本發(fā)明涉及藥物檢測，尤其涉及一種枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)的檢測方法。

背景技術(shù)：

1、枸櫞酸莫沙必利(mosapride?citrate)，是一種選擇性5-羥色胺(5-ht4)受體激動藥，能促進(jìn)乙酰膽堿的釋放，刺激胃腸道而發(fā)揮促動力作用，從而改善功能性消化不良患者的胃腸道癥狀，但不影響胃酸的分泌?；瘜W(xué)名為4-氨基-5-氯-2-乙氧基-n-[[4-(4-氟芐基)-2-嗎啉基]甲基]苯甲酰胺枸櫞酸鹽二水合物，cas號：156925-25-6，具有如下結(jié)構(gòu)：

2、

3、關(guān)于枸櫞酸莫沙必利合成工藝，文獻(xiàn)報道多以兩個關(guān)鍵側(cè)鏈進(jìn)行縮合反應(yīng)，合成工藝如下：

4、

5、關(guān)鍵中間體4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(化合物i)需經(jīng)氯甲酸異丁酯活化后，將羧酸基團(tuán)活化成酸酐，4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐(化合物ii)與另一側(cè)鏈中間體2-氨甲基-4-(4-氟芐基)-嗎啉(化合物iii)進(jìn)一步?；赡潮乩?化合物iv)，其活化反應(yīng)程度對后續(xù)工藝反應(yīng)及最終枸櫞酸莫沙必利的產(chǎn)品質(zhì)量起到?jīng)Q定性的影響，因此有必要對中間體4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐雜質(zhì)檢測方法進(jìn)行開發(fā)，能夠?qū)χ虚g體的反應(yīng)程度進(jìn)行監(jiān)控確保反應(yīng)充分可控，同時進(jìn)一步對中間體有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行有限控制，保證產(chǎn)品質(zhì)量。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供一種枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)的檢測方法，可以對中間體4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐進(jìn)行檢測。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)的檢測方法，包括以下步驟：

3、采用液相色譜法對含4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的供試品溶液進(jìn)行檢測，其中，供試品溶液的溶劑為乙腈。

4、本發(fā)明針對枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐(化合物ii)，其結(jié)構(gòu)式如下：

5、

6、上述酸酐類雜質(zhì)極其不穩(wěn)定，與水及醇等易發(fā)生反應(yīng)無法準(zhǔn)確定量測量。試驗結(jié)果表明，采用常規(guī)溶劑如水、醇類溶劑、正己烷-異丙醇混合溶劑等，會導(dǎo)致待測物質(zhì)不穩(wěn)定，存在未知雜質(zhì)增長的現(xiàn)象。

7、本發(fā)明提供了一種正相hplc分析方法，采用乙腈作為溶劑，用于枸櫞酸莫沙必利中間體4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐雜質(zhì)的檢測，避免了上述酸酐類雜質(zhì)不穩(wěn)定，該方法也適用于其它藥物中酸酐類化合物的定量分析。

8、優(yōu)選的，所述含4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的供試品溶液的濃度為2mg/ml。

9、優(yōu)選的，所述液相色譜法采用的色譜柱為氰基硅烷鍵合硅膠填料。

10、優(yōu)選的，所述液相色譜法以正己烷-異丙醇為流動相進(jìn)行梯度洗脫。

11、所述液相色譜法的洗脫梯度優(yōu)選為：

12、

13、

14、本發(fā)明采用正己烷-異丙醇為流動相，采用上述洗脫梯度，可以使枸櫞酸莫沙必利中間體和雜質(zhì)4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐達(dá)到最好分離度。

15、優(yōu)選的，所述液相色譜法的柱溫為30℃。

16、優(yōu)選的，所述液相色譜法的流速為1ml/min。

17、優(yōu)選的，所述液相色譜法的檢測波長為274nm。

18、優(yōu)選的，所述液相色譜法的進(jìn)樣體積為5μl。

19、優(yōu)選的，所述液相色譜法中，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為0.002mg/ml。

20、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供了一種枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)的檢測方法，包括以下步驟：采用液相色譜法對含4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的供試品溶液進(jìn)行檢測，其中，供試品溶液的溶劑為乙腈。上述檢測方法簡便快速，分離度好、檢測效率高，運(yùn)行時間短，配制過程簡單，能夠迅速準(zhǔn)確確定枸櫞酸莫沙必利中間體4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的情況，替代常規(guī)薄層色譜法的監(jiān)控方法，準(zhǔn)確高效地確定樣品情況。

技術(shù)特征：

1.一種枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)的檢測方法，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述含4-氨基-5-氯-2-乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的供試品溶液的濃度為2mg/ml。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法采用的色譜柱為氰基硅烷鍵合硅膠填料。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法以正己烷-異丙醇為流動相進(jìn)行梯度洗脫。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法的洗脫梯度為：

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法的柱溫為30℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法的流速為1ml/min。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法的檢測波長為274nm。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法的進(jìn)樣體積為5μl。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測方法，其特征在于，所述液相色譜法的色譜柱為kromasil?60-5-cn(4.6×250mm，5μm)。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種枸櫞酸莫沙必利中間體雜質(zhì)的檢測方法，包括以下步驟：采用液相色譜法對含4?氨基?5?氯?2?乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的供試品溶液進(jìn)行檢測，其中，供試品溶液的溶劑為乙腈。上述檢測方法簡便快速，分離度好、檢測效率高，運(yùn)行時間短，配制過程簡單，能夠迅速準(zhǔn)確確定枸櫞酸莫沙必利中間體4?氨基?5?氯?2?乙氧基苯甲酸(異丁氧基甲酸)酸酐的情況，替代常規(guī)薄層色譜法的監(jiān)控方法，準(zhǔn)確高效地確定樣品情況。

技術(shù)研發(fā)人員：劉丹,李丹,周華祥,閻君,王碩冰
受保護(hù)的技術(shù)使用者：吉林修正藥業(yè)新藥開發(fā)有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2