本發(fā)明屬于中藥化學成分檢測分析，具體涉及一種鑒別湖北麥冬的方法。

背景技術：

1、湖北麥冬藥材來源于百合科植物湖北麥冬liriope?spicata(thunb.)lour.var.prolifera?y.t.ma干燥塊根，自宋代即有入藥記載。早年間麥冬屬藥材均混用，自1995年版《中國藥典》起，將麥冬屬藥材分成兩種：麥冬和山麥冬。從功能與主治來看，二者基本一致，均具有養(yǎng)陰生津，潤肺清心的功效。用于肺燥干咳，陰虛癆嗽，喉痹咽痛，津傷口渴，內熱消渴，心煩失眠，腸燥便秘。山麥冬分成湖北麥冬與短葶山麥冬liriope?muscari(decne.)baily，麥冬ophiopogon?japonicus(l.f.)ker-gawl則按產(chǎn)地可分為川麥冬和浙麥冬，川麥冬主產(chǎn)于四川三臺縣地區(qū)，浙麥冬主產(chǎn)于浙江余姚和杭州等地，湖北麥冬主產(chǎn)地在湖北襄陽等漢江流域，短葶山麥冬的主產(chǎn)地在福建泉州、惠安等地。目前產(chǎn)量最高的川麥冬，其次是湖北麥冬。

2、現(xiàn)行版《中國藥典》項下，僅規(guī)定了湖北麥冬的來源、性狀、鑒別、檢查、浸出物等指標，缺乏靈敏度高、特征性強、可定量的質量控制方法，導致市場中湖北麥冬及其制劑的質量參差不齊。而國家藥典委頒布的川麥冬、浙麥冬等配方顆粒國家標準，采用的是超高液相加電噴霧檢測器的技術，檢測成本較高，普適性不強，限制了技術的應用。于此同時，由于湖北麥冬與其它三種麥冬的性狀相似，功效接近，經(jīng)常出現(xiàn)幾種麥冬混用的情況，非有豐富經(jīng)驗的專業(yè)人士很難將其分辨開，因此找到一種既能對湖北麥冬質量進行整體定性定量的評價，又能簡單、快速對湖北麥冬與其它三種麥冬進行鑒別和區(qū)別的方法是十分有必要。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于，針對現(xiàn)有技術的上述不足，提供了一種鑒別湖北麥冬的方法，可對湖北麥冬與浙麥冬、川麥冬、短葶山麥冬進行鑒定和區(qū)分，同時還能準確檢測湖北麥冬中多種糖類成分的含量，更能準確反映湖北麥冬及其制劑的質量，有利于質量控制，成本更低。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下的技術方案：

3、本發(fā)明的第一目的是提供一種鑒別湖北麥冬的方法，所述方法包括以下步驟：

4、s1、制備溶液：

5、供試品溶液：取待測麥冬藥材或其制劑樣本適量，研細，加乙醇適量超聲提取，搖勻，過濾，取其續(xù)濾液，作為供試品溶液；

6、對照品溶液：取果糖、蔗糖、d-無水葡萄糖等3種對照品適量，加乙醇溶解后制成混合對照品溶液；

7、對照藥材參照物溶液：取標準湖北麥冬藥材適量，加乙醇適量超聲提取，

8、搖勻，過濾，取其續(xù)濾液，作為對照藥材參照物溶液；

9、s2、實施檢測：

10、將步驟s1中制備的供試品溶液、混合對照品溶液、對照藥材參照物溶液分別注入到超高壓高效液相色譜儀，記錄色譜圖；

11、在所述高效液相色譜儀上設置的色譜參數(shù)為：以beh?amide柱或poroshell120hhilic-z柱其中一種為色譜柱；以乙腈作為流動相a，以水作為流動相b進行梯度洗脫，流速設置為0.1～0.3ml/min，蒸發(fā)光散射檢測器檢測，柱溫為25～30℃；

12、所述梯度洗脫的程序為，0-5min，流動相a：流動相b體積比為85：15；5-12min，流動相a：流動相b體積比為85：15改變?yōu)?0:20；12-17min，流動相a：流動相b體積比為80：20改變?yōu)?8：22；17-30min，流動相a：流動相b體積比為78：22改變?yōu)?5:25；30～35min，流動相a：流動相b體積比為75：25改變?yōu)?0:60；

13、s3、分析圖譜：

14、以對照藥材參照物溶液的特征譜圖為標準分析供試品溶液的譜圖，所述對照藥材參照物溶液的特征譜圖包括8個共有峰，以5號峰為參照峰，其余特征峰的相對保留時間應在規(guī)定值的±10％范圍之內，規(guī)定值為：相對保留時間為0.36的1號峰、相對保留時間為0.45的2號峰、相對保留時間為0.51的3號峰、相對保留時間為0.55的4號峰、相對保留時間為1.55的6號峰、相對保留時間為1.67的7號峰、相對保留時間為2.21的8號峰，2號峰為果糖峰，3、4號峰互為同分異構體、為葡萄糖峰，4號峰為蔗糖峰、7號峰為蔗果三糖峰、8號峰為耐斯糖峰；

15、s4、待測麥冬藥材鑒定

16、計算峰7與峰6峰面積的對數(shù)比：log7號峰峰面積/log6號峰峰面積，若大于0.91則為湖北麥冬藥材，若小于0.91則不是湖北麥冬藥材。

17、進一步的，步驟s1中，所述超聲功率為250～300w，所述供試品溶液濃度為5～30mg/ml。

18、進一步的，步驟s1中，所述供試品溶液的制備方法具體包括，取待測麥冬藥材或其制劑適量，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇10ml，稱定重量，超聲提取10分鐘，超聲功率為300w，頻率為53khz，放冷，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

19、進一步的，步驟s1中，所述對照藥材參照物溶液的制備方法具體包括，取湖北麥冬對照藥材0.2g，置具塞錐形瓶中，加入70％乙醇10ml，超聲提取10分鐘，放冷搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為對照藥材參照物溶液。

20、進一步的，步驟s2中，流速設置為0.2ml/min。

21、進一步的，步驟s2中，柱溫設置為25℃。

22、進一步的，步驟s2中，色譜柱為beh?amide柱，規(guī)格為100×2.1mm，1.7μm。

23、進一步的，用于對湖北麥冬及其制劑待測樣品中果糖、蔗糖、葡萄糖3種主要成分的含量進行測定，具體包括，分別精密吸取對照品溶液1μl、3μl，供試品溶液和對照藥材參照物溶液各2μl，注入超高效液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算，即得。

24、進一步的，所述對照品溶液的濃度，果糖為1.2mg/ml、蔗糖為0.2mg/ml、d-無水葡萄糖為0.3mg/ml；所述對照藥材參照物溶液的濃度為20mg/ml。

25、進一步的，所述的待測麥冬藥材或其制劑樣本為湖北麥冬、浙麥冬、川麥冬和短葶山麥冬中的至少一種。

26、與現(xiàn)有技術比較，本發(fā)明提供的技術方案帶來的有益效果是：

27、(1)本發(fā)明提供的一種鑒別湖北麥冬的方法，可對湖北麥冬與浙麥冬、川麥冬、短葶山麥冬進行快速、高效的鑒別和區(qū)分，是一項實用性非常強的鑒別方法，使湖北麥冬及其制劑質量控制達到了更高的水平。

28、(2)本發(fā)明提供的一種鑒別湖北麥冬的方法，各特征峰分離度良好，靈敏度高，重現(xiàn)性強，還可用于湖北麥冬藥材、湖北麥冬飲片、湖北麥冬標準湯劑以及湖北麥冬配方顆粒等質量控制，適用范圍非常廣。

29、(3)本發(fā)明提供的方法成本低，有利于藥品生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)作業(yè)。

技術特征：

1.一種鑒別湖北麥冬的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟s1中，所述超聲功率為250～300w，所述供試品溶液濃度為5～30mg/ml。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟s1中，所述供試品溶液的制備方法具體包括，取待測麥冬藥材或其制劑適量，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇10ml，稱定重量，超聲提取10分鐘，超聲功率為300w，頻率為53khz，放冷，再稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，步驟s1中，所述對照藥材參照物溶液的制備方法具體包括，取湖北麥冬對照藥材0.2g，置具塞錐形瓶中，加入70％乙醇10ml，超聲提取10分鐘，放冷搖勻，濾過，取續(xù)濾液，作為對照藥材參照物溶液。

5.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟s2中，流速設置為0.2ml/min。

6.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟s2中，柱溫設置為25℃。

7.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟s2中，色譜柱為beh?amide柱，規(guī)格為100×2.1mm，1.7μm。

8.如權利要求4所述的方法，其特征在于，用于對湖北麥冬及其制劑待測樣品中果糖、蔗糖、葡萄糖3種主要成分的含量進行測定，具體包括，分別精密吸取對照品溶液1μl、3μl，供試品溶液和對照藥材參照物溶液各2μl，注入超高效液相色譜儀，測定，以外標兩點法對數(shù)方程計算，即得。

9.如權利要求8所述的方法，其特征在于，所述對照品溶液的濃度，果糖為1.2mg/ml、蔗糖為0.2mg/ml、d-無水葡萄糖為0.3mg/ml；所述對照藥材參照物溶液的濃度為20mg/ml。

10.如權利要求1-9中任一項所述的方法，其特征在于，所述的待測麥冬藥材或其制劑樣本為湖北麥冬、浙麥冬、川麥冬和短葶山麥冬中的至少一種。

技術總結
本發(fā)明涉及中藥化學成分檢測分析技術領域，具體公開了一種鑒別湖北麥冬的方法。該方法采用超聲波輔助乙醇溶液提取技術和UPLC及蒸發(fā)光檢測器，確定了8個特征峰，作為湖北麥冬藥材及其制劑的特征圖譜，可對湖北麥冬與浙麥冬、川麥冬、短葶山麥冬進行快速、高效的鑒別和區(qū)分，是一項實用性非常強的鑒別方法，同時還可測定湖北麥冬藥材及其制劑中三種主要成分果糖、蔗糖、葡萄糖的含量，使湖北麥冬及其制劑質量控制達到了更高的水平。該方法具有更好的靈敏度，操作便捷，成本低，普適性強等特點。

技術研發(fā)人員：黃文,龍林,陳前正,胡輝,翟紅偉,劉瑩
受保護的技術使用者：華中農(nóng)業(yè)大學
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/23