本發(fā)明屬于生物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒及檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
：免疫球蛋白是一組具有抗體活性的蛋白質(zhì)，主要存在于血漿中，也見(jiàn)于其他體液、組織和一些分泌液中。免疫球蛋白分為五類，即免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白D(IgD)和免疫球蛋白E(IgE)。其中，IgM是五類免疫球蛋白中分子量最大的一種。其分子量為9×105道爾頓，故又稱為巨球蛋白。在正常人血清中的平均濃度為60～180mg％，約占血清總免疫球蛋白的6％。IgM的升高常見(jiàn)于巨球蛋白血癥、細(xì)菌和寄生蟲傳染病、肝臟疾病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及膽囊纖維癥等。IgM的減少常見(jiàn)于原發(fā)性無(wú)丙種球蛋白血癥，非IgA和IgG型多發(fā)性骨髓瘤，霍奇金病，慢性淋巴細(xì)胞白血病，蛋白喪失性胃腸病等。目前臨床上使用較為廣泛的免疫球蛋白A的檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附法和高效液相色譜法，酶聯(lián)免疫吸附法操作過(guò)程復(fù)雜，耗時(shí)長(zhǎng)，且對(duì)操作人員有較高的專業(yè)技術(shù)要求高，而且檢測(cè)不準(zhǔn)確。而隨著生化檢測(cè)技術(shù)的不斷改進(jìn)和完善，由于比濁法用于免疫球蛋白測(cè)定，具有快速、準(zhǔn)確、就愛(ài)你百納、易于自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，正日益受到人們的關(guān)注。如中國(guó)專利申請(qǐng)CN104407159A公開了一種免疫球蛋白IgM免疫比濁法檢測(cè)試劑盒，它包含試劑R1、試劑R2和校準(zhǔn)品，其中試劑R1組成為：pH7.6Tris緩沖液、氯化鈉、聚乙二醇400、二氧化硅包覆的磁性納米顆粒；試劑R2組成為：pH7.6Tris緩沖液、羊抗人IgM抗體、牛血清白蛋白、Kathon-CG。該試劑盒通過(guò)在試劑R1中加入一定量的二氧化硅包覆的磁性納米顆粒和在試劑R2中加入一定量的牛血清白蛋白和Kathon-CG，有效的提高了試劑盒的穩(wěn)定性和分析靈敏度，其線性范圍也較好，試劑的準(zhǔn)確度高，有利于在市場(chǎng)中進(jìn)一步的推廣使用。但是該試劑盒忽略了磁顆粒的聚集現(xiàn)象，在實(shí)際應(yīng)用中，磁顆粒傾向于黏附于反應(yīng)器內(nèi)壁，降低了免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致試劑盒的靈敏度下降，另外，該試劑盒抗原和抗體的結(jié)合不夠穩(wěn)定，易解離，特異性不強(qiáng)。中國(guó)專利申請(qǐng)CN105572384A公開了一種高性價(jià)比的人血液免疫球蛋白G檢測(cè)試劑盒，包括試劑2，所述試劑2為標(biāo)記有兔抗人免疫球蛋白G多克隆抗體的膠乳顆粒溶液；其中，所述膠乳顆粒粒徑范圍為40nm～120nm，每升試劑2中抗體的用量為20ml～30ml。但是該試劑盒未能解決抗體在稀溶液中穩(wěn)定性的問(wèn)題。因此，有必要提供一種靈敏度高、特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確度高、穩(wěn)定性高的試劑盒。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒，其解決了因磁微粒傾向聚集的現(xiàn)象和抗體不穩(wěn)定導(dǎo)致現(xiàn)有的試劑盒的特異性和穩(wěn)定性不高的問(wèn)題。本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒，包括試劑R1、試劑R2和免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品，所述試劑R1包括第一緩沖液20～300mmol/L、促進(jìn)劑5～50mmol/L、聚乙二醇-4000.5～10g/L和氯化鈉5～50g/L；所述試劑R2包括第二緩沖液20～300mmol/L、抗人免疫球蛋白M抗體包被的磁微粒10～50％w/v、氯化鈉5～50g/L和穩(wěn)定劑0.5～10g/L。進(jìn)一步地，所述第一緩沖液、所述第二緩沖液選自PBS緩沖液、Tris緩沖液和醋酸鹽緩沖液中的一種。進(jìn)一步地，所述促進(jìn)劑由非極性氨基酸和CHAPS按1:(0.5～2)的重量比在組成。進(jìn)一步地，所述促進(jìn)劑由非極性氨基酸和CHAPS按1:0.8的重量比在組成。進(jìn)一步地，所述非極性氨基酸選自苯丙氨酸、亮氨酸和纈氨酸中的一種或幾種。進(jìn)一步地，所述非極性氨基酸由苯丙氨酸和亮氨酸按1:(0.02～0.1)的重量比在組成。進(jìn)一步地，所述非極性氨基酸由苯丙氨酸和亮氨酸按1:0.06的重量比在組成。進(jìn)一步地，所述穩(wěn)定劑包括以下重量份數(shù)的組份：聚乙烯吡咯烷酮0.05～2份、二硫蘇糖醇0.01～0.1份、無(wú)機(jī)鹽0.1～2份、牛血清白蛋白0.05～2份和甘油1～2份。進(jìn)一步地，所述穩(wěn)定劑包括以下重量份數(shù)的組份：聚乙烯吡咯烷酮1.2份、二硫蘇糖醇0.06份、無(wú)機(jī)鹽1.5份、牛血清白蛋白1份和甘油1.5份。進(jìn)一步地，所述無(wú)機(jī)鹽選自氯化鈣、氯化鈉、氯化鉀、溴化鈣、溴化鈉、溴化鉀、硫酸鈉和硫酸鉀中的一種或幾種。進(jìn)一步地，所述無(wú)機(jī)鹽選自氯化鈣。進(jìn)一步地，所述試劑R1和所述試劑R2的pH均為6～10。進(jìn)一步地，所述抗人免疫球蛋白M抗體包被的磁微粒由以下步驟制得：將磁微粒用MES緩沖液分散，使磁微粒的濃度為60～90mg/m，加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和N-羥基琥珀酰亞胺，攪拌后加入抗人免疫球蛋白M抗體，攪拌好混合均勻，室溫下孵育10～24h，分離磁微粒，即得。除外，本發(fā)明還提供了一種利用上述免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒檢測(cè)免疫球蛋白M含量的方法，包括以下步驟：A)取2μl待測(cè)樣品，加入250μl所述試劑R1，孵育3～6min后得到吸光度A1，加入50μl所述試劑R2反應(yīng)3～6min后得吸光度A2，計(jì)算ΔA；B)使用所述免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并根據(jù)ΔA和標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)樣品中免疫球蛋白M的含量。免疫比濁法的測(cè)試原理為：樣本中免疫球蛋白M抗原與抗人免疫球蛋白M抗體包被的磁微粒產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)的凝集反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物，其濁度的變化通過(guò)測(cè)定特定波長(zhǎng)的吸光度值，即可得出免疫球蛋白M的含量。發(fā)明人在實(shí)踐過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)樣本發(fā)生溶血時(shí)，血細(xì)胞內(nèi)部的一些物質(zhì)流入反應(yīng)系統(tǒng)內(nèi)，其可以引起磁微粒的非特異性聚集，具體地說(shuō)是容易使磁微粒在反應(yīng)容器內(nèi)壁上黏附，嚴(yán)重影響了測(cè)試的進(jìn)行和降低了免疫反應(yīng)。經(jīng)過(guò)不懈地努力，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了一種促進(jìn)劑，其一方面可以有效避免磁微粒的聚集現(xiàn)象，另一方面，驚奇地，其可以有效促進(jìn)抗原和抗體的結(jié)合，并且兩者的結(jié)合穩(wěn)定，提高了試劑盒的特異性。優(yōu)選地，促進(jìn)劑由非極性氨基酸和CHAPS按1:(0.5～2)的重量比在組成，更優(yōu)選地，由非極性氨基酸和CHAPS按1:0.8的重量比在組成。其中，非極性氨基酸由苯丙氨酸和亮氨酸按1:(0.02～0.1)的重量比在組成。雖然促進(jìn)劑能有效促進(jìn)抗原和抗體的結(jié)合的機(jī)理不明，但發(fā)明人認(rèn)為可能是因?yàn)樵诜磻?yīng)過(guò)程中，非極性氨基酸圍繞在抗原抗體周圍，使得抗原抗體分子上的疏水決定簇在水中不易形成氫鍵，而傾向于彼此間的相互吸引，促進(jìn)了抗原與抗體之間的疏水性作用，而抗原抗體的疏水作用結(jié)合比氫鍵結(jié)合更具有高度特異性，因此能夠使試劑盒的特異性提高。另外，本發(fā)明還提供了一種穩(wěn)定劑，其解決了抗體在稀溶液中穩(wěn)定性不高這一難題，其能夠使抗體保持穩(wěn)定，且不會(huì)影響抗體的性質(zhì)，從而提高了試劑盒的穩(wěn)定性。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明試劑盒具有以下優(yōu)勢(shì)：1)本發(fā)明提供了一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒，其具有準(zhǔn)確度高、特異性好、精密度高、穩(wěn)定性優(yōu)異的優(yōu)點(diǎn)。2)本發(fā)明通過(guò)加入了促進(jìn)劑，其一方面可以有效避免磁微粒的聚集現(xiàn)象，另一方面，可以有效促進(jìn)抗原和抗體的結(jié)合，并且兩者的結(jié)合穩(wěn)定，提高了試劑盒的特異性；另外通過(guò)加入穩(wěn)定劑，使本發(fā)明試劑盒在4℃的條件下保存6個(gè)月后，準(zhǔn)確度、精密度、特異性仍然保持不變，具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。具體實(shí)施方式：以下通過(guò)具體實(shí)施方式的描述對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但這并非是對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本發(fā)明磁微粒內(nèi)核為四氧化三鐵納米粒子，購(gòu)于西安金磁納米生物技術(shù)有限公司，免疫球蛋白M購(gòu)自北京索寶科技有限公司；CHAPS購(gòu)自上海研晶生物科技有限公司，CAS號(hào)為75621-03-3；抗人免疫球蛋白M抗體購(gòu)自上海金標(biāo)生物有限公司。實(shí)施例1、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒本發(fā)明實(shí)施例1所述試劑盒包括試劑R1、試劑R2和免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品，所述試劑R1包括：Tris緩沖液50mmol/L、促進(jìn)劑15mmol/L、聚乙二醇-4005g/L和氯化鈉20g/L；所述試劑R2包括：Tris緩沖液50mmol/L、抗人免疫球蛋白M抗體20％w/v、氯化鈉2g/L和穩(wěn)定劑5g/L。所述促進(jìn)劑由非極性氨基酸和CHAPS按1:0.8的重量比在組成，所述非極性氨基酸由苯丙氨酸和亮氨酸按1:0.06的重量比在組成，所述穩(wěn)定劑由以下重量份數(shù)的組份組成：聚乙烯吡咯烷酮1.2份、二硫蘇糖醇0.06份、無(wú)機(jī)鹽1.5份、牛血清白蛋白1份和甘油1.5份。制備方法：A)抗人免疫球蛋白M抗體包被的磁微粒的制備：將磁微粒用3ml的MES緩沖液分散，使磁微粒的濃度為80mg/m，加入0.1mg1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺和0.3mgN-羥基琥珀酰亞胺，攪拌后加入1mg抗人免疫球蛋白M抗體，攪拌好混合均勻，室溫下孵育12h，分離磁微粒，得磁微粒；。B)免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品的制備：用生理鹽水將濃度為400U/L的免疫球蛋白M稀釋成6個(gè)不同濃度的免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品，其濃度分別為：0U/L、50U/L、100U/L、200U/L、300U/L和400U/L，然后將免疫球蛋白D校準(zhǔn)品用0.22μm的濾膜過(guò)濾除菌，在2～8℃下保存；C)按上述組分和含量配制好試劑，分裝，即得。實(shí)施例2、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒本發(fā)明實(shí)施例2所述試劑盒包括試劑R1、試劑R2和免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品，所述試劑R1包括：Tris緩沖液20mmol/L、促進(jìn)劑5mmol/L、聚乙二醇-4000.5g/L和氯化鈉5g/L；所述試劑R2包括：Tris緩沖液20mmol/L、抗人免疫球蛋白M抗體10％w/v、氯化鈉5g/L和穩(wěn)定劑0.5g/L。所述促進(jìn)劑由非極性氨基酸和CHAPS按1:0.5的重量比在組成，所述非極性氨基酸由苯丙氨酸和亮氨酸按1:0.02的重量比在組成，所述穩(wěn)定劑由以下重量份數(shù)的組份組成：聚乙烯吡咯烷酮0.05份、二硫蘇糖醇0.01份、無(wú)機(jī)鹽0.1份、牛血清白蛋白0.05份和甘油1份。制備方法如實(shí)施例1。實(shí)施例3、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒本發(fā)明實(shí)施例3所述試劑盒包括試劑R1、試劑R2和免疫球蛋白M標(biāo)準(zhǔn)品，所述試劑R1包括：Tris緩沖液300mmol/L、促進(jìn)劑50mmol/L、聚乙二醇-40010g/L和氯化鈉50g/L；所述試劑R2包括：Tris緩沖液300mmol/L、抗人免疫球蛋白M抗體50％w/v、氯化鈉50g/L和穩(wěn)定劑10g/L。所述促進(jìn)劑由非極性氨基酸和CHAPS按1:2的重量比在組成，所述非極性氨基酸由苯丙氨酸和亮氨酸按1:0.1的重量比在組成，所述穩(wěn)定劑由以下重量份數(shù)的組份組成：聚乙烯吡咯烷酮2份、二硫蘇糖醇0.06份、無(wú)機(jī)鹽1.5份、牛血清白蛋白1份和甘油1.5份。制備方法如實(shí)施例1。實(shí)施例4、本發(fā)明試劑盒檢測(cè)方法a)采用上述試劑盒，使用免疫球蛋白M校準(zhǔn)品在全自動(dòng)生化分析儀上通過(guò)內(nèi)置logit-log(4p)曲線擬合模式擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線；b)取2μl待測(cè)樣品于反應(yīng)杯中，加入250μl試劑R1，混合均勻，將混合后的溶劑在37℃的條件下孵育5min，讀取吸光度A1；c)加入50μl試劑R2反應(yīng)5min后得吸光度A2，計(jì)算吸光度變化值ΔA＝A2-A1；d)根據(jù)樣本中免疫球蛋白M的活性式中：ΔAT是以空白管吸光度作對(duì)照的樣品管吸光度值；ΔAs是以空白管吸光度作對(duì)照的標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值；Cs為標(biāo)準(zhǔn)品中免疫球蛋白M的濃度。對(duì)比例1、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒對(duì)比例1與實(shí)施例1的區(qū)別在于：不含有促進(jìn)劑，其余參數(shù)與操作如實(shí)施例1所示。對(duì)比例2、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒對(duì)比例2與實(shí)施例1的區(qū)別在于：本發(fā)明促進(jìn)劑為CHAPS，其余參數(shù)與操作如實(shí)施例1所示。對(duì)比例3、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒對(duì)比例3與實(shí)施例1的區(qū)別在于：本發(fā)明促進(jìn)劑由苯丙氨酸和亮氨酸按1:0.06的重量比在組成，其余參數(shù)與操作如實(shí)施例1所示。對(duì)比例4、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒對(duì)比例4與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述穩(wěn)定劑不包括甘油，其余參數(shù)與操作如實(shí)施例1所示。對(duì)比例5、一種免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒對(duì)比例5與實(shí)施例1的區(qū)別在于：所述穩(wěn)定劑不包括二硫蘇糖醇，其余參數(shù)與操作如實(shí)施例1所示。試驗(yàn)例一、性能測(cè)試1.1準(zhǔn)確度測(cè)試取實(shí)施例1～3所述試劑盒按照實(shí)施例4所述檢測(cè)方法分別對(duì)質(zhì)控品1和質(zhì)控品2進(jìn)行測(cè)定，其中質(zhì)控品1中免疫球蛋白M的濃度為1.57g/L，質(zhì)控品2中免疫球蛋白M的濃度為1.85g/L，每個(gè)試劑盒重復(fù)測(cè)定三次，測(cè)定結(jié)果如表1和表2所示。表1本發(fā)明試劑盒對(duì)質(zhì)控品1的測(cè)定結(jié)果組別第1次(g/L)第2次(g/L)第3次(g/L)平均值(g/L)偏差(％)實(shí)施例11.561.551.571.560.64％實(shí)施例21.551.571.561.560.64％實(shí)施例31.531.551.571.551.2％表2本發(fā)明試劑盒對(duì)質(zhì)控品2的測(cè)定結(jié)果組別第1次(g/L)第2次(g/L)第3次(g/L)平均值(g/L)偏差(％)實(shí)施例11.841.841.851.8430.37％實(shí)施例21.831.851.841.840.54％實(shí)施例31.841.861.831.840.54％由表1和表2可知，本發(fā)明免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)確度高，對(duì)質(zhì)控品1和質(zhì)控品2的檢測(cè)偏差較小，綜合來(lái)說(shuō)，實(shí)施例1所述試劑盒準(zhǔn)確度更高，為最佳的實(shí)施例。1.2精密度測(cè)試取本發(fā)明實(shí)施例1～3所述試劑盒按照實(shí)施例4所述檢測(cè)方法對(duì)同一待測(cè)樣本中免疫球蛋白M的含量進(jìn)行多次反復(fù)測(cè)定，對(duì)所得的結(jié)果進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)偏差SD和變異系數(shù)CV計(jì)算，結(jié)果如表3所示。表3本發(fā)明試劑盒對(duì)同一待測(cè)樣本進(jìn)行多次反復(fù)測(cè)定的測(cè)定結(jié)果組別①②③④⑤⑥⑦⑧⑨⑩均值SDCV％實(shí)施例11.841.831.811.801.831.821.821.831.841.831.8250.0120.6實(shí)施例21.831.821.801.801.821.811.821.831.841.831.820.0130.7實(shí)施例31.821.801.821.841.801.851.821.861.841.831.8280.0191.08由表3可知，本發(fā)明實(shí)施例1～3所述試劑盒的精密度好，變異系數(shù)小。1.3特異性測(cè)試1.3.1特異性：用本發(fā)明實(shí)施例1～3以及對(duì)比例1～3所述試劑盒分別檢測(cè)健康獻(xiàn)血員血清186份，檢測(cè)結(jié)果如表4所示。表4檢測(cè)結(jié)果由表4可知，用本發(fā)明實(shí)施例1～3所述試劑盒檢測(cè)健康血清186例，檢出陽(yáng)性1～2例，陽(yáng)性率為0.54～1.08％，結(jié)果差異無(wú)顯著性，試劑盒的特異性為98.92～99.46％，其中，以實(shí)施例1所述試劑盒特異性最高，為99.46％。值得說(shuō)明的是，對(duì)比例1不含有促進(jìn)劑，其制備得到的試劑盒檢測(cè)健康血清186例，檢出陽(yáng)性15例，與實(shí)施例1相比，特異性下降了7.52％。對(duì)比例2和對(duì)比例3改變了促進(jìn)劑的組成，其特異性與實(shí)施例1相比均有明顯下降。1.4穩(wěn)定性測(cè)試取本發(fā)明實(shí)施例1以及對(duì)比例4～5所述試劑盒4℃下保存6個(gè)月，按照上述1.1～1.3所述方法測(cè)定試劑盒的準(zhǔn)確度、精密度和特異性，檢測(cè)結(jié)果表5所示。表54℃下保存6個(gè)月后穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度檢測(cè)結(jié)果：本發(fā)明實(shí)施例1所述試劑盒在4℃的條件下保存6個(gè)月后，測(cè)定免疫球蛋白M濃度為1.54g/L的質(zhì)控品1三次，測(cè)得平均值為1.54g/L，偏差為1.9％；測(cè)定免疫球蛋白M濃度為1.85g/L的質(zhì)控品2三次，測(cè)得平均值為1.826g/L，偏差為1.29％。故認(rèn)為本發(fā)明試劑盒在4℃的條件下保存6個(gè)月后，其準(zhǔn)確度保持不變。對(duì)比例4所述試劑盒與實(shí)施例1所述試劑盒相比，不含有甘油，其在同樣的條件下保存6個(gè)月后，其測(cè)定質(zhì)控品1的偏差為12.1％，測(cè)定質(zhì)控品2的偏差為10.6％，可認(rèn)定為準(zhǔn)確度有明顯下降；對(duì)比例5所述試劑盒去掉了二硫蘇糖醇，其所得試劑盒的準(zhǔn)確度在同樣的條件下保存同樣時(shí)間后有明顯下降，精密度檢測(cè)結(jié)果：本發(fā)明實(shí)施例1所述試劑盒在4℃的條件下保存6個(gè)月后，其精密度良好，變異系數(shù)為0.8％，故可認(rèn)為，本發(fā)明試劑盒在4℃的條件下保存6個(gè)月后，其精確度保持不變。同樣地，對(duì)比例4和對(duì)比例5改變了穩(wěn)定劑的組成，其精密度有所下降。特異性檢測(cè)結(jié)果：本發(fā)明實(shí)施例1所述試劑盒在4℃的條件下保存6個(gè)月后，檢測(cè)186份健康血清，檢出陽(yáng)性2例，陽(yáng)性率為1.07％，與未保存前相比，陽(yáng)性率增加了0.53％，基本保持一致。對(duì)比例4和對(duì)比例5所述試劑盒在同樣的條件下保存相同的時(shí)間后，檢測(cè)186份健康血清，分別檢出陽(yáng)性12例和10例，陽(yáng)性率與實(shí)施例1相比分別提高了5.38％和4.3％。綜上所述，本發(fā)明試劑盒由于穩(wěn)定劑的存在，在4℃的條件下保存6個(gè)月后，其精密度、準(zhǔn)確度和特異性基本保持不變，具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。而改變了穩(wěn)定劑的組成，對(duì)試劑盒的準(zhǔn)確度影響最大，精密度和特異性也有所下降。試驗(yàn)例二、不同促進(jìn)劑組成對(duì)磁微粒聚集現(xiàn)象的影響取實(shí)施例1以及對(duì)比例1～3所述試劑盒，利用各試劑盒按照實(shí)施例4所述檢測(cè)方法對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)，目測(cè)反應(yīng)過(guò)程中磁微粒反應(yīng)杯上的黏附和聚集現(xiàn)象，記錄結(jié)果如表6。表6結(jié)果組別磁微粒粒與反應(yīng)容器的黏附磁微粒的聚集實(shí)施例1沒(méi)有沒(méi)有對(duì)比例1存在存在對(duì)比例2存在存在對(duì)比例3存在沒(méi)有由上表可知，當(dāng)存在促進(jìn)劑時(shí)，磁微粒沒(méi)有出現(xiàn)在反應(yīng)容器內(nèi)壁上黏附和相互聚集現(xiàn)象，且后續(xù)結(jié)果表明，磁微粒的存在對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性無(wú)不良影響。當(dāng)不加入促進(jìn)劑時(shí)，磁微粒在反應(yīng)容器的內(nèi)壁上有非常嚴(yán)重的黏附現(xiàn)象，且磁微粒之間相互聚集，所以后續(xù)洗滌過(guò)程中無(wú)法順利的進(jìn)行，故而可認(rèn)為對(duì)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生了影響。值得說(shuō)明的是，即使是改變促進(jìn)劑的組成或者改變各組分的用量也會(huì)引起磁微粒的聚集，如當(dāng)去掉非極性氨基酸時(shí)，磁微粒有明顯的黏附和聚集現(xiàn)象，當(dāng)去掉CHAPS時(shí)，容易使得磁微粒在反應(yīng)容器內(nèi)壁上黏附。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3