本發(fā)明涉及核磁共振(nmr，nuclearmagneticresonance)波譜學(xué)檢測(cè)方法，尤其是涉及一種可直接用于獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系測(cè)量的新型核磁共振二維j分解譜方法。
背景技術(shù)：
：核磁共振波譜技術(shù)可提供化學(xué)位移和j偶合等分子級(jí)別的信息，成為分子結(jié)構(gòu)解析和成分分析一種強(qiáng)有力的工具。常規(guī)2dj分解譜直接維度提供化學(xué)位移信息，間接維度提供所有核自旋與檢測(cè)自旋共同作用的j裂峰情況。然而獨(dú)立同核自旋對(duì)的裂峰個(gè)數(shù)以及j偶合常數(shù)往往無(wú)法直接獲得，影響分子鍵角度和扭轉(zhuǎn)情況的測(cè)量，從而不利于信號(hào)歸屬和結(jié)構(gòu)分析。目前獨(dú)立同核自旋對(duì)j偶合常數(shù)的測(cè)量是通過(guò)采樣常規(guī)1d以及2d核磁共振譜，然后基于核磁共振譜信息通過(guò)約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算來(lái)獲得的。為了盡可能獲得詳細(xì)的核磁共振信息，除了1d核磁共振譜外，還需要采樣2d同核相關(guān)核磁共振譜和2d異核單量子相關(guān)核磁共振譜。另一方面，約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算是不同于核磁共振領(lǐng)域的研究，往往掌握核磁共振技術(shù)的研究人員不懂得使用約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算。而且，約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算時(shí)間長(zhǎng)，需要配置計(jì)算能力強(qiáng)的計(jì)算機(jī)。因此，如何無(wú)需掌握深?yuàn)W的約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算能力以及特殊的計(jì)算機(jī)設(shè)備，而僅從脈沖序列設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)后處理方法角度出發(fā)，設(shè)計(jì)出一種直接用于獨(dú)立同核自旋對(duì)間接偶合關(guān)系測(cè)量的新型核磁共振二維j分解譜的方法，就能進(jìn)一步提高核磁共振譜學(xué)在化學(xué)、生物結(jié)構(gòu)學(xué)中的應(yīng)用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明給出核磁共振譜儀上，一種直接用于獨(dú)立同核自旋對(duì)間接偶合關(guān)系測(cè)量的新型核磁共振二維j分解譜方法，包括如下步驟：1)將所檢測(cè)的溶液樣品裝入核磁試管中，然后將裝好樣品的試管放入核磁譜儀的檢測(cè)磁體中；2)對(duì)樣品進(jìn)行勻場(chǎng)和鎖場(chǎng)；3)常規(guī)一維脈沖序列采樣一張一維譜，獲得譜圖的譜寬；4)在一個(gè)固定功率下，測(cè)量常規(guī)一維脈沖序列中非選擇性矩形π/2脈沖的持續(xù)時(shí)間，為多色脈沖、選擇性脈沖以及絕熱脈沖參數(shù)設(shè)置提供依據(jù)；5)在核磁共振波譜儀上導(dǎo)入事先編譯好的脈沖序列；6)打開(kāi)這一脈沖序列的自旋相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊、同核自旋對(duì)選擇模塊和j調(diào)制信號(hào)采樣模塊，設(shè)置各個(gè)模塊的實(shí)驗(yàn)參數(shù)；6)完成實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置后，直接執(zhí)行數(shù)據(jù)采樣，測(cè)量每一個(gè)所選擇核自旋與之偶合核的新型j分解譜需要20分鐘左右，整個(gè)采樣過(guò)程的時(shí)間等于所選擇核自旋的個(gè)數(shù)乘以20分鐘，得到二維譜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)；7)當(dāng)數(shù)據(jù)采樣全部完成后，進(jìn)行相關(guān)的數(shù)據(jù)后處理，得到反映獨(dú)立同核自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的新型核磁共振二維j分解譜。在步驟1)中，所述的裝樣過(guò)程只需要直接將配置好的溶液樣品裝入核磁譜儀配備的試管并放入指定檢測(cè)磁體中，整個(gè)過(guò)程無(wú)需對(duì)譜儀硬件設(shè)施進(jìn)行改動(dòng)。在步驟2)中，所述的對(duì)樣品進(jìn)行勻場(chǎng)和鎖場(chǎng)，只需要利用譜儀自帶的勻場(chǎng)和鎖場(chǎng)命令實(shí)現(xiàn)，無(wú)需附加過(guò)程，也無(wú)需對(duì)譜儀硬件設(shè)施進(jìn)行改動(dòng)。在步驟3)中，所述常規(guī)一維脈沖序列是核磁共振譜儀自帶的一維脈沖序列，由一個(gè)非選擇性π/2射頻脈沖和采樣期構(gòu)成，即非選擇性π/2射頻脈沖作用后緊跟著信號(hào)采樣，目的是為了檢查在液體樣品放置后磁場(chǎng)均勻性情況，同時(shí)為譜寬參數(shù)設(shè)置提供依據(jù)。在步驟4)中，所述常規(guī)一維脈沖序列與步驟3)中所述一致，非選擇性π/2射頻脈沖寬度的測(cè)量，是在固定一個(gè)功率下，對(duì)脈沖寬度從1微秒開(kāi)始，以固定步長(zhǎng)值4μs左右對(duì)脈沖時(shí)間遞增方式設(shè)置10個(gè)左右的脈沖值，利用常規(guī)一維脈沖序列進(jìn)行采樣。以第一個(gè)脈沖寬度下采樣獲得的譜線利用譜儀自帶調(diào)相命令進(jìn)行調(diào)相，觀察不同脈沖寬度下譜線分布情況。當(dāng)觀測(cè)到第一次出現(xiàn)負(fù)的幅值向正的幅值變化時(shí)，即找到2π脈沖時(shí)間的附近。為了測(cè)量2π脈沖時(shí)間，在其附近以更小的固定值(如1μs)設(shè)置一組脈沖寬度，找出譜線積分值為0時(shí)的脈沖時(shí)間，此脈沖時(shí)間即為2π脈沖時(shí)間，其值除以4即可得到π/2的脈沖時(shí)間。在步驟5)中，所述脈沖序列使用了自旋相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊、同核自旋對(duì)選擇模塊和j調(diào)制信號(hào)采樣模塊。所述脈沖序列中自旋相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊由一個(gè)多色π/2脈沖和一個(gè)非選擇性矩形π/2脈沖構(gòu)成。多色π/2脈沖包含多個(gè)寬度相同的選擇性高斯形狀π/2脈沖，其中每一個(gè)高斯形狀π/2脈沖激發(fā)一個(gè)感興趣的核自旋，每一個(gè)形狀脈沖的相位根據(jù)傅立葉變化矩陣相位來(lái)設(shè)值，即其中n表示感興趣的核自旋數(shù)目；n＝1，2，…,n，表示感興趣核自旋編號(hào)；m＝1，2，…，n，表示脈沖序列重復(fù)采樣的編號(hào)。多色π/2脈沖將感興趣核自旋從縱向翻轉(zhuǎn)到橫向磁化平面，利用核-核間接偶合關(guān)系以及非選擇性矩形π/2脈沖，感興趣自旋被翻轉(zhuǎn)回縱向，而與之偶合的核自旋被翻轉(zhuǎn)到橫向磁化平面，從而實(shí)現(xiàn)了相關(guān)轉(zhuǎn)移。所述脈沖序列中同核自旋對(duì)選擇模塊是一個(gè)多色π脈沖、作用在梯度場(chǎng)下的一對(duì)斜率反向的線性調(diào)頻脈沖組成的psyche模塊、psyche模塊兩端的散相梯度場(chǎng)、以及放置在多色π脈沖和psyche模塊兩邊的一對(duì)同向散相梯度場(chǎng)構(gòu)成。多色π脈沖選擇與多色π/2脈沖選擇相同的核的縱向磁化進(jìn)行翻轉(zhuǎn)，梯度場(chǎng)下的一對(duì)斜率反向的線性調(diào)頻脈沖實(shí)現(xiàn)對(duì)核自旋的少量翻轉(zhuǎn)，少量被線性調(diào)頻脈沖翻轉(zhuǎn)的核自旋如果與多色π脈沖所選擇的核自旋具有間接偶合關(guān)系，它們的偶合關(guān)系可以選擇出來(lái)被j調(diào)制信號(hào)采樣模塊檢測(cè)，同時(shí)偶合核的化學(xué)位移以及與非選擇核的偶合關(guān)系在采樣期被檢測(cè)；而被多色π/2脈沖激發(fā)的核自旋的殘留橫向磁化矢量受到多色π脈沖翻轉(zhuǎn)以及放置在脈沖和psyche模塊兩邊的一對(duì)同向散相梯度場(chǎng)作用下被濾除。所述脈沖序列中j調(diào)制信號(hào)采樣模塊是由放置在同核自旋對(duì)間接偶合關(guān)系選擇模塊兩側(cè)的間接維演化時(shí)間t1構(gòu)成。由于前后相等的兩部分演化期t1/2及其中間同核自旋對(duì)選擇模塊形成自旋回波的信號(hào)演化，所選擇出的核自旋的偶合核自旋在經(jīng)此演化后完全消除了化學(xué)位移，只保留了所選擇核自旋與偶合核自旋獨(dú)立的j偶合信息，從而構(gòu)成了采樣信號(hào)沿f1維的信息，即二維j分解譜中j偶合信息維。在步驟6)中，所述實(shí)驗(yàn)參數(shù)包括直接維譜寬sw、j調(diào)制信號(hào)模塊中間接維演化期t1、間接維點(diǎn)數(shù)ni、序列延遲時(shí)間rd、非選擇性矩形π/2脈沖時(shí)間、多色π/2脈沖功率和時(shí)間、多色π脈沖功率和時(shí)間、psyche模塊中線型調(diào)頻脈沖功率和時(shí)間、psyche模塊中梯度場(chǎng)強(qiáng)度及其作用時(shí)間、散相梯度場(chǎng)強(qiáng)度及其作用時(shí)間。所述序列延遲時(shí)間rd的設(shè)定范圍為3～5s。在步驟7)中，所述數(shù)據(jù)采樣的具體過(guò)程為：首先脈沖序列延遲一段rd的時(shí)間，目的是為了讓磁化矢量弛豫恢復(fù)過(guò)來(lái)；接著，脈沖序列的各個(gè)模塊依次對(duì)樣品進(jìn)行作用演化，即選擇出感興趣的自旋進(jìn)行激發(fā)并對(duì)其施加相位調(diào)制，通過(guò)相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊將激發(fā)核自旋的橫向磁化矢量及相位傳遞給其偶合核，偶合核在同核自旋對(duì)選擇模塊作用下在f1維僅保留與激發(fā)核的間接偶合關(guān)系，并在間接維演化期t1進(jìn)行信號(hào)演化，在采樣期t2采樣最終信號(hào)。上述脈沖序列執(zhí)行過(guò)程需要改變多色π/2脈沖中各個(gè)高斯形狀脈沖的相位，即改變多色π/2脈沖的形狀設(shè)置，每改一次多色π/2脈沖的形狀，需要進(jìn)行一次2dj分解譜的采樣。多色π/2脈沖的形狀個(gè)數(shù)等于感興趣的激發(fā)核自旋數(shù)n，因此需要n次2dj分解譜實(shí)驗(yàn)。在步驟8)中，所述相關(guān)的數(shù)據(jù)后處理過(guò)程如下：(a)對(duì)多次二維譜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重排，將每一次二維譜實(shí)驗(yàn)采樣得到的數(shù)據(jù)按照相同的t1時(shí)間分成一組塊；(b)將(a)分塊得到的數(shù)據(jù)沿采樣次數(shù)維進(jìn)行傅立葉變換；(c)將(b)變換得到的數(shù)據(jù)具有相同傅立葉變換域變量值的組成一組塊，并按照t1時(shí)間遞增方式排列；(d)將(c)重排后的數(shù)據(jù)進(jìn)行傅立葉變換，最終得到多張新型核磁共振二維j分解譜，每一張二維j分解譜f1維反映了一個(gè)選擇自旋核與其偶合的所有自旋間獨(dú)立的j裂峰情況，f2維反映偶合自旋與非選擇自旋j裂峰情況。本發(fā)明通過(guò)脈沖序列的設(shè)計(jì)利用同核自旋對(duì)選擇模塊和j調(diào)制信號(hào)采樣模塊來(lái)獲得獨(dú)立同核自旋對(duì)的j偶合關(guān)系，最終獲得新型核磁共振二維j分解譜。同核自旋對(duì)選擇模塊中psyche模塊的使用有利于提高譜的信噪比。另外，通過(guò)激發(fā)脈沖相位傅立葉變換矩陣編碼可同時(shí)多次采樣多個(gè)感興趣自旋的獨(dú)立偶合自旋對(duì)，可以進(jìn)一步提高最終核磁共振譜的信噪比。獨(dú)立同核自旋對(duì)的j偶合信息有利于精確分析化學(xué)鍵角度和旋轉(zhuǎn)情況，本發(fā)明能夠克服選擇核自旋受多個(gè)核自旋間接偶合的影響，直接檢測(cè)出選擇核自旋與所有偶合核獨(dú)立間接偶合關(guān)系，且無(wú)需深?yuàn)W的約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算以及特殊的硬件設(shè)備，可適用于任意常規(guī)核磁共振波譜儀，為化學(xué)、生物學(xué)結(jié)構(gòu)提供了一種簡(jiǎn)便有效的手段。附圖說(shuō)明圖1為用于檢測(cè)獨(dú)立同核自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的核磁共振二維j分解譜脈沖序列，其中矩形條為非選擇性π/2射頻脈沖，高斯形狀的條形分別為多色π/2脈沖pc1和多色π脈沖pc2。帶箭頭的梯形條為線性調(diào)頻射頻脈沖，總的翻轉(zhuǎn)角為π，條紋填充的矩形塊為沿z方向線性梯度場(chǎng)g1，g2和g3，t1/2為間接維演化時(shí)間。圖2為α-d-葡萄糖和β-d-葡萄糖化學(xué)結(jié)構(gòu)式，以及葡萄糖混合物的常規(guī)j分解譜。圖3為本發(fā)明所提出的方法在葡萄糖混合物上所獲得的α-d-葡萄糖上h2所有獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的新型二維j分解譜。圖4為本發(fā)明所提出的方法在葡萄糖混合物上所獲得的β-d-葡萄糖上h15所有獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的新型二維j分解譜。圖5為本發(fā)明所提出的方法在葡萄糖混合物上所獲得的α-d-葡萄糖上h5和β-d-葡萄糖上h17所有獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的新型二維j分解譜。圖6為本發(fā)明所提出的方法在葡萄糖混合物上所獲得的α-d-葡萄糖上h3所有獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的新型二維j分解譜。圖7為本發(fā)明所提出的方法在葡萄糖混合物上所獲得的β-d-葡萄糖上h23所有獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的新型二維j分解譜。具體實(shí)施方式本發(fā)明所提出的方法能夠克服選擇核自旋受多個(gè)核自旋間接偶合的影響，直接檢測(cè)出選擇核自旋與所有偶合核獨(dú)立間接偶合關(guān)系，最終獲得新型二維j分解譜。該方法能省去深?yuàn)W的約束分子動(dòng)力學(xué)計(jì)算以及特殊的硬件設(shè)備，可適用于任意常規(guī)核磁共振波譜儀，為化學(xué)和生物學(xué)結(jié)構(gòu)分析提供一種簡(jiǎn)便有效的方法。本發(fā)明所用字符對(duì)照表參照下表：本發(fā)明具體實(shí)施過(guò)程中的各個(gè)步驟如下：步驟1，樣品裝樣將所檢測(cè)的生物組織樣品裝入核磁試管并將其放入核磁譜儀檢測(cè)磁體中。步驟2，對(duì)樣品進(jìn)行勻場(chǎng)和鎖場(chǎng)利用譜儀自帶的勻場(chǎng)和鎖場(chǎng)功能實(shí)現(xiàn)樣品的勻場(chǎng)和鎖場(chǎng)。步驟3，常規(guī)一維譜的采樣用核磁共振譜儀自帶的常規(guī)一維脈沖序列采樣得到一張一維譜，由一維譜獲得譜圖的譜寬。步驟4，非選擇性矩形π/2脈沖寬度測(cè)量在一個(gè)固定功率下，測(cè)量常規(guī)一維脈沖序列中非選擇性矩形π/2脈沖寬度，為多色脈沖、選擇性脈沖以及絕熱脈沖參數(shù)設(shè)置提供依據(jù)；步驟5，脈沖序列的導(dǎo)入在核磁共振譜儀操作臺(tái)上，打開(kāi)譜儀相應(yīng)的操作軟件，導(dǎo)入事先編譯好的脈沖序列(如圖1所示)，選擇特定的實(shí)驗(yàn)區(qū)，然后調(diào)入上述脈沖序列，為下一步操作做準(zhǔn)備。步驟6，脈沖序列參數(shù)設(shè)置首先打開(kāi)所導(dǎo)入脈沖序列的各個(gè)相關(guān)模塊，包括自旋相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊、同核自旋對(duì)選擇模塊和j調(diào)制信號(hào)采樣模塊。接著根據(jù)檢測(cè)樣品實(shí)際情況設(shè)置相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)參數(shù)，包括直接維譜寬sw、j調(diào)制信號(hào)模塊中間接維演化期t1的點(diǎn)數(shù)ni、序列延遲時(shí)間rd、π/2非選擇性矩形脈沖功率和時(shí)間、多色π/2脈沖功率和時(shí)間、多色π脈沖功率和時(shí)間、psyche模塊中線型調(diào)頻脈沖功率和時(shí)間、psyche模塊中梯度場(chǎng)強(qiáng)度及其作用時(shí)間、散相梯度場(chǎng)強(qiáng)度及其作用時(shí)間。步驟7，數(shù)據(jù)采樣。數(shù)據(jù)采樣具體過(guò)程為：首先脈沖序列延遲一段rd的時(shí)間，目的是為了讓磁化矢量弛豫恢復(fù)過(guò)來(lái)；接著，脈沖序列的各個(gè)模塊依次對(duì)樣品進(jìn)行作用演化，即選擇出感興趣的自旋進(jìn)行激發(fā)并對(duì)其施加相位調(diào)制，通過(guò)相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊將激發(fā)核自旋的橫向磁化矢量及相位傳遞給其偶合核，偶合核在同核自旋對(duì)選擇模塊作用下在f1維僅保留與激發(fā)核的間接偶合關(guān)系，并在間接維演化期t1進(jìn)行信號(hào)演化，在采樣期t2采樣最終信號(hào)。上述脈沖序列執(zhí)行過(guò)程需要改變多色π/2脈沖中各個(gè)高斯形狀脈沖的相位，即改變多色π/2脈沖的設(shè)置，每改一次多色π/2脈沖，需要進(jìn)行一次2dj分解譜的采樣。多色π/2脈沖個(gè)數(shù)等于每一組實(shí)驗(yàn)中感興趣的激發(fā)核自旋數(shù)n，因此每一組需要n次2dj分解譜實(shí)驗(yàn)。步驟8，數(shù)據(jù)后處理。數(shù)據(jù)采樣完成后，進(jìn)行相關(guān)的數(shù)據(jù)后處理，具體過(guò)程如下：(a)對(duì)多次二維譜實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)重排，將每一次二維譜實(shí)驗(yàn)采樣得到的數(shù)據(jù)按照相同的t1時(shí)間分成一組塊；(b)將(a)分塊得到的數(shù)據(jù)沿采樣次數(shù)維進(jìn)行傅立葉變換；(c)將(b)變換得到的數(shù)據(jù)具有相同傅立葉變換域變量值的組成一組塊，并按照t1時(shí)間遞增方式排列；(d)將(c)重排后的數(shù)據(jù)進(jìn)行傅立葉變換，最終得到多張新型核磁共振二維j分解譜，每一張二維j分解譜f1維反映了一個(gè)選擇自旋核與偶合的所有自旋間獨(dú)立的j裂峰情況，f2維反映偶合自旋與非選擇自旋j裂峰情況。以下給出一個(gè)具體實(shí)施例：將本發(fā)明所提出的方法用于掃描α-d-葡萄糖和β-d-葡萄糖的混合物作為一個(gè)實(shí)施例，用這個(gè)具體的實(shí)施例來(lái)驗(yàn)證本發(fā)明在測(cè)量獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系的可行性。實(shí)驗(yàn)測(cè)試是在一臺(tái)varian500mhznmr譜議(varian,paloalto,ca)下進(jìn)行，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程沒(méi)有改動(dòng)任何儀器硬件設(shè)施。按照上述本發(fā)明所提出方法的操作流程，首先用常規(guī)簡(jiǎn)單的一維脈沖序列采樣得到一張一維譜，采樣時(shí)間為4s，譜寬是1302.08hz。然后用一維脈沖序列測(cè)得在發(fā)射機(jī)功率為62db時(shí)，π/2非選擇性脈沖持續(xù)時(shí)間為15.25μs。接著，用儀器自帶的j譜序列采樣的傳統(tǒng)2dj分解譜如圖2所示。從這張一維譜中只能獲得自旋的裂峰情況，而無(wú)法獲得自旋之間的間接偶合關(guān)系。然后，導(dǎo)入編譯好的如圖1所示脈沖序列，打開(kāi)脈沖序列的各個(gè)相關(guān)模塊，包括自旋相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊、同核自旋對(duì)選擇模塊和j調(diào)制信號(hào)采樣模塊，設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)。具體對(duì)于本實(shí)施例所采用的樣品，其實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置如下：直接維譜寬sw為1.30khz，第一間接維譜寬sw1為60hz，j調(diào)制信號(hào)采樣模塊中間接維演化期t1的點(diǎn)數(shù)ni為64，序列延遲時(shí)間rd為3s，π/2非選擇性矩形脈沖時(shí)間為15.25μs,線性調(diào)頻射頻脈沖激發(fā)功率13db，激發(fā)頻率范圍6000hz，持續(xù)時(shí)間15ms。梯度場(chǎng)強(qiáng)度為g1＝16g/cm、g2＝8g/cm和g3＝0.75g/cm，其作用時(shí)間為σ1＝σ1＝σ3＝0.5ms。為了在最短時(shí)間內(nèi)測(cè)量出葡萄糖混合中所有獨(dú)立自旋對(duì)的間接偶合關(guān)系，我們?cè)O(shè)置了四組實(shí)驗(yàn)，其中第一組實(shí)驗(yàn)選擇化學(xué)位移為5.22ppm(α-d-葡萄糖上h2)和3.23ppm(β-d-葡萄糖上h15)的自旋，第二組選擇化學(xué)位移為3.40ppm(α-d-葡萄糖上h2和β-d-葡萄糖上h17)的自旋，第三組選擇化學(xué)位移為3.52ppm(α-d-葡萄糖上h3)的自旋，第四組選擇化學(xué)位移為3.88ppm(β-d-葡萄糖上h23)自旋。每一組實(shí)驗(yàn)中根據(jù)選擇自旋的化學(xué)位移及其與鄰近自旋的化學(xué)位移差，設(shè)置自旋相關(guān)轉(zhuǎn)移模塊中π/2多色脈沖pc1參數(shù)以及同核自旋對(duì)選擇模塊中π多色脈沖pc2參數(shù)。在第一組實(shí)驗(yàn)中pc1和pc2均對(duì)準(zhǔn)α-d-葡萄糖上h2和β-d-葡萄糖上h15，脈沖時(shí)間40ms，功率7db，13db。在第二組實(shí)驗(yàn)中pc1和pc2對(duì)準(zhǔn)α-d-葡萄糖上h5和β-d-葡萄糖上h17，脈沖時(shí)間60ms，功率-2db，4db。在第三組實(shí)驗(yàn)中pc1和pc2對(duì)準(zhǔn)α-d-葡萄糖上h3，脈沖時(shí)間90ms，功率-6db，0db。在第四組實(shí)驗(yàn)中pc1和pc2對(duì)準(zhǔn)β-d-葡萄糖上h23，脈沖時(shí)間110ms，功率-7db，-1db。執(zhí)行設(shè)置好的序列，第一組實(shí)驗(yàn)由于同時(shí)激發(fā)兩個(gè)位置的自旋，激發(fā)脈沖pc1受到二階的傅立葉變換矩陣編碼，因此需要進(jìn)行兩次的二維采樣，兩次采樣到的數(shù)據(jù)根據(jù)t1值分塊，每一塊做兩點(diǎn)傅立葉變換后，再根據(jù)傅立葉變換頻點(diǎn)值將數(shù)據(jù)分為兩塊，每一塊都按照t1遞增順序排列。對(duì)每一塊數(shù)據(jù)作二維傅立葉變換獲得的新型二維j分解譜，分別對(duì)應(yīng)化學(xué)位移α-d-葡萄糖上h2和β-d-葡萄糖上h15自旋的間接偶合關(guān)系。如圖3、4所示。第二至第四組實(shí)驗(yàn)設(shè)置完參數(shù)后采樣，采樣后的數(shù)據(jù)直接作二維傅立葉變換即可獲得新型二維j分解譜，分別對(duì)應(yīng)化學(xué)位移α-d-葡萄糖上h5和β-d-葡萄糖上h17、α-d-葡萄糖上h3以及β-d-葡萄糖上h23自旋的間接偶合關(guān)系，如圖5-7所示。第一組的實(shí)驗(yàn)時(shí)間36min，第二至四組的實(shí)驗(yàn)時(shí)間分別是19min，19min，20min。根據(jù)本方法所獲得的新型二維j分解譜提供的f1和f2裂峰距離(如圖3-7所示)，可測(cè)量葡萄糖混合物中各個(gè)獨(dú)立h-h對(duì)的間接偶合關(guān)系，所歸屬的信息如表1所示：表1.根據(jù)本發(fā)明提出方法所獲得獨(dú)立自旋對(duì)間接偶合關(guān)系歸屬序號(hào)混合物偶合自旋對(duì)裂分方式j(luò)偶合常數(shù)(hz)1α-d-葡萄糖2，3雙重峰3.732α-d-葡萄糖3，4雙重峰9.553α-d-葡萄糖4，5雙重峰9.064α-d-葡萄糖5，6雙重峰10.135α-d-葡萄糖6，11雙重峰--6α-d-葡萄糖11，11雙重峰--7β-d-葡萄糖14，15雙重峰7.928β-d-葡萄糖15，16雙重峰9.199β-d-葡萄糖16，17雙重峰8.5810β-d-葡萄糖17，18雙重峰9.2911β-d-葡萄糖18，23雙重峰2.4712β-d-葡萄糖18，23雙重峰5.7513β-d-葡萄糖23，23雙重峰12.33由于α-d-葡萄糖上h6、h11自旋的化學(xué)位移幾乎重合，所以無(wú)法測(cè)量α-d-葡萄糖上h6，11，以及h11，11之間的間接偶合關(guān)系。α-d-葡萄糖和β-d-葡萄糖其余獨(dú)立h-h自旋對(duì)的間接偶合關(guān)系均能測(cè)量。上述實(shí)施例僅用來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的一種測(cè)量獨(dú)立同核自旋對(duì)間接偶合模式的方法，但本發(fā)明并不局限于實(shí)施例，凡是依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與修飾，均落入本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12