本發(fā)明屬于電化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種單液滴情況下電化學(xué)-熒光聯(lián)用檢測方法。

背景技術(shù)：

電化學(xué)分析具有方法簡便、分析速度快、設(shè)備費用低廉、便于實現(xiàn)自動化而且還有富集和分離能力等優(yōu)點；而熒光分析具有靈敏度高、線性關(guān)系好、試樣需要量少，可測定多種形態(tài)樣品等優(yōu)點。但我們不可否認的是，電化學(xué)分析靈敏度低，熒光分析選擇性差、比色池容易受污染影響熒光信號檢測等。隨著科學(xué)技術(shù)的進步，電化學(xué)、熒光光譜學(xué)在分析化學(xué)領(lǐng)域得以迅速發(fā)展，并形成了獨具特色的分析方法。在生命科學(xué)、能源科學(xué)、信息科學(xué)、環(huán)境科學(xué)和廣泛的生產(chǎn)實踐活動中發(fā)揮著重要的作用。

今天，分析化學(xué)工作者仍在不斷地引進和利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)改善已有的方法并建立新的分析方法，同時積極參與聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展和利用。

電化學(xué)熒光法就是以電化學(xué)分析和熒光分析法為基礎(chǔ)建立地新的分析方法，電化學(xué)和熒光光譜學(xué)兩者各具特色也各不足之處。將電化學(xué)和光學(xué)結(jié)合起來常常可以達到取長補短的效果，擴大了檢測范圍，提高檢驗精度。相信將來分析方法相結(jié)合運用將是分析化學(xué)的發(fā)展趨勢。

在傳統(tǒng)光度分析中所必需的人為光學(xué)界面的比色池，其容易受到樣品與試劑污染以及因光學(xué)界面對光的吸收、散射等所引起的對測量信號的影響。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種單液滴情況下電化學(xué)-熒光聯(lián)用檢測方法。

具體步驟為：

(1)設(shè)置一種檢測裝置，該裝置包括電化學(xué)三電極體系和熒光檢測體系，其中電化學(xué)三電極體系由旋轉(zhuǎn)玻碳電極和銀鉑復(fù)合電極組成，旋轉(zhuǎn)玻碳電極為工作電極，銀鉑復(fù)合電極是將銀絲和鉑絲嵌入一根聚四氟乙烯棒內(nèi)組合成復(fù)合電極，銀絲為參比電極，鉑絲為對電極，電化學(xué)三電極體系用于對單液滴施加電壓，使單液滴中的檢測物質(zhì)發(fā)生電致反應(yīng)產(chǎn)生熒光物質(zhì)或電致反應(yīng)的產(chǎn)物與其他物質(zhì)反應(yīng)產(chǎn)生強熒光物質(zhì)；熒光檢測體系由光學(xué)檢測暗室和熒光檢測系統(tǒng)組成，光學(xué)檢測暗室由光學(xué)密封圈、樣品反應(yīng)室和底座組成，為熒光檢測營造黑暗環(huán)境，避免其他雜光干擾；熒光檢測系統(tǒng)由激發(fā)光源、光纖光譜儀、SMA905-SMA905光纖、數(shù)據(jù)線和計算機組成，對單液滴中熒光物質(zhì)進行激發(fā)、檢測，并處理、記錄、顯示檢測結(jié)果。

所述單液滴是利用微量移液槍吸取待測液滴到旋轉(zhuǎn)玻碳電極和銀鉑復(fù)合電極之間形成單液滴，將單液滴作為無光窗光池，替換傳統(tǒng)的比色池。

所述樣品反應(yīng)室和底座均是無底光學(xué)暗箱，其中樣品反應(yīng)室為有蓋設(shè)計的暗箱，蓋子頂部中心有一個直徑Φ為9 mm的圓孔，四個側(cè)面各有一個出/入口，都能夠配備SMA905光纖座；底座作為樣品反應(yīng)室的底座和銀鉑復(fù)合電極的支座。

(2)在樣品反應(yīng)室中，將樣品單液滴滴加到旋轉(zhuǎn)玻碳電極和銀鉑復(fù)合電極之間，通過電化學(xué)三電極體系施加電壓，單液滴中的檢測物質(zhì)發(fā)生電致反應(yīng)產(chǎn)生熒光物質(zhì)或電致反應(yīng)的產(chǎn)物與其他物質(zhì)反應(yīng)產(chǎn)生強熒光物質(zhì)，然后在激發(fā)光源的照射激發(fā)下產(chǎn)生熒光，熒光信號再由SMA905-SMA905光纖傳送到光纖光譜儀中，產(chǎn)生的光譜信號通過數(shù)據(jù)線傳輸?shù)接嬎銠C，再由計算機處理、顯示、儲存，進而得到檢測物質(zhì)的含量。

本發(fā)明方法所用的裝置采用單液滴代替?zhèn)鹘y(tǒng)光學(xué)必需的比色池，消除了樣品與試劑對比色池的污染以及因光學(xué)界面對光的吸收、散射等所引起的對測量信號的影響，大大提高檢測的靈敏度和準確性；同時，本發(fā)明將電化學(xué)分析法與熒光分析法相結(jié)合，利用電化學(xué)具有富集和分離能力，而且還具有較強的氧化還原能力等優(yōu)點以及熒光分析具有靈敏度高、線性關(guān)系好等優(yōu)點，通過兩種方法的聯(lián)用，到達了優(yōu)勢互補，避免了各自的不足。

附圖說明

圖1 是本發(fā)明實施例中所用檢測裝置的示意圖。

圖中標記：1-旋轉(zhuǎn)玻碳電極；2-銀鉑復(fù)合電極；3-光學(xué)密封圈；4-樣品反應(yīng)室；5-底座；6-激發(fā)光源；7-光纖光譜儀；8-SMA905-SMA905光纖；9-數(shù)據(jù)線；10-計算機；WE-工作電極；RE-參比電極；CE-對電極。

圖2是本發(fā)明實施例中所用檢測裝置的樣品反應(yīng)室的示意圖。

圖3 是本發(fā)明實施例中所用檢測裝置的底座的示意圖。

具體實施方式

以下實施例以維生素C（Vc）為待測物，進行檢測。

實施例：

(1)設(shè)置一種檢測裝置，該裝置包括電化學(xué)三電極體系和熒光檢測體系，其中電化學(xué)三電極體系由旋轉(zhuǎn)玻碳電極1和銀鉑復(fù)合電極2組成，旋轉(zhuǎn)玻碳電極1為工作電極WE，銀鉑復(fù)合電極2是將銀絲和鉑絲嵌入一根聚四氟乙烯棒內(nèi)組合成復(fù)合電極，銀絲為參比電極RE，鉑絲為對電極CE，電化學(xué)三電極體系用于對單液滴施加電壓，使單液滴中的檢測物質(zhì)發(fā)生電致反應(yīng)，電致反應(yīng)的產(chǎn)物與其他物質(zhì)反應(yīng)產(chǎn)生強熒光物質(zhì)；熒光檢測體系由光學(xué)檢測暗室和熒光檢測系統(tǒng)組成，光學(xué)檢測暗室由光學(xué)密封圈3、樣品反應(yīng)室4和底座5組成，為熒光檢測營造黑暗環(huán)境，避免其他雜光干擾；熒光檢測系統(tǒng)由激發(fā)光源6、光纖光譜儀7、SMA905-SMA905光纖8、數(shù)據(jù)線9和計算機10組成，對單液滴中熒光物質(zhì)進行激發(fā)、檢測，并處理、記錄、顯示檢測結(jié)果。

所述單液滴是利用微量移液槍吸取待測液滴到旋轉(zhuǎn)玻碳電極1和銀鉑復(fù)合電極2之間形成單液滴，將單液滴作為無光窗光池，替換傳統(tǒng)的比色池。

所述樣品反應(yīng)室4和底座5均是無底光學(xué)暗箱，其中樣品反應(yīng)室4為有蓋設(shè)計的暗箱，蓋子頂部中心有一個直徑Φ為9 mm的圓孔，四個側(cè)面各有一個出/入口，都能夠配備SMA905光纖座；底座5作為樣品反應(yīng)室4的底座和銀鉑復(fù)合電極2的支座。

(2)在樣品反應(yīng)室中，將Vc樣品單液滴滴加到旋轉(zhuǎn)玻碳電極1和銀鉑復(fù)合電極2之間，通過電化學(xué)三電極體系施加電壓，單液滴中的Vc發(fā)生電致氧化反應(yīng)產(chǎn)生DHVc，DHVc與鄰苯二胺(OPDA)反應(yīng)生成有熒光的喹喔啉(Quinoxalin，QNL)，然后在激發(fā)光源6的照射激發(fā)下產(chǎn)生熒光，熒光信號再由SMA905-SMA905光纖8傳送到光纖光譜儀7中，產(chǎn)生的光譜信號通過數(shù)據(jù)線9傳輸?shù)接嬎銠C10，再由計算機10處理、顯示、儲存，進而得到Vc的含量。

Vc的具體反應(yīng)過程如下：

傳統(tǒng)方法中Vc氧化一般采用化學(xué)試劑氧化，如：活性炭和2，6-二氯靛酚鈉等。而本實施例采用的是電化學(xué)氧化，氧化能力強而且不消耗化學(xué)藥劑，避免了二次污染問題。