本發(fā)明涉及卷煙質(zhì)量安全技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種同時(shí)檢測(cè)煙用包裝材料中24種人工合成色素的方法。

背景技術(shù)：

合成色素亦稱著色劑，主要是使產(chǎn)品著色。一般用來調(diào)整原料對(duì)產(chǎn)品色調(diào)的影響，或提高產(chǎn)品的吸引力。其含義和分類因具體行業(yè)不同略有不同。廣義而言，著色劑可以分為染料和顏料兩種。從來源分類，主要分為合成色素、天然色素和其他色素三類。合成色素通常以萘、苯、甲苯等為主要原料，經(jīng)一系列化學(xué)反應(yīng)合成，產(chǎn)物中多含苯環(huán)、氧雜蒽等結(jié)構(gòu)，部分色素含有硝基，長(zhǎng)期攝入這類物質(zhì)會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生毒害作用。

食品行業(yè)對(duì)于人工合成色素的關(guān)注較多，食品行業(yè)中非法添加人工合成色素的報(bào)道常見諸媒體，如辣椒制品中的蘇丹紅、茶葉中的鉛鉻綠、香辛料中的羅丹明b等。非法添加的色素種類眾多，各國(guó)監(jiān)控略有不同，國(guó)內(nèi)外尤其是西方發(fā)達(dá)國(guó)家和地區(qū)在色素對(duì)人體健康影響方面做了大量調(diào)查和研究，而且在合成色素的使用方面均有嚴(yán)格的規(guī)定，多種合成色素已被禁止或嚴(yán)格限量使用。中國(guó)衛(wèi)生部2008年以來，已發(fā)布的1～6批《食品中可能違法添加的非食用物質(zhì)和易濫用的食品添加劑名單》中已明確禁止使用蘇丹紅i、堿性橙ii、羅丹明b、鉛鉻綠、堿性嫩黃、酸性橙、堿性黃等色素。同時(shí)，喹啉黃、偶氮玉紅、酸性紫、酸性紅等色素也被國(guó)際法典委員會(huì)(cac)、日本、美國(guó)、歐盟等機(jī)構(gòu)列入禁止色素名單。此外，各法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)允許在添加的合成色素如胭脂紅、檸檬黃、誘惑紅和日落黃等色素也設(shè)定了限量要求。

目前對(duì)合成色素的檢測(cè)經(jīng)報(bào)道的有薄層色譜法、極譜法、紫外—可見吸收光譜法、微柱法、液相色譜法、氣相色譜/質(zhì)譜法、液相色譜/質(zhì)譜法、毛細(xì)管電泳法等，較常見的有正相和反相液相色譜法，用紫外、熒光、光電二級(jí)管列陣檢測(cè)器或質(zhì)譜。鑒于人工合成色素色系眾多，不同國(guó)家的命名和編號(hào)繁多，允許使用目錄也各不相同。近年來，隨著色素安全事件的不斷發(fā)生，出于對(duì)違禁色素的隱蔽性、隨意性等因素考慮，檢測(cè)人工合成色素(尤其是違禁色素)的方法逐漸向一次檢測(cè)多種色素方向發(fā)展。國(guó)內(nèi)有關(guān)食品中違禁色素檢測(cè)方法的研究非?；钴S，但主要集中在蘇丹紅、對(duì)位紅，國(guó)外檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)中涉及的色素種類也十分有限，高靈敏測(cè)定多種合成色素的方法也有所欠缺。因此，亟需研究一種方法能夠解決煙用包裝材料測(cè)試的色素種類少，靈敏度低的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

鑒于以上所述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種同時(shí)檢測(cè)煙用包裝材料中24種人工合成色素的方法，該方法檢測(cè)對(duì)象廣，方法方便、快捷，靈敏度較高，能夠?qū)崿F(xiàn)煙用包裝材料中人工合成色素的高靈敏檢出。

為實(shí)現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明提供一種同時(shí)檢測(cè)煙用包裝材料中24種人工合成色素的方法，包括以下步驟：

1)樣品前處理，提取人工合成色素：

稱取混合均勻的煙用包裝材料樣品，置于容器中，加入萃取溶劑，密封后置于超聲波發(fā)生器內(nèi)超聲萃取，取上清液，經(jīng)水相濾膜過濾，得到待測(cè)液；

2)配制工作標(biāo)準(zhǔn)溶液：配制麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2、酸性紫49、赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；

3)采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)工作標(biāo)準(zhǔn)溶液中的人工合成色素，建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

4)采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)步驟1)得到的待測(cè)液中人工合成色素，采用外標(biāo)法并根據(jù)步驟3)中建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)待測(cè)液進(jìn)行定量分析。

優(yōu)選地，在步驟2)中，根據(jù)人工合成色素在相關(guān)國(guó)家的法規(guī)中禁用或許可的特點(diǎn)，將人工合成色素分成第一組、第二組，并配制為第一組標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和第二組標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，第一組包括麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49；第二組包括赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃。

優(yōu)選地，所述第一組工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，包括以下步驟：

a)分別移取麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49，用水溶解并定容，配制麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液；

較佳地，所述麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液為麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49混合或單一元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。

優(yōu)選地，所述麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度均為1-100μg/l。

更優(yōu)選地，所述麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度均為10μg/l。

優(yōu)選地，所述麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的儲(chǔ)存條件為：儲(chǔ)存溫度：0-4℃；儲(chǔ)存1個(gè)月。

b)分別移取不同體積的步驟a中的麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用水定容配制為一系列不同濃度的麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

較佳地，所述麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49工作標(biāo)準(zhǔn)溶液為麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2和酸性紫49混合工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

所述工作標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)覆蓋樣品濃度范圍，即配即用。

優(yōu)選地，所述第二組工作標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，包括以下步驟：

a)分別移取赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃，用水溶解并定容，配制赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液；

較佳地，所述赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液為赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃混合或單一元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。

優(yōu)選地，所述赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度均為1-100μg/l。

更優(yōu)選地，所述赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的質(zhì)量濃度均為10μg/l。

優(yōu)選地，所述赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的儲(chǔ)存條件為：儲(chǔ)存溫度：0-4℃；儲(chǔ)存1個(gè)月。

b)分別移取不同體積的步驟a中的赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用水定容配制為一系列不同濃度的赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

較佳地，所述赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃工作標(biāo)準(zhǔn)溶液為赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50和喹啉黃混合工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。

所述工作標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)覆蓋樣品濃度范圍，即配即用。

優(yōu)選地，在步驟1)中，所述萃取溶劑的加入體積與煙用包裝材料樣品加入重量的比例為(45-55)ml：1g。

更優(yōu)選地，在步驟1)中，所述萃取溶劑的加入體積與煙用包裝材料樣品加入重量的比例為(48-52)ml：1g。

優(yōu)選地，在步驟1)中，所述萃取溶劑選用分析純甲醇和體積分?jǐn)?shù)為70-79％的丙酮水溶液。本發(fā)明在24種人工合成色素中有3種人工合成色素在丙酮水溶液中的提取效率較高，而在甲醇中效果不是很理想。所以需要丙酮水溶液對(duì)3種色素進(jìn)行萃取。

更優(yōu)選地，在步驟1)中，所述萃取溶劑為分析純甲醇或體積分?jǐn)?shù)為74-76％的丙酮水溶液。

優(yōu)選地，在步驟1)中，所述超聲波發(fā)生器的頻率為12000-13000r/min，超聲萃取的時(shí)間為17-22min。

更優(yōu)選地，在步驟1)中，所述超聲波發(fā)生器的頻率為12400-12700r/min，超聲萃取的時(shí)間為19-21min。

優(yōu)選地，在步驟1)中，所述水相濾膜的孔徑為0.18-0.21μm。

更優(yōu)選地，在步驟1)中，所述水相濾膜的孔徑為0.20μm。

優(yōu)選地，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液或待測(cè)液中人工合成色素的測(cè)試過程中，液相色譜工作條件：反相c18高效液相色譜柱，柱溫28-32℃，進(jìn)樣體積為0.8-1.2μl；流動(dòng)相a為乙酸銨水溶液，流動(dòng)相b為甲醇，流速為290-310μl/min；采用等度洗脫方式，流動(dòng)相洗脫梯度為0min90％a+10％b，3.5min45％a+55％b，6.0min0％a+100％b，7.0min0％a+100％b，7.5min90％a+10％b，12min90％a+10％b。

優(yōu)選地，采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液或待測(cè)液中人工合成色素的測(cè)試過程中，質(zhì)譜工作條件：氣簾氣：28-32psi；電噴霧電壓：4300-4700v、-4700～-4300v；溫度：630-670℃；霧化氣：45-55psi；輔助氣：45-55psi。

優(yōu)選地，質(zhì)譜采用多離子監(jiān)測(cè)掃描方式，質(zhì)譜掃描參數(shù)如表1所示。

表1質(zhì)譜掃描參數(shù)

如上所述，本發(fā)明提供一種同時(shí)檢測(cè)煙用包裝材料中24種人工合成色素的方法，具有以下有益效果：

本發(fā)明采用超聲萃取作為前處理手段，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行檢測(cè)，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量，實(shí)現(xiàn)同時(shí)測(cè)定24種人工合成色素，檢測(cè)對(duì)象廣，方法方便、快捷；同時(shí)本發(fā)明靈敏度較高，24種人工合成色素的檢出限在0.02-0.96ng/ml的范圍，定量限在0.06-3.19ng/ml，能夠?qū)崿F(xiàn)煙用包裝材料中人工合成色素的高靈敏檢出。

附圖說明

圖1顯示為本發(fā)明中同時(shí)檢測(cè)煙用包裝材料中24種人工合成色素的方法的流程示意圖。

圖2顯示為麗春紅6r標(biāo)準(zhǔn)品譜圖。

圖3顯示為麗春紅sx標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖4顯示為羅丹明b標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖5顯示為酸性橙2標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖6顯示為堿性橙2標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖7顯示為蘇丹紅3標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖8顯示為酸性綠3標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖9顯示為堿性黃2標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖10顯示為酸性紫49標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖11顯示為赤蘚紅標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖12顯示為檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖13顯示為日落黃標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖14顯示為誘惑紅標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖15顯示為莧菜紅和胭脂紅標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖16顯示為酸性紅14和酸性紅13標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖17顯示為亮藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖18顯示為酸性紅2g標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖19顯示為酸性蘭25標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖20顯示為酸性蘭3標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖21顯示為酸性橙6標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖22顯示為酸性綠50標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖23顯示為喹啉黃標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

圖24顯示為實(shí)際樣品的色譜圖。

具體實(shí)施方式

以下通過特定的具體實(shí)例說明本發(fā)明的實(shí)施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可由本說明書所揭露的內(nèi)容輕易地了解本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)與功效。本發(fā)明還可以通過另外不同的具體實(shí)施方式加以實(shí)施或應(yīng)用，本說明書中的各項(xiàng)細(xì)節(jié)也可以基于不同觀點(diǎn)與應(yīng)用，在沒有背離本發(fā)明的精神下進(jìn)行各種修飾或改變。

以下實(shí)施例使用的試劑及儀器如下：

1、試劑：目標(biāo)物(麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2、酸性紫49、赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50、喹啉黃)，均為標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)自torontoresearchchemicals公司；丙酮、甲醇均為色譜純?cè)噭?，?gòu)自tedia公司；乙酸銨為色譜純?cè)噭?，?gòu)自sigma公司。

2、儀器：高液相色譜為agilent1290；色譜柱為agilentporshell120ec-c18柱(100mm×2.1mm(id)，2.7μm)；質(zhì)譜為agilent6410qqq；電子天平為瑞士mettlertoledo公司產(chǎn)品；超聲波儀，瑞士sono公司產(chǎn)品。

實(shí)施例1

如圖1所示，同時(shí)檢測(cè)煙用包裝材料中24種人工合成色素的方法包括以下步驟

1.1樣品前處理，提取人工合成色素：將樣品剪成5mm×5mm左右的碎片，混合均勻。稱取兩份0.2g樣品，分別置于50ml的具塞三角瓶中，一份加入10ml甲醇，另一份加入10ml75％的丙酮-水溶液。加蓋密封后置于超聲波發(fā)生器內(nèi)，室溫下超聲萃取20min，取適量上清液經(jīng)0.2μm水相濾膜過濾后，分別作為待測(cè)液。

1.2配制標(biāo)準(zhǔn)工作溶液

根據(jù)人工合成色素在相關(guān)國(guó)家的法規(guī)中禁用或許可的特點(diǎn)，對(duì)其分成第一組和第二組，并配制兩組標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：第一組包含麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2、酸性紫49，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制方法如下：分別移取10μg/ml混合儲(chǔ)備標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.00ml、0.50ml、0.10ml、0.05ml、0.01ml，0ml于10ml容量瓶，用水定容，得到濃度分別為1000ng/ml、500ng/ml、100ng/ml、50ng/ml、10ng/ml、0ng/ml的工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。每種工作標(biāo)準(zhǔn)溶液中各種人工合成色素的質(zhì)量濃度均是相同的，比如，質(zhì)量濃度為10ng/ml工作標(biāo)準(zhǔn)溶液中麗春紅6r、麗春紅sx、羅丹明b、酸性橙2、堿性橙2、蘇丹紅3、酸性綠3、堿性黃2、酸性紫49質(zhì)量濃度均是10ng/ml。

第二組包含赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50、喹啉黃，標(biāo)準(zhǔn)工作溶液配制方法如下：取1ml10μg/ml的混合儲(chǔ)備溶液于100ml容量瓶，用水定容，得到濃度為100ng/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后分別移取100ng/ml的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液各5.00ml、1.00ml、0.50ml、0.10ml、0.05ml、0.01ml、0ml于10ml容量瓶，用水定容，得到質(zhì)量濃度分別為50ng/ml、10ng/ml、5ng/ml、1ng/ml、0.5ng/ml、0.1ng/ml、0ng/ml的工作標(biāo)準(zhǔn)溶液。每種工作標(biāo)準(zhǔn)溶液中各種人工合成色素的質(zhì)量濃度均是相同的，比如，質(zhì)量濃度為10ng/ml工作標(biāo)準(zhǔn)溶液中赤蘚紅、檸檬黃、日落黃、誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、酸性紅14、亮藍(lán)、酸性紅2g、酸性紅13、酸性蘭25、酸性蘭3、酸性橙6、酸性綠50、喹啉黃的質(zhì)量濃度均是10ng/ml。

所有工作標(biāo)準(zhǔn)溶液于4℃冰箱中避光保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.3lc-ms/ms檢測(cè)

分別將1.1中的待測(cè)液、1.2配制的工作標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行l(wèi)c-ms/ms檢測(cè)，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量，獲得煙用包裝材料中24種人工合成色素的含量。

具體來講，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)x，以峰面積為縱坐標(biāo)y，繪制出24種人工合成色素相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；在優(yōu)化建立的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法同時(shí)檢測(cè)24種人工合成色素的條件下，檢測(cè)第1.1步得到的待測(cè)液，根據(jù)測(cè)得的24種人工合成色素的峰面積，用外標(biāo)法對(duì)待測(cè)液進(jìn)行定量分析。

采用液相色譜-質(zhì)譜同時(shí)檢測(cè)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液或待測(cè)液中24種人工合成色素的含量的測(cè)試條件為：液相色譜條件為：高效液相色譜儀為agilent1290型；色譜柱為agilentporshell120ec-c18柱(100mm×2.1mm(id)，2.7μm)色譜柱；流動(dòng)相a為10mm乙酸銨水溶液，流動(dòng)相b為甲醇；梯度洗脫程序?yàn)椋?min90％a+10％bb,3.5min45％a+55％b，6.0min0％a+100％b，7.0min0％a+100％b，7.5min90％a+10％b，12min90％a+10％b；流速為300μl/min；柱溫30℃；進(jìn)樣量1μl。質(zhì)譜條件為氣簾氣：30psi；電噴霧電壓：4500v(正模式)、-4500v(負(fù)模式)；離子源溫度：650℃；霧化氣：50psi；輔助氣：50psi。質(zhì)譜掃描參數(shù)如表1所示。

實(shí)施例2

結(jié)果與討論：

2.1本發(fā)明方法的重復(fù)性和加標(biāo)回收率

以未經(jīng)著色的白紙為空白樣本，添加質(zhì)量濃度為10ng/ml、5ng/ml、1ng/ml的24種人工合成色素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，加標(biāo)量為1ml，每個(gè)質(zhì)量濃度重復(fù)5次，按實(shí)施例1進(jìn)行提取和檢測(cè)，然后根據(jù)加標(biāo)量和實(shí)際測(cè)定值，計(jì)算加標(biāo)回收率。試驗(yàn)結(jié)果表明，堿性橙2、蘇丹紅3和堿性黃2三者的平均回收率在74.26％-84.11％之間，其它21種人工合成色素的平均回收率在90.11％-107.95％之間。24種人工合成色素加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在0.24％-7.97％之間。圖2至23顯示為24種人工合成色素標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖。

2.2本發(fā)明方法的線性、檢出限及定量限

以人工合成色素的定量離子峰面積(y)為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)x(ng/ml)進(jìn)行回歸運(yùn)算，得到相應(yīng)的線性回歸方程及其相關(guān)參數(shù)。以信噪比(s/n)不低于3時(shí)的樣品濃度為檢測(cè)限，以信噪比(s/n)不低于10時(shí)的樣品濃度為定量限，檢測(cè)結(jié)果如表2所示。實(shí)測(cè)結(jié)果如表3所示，本發(fā)明檢測(cè)檸檬黃、酸性蘭25、喹啉黃的煙用包裝材料的定量限為2-4ng/ml，其它21種人工合成色素?zé)熡冒b材料的定量限為0.060-0.901.0ng/ml，24種人工合成色素的煙用包裝材料的檢出限為0.018-0.96ng/ml。

表2本發(fā)明方法的工作曲線、定量限和檢測(cè)限

實(shí)施例3

按照實(shí)施例1所述的方法對(duì)國(guó)內(nèi)一種煙用包裝材料的進(jìn)行24種人工合成色素檢測(cè)，所得實(shí)際樣品的譜圖結(jié)果如圖24所示。從圖24可以看出，實(shí)際樣品含有62.8μg/g的羅丹明b，其它人工合成色素未檢出。

綜上所述，本發(fā)明采用超聲萃取作為前處理手段，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法進(jìn)行檢測(cè)，采用外標(biāo)法進(jìn)行定量，實(shí)現(xiàn)同時(shí)測(cè)定24種人工合成色素，檢測(cè)對(duì)象廣，方法方便、快捷；同時(shí)本發(fā)明靈敏度較高，24種人工合成色素的檢出限在0.02-0.96ng/ml的范圍，定量限在0.06-3.19ng/ml，能夠?qū)崿F(xiàn)煙用包裝材料中人工合成色素的高靈敏檢出。

上述實(shí)施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對(duì)上述實(shí)施例進(jìn)行修飾或改變。因此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識(shí)者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。