本發(fā)明涉及一種同時(shí)檢測(cè)塑料制品中顏料橙64、UV-326和DEHP的方法，屬于食品藥品包材分析檢測(cè)
技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
：顏料橙64為苯并咪唑酮類有機(jī)顏料，分子式為C12H10N6O4，分子結(jié)構(gòu)圖如下：顏料橙64具有優(yōu)異的耐曬性、耐熱性、耐溶劑性、耐酸性、耐堿性和加工應(yīng)用性能，因此該化合物常常被作為避光劑來(lái)使用：涂層在容器表層來(lái)盛放一些遇光易分解的物質(zhì)，以保證物品的穩(wěn)定性。輸液器是臨床醫(yī)療上必不可少的醫(yī)療器械，在臨床輸液過(guò)程中，遇光易分解的藥物需要避光輸液，這時(shí)就會(huì)用到一次性避光輸液器，避光輸液器原料中加入的避光劑可能對(duì)人體產(chǎn)生潛在的危險(xiǎn)，在一定程度上限制了避光輸液器的臨床應(yīng)用，所以在《一次性使用避光輸液器注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》中明確提出了必須對(duì)避光劑進(jìn)行相應(yīng)的檢測(cè)。UV-326屬于苯并三唑類紫外光穩(wěn)定劑，化學(xué)名稱為2-(2'-羥基-3'-叔丁基-5'-甲基苯基)-5-氯代苯并三唑，分子式為C17H18N3OCl，其分子結(jié)構(gòu)圖如下：UV-326能有效地吸收波長(zhǎng)為270～380nm的紫外線，且不發(fā)生光化學(xué)反應(yīng)，并對(duì)水和熱的穩(wěn)定性好，揮發(fā)性小。因此，該化合物常被作為塑料添加劑，以減少塑料制品特別是聚烯烴發(fā)生光氧老化，從而延長(zhǎng)塑料袋的使用壽命。由于食品包裝袋直接與食品接觸，所以包裝袋中殘留的有害物質(zhì)可能會(huì)遷移到食品中，造成食品的二次污染。目前，很多國(guó)家已將光穩(wěn)定劑的殘留量和遷移量的限制納入法規(guī)。DEHP屬于鄰苯二甲酸酯的一種，化學(xué)名稱為鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯，分子式為C6H4(CO2C8H17)2[C24H38O4]，其分子結(jié)構(gòu)圖如下：DEHP是少數(shù)幾種允許用于食品級(jí)塑料包裝材料的增塑劑中的一種，應(yīng)用非常廣泛，其在塑料中的含量可達(dá)60％。增塑劑是小分子物質(zhì)，與內(nèi)裝食品直接相接觸時(shí)，能夠遷移到食品中，造成內(nèi)裝食品的污染，塑化劑的含量越高，遷移的可能性越大。DEHP對(duì)人體具有致畸、致癌等作用，因而，對(duì)各種材質(zhì)食品塑料袋中的DEHP進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)定是保障塑料材料安全乃至食品消費(fèi)安全的重要步驟。綜上所述，為了保證安全使用，需要對(duì)塑料制品中的避光劑顏料橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP進(jìn)行檢測(cè)，以確保其含量控制在安全范圍以內(nèi)，而目前對(duì)于避光劑顏料橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP的檢測(cè)都是單獨(dú)分別檢測(cè)，儀器分析方法有GC法、HPLC法和GC-MS法，且由于現(xiàn)有的檢測(cè)技術(shù)所要求的實(shí)驗(yàn)樣品預(yù)處理比較麻煩，存在費(fèi)時(shí)、費(fèi)力、檢測(cè)成本高的問(wèn)題，因而不能將其作為一種快速便捷的檢測(cè)方法。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種同時(shí)檢測(cè)塑料制品中顏料橙64、UV-326和DEHP的方法，解決了目前的檢測(cè)方法存在的需要單獨(dú)分別檢測(cè)、檢測(cè)效率低的問(wèn)題，具有操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性好、檢測(cè)效率高、檢測(cè)成本低的特點(diǎn)。本發(fā)明所述的同時(shí)檢測(cè)塑料制品中顏料橙64、UV-326和DEHP的方法是采用60％的甲醇水溶液作為溶劑，將顏料橙64、UV-326和DEHP分別配制成濃度梯度為0.05μg/mL～10μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后通過(guò)含有DAD檢測(cè)器的高效液相色譜儀對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。其中：所述的高效液相色譜的色譜條件如下：(1)色譜柱：反相鍵合硅膠色譜柱(2)流動(dòng)相A：甲醇；流動(dòng)相B：乙酸銨水溶液(3)流速：1.0mL/min(4)洗脫方式：梯度洗脫(5)檢測(cè)波長(zhǎng)：220～440nm(6)柱溫：30℃(7)進(jìn)樣量：20μL。其中：所述的高效液相色譜儀優(yōu)選由四元泵、恒溫箱、DAD檢測(cè)器以及化學(xué)工作站所組成的Agilent1260型高效液相色譜儀。所述的梯度洗脫程序如下：流動(dòng)相A：0～3min，50％；3～5min，由50％升至80％；5～13min，由80％升至95％；13～28min，保持95％；28～30min，由95％降至50％；流動(dòng)相B：0～3min，50％；3～5min，由50％降至20％；5～13min，由20％降至5％；13～28min，保持5％；28～30min，由5％升至50％；柱后平衡10min。所述的反相鍵合硅膠色譜柱的型號(hào)為島津ODS-3(150×4.6mm，5μm)色譜柱所述的塑料制品為避光過(guò)濾輸液器、注射器、食品包裝材料、EP管中的任意一種。在得到本發(fā)明的檢測(cè)方法之前，發(fā)明人分別摸索了避光劑橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP的高效液相色譜條件：(1)避光劑橙64高效液相色譜條件的建立：首先進(jìn)行溶劑的篩選，常規(guī)溶劑如甲醇、乙腈、乙醇等均不能溶解避光劑橙64，最終選擇二甲基亞砜作溶劑，選擇50％甲醇/水溶液作為稀釋劑，然后進(jìn)行了檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇，通過(guò)在250-600nm范圍內(nèi)掃描紫外-可見(jiàn)光譜圖，得到避光劑顏料橙64在444nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；色譜條件的選擇：色譜柱：島津ODS-3(250×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：含0.1％TFA的甲醇-水(70:30)；檢測(cè)波長(zhǎng)：444nm；流速：0.8mL·min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20μL，得到避光劑顏料橙64的出峰時(shí)間為4.34min。(2)光穩(wěn)定劑UV-326高效液相色譜條件的建立：首先選擇甲醇作為溶劑；然后進(jìn)行了檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇，通過(guò)在250-600nm范圍內(nèi)掃描紫外-可見(jiàn)光譜圖，得到光穩(wěn)定劑UV-326在349nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；色譜條件的選擇：色譜柱：Agilent-C18(150×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：95％甲醇；檢測(cè)波長(zhǎng)：349nm；流速：1.0mL·min-1；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL，得到光穩(wěn)定劑UV-326的出峰時(shí)間為8.98min。(3)塑化劑DEHP高效液相色譜條件的建立：首先選擇甲醇作為溶劑，然后進(jìn)行了檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇，通過(guò)在250-600nm范圍內(nèi)掃描紫外-可見(jiàn)光譜圖，得到塑化劑DEHP在226nm的波長(zhǎng)處有最大吸收；色譜條件的選擇：色譜柱：Agilent-C18(150×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：95％甲醇；檢測(cè)波長(zhǎng)：349nm；流速：0.9mL·min-1；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL，得到塑化劑DEHP的出峰時(shí)間為6.71min。通過(guò)上述分別對(duì)避光劑橙64、光穩(wěn)定劑UV-326和塑化劑DEHP的高效液相色譜條件的摸索，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了同時(shí)檢測(cè)這三種化合物的可行性，進(jìn)一步建立了同時(shí)檢測(cè)該三種化合物的高效液相色譜方法。本發(fā)明的有益效果如下：本發(fā)明通過(guò)采用含有DAD檢測(cè)器的液相色譜儀建立多波長(zhǎng)法來(lái)同時(shí)測(cè)定避光劑顏料橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP三種化合物的含量，操作方法簡(jiǎn)單，檢測(cè)靈敏度高，且結(jié)果可靠，能夠?qū)崿F(xiàn)這三種化合物的快速檢測(cè)；通過(guò)本發(fā)明方法的樣品處理時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于國(guó)標(biāo)方法處理時(shí)間，改變了實(shí)驗(yàn)中樣品預(yù)處理麻煩、費(fèi)時(shí)、費(fèi)力且檢測(cè)成本高的現(xiàn)狀。附圖說(shuō)明圖1是實(shí)施例2中一次性避光輸液器的滴注安裝圖。具體實(shí)施方式以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述。實(shí)施例中涉及到的儀器與設(shè)備如下：1260型高效液相色譜儀(美國(guó)Agilent公司，配DAD檢測(cè)器)；超聲波清洗儀(美國(guó)Thermo公司)；BT125D電子分析天平(德國(guó)Sartorius公司)；Evolution300紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)(美國(guó)Thermo公司)實(shí)施例中涉及到的試劑如下：二甲基亞砜(分析純)、乙酸銨(分析純)、甲醇(色譜純)、超純水(由Thermo超純水儀制備)實(shí)施例1同時(shí)檢測(cè)塑料制品中顏料橙64、UV-326和DEHP的方法如下：(1)配置儲(chǔ)備液顏料橙64儲(chǔ)備液：精密稱取10.84mg避光劑顏料橙64于100mL容量瓶中，加入適量二甲基亞砜，超聲溶解，加二甲基亞砜至刻度，搖勻，置于4℃冰箱中，作為儲(chǔ)備液備用；UV326儲(chǔ)備液：精密稱取10.08mgUV-326于100mL容量瓶中，加入適量甲醇，超聲溶解，加甲醇至刻度，搖勻，置于4℃冰箱中，作為儲(chǔ)備液備用；DEHP儲(chǔ)備液：精密稱取210.5mgDEHP于100mL容量瓶中，加入適量甲醇，超聲溶解，加甲醇至刻度，搖勻，置于4℃冰箱中，作為儲(chǔ)備液備用；(2)配置標(biāo)準(zhǔn)工作液取三種樣品儲(chǔ)備液各1mL于100mL容量瓶中，加入60％甲醇至刻度搖勻，制成顏料橙64、UV326和DEHP的濃度分別為1.084μg/mL、1.008μg/mL和2.105μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液；(3)色譜檢測(cè)將標(biāo)準(zhǔn)工作液以20μL進(jìn)樣量注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，回歸方程見(jiàn)表1。色譜條件如下：(1)色譜柱：反相鍵合硅膠色譜柱(2)流動(dòng)相A：甲醇；流動(dòng)相B：乙酸銨水溶液(3)流速：1.0mL/min(4)洗脫方式：梯度洗脫(5)檢測(cè)波長(zhǎng)：220～440nm(6)柱溫：30℃(7)進(jìn)樣量：20μL。流動(dòng)相體系中甲醇與乙酸銨的體積百分比隨時(shí)間變化如下：0～3min，甲醇為50％，乙酸銨水溶液為50％；3～5min，甲醇由50％升至80％，乙酸銨水溶液由50％降至20％；5～13min，甲醇由80％升至95％，乙酸銨水溶液由20％降至5％；13～28min，甲醇保持在95％；28～30min，甲醇由95％降至50％；柱后平衡10min。定性定量分析：?jiǎn)蝹€(gè)峰的紫外吸收光譜圖分別和避光劑橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP的紫外吸收?qǐng)D一致，峰面積也與同一濃度下單個(gè)進(jìn)樣的峰面積在誤差允許范圍內(nèi)，說(shuō)明三者混合進(jìn)樣彼此不影響，該發(fā)明方法可以同時(shí)測(cè)定塑料制品中的避光劑橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP。表1線性回歸方程回歸方程相關(guān)系數(shù)線性范圍(μg/mL)避光劑顏料橙64y＝119.395x+1.6070.99990.0542～10.84光穩(wěn)定劑UV326y＝58.46896x+2.258320.99990.1008～20.16塑化劑DEHPy＝28.27799x-7.136590.99990.421～05.25實(shí)施例2根據(jù)《一次性使用避光輸液器注冊(cè)技術(shù)審查指導(dǎo)原則》的要求，模擬臨床滴注方式并加大劑量延長(zhǎng)過(guò)濾時(shí)間來(lái)測(cè)定一次性避光輸液器中避光劑橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP的含量。樣品處理：選擇65％乙醇溶液于40℃下滴注24小時(shí)，檢測(cè)光劑橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP遷移溶出的情況，滴注方式見(jiàn)圖1。樣品測(cè)定：選用實(shí)施例1中的色譜條件，測(cè)得一次性使用避光一次性避光輸液器中避光劑顏料橙64、光穩(wěn)定劑UV326和塑化劑DEHP遷移溶出情況如表2所示。表2一次性避光輸液器中顏料橙64、UV326和DEHP的遷移溶出量化合物峰面積溶出量(mg/套)顏料橙640未檢出UV3260未檢出DEHP272.75.04當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3