本發(fā)明屬于生物非切片制片的技術領域,涉及一種朱槿纖維快速制片的方法。
背景技術:
植物纖維普遍存在于植物體的營養(yǎng)器官中,是植物機械組織的一部分,同時也是植物運輸系統(tǒng)重要的組成部分,是植物物質(zhì)運輸、維持正常生命活動的主要場所。植物纖維具有多種類型,根據(jù)纖維所在的部位可以將植物纖維分為木纖維、下皮纖維、韌皮纖維、皮層纖維、中柱鞘纖維、環(huán)髓纖維;根據(jù)纖維的特殊組織形態(tài)可以將纖維分為晶鞘纖維、嵌晶纖維、含晶纖維、分隔纖維、分枝纖維等。而通常人們所說的植物纖維主要是指木纖維,木纖維包括木質(zhì)部中除導管、薄壁細胞和管胞之外的一切細長的厚壁組織。纖維體內(nèi)主要含有纖維素。但是韌皮纖維也是植物纖維中重要的組成部分。韌皮纖維比木纖維更容易分離出來,因此對于觀察植物纖維結(jié)構具有重要的意義,是纖維實驗教學的重要材料來源。
而目前國內(nèi)對于纖維的研究主要集中在對絲織品的研究以及對于纖維旋光性、著色性能等方向進行研究尤其是對于熱帶纖維的研究已經(jīng)成為一種新研究方向。處理纖維的主要方法有堿法、酸法。其中堿法是一種古老的纖維處理方法,同時也是目前最常用的方法,堿法處理可以除去纖維中的脂肪酸和果酸使植物纖維可以分出來,還能保留木質(zhì)素。但目前采用的方法離析時間非常長,易破壞纖維結(jié)構,導致制片效果均不佳。
在教學方面,朱槿纖維是典型的常用材料。目前,離析朱槿纖維的方法,主要采用10%重鉻酸鉀和10%硝酸離析法,但是采用該方法,離析時耗費的時間長,而獲得的纖維結(jié)構不完整,在生物顯微鏡下很難觀察到其結(jié)構如清晰的細胞壁以及紋孔等結(jié)構。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種朱槿植物纖維快速制片的方法,該方法離析時間短,獲得的纖維結(jié)構完整,能夠在纖維鏡下觀察到清晰的細胞壁以及紋孔等結(jié)構。
本發(fā)明的技術方案是:一種朱槿纖維快速制片的方法,包括以下步驟:
(1)、用剪刀剪取兩年以上的老枝條,剝下樹皮,浸泡到質(zhì)量百分數(shù)為15%-25%重鉻酸鉀和8%-15%硝酸混合液中,煮沸60~90min,然后再加入質(zhì)量百分數(shù)為10%-15%過氧化氫和50%-65%醋酸混合液10~20ml,繼續(xù)煮沸處理30~60min;
(2)、將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有自來水的培養(yǎng)皿中,用解剖針挑出植物纖維,置于干凈的載玻片中,滴入0.5~1ml的質(zhì)量百分數(shù)為0.1%番紅染色液染色10min,然后用70%酒精洗干凈多余的番紅染色液,再滴入0.5~1ml50%的甘油,蓋上蓋玻片,完成封片;
(3)、生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構。
步驟(1)是用所述重鉻酸鉀和硝酸的混合液處理使植物樹皮變硬之后,再緩慢加入所述醋酸和過氧化氫混合液處理一段時間,獲得完整的植物纖維。
除另有說明外,本發(fā)明所述的百分比均為質(zhì)量百分比,各組分含量百分數(shù)之和為100%。
發(fā)明人在用10%重鉻酸鉀和10%硝酸的混合液處理朱槿樹皮時發(fā)現(xiàn),僅用10%重鉻酸鉀和10%硝酸混合液處理朱槿莖段樹皮所需要消耗的時間15~20h,并且所獲得纖維的觀察效果差,部分的纖維結(jié)構被分解,細胞壁的染色效果不清晰。然后在發(fā)明人用朱槿為材料重新所做的實驗中發(fā)現(xiàn)在用重鉻酸鉀和硝酸的混合液處理使植物樹皮變硬之后,再緩慢加入醋酸和過氧化氫混合液處理一段時間就可以很快的獲取完整的植物纖維。
附圖說明
圖1-1是光學顯微鏡下觀察朱槿纖維結(jié)構圖。
圖1-2是朱槿纖維局部圖。
圖1-3是朱槿纖維局部放大圖(40x10)。
圖2-1是朱槿纖維全景圖(100x)。
圖2-2是朱槿纖維束局部圖(100x)。
圖2-3是朱槿纖維局部圖(400x)。
圖2-4是朱槿纖維局部圖(400x)。
具體實施方式
以下通過實施例對本發(fā)明的技術方案作進行進一步的說明。
實施例1
用剪刀剪取兩年以上的朱槿老枝條,剝下樹皮,將樹皮浸泡到質(zhì)量百分數(shù)為15%重鉻酸鉀和8%硝酸混合液中,煮沸60min,然后再加入質(zhì)量百分數(shù)為10%過氧化氫和50%醋酸混合液20ml,繼續(xù)煮沸處理30min。將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有澄清自來水的培養(yǎng)皿中,用解剖針挑出植物纖維,置于干凈的載玻片中,滴入0.5~1ml質(zhì)量百分數(shù)為0.1%番紅染色液染色10min。然后用70%酒精洗干凈多余的番紅染色液,再滴入0.5~1ml50%的甘油,蓋上蓋玻片,完成封片。電子顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構。結(jié)果如圖1-1、圖1-2、圖1-3。
實施例2
用剪刀剪取兩年以上的朱槿老枝條,剝下樹皮,將樹皮浸泡到質(zhì)量百分數(shù)為20%重鉻酸鉀和10%硝酸混合液中,煮沸90min,然后再加入質(zhì)量百分數(shù)為12%過氧化氫和60%醋酸混合液10ml,繼續(xù)煮沸處理30min。將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有澄清自來水的培養(yǎng)皿中,用解剖針挑出植物纖維,置于干凈的載玻片中,滴入0.5~1ml質(zhì)量百分數(shù)為0.1%番紅染色液染色10min。然后用70%酒精洗干凈多余的番紅染色液,再滴入0.5~1ml50%的甘油,蓋上蓋玻片,完成封片。生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構。生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構。用此方法所得的結(jié)果與實例1所得結(jié)果相差不大。
實施例3
用剪刀剪取扶桑兩年以上的老枝條,剝下樹皮,將樹皮浸泡到質(zhì)量百分數(shù)為25%重鉻酸鉀和15%硝酸混合液中,煮沸60~90min,然后再將質(zhì)量百分數(shù)為25%重鉻酸鉀和15%硝酸混合液倒掉,再加入質(zhì)量百分數(shù)為15%過氧化氫和65%醋酸混合液10~20ml,繼續(xù)煮沸處理30~60min。將處理好的植物組織用鑷子夾到裝有澄清自來水的培養(yǎng)皿中,用解剖針挑出植物纖維,置于干凈的載玻片中,滴入0.5~1ml質(zhì)量百分數(shù)為0.1%番紅染色液染色10min。然后用70%酒精洗干凈多余的番紅染色液,再滴入0.5~1ml50%的甘油,蓋上蓋玻片,完成封片。生物顯微鏡下觀察植物纖維結(jié)構。用此方法所得的結(jié)果與實例1所得結(jié)果相差不大。如圖2-1、圖2-2、圖2-3、圖2-4。