本發(fā)明涉及體外診斷試劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及溶血劑及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

體外診斷試劑是指可單獨使用或與儀器、器具、設(shè)備或系統(tǒng)組合使用,在疾病的預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測、預(yù)后觀察、健康狀態(tài)評價以及遺傳性疾病的預(yù)測過程中,用于對人體樣本(各種體液、細胞、組織樣本等)進行體外檢測的試劑、試劑盒、校準品(物)、質(zhì)控品(物)等。隨著臨床體外診斷技術(shù)的研究和發(fā)展，體外診斷使用最多最重要的人體樣本類型當屬門診全血。全血成分相當豐富，除血常規(guī)檢測細胞等有形成分外，還含血清和血漿中的其他所有化學(xué)成分，為避免紅細胞、白細胞等對檢測的影響，在進行全血中的化學(xué)成分測試前，需要將全血進行快速有效溶解，因此溶血劑的效率和作用將對后續(xù)樣本的檢測起到非常關(guān)鍵的作用。

C-反應(yīng)蛋白(CRP)是相對分子質(zhì)量為115～140KD的血清β球蛋白，因最早發(fā)現(xiàn)其和肺炎球菌的C多糖相結(jié)合而得名(1930年)，是由5個相同的亞單位以非共價鍵結(jié)合而成的環(huán)狀五球體。CRP半壽期約15h，正常人CRP的濃度很低(0.068～8.2mg/L)，但在組織損傷、急性感染發(fā)生后6～8h開始升高,24～48h達峰值，可達正常值的幾百倍甚至上千倍，升高幅度與感染程度成正比，炎癥治愈后濃度迅速下降，7～12天可恢復(fù)正常水平。CRP持續(xù)增高提示機體存在慢性炎癥或自身免疫疾病，CRP在病毒感染時不會升高，其變化不受病人的個體差異、機體狀態(tài)和治療藥物的影響。近年來研究證明，CRP具有與IgG和補體相似的調(diào)理和凝集作用，促進巨噬細胞的吞噬，刺激單核細胞表面的組織因子表達及其它免疫調(diào)節(jié)功能。CRP在炎癥或組織損傷時皆可升高，但CRP與其他蛋白升高(2～3倍)不同，可升高100～1000倍，盡管為非特異性的，但對于細菌感染、各種炎癥過程及組織壞死與損傷及其恢復(fù)期的篩檢、監(jiān)測、病情評估與療效判斷，都有重要的價值。

以往CRP的檢測主要基于生化分析儀或特定蛋白儀上針對血清進行檢測，隨著研究的進展和發(fā)現(xiàn)CRP在細菌和病毒感染表現(xiàn)差異的重要臨床價值，以靜脈全血或者末梢血作為樣本進行CRP的檢測就顯得異常迫切和重要。

然而，目前還沒有能夠同時滿足對血清、血漿和全血(靜脈和末梢)的C-反應(yīng)蛋白檢測且不影響后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的速度的溶血劑。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種能夠同時滿足對血清、血漿和全血(靜脈和末梢)的C-反應(yīng)蛋白檢測且不影響后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的速度的溶血劑。

需要說明的是，本發(fā)明是基于發(fā)明人的下列發(fā)現(xiàn)而完成的：

發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，CRP(體C-反應(yīng)蛋白)是人體在感染發(fā)生后的極性相反應(yīng)蛋白，早期臨床上幾乎均是針對人體血清樣本進行測試，最近幾年由于研發(fā)發(fā)現(xiàn)CRP對病毒感染和對細菌感染的升高水平差異性表現(xiàn)而發(fā)展為與血常規(guī)測試配合針對全血樣本進行測試。但由于血清是采用自然凝固或加入促凝劑或分離膠并經(jīng)離心除去纖維蛋白及血液有形成分的均一性樣本，與含有紅細胞、白細胞、血小板等有形成分的未經(jīng)任何處理的全血有很大的差異。全血樣本和血清樣本的測定過程本質(zhì)都是人體C-反應(yīng)蛋白與對應(yīng)的CRP抗體發(fā)生免疫結(jié)合從而產(chǎn)生沉淀的反應(yīng)，兩者的差異在于是否存在溶血的過程。而全血C-反應(yīng)蛋白的檢測，由于全血成分復(fù)雜，需溶血過程，影響因素較多。

血清樣本均一、干擾成分少，無需溶血過程，目前針對血清的CRP檢測試劑盒中，試劑1成分簡單，主要是一些緩沖鹽溶液，起到穩(wěn)定反應(yīng)體系的作用即可，加入試劑2乳膠抗體即可產(chǎn)生反應(yīng)。通常稱為一步法完成測試。

對于全血樣本，溶血本身是一個很簡單的過程，關(guān)鍵在于如需要快速溶血，比如10s以內(nèi)，則需要加入足夠濃度的能快速破壞血液細胞并溶解細胞壁上的脂類等成分的表面活性劑，表面活性劑強度不足(親水親油平衡值低)則溶血慢或者不充分，表面活性劑過強，則會通過破壞后續(xù)加入的CRP乳膠抗體(其本質(zhì)是膠體溶液)的水化層從而破壞反應(yīng)體系的穩(wěn)定性(表現(xiàn)為加入試劑2乳膠抗體后吸光值下降從而反應(yīng)信號為負，或者為加入試劑2乳膠抗體后測試水空白時吸光值異常升高，產(chǎn)生強烈的本地反應(yīng)導(dǎo)致正常樣本反應(yīng)信號低于水空白)，影響反應(yīng)的特異性和反應(yīng)速度。由于全血樣本溶血劑對后續(xù)反應(yīng)的干擾問題，當前市面上的全血CRP檢測試劑幾乎均為兩步法，即第一步先加稀釋液(溶血劑)對全血樣本進行溶血，然后時第二步再取溶血后的樣本進行反應(yīng)，這樣由于稀釋過程和反應(yīng)過程分開，加入的稀釋液樣本體積遠小于一步法中需加入的試劑1體積，所以對后續(xù)免疫比濁反應(yīng)影響?。蝗鐪y試血清樣本則不需要第一步樣本稀釋(溶血)過程。部分廠家直接注冊兩種試劑盒，一種只適用于血清樣本，一種只適用于全血樣本。因而，目前市場在用尤其是國產(chǎn)的C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測試劑盒，基本是血清/血漿檢測和全血檢測試劑分開，即采用不同試劑，這樣無論是對于企業(yè)還是臨床檢測實驗室，既不方便也增加了成本負擔(dān)。

但是，同一種試劑要同時滿足對血清、血漿和全血(靜脈和末梢)的檢測且不影響后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的速度，具有一定難度。因而，發(fā)明人繼續(xù)進行了一系列的實驗探索和研究，以期尋找出一種能夠?qū)θM行快速有效溶解，并能夠同時滿足對血清、血漿和全血(靜脈和末梢)的C-反應(yīng)蛋白檢測且不影響后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的速度的溶血劑。從而，最終得到了本發(fā)明的溶血劑。本發(fā)明的溶血劑，含有多種表面活性劑及緩沖成分，可以在很短的時間內(nèi)完成溶血(對靜脈全血和末梢血)過程，并直接加入試劑2(乳膠CRP抗體)進行反應(yīng)，無需樣本稀釋(溶血)過程，免疫比濁反應(yīng)進程不受影響；溶血劑對血清、血漿無影響，即血清和血漿可以同全血一樣與乳膠CRP抗體順利產(chǎn)生免疫比濁反應(yīng)，從而能夠?qū)崿F(xiàn)針對血清、血漿、全血均一步法完成測試過程。

因而，在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了一種溶血劑。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該溶血劑包含：表面活性劑；聚乙二醇；乙二胺四乙酸鈉鹽；以及水。如前所述，目前市售的C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測試劑盒分為適用于血清和全血兩種，通用性較差，而本發(fā)明的溶血劑能夠同時滿足對血清、血漿和全血(靜脈和末梢)的C-反應(yīng)蛋白檢測且不影響后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的速度。從而，將本發(fā)明的溶血劑用于C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測，能夠有效解決同一種試劑適用于與多種臨床樣本的兼容性問題，可分別臨床使用需求，并減少成本。并且，根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明的溶血劑能夠?qū)θM行快速有效溶解。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述溶血劑的pH值為6.0～8.0。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述表面活性劑為選自十二烷基硫酸鈉、十四烷基三甲基氯化銨和甜菜堿的至少一種。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，當所述表面活性劑為選自十二烷基硫酸鈉和十四烷基三甲基氯化銨的至少一種時，在所述溶血劑中，所述表面活性劑的質(zhì)量-體積濃度為0.1‰～1‰；當所述表面活性劑為甜菜堿時，在所述溶血劑中，所述表面活性劑的質(zhì)量-體積濃度為0.01％～0.1％。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述聚乙二醇的分子量范圍為8000-20000。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，在所述溶血劑中，所述聚乙二醇的質(zhì)量-體積濃度為0.4％～1％。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，在所述溶血劑中，所述乙二胺四乙酸鈉鹽的質(zhì)量-體積濃度為1‰～5‰。

其中，在本文中所述的“質(zhì)量-體積濃度”＝溶質(zhì)的質(zhì)量數(shù)(克)/溶液的體積(升)，即1‰＝1克/升。

發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的溶血劑中，表面活性劑，特別是十二烷基硫酸鈉、十四烷基三甲基氯化銨或者甜菜堿；聚乙二醇，特別是分子量8000-20000的聚乙二醇；這幾個組分的配伍，可以高效快速溶血并保證后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的順利快速進行。含有質(zhì)量-體積濃度為0.1‰～1‰的十二烷基硫酸鈉或者十四烷基三甲基氯化銨、質(zhì)量-體積濃度為0.4％～1％的聚乙二醇8000-2000、質(zhì)量-體積濃度為1‰～5‰的二胺四乙酸鈉、且pH為6.0-8.0的C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測用溶血劑性能完全滿足商品化的要求，尤其是能夠同時滿足對血清、血漿和全血(靜脈和末梢)的C-反應(yīng)蛋白檢測且不影響后續(xù)免疫比濁反應(yīng)的速度。

在本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明提供了前面所述的溶血劑在檢測血液樣本的C-反應(yīng)蛋白中的用途。根據(jù)本發(fā)明的實施例，將本發(fā)明溶血劑與全血樣本混合孵育，然后加入C-反應(yīng)蛋白(CRP)抗體膠乳試劑混合后孵育，然后按照常規(guī)方法，檢測加入膠乳試劑前后混合物在700nm波長下的吸光值的差值，基于該差值與CRP的濃度成正比，通過與對應(yīng)的標準曲線比較即可得到樣本的C-反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述血液樣本為靜脈血或末梢血。

根據(jù)本發(fā)明的一些具體示例，所述血液樣本為選自血清、血漿和全血的至少一種，優(yōu)選全血。

在本發(fā)明的又一方面，本發(fā)明還提供了一種檢測血液樣本的C-反應(yīng)蛋白的方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該方法為利用前面所述的溶血劑檢測所述血液樣本的C-反應(yīng)蛋白。如前所述，該方法通過將本發(fā)明溶血劑與血液樣本混合孵育，然后加入C-反應(yīng)蛋白(CRP)抗體膠乳試劑混合后孵育，然后按照常規(guī)方法，檢測加入膠乳試劑前后混合物在700nm波長下的吸光值的差值，進而，基于該差值與CRP的濃度成正比，通過與對應(yīng)的標準曲線比較即可得到樣本的C-反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述方法包括以下步驟：將所述溶血劑與所述血液樣本混合并進行第一孵育，以便獲得第一孵育混合物；獲得所述第一孵育混合物700nm波長下的吸光值A(chǔ)1；將所述第一孵育混合物與C-反應(yīng)蛋白抗體膠乳試劑混合并進行第二孵育，以便獲得第二孵育混合物；獲得所述第二孵育混合物700nm波長下的吸光值A(chǔ)2；以及基于A1和A2確定所述血液樣本中C-反應(yīng)蛋白的濃度。由此，能夠快速有效地得到樣本的C-反應(yīng)蛋白檢測結(jié)果，且成本低，而結(jié)果準確可靠，重復(fù)性好。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述血液樣本為靜脈血或末梢血。

根據(jù)本發(fā)明的一些實施例，所述血液樣本為選自血清、血漿和全血的至少一種，優(yōu)選全血。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，按照150:1～25:1的體積比，將所述溶血劑與所述血液樣本混合。由此，溶血效率高、效果好。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，于37℃下進行所述第一孵育1分鐘。由此，溶血效率高、效果好。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，所述C-反應(yīng)蛋白抗體膠乳試劑的體積與所述溶血劑相同。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，于37℃下進行所述第二孵育2分鐘。

根據(jù)本發(fā)明的實施例，基于A1和A2確定所述血液樣本中C-反應(yīng)蛋白的濃度，包括：

基于A1和A2，確定ΔA，其中ΔA＝A2-A1；以及

基于預(yù)定標準曲線和ΔA，確定所述血液樣本中C-反應(yīng)蛋白的濃度，其中所述預(yù)定標準曲線為所述C-反應(yīng)蛋白抗體膠乳試劑對C-反應(yīng)蛋白校準品的正比曲線。

其中，ΔA即為所述第一孵育混合物700nm波長下的吸光值A(chǔ)1和所述第二混合物700nm波長下的吸光值A(chǔ)2的差值，即ΔA＝A2-A1。所述預(yù)定標準曲線是利用本發(fā)明的溶血劑配合測定時采用的CRP膠乳抗體試劑對C-反應(yīng)蛋白(CRP)校準品而建立的。ΔA與CRP的濃度成正比。

此外，還需要說明的是，根據(jù)本發(fā)明的實施例，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有下列優(yōu)點的至少之一：

1)對靜脈全血和末梢血的溶血效率高，10秒內(nèi)可完全溶解；

2)不影后續(xù)免疫比濁反應(yīng)進程，反應(yīng)信號高，靈敏度好，檢測CRP可低至0.1mg/L；

3)同時適用于血清、各種抗凝血漿，一種試劑可應(yīng)用于多種設(shè)備和臨床科室；

4)測試方法簡單快捷，綜合比較，使用本發(fā)明方法的溶血劑進行C-反應(yīng)蛋白檢測的較市面普遍使用的CRP檢測試劑具有明顯優(yōu)勢。

本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。

附圖說明

本發(fā)明的上述和/或附加的方面和優(yōu)點從結(jié)合下面附圖對實施例的描述中將變得明顯和容易理解，其中：

圖1為根據(jù)本發(fā)明實施例的溶血劑對靜脈全血的溶血示意圖；

圖2為根據(jù)本發(fā)明實施例的溶血劑對末梢血的溶血示意圖；

圖3為根據(jù)本發(fā)明實施例的檢測血液樣本的C-反應(yīng)蛋白的方法的流程示意圖；

圖4為根據(jù)本發(fā)明的實施例，使用本發(fā)明的溶血劑配合CRP膠乳抗體試劑對C-反應(yīng)蛋白(CRP)校準品建立的校準曲線示意圖；以及

圖5為根據(jù)本發(fā)明的實施例，本發(fā)明全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)測定方法與已上市試劑(對照)的方法學(xué)對比一致性示意圖。

具體實施方式

下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的方案進行解釋。本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，下面的實施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實施例1

按照以下流程配制溶血劑：

1、表面活性劑母液配制：稱取十二烷基硫酸鈉(SDS)0.34g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解，用1mol/L鹽酸調(diào)pH為7.25。

2、聚乙二醇母液配制：稱取聚乙二醇8000(PEG8000)11.3g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解。

3、乙二胺四乙酸(EDTA)鈉鹽緩沖液配制：稱取乙二胺四乙酸二鈉聚0.34g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解，用1mol/L鹽酸調(diào)pH為7.25。

4、將表面活性劑母液、聚乙二醇母液、乙二胺四乙酸鈉緩沖液按1:3:30進行充分混合，得到本發(fā)明的全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測用溶血劑。

實施例2

按照以下流程配制溶血劑：

1、表面活性劑母液配制：稱取十四烷基三甲基氯化銨(TTAC)1.0g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解，用1mol/L鹽酸調(diào)pH為6.80。

2、聚乙二醇母液配制：稱取聚乙二醇20000(PEG20000)4.5g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解。

3、乙二胺四乙酸鈉(EDTA)鹽緩沖液配制：稱取乙二胺四乙酸二鈉聚0.56g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解，用1mol/L鹽酸調(diào)pH為6.80。

4、將表面活性劑母液、聚乙二醇母液、乙二胺四乙酸鈉緩沖液按1:3:30進行充分混合，得到本發(fā)明的全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測用溶血劑。

實施例3

按照以下流程配制溶血劑：

1、表面活性劑母液配制：稱取甜菜堿3.4g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解，用1mol/L鹽酸調(diào)pH為6.0。

2、聚乙二醇母液配制：稱取聚乙二醇10000(PEG10000)10.0g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解。

3、乙二胺四乙酸鈉(EDTA)鹽緩沖液配制：稱取乙二胺四乙酸二鈉聚0.11g，加入100ml純化水，攪拌使其充分溶解，用1mol/L鹽酸調(diào)pH為6.0。

4、將表面活性劑母液、聚乙二醇母液、乙二胺四乙酸鈉緩沖液按1:3:30進行充分混合，得到本發(fā)明的全血C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測用溶血劑。

實施例4溶血劑的溶血效果檢測

隨機抽取7份新鮮血常規(guī)檢測用靜脈全血和3份新鮮末梢全血作為樣本，分別利用實施例1-3配制獲得的本發(fā)明的溶血劑，按溶血劑與血液樣本體積比50:1的比例混合，上機檢測700nm波長下的吸光值變化(檢測采用錦瑞PA50特定蛋白儀進行)，靜脈全血和末梢全血的反應(yīng)信號變化過程示意如圖1和圖2。

如圖1-2所示，針對靜脈全血和末梢全血，溶血劑均能在約10秒時間內(nèi)(圖中一個讀點為12秒)有效完全溶解并達到平衡，后續(xù)免疫比濁反應(yīng)未受到影響。

實施例5C-反應(yīng)蛋白(CRP)的測定

利用實施例1-3配制獲得的本發(fā)明的溶血劑，參照圖3所示的方法，分別測定待測血液樣本中的C-反應(yīng)蛋白，具體步驟如下：

1、校準曲線建立

利用本發(fā)明的溶血劑配合某品牌CRP膠乳抗體試劑對該公司可溯源至國際參考物CRM470的CRP校準品進行定標(溶血劑：樣本：膠乳抗體試劑的體積比＝50:1:50)，所得標準曲線如圖4。該標準曲線即為所述C-反應(yīng)蛋白抗體膠乳試劑對C-反應(yīng)蛋白校準品的正比曲線。

圖4中校準曲線光滑，各點反應(yīng)信號區(qū)分明顯，校準曲線建立成功。

2、血C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測用溶血劑準確性檢測：

選取不同濃度分布的20份新鮮血清和20份新鮮全血與已經(jīng)上市的分別檢測血清和全血的試劑盒進行方法學(xué)對比測試。

其中，血清CRP測試試劑盒(對比試劑1)：R1為緩沖液，R2為CRP乳膠抗體，廠家為日本Denka Seiken，R1貨號600967；全血CRP測試試劑盒(對比試劑2)：廠家為深圳邁瑞，包括溶血劑和CRP乳膠試劑兩個獨立的試劑盒，溶血劑貨號為105-004856-00，CRP乳膠試劑盒貨號為105-0048860-00。

對照(對比試劑1和對比試劑2)采用其試劑盒對應(yīng)的流程進行操作。

針對實施例1-3配制獲得的本發(fā)明的溶血劑，如前所述，測定流程參照圖2所示，具體如下：

將溶血劑與血液樣本混合，并于37℃下進行第一孵育1分鐘，以便獲得第一孵育混合物；

獲得所述第一孵育混合物700nm波長下的吸光值A(chǔ)1；

將所述第一孵育混合物與C-反應(yīng)蛋白抗體膠乳試劑混合，并于37℃下進行第二孵育2分鐘，以便獲得第二孵育混合物；

獲得所述第二孵育混合物700nm波長下的吸光值A(chǔ)2；

基于A1和A2，確定ΔA，其中ΔA＝A2-A1；以及

基于前述確定的標準曲線和ΔA，確定所述血液樣本中C-反應(yīng)蛋白的濃度(ΔA與CRP的濃度成正比)。

其中，溶血劑：樣本：膠乳抗體試劑的體積比＝50:1:50。

以實施例1的溶血劑的結(jié)果為例，40份樣本的結(jié)果如表1，結(jié)果一致性示意圖如圖5所示。

表1C-反應(yīng)蛋白(CRP)檢測結(jié)果

由表1和圖5的結(jié)果可知，本發(fā)明中實例1和實例2所述的溶血劑對血清和全血樣本的反應(yīng)及作用與對比試劑表現(xiàn)一致性非常好。

實施例6

參照實施例1的方法流程，按下表2的成分組成分別配制系列溶血劑。

表2溶血劑成分組合及上機比例

即得本發(fā)明的溶血劑：試劑1-4。

然后，參照實施例5的CRP測定方法，分別對試劑1-4(對照如表2所示)進行定標和測試10組同一病人來源的全血樣本，測試結(jié)果如表3。

表3

由表3可知，本發(fā)明的溶血劑的各組分組合，測試全血C-反應(yīng)蛋白結(jié)果差異不大，除0.5以下的低值外，其他差異均在10％以內(nèi)，說明本發(fā)明的各組合的溶血劑均可達到相同的溶血效果。

在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不一定指的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任何的一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。

盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以理解：在不脫離本發(fā)明的原理和宗旨的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由權(quán)利要求及其等同物限定。