用于制備小粒徑多糖微球，進(jìn)一步制備出用于面部填充的多糖凝膠。依據(jù)目前中國(guó)藥典和新藥審批規(guī)定，需對(duì)藥物合成中的殘留溶劑進(jìn)行控制，否則產(chǎn)品會(huì)對(duì)人體造成危害。因此，需對(duì)多糖凝膠中的液體石蠟含量進(jìn)行檢測(cè)，確保后續(xù)的清洗步驟已將大部分的液體石蠟去除。

2、目前液體石蠟的檢測(cè)方法有很多，但無(wú)凝膠樣品中液體石蠟含量檢測(cè)相關(guān)方法，大多數(shù)是檢測(cè)食品或止血粉中的液體石蠟，例如，中國(guó)專利cn107478650a提供了一種止血粉中液體石蠟殘留的檢測(cè)方法，該方法利用索氏提取器與石油醚(無(wú)水乙醚)水浴加熱的方法提取止血粉中的液體石蠟，通過(guò)對(duì)比樣品溶液與2％液體石蠟對(duì)照品的渾濁度，判斷止血粉中的液體石蠟是低于還是高于2％。但該專利方法僅能定性檢測(cè)止血粉中液體石蠟含量，干擾因素較多，結(jié)果不準(zhǔn)確，而且無(wú)法定量。中國(guó)專利cn110221005a也提供了一種止血粉中液體石蠟的檢測(cè)方法，該方法利用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀，以聯(lián)苯為內(nèi)標(biāo)，氯仿定容檢測(cè)，雖然樣品處理過(guò)程簡(jiǎn)單，但對(duì)儀器設(shè)備要求較高，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的干擾因素較多、檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)等問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種多糖凝膠中的液體石蠟含量檢測(cè)方法，是利用gc-fid法對(duì)含有液體石蠟的供試品進(jìn)行檢測(cè)，直接以液體石蠟作為對(duì)照品，正己烷為溶劑，由于氫火焰離子化檢測(cè)器(fid)的等碳響應(yīng)特性規(guī)避了缺乏礦物油標(biāo)準(zhǔn)的問(wèn)題，提高了液體石蠟檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確性，檢測(cè)結(jié)果更加可靠。

2、本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

3、一種多糖凝膠中液體石蠟含量的檢測(cè)方法，包括如下步驟：

4、將多糖凝膠供試品溶液進(jìn)氣相色譜儀，測(cè)定液體石蠟的峰面積，選取最具代表性的一個(gè)峰，然后將該峰的峰面積帶入液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得多糖凝膠供試品溶液中的液體石蠟濃度；最后將液體石蠟濃度帶入計(jì)算公式，獲得供試品溶液中的液體石蠟含量。

5、在上述檢測(cè)方法中，所述多糖凝膠供試品溶液由如下方法制備而成：

6、取15g多糖凝膠樣品，加入石油醚，置于索式提取裝置中，回流提取1～2h，回流溫度為40～60℃；回收溶劑，揮干溶劑；用5ml正己烷溶解石油醚提取物并轉(zhuǎn)移至50ml離心管中，加4ml?0.4mol/l氫氧化鉀-甲醇溶液，振蕩，靜置10min，加水10ml，靜置至上層溶液透明；取上層透明溶液過(guò)0.22μm濾膜，獲得多糖凝膠供試品溶液。

7、在上述檢測(cè)方法中，所述回流提取時(shí)間為2h；所述回流溫度為50℃。

8、在上述檢測(cè)方法中，所述氣相色譜儀的色譜條件如下：

9、色譜柱：agilent?hp-5(30m*0.32mm*0.25μm)；程序升溫：起始溫度100℃，維持5min，以20℃/min升溫至250℃，維持30min；進(jìn)樣口溫度：230～260℃；fid檢測(cè)器溫度：250～270℃；載氣流量40ml/min；氫氣流量55ml/min；不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量：1μl；載氣為高純氮?dú)狻?/p>

10、在上述檢測(cè)方法中，所述最具代表性的一個(gè)峰選自保留時(shí)間在9.102～9.109min區(qū)間內(nèi)的液體石蠟特征峰；優(yōu)選為保留時(shí)間在9.107min的液體石蠟特征峰。

11、在上述檢測(cè)方法中，所述液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)曲線由如下方法繪制而成：

12、(1)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制

13、稱取0.1g液體石蠟于50ml容量瓶中，正己烷溶解并定容至刻度，搖勻，作為石蠟標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1，濃度為2mg/ml；取25ml標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1至50ml容量瓶中，正己烷溶解并定容至刻度，搖勻，作為石蠟標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液2，濃度為1mg/ml；

14、(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液配制

15、將液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液2梯度稀釋至0.0025、0.005、0.025、0.5mg/ml的一系列不同標(biāo)準(zhǔn)溶液，用0.22μm濾膜過(guò)濾，獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液；

16、(3)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

17、將標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液注入氣相色譜儀內(nèi)，測(cè)定液體石蠟的峰面積，記錄對(duì)應(yīng)的色譜圖，以液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)x，峰面積為縱坐標(biāo)y，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算獲得回歸方程。

18、在上述檢測(cè)方法中，所述回歸方程可以為：y＝45.039x+6.3613，r2＝0.9978。

19、在上述檢測(cè)方法中，所述計(jì)算公式為：c＝(c0×5)/m；其中，c表示供試品中液體石蠟含量，單位mg/g；c0表示供試品中液體石蠟的濃度，單位mg/ml；m表示稱取的樣品重量，單位g。

20、本發(fā)明提供了上述方法在多糖凝膠中液體石蠟含量檢測(cè)中的應(yīng)用。

21、在本發(fā)明中，所述多糖凝膠選自乳化交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠、魔芋葡甘聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠中的一種；優(yōu)選為瓊脂糖凝膠。

22、本發(fā)明的有益效果為：

23、本發(fā)明利用氣相色譜儀對(duì)含有液體石蠟的多糖凝膠進(jìn)行檢測(cè)，直接以液體石蠟作為對(duì)照品(將液體石蠟作為標(biāo)準(zhǔn)品，配制不同濃度的液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)品溶液，根據(jù)液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度與峰面積制作標(biāo)準(zhǔn)曲線)，正己烷為溶劑，通過(guò)選取最具代表性的一個(gè)峰面積換算得到液體石蠟的含量，提高了液體石蠟檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確性，縮短檢測(cè)時(shí)間，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。同時(shí)，該檢測(cè)方法能夠定量檢測(cè)液體石蠟含量，線性良好，可準(zhǔn)確、靈敏地對(duì)含有液體石蠟殘留的多糖凝膠進(jìn)行檢測(cè)。

技術(shù)特征：

1.一種多糖凝膠中液體石蠟含量的檢測(cè)方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述多糖凝膠供試品溶液由如下方法制備而成：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述回流提取時(shí)間為2h；所述回流溫度為50℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述氣相色譜儀的色譜條件如下：

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述最具代表性的一個(gè)峰選自保留時(shí)間在9.102～9.109min區(qū)間內(nèi)的液體石蠟特征峰。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述最具代表性的一個(gè)峰為保留時(shí)間在9.107min的液體石蠟特征峰。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)曲線由如下方法繪制而成：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述回歸方程為：y＝45.039x+6.3613，r2＝0.9978。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述計(jì)算公式為：c＝(c0×5)/m；其中，c表示供試品中液體石蠟含量，單位mg/g；c0表示供試品中液體石蠟的濃度，單位mg/ml；m表示稱取的樣品重量，單位g。

10.權(quán)利要求1～9任一項(xiàng)所述方法在多糖凝膠中液體石蠟含量檢測(cè)中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種多糖凝膠中液體石蠟含量的檢測(cè)方法，屬于藥用輔料分析檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。所述檢測(cè)方法，包括如下步驟：將多糖凝膠供試品溶液進(jìn)氣相色譜儀，測(cè)定液體石蠟的峰面積，選取最具代表性的一個(gè)峰，然后將該峰的峰面積帶入液體石蠟標(biāo)準(zhǔn)曲線，獲得多糖凝膠供試品溶液中的液體石蠟濃度；最后將液體石蠟濃度帶入計(jì)算公式，獲得供試品溶液中的液體石蠟含量。本發(fā)明利用氣相色譜儀對(duì)含有液體石蠟的多糖凝膠進(jìn)行檢測(cè)，直接以液體石蠟作為對(duì)照品，正己烷為溶劑，通過(guò)選取最具代表性的一個(gè)峰面積計(jì)算液體石蠟的含量，提高了液體石蠟檢測(cè)的靈敏度與準(zhǔn)確性，縮短檢測(cè)時(shí)間，實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。同時(shí)，還能夠?qū)崿F(xiàn)液體石蠟含量的定量檢測(cè)。

技術(shù)研發(fā)人員：鄒圣燦,陳醒,王寶群,林莎莎
受保護(hù)的技術(shù)使用者：青島琛藍(lán)海洋生物工程有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/26