本發(fā)明涉及一種快速檢測食用菌中農(nóng)藥殘留的方法，屬于農(nóng)產(chǎn)品分析檢測技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
我國是世界上最大的食用菌生產(chǎn)、出口大國，隨著食用菌工廠化栽培技術(shù)的逐漸成熟，食用菌產(chǎn)業(yè)逐漸發(fā)展壯大，特別是金針菇、杏鮑菇的栽培量逐年增多，食用菌在生產(chǎn)、銷售、加工過程中的安全問題也越來越受重視。食用菌在種植、采摘、運輸及銷售過程中的農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染物、容器包裝添加劑、甲醛、二氧化硫、有害金屬等有毒有害物質(zhì)安全問題日益受到國內(nèi)外重視。然而我國食品安全風險監(jiān)測工作仍存在監(jiān)測能力不足、風險物質(zhì)篩查困難、各地區(qū)機構(gòu)檢測能力差異大等問題，與發(fā)達國家仍有較大差距，解決食用菌安全問題已成為我國食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展的緊迫任務，食用菌的生產(chǎn)也必將要由追求數(shù)量型向質(zhì)量效益型方向轉(zhuǎn)變。
食品中農(nóng)藥殘留的分析主要由樣品的提取凈化前處理和檢測兩部分組成，目前，常用的預處理技術(shù)主要有固相萃?。╯pe）、超臨界流體萃?。╯fe）、微波輔助萃取（mae）、基質(zhì)固相分散萃?。╩spde）等，這些傳統(tǒng)的食品中農(nóng)藥殘留的預處理方法往往樣品需求量大、提取和凈化步驟復雜繁瑣、操作時間長、溶劑消耗大，使得農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的檢測效率大大下降，往往導致很多農(nóng)產(chǎn)品的安全監(jiān)測嚴重滯后。在檢測技術(shù)方面，方法有很多，主要有酶抑制法、酶聯(lián)免疫法、分光亮度法、色譜法及質(zhì)譜法等，這些測定方法在提高農(nóng)藥定性定量快速檢測等方面發(fā)揮著巨大的作用，但往往存在樣品需求量大、需要配制標準溶液等問題。
目前，國內(nèi)的研究者在對食品中風險化合物篩查的研究中通常是用標準品構(gòu)建圖譜庫來對目標物定性和定量，或者利用已有的譜庫（nist）定性然后用標準品制作標準曲線來定量。一些研究也建立了香菇、杏鮑菇、雙孢菇等食用菌中幾種氨基甲酸酯和有機氯農(nóng)藥殘留的gc-ms測定方法。但是現(xiàn)有的分析方法只是針對特定幾種或者一類特定目標物進行檢測，而對于可能存在于食品中但不是目標類物質(zhì)這類有機物則無法進行篩查，難以實現(xiàn)對所有的農(nóng)藥殘留進行全掃描和篩查。農(nóng)藥殘留定量檢測時需要配制其標準溶液和制作標準曲線，分析通量較低，也很難實現(xiàn)統(tǒng)一的和同一條件下的多成分一起分析。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于，針對上述問題，提供一種高通量快速檢測食用菌中農(nóng)藥殘留的方法，步驟為：
（1）全自動樣品預處理技術(shù)：提取：每克食用菌樣品加入2ml乙腈，勻漿提取2min，加入0.4g無水硫酸鎂和0.1g氯化鈉，渦旋振蕩1min后離心，取上清液旋蒸濃縮至近干，加1ml乙腈溶解，過0.22μm濾膜待測定。
萃取：采用涂有聚二甲氧基硅氧烷的攪拌棒進行萃取。攪拌棒在300℃下加熱40min，氮氣流速1.2ml/min，萃取時1000r/min攪拌45min。
（2）gc-ms測定：色譜條件：色譜柱溫度程序：初始溫度70℃，保持2min，以25℃/min升至150℃，以3℃/min升至200℃，以8℃/min升至280℃，保持10min；載氣：高純氦氣，純度≥99.999%；載氣流速1.0ml/min；進樣口溫度：280℃；溶劑延遲：3.5min；進樣方式：不分流進樣；進樣量：2μl。
質(zhì)譜條件：電離方式：ei；電子能量70ev；離子源溫度230℃；四級桿溫度150℃；質(zhì)譜調(diào)諧方式：dftpp調(diào)諧，分辨率和靈敏度均達到最佳匹配。掃描方式：全掃描模式，掃描質(zhì)量范圍35～550，掃描速度：2.86scan/sec。
（3）基于gc-ms的三元組數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)：由保持時間數(shù)據(jù)庫、ms譜圖譜庫、化合物的校證曲線組成。
本發(fā)明快速檢測食用菌種農(nóng)藥殘留的方法，利用全自動預處理與gc-ms結(jié)合三元組數(shù)據(jù)庫建立食用菌中農(nóng)藥多殘留的快速篩查方法，為食用菌樣品的快速篩查提供了可靠的技術(shù)支持和更加快速簡便的解決途徑，本發(fā)明可應用于食用菌樣品突發(fā)事件的快速處置應急工作，大大縮短樣品的分析時間，提高檢測篩查的工作效率。
全自動樣品預處理解決食用菌中農(nóng)藥殘留在預處理過程中樣品需求量大、提取和凈化步驟復雜繁瑣、操作時間長、溶劑消耗大、成本高、人為誤差干擾等問題，方法靈活、高通量且能快速篩查。動態(tài)頂空進樣有效減少了有機溶劑的使用量，利用高純氣體萃取也避免了溶劑引入干擾因素。gc-ms技術(shù)結(jié)合三元組數(shù)據(jù)庫建立的快速篩查方法不需要配制標準溶液和制作標準曲線，不需要標準物質(zhì)來定性/定量樣品中的有害物質(zhì)，直接通過校準曲線數(shù)據(jù)庫就可以評估藥物和農(nóng)藥的含量，自動檢出并定量化學風險物所需時間短，可以檢測農(nóng)藥殘留，環(huán)境污染物，容器包裝添加劑等的多成分分析用的近100種化合物，有效解決食用菌中風險物篩選困難、檢測速度慢、獲得數(shù)據(jù)差異大，以及在傳統(tǒng)分析中需要配制標準溶液進行定性/定量分析時所耗費的人力、財力、物力等諸多問題。
具體實施方式
以下結(jié)合具體實例對本發(fā)明的方法和特征進行描述，所舉實例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。
實施例檢測香菇中的農(nóng)藥殘留
準確稱量10.0000g香菇樣品加入20ml乙腈，勻漿提取2min，加入4g無水硫酸鎂和1g氯化鈉，渦旋振蕩1min，4000r/min離心10min，取上清液旋蒸濃縮至近干，加1ml乙腈溶解，過0.22μm濾膜待測定。
采用涂有聚二甲氧基硅氧烷的攪拌棒進行萃取，設置攪拌棒在300℃下加熱40min，氮氣流速1.2ml/min，萃取時1000r/min攪拌45min。
gc-ms測定：色譜條件：色譜柱溫度程序：初始溫度70℃，保持2min，以25℃/min升至150℃，以3℃/min升至200℃，以8℃/min升至280℃，保持10min；載氣：高純氦氣，純度≥99.999%；載氣流速1.0ml/min；進樣口溫度：280℃；溶劑延遲：3.5min；進樣方式：不分流進樣；進樣量：2μl。
質(zhì)譜條件：電離方式：ei；電子能量70ev；離子源溫度230℃；四級桿溫度150℃；質(zhì)譜調(diào)諧方式：dftpp調(diào)諧，分辨率和靈敏度均達到最佳匹配。掃描方式：全掃描模式，掃描質(zhì)量范圍35～550，掃描速度：2.86scan/sec。
建立基于gc-ms的三元組數(shù)據(jù)庫系統(tǒng)，由保持時間數(shù)據(jù)庫、ms譜圖譜庫、化合物的校證曲線組成，由此改進和建立的18種食用菌中常見的農(nóng)藥的保留時間、目標離子和定量離子數(shù)據(jù)庫。三元組數(shù)據(jù)庫自動檢出化合物并相對定量僅需2分鐘。檢出限為0.001mg/kg～0.050mg/kg，平均回收率為79%～110%，相對標準偏差為1.0%～5.8%，完全符合農(nóng)藥殘留分析方法的要求。試驗結(jié)果表明，本方法操作簡單、靈敏度高、重現(xiàn)性好，能滿足食用菌中農(nóng)藥殘留的篩查檢測要求。