本發(fā)明涉及藥食同源的食品領(lǐng)域，具體為金銀花細胞破壁粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、操作規(guī)程與制造工藝。
背景技術(shù)：
金銀花(學(xué)名：Lonicerae japonicae flos)，別名：金銀藤、銀藤、二色花藤、二寶藤、右轉(zhuǎn)藤、子風(fēng)藤、鴛鴦藤、二花，為忍冬科植物忍冬的干燥花蕾或帶初開的花，為常用的藥食同源品種。金銀花自古以來就以它的藥用價值廣泛而著名，其功效主要是清熱解毒，主治溫病發(fā)熱、熱毒血痢、癰疽疔毒等?，F(xiàn)代研究證明，金銀花含有綠原酸、木犀草素苷等藥理活性成分，對溶血性鏈球菌、金黃葡萄球菌等多種致病菌及上呼吸道感染致病病毒等有較強的抑制力，另外還可增強免疫力、抗早孕、護肝、抗腫瘤、消炎、解熱、止血(凝血)、抑制腸道吸收膽固醇等，其臨床用途非常廣泛，可與其它藥物配伍用于治療呼吸道感染、菌痢、急性泌尿系統(tǒng)感染、高血壓等40余種病癥。另外，金銀花被國家衛(wèi)生部列為治療禽流感及甲型H1N1流感的首選藥物，長期飲用金銀花茶有防感冒、降脂、延緩衰老及滋潤皮膚等功效。
謝永紅、楊定清等的《金銀花等3種中藥中重金屬鉛鎘含量分析》(《四川省第十一次環(huán)境監(jiān)測學(xué)術(shù)交流會論文集》2010年)中的摘要結(jié)論“中藥金銀花、麥冬鎘含量的超標(biāo)現(xiàn)象較普遍，這與藥材的生產(chǎn)過程、產(chǎn)地環(huán)境、藥材品種等因素密切相關(guān)?！?，而更進一步，劉周莉的博士學(xué)位論文《金銀花對重金屬鎘的超積累與生理響應(yīng)研究》通過水培和土培試驗方法，對金銀花在不同濃度Cd脅迫下，Cd在其體內(nèi)的積累特性和生理響應(yīng)進行了研究，表明金銀花對Cd具有很強的超富集能力和耐性。重金屬大部分會蓄積于體內(nèi)，即使微量，經(jīng)長期連續(xù)攝取，仍可能危害中樞神經(jīng)、血液及各器官，呈現(xiàn)毒性作用，導(dǎo)致類阿茲海默氏癥、帕金森氏癥，甚至有致癌的危險。本發(fā)明提供的金銀花細胞破壁粉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中，對總砷、鉛、鎘、總汞、銅等重金屬進行嚴(yán)格的檢測，同時也對有效成分綠原酸、木犀草苷的含量等多方面進行檢測，確保產(chǎn)品安全、優(yōu)質(zhì)。
位于沂蒙山區(qū)的平邑縣是我國著名的金銀花產(chǎn)地，種植金銀花的歷史已超過200年。2007年被國家質(zhì)檢總局認(rèn)證的“中國金銀花之鄉(xiāng)”。目前，平邑縣金銀花種植面積超過65萬畝，產(chǎn)量占到全國的60％以上。值得注意的是，金銀花在生產(chǎn)、收購、加工及制成品的整個環(huán)節(jié)中都缺少農(nóng)殘檢測，而且現(xiàn)行版《中國藥典》中金銀花的農(nóng)殘是沒有標(biāo)準(zhǔn)的。即便是在道地產(chǎn)區(qū)，2013年7月間金銀花曾因涉及涼茶造假事件而引發(fā)關(guān)注，被曝存在普遍濫用高效化學(xué)農(nóng)藥的現(xiàn)象。秉持對產(chǎn)品高品質(zhì)的追求，本公司對平邑縣的九間棚集團、魯農(nóng)合作社等相關(guān)供應(yīng)商進行了實地考察，宣傳嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，其中樂果、敵敵畏、溴氰菊酯、氯氰菊酯、六六六、滴滴涕、五氯硝基苯等7種農(nóng)藥殘留為必檢項目，可有效對金銀花細胞破壁粉的質(zhì)量進行控制，增加了食用安全性。
附圖說明
附圖1是金銀花細胞壁粉生產(chǎn)工藝流程圖。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
為了確保金銀花細胞破壁粉的高品質(zhì)要求，本發(fā)明提供了金銀花細胞破壁粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與制造工藝，包括了感官指標(biāo)、理化指標(biāo)和微生物指標(biāo)三方面的內(nèi)容，并采用一種細胞破壁技術(shù)將符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的金銀花制備成一種微米級新型固體飲料，提高了人體對金銀花營養(yǎng)物質(zhì)的吸收。
本發(fā)明提供的金銀花細胞破壁粉的制造工藝，包括以下步驟：
A10、凈選：金銀花放置在揀選工作臺進行目檢挑選，將其中的雜質(zhì)，如草枝、蟲、霉粒、油粒及未完全篩除的泥塊、砂石等及變質(zhì)品除去后，裝入潔凈容器中，稱量并做好記錄。
A20、干燥：將揀選后的金銀花放入烘箱托盤中，平鋪均勻，厚度不宜過厚，用熱風(fēng)循環(huán)烘箱40℃-55℃干燥至水分≤6％，干燥好后裝入潔凈容器中，稱量并做好記錄。
A30、粗粉碎：將干燥的金銀花用粗碎機進行粗粉碎，通過粗碎機上安裝的4目篩網(wǎng)來控制好粒徑規(guī)格，方便超微粉碎。加物料時應(yīng)做到少而均勻。防止過大、過硬物料進入機內(nèi)，嚴(yán)禁加料過量。粗碎后的物料要及時排出收集起來，避免堵料和跑料。
A40、滅菌：將粗粉碎后的金銀花由微波真空干燥機后門加入，按電機點動按鈕調(diào)整料盤位置，在料盤中依次加入適量物料，所有料盤加完物料，關(guān)閉后門。通過前門檢查無誤后關(guān)閉前門，抽真空，真空度達到-0.04Mpa后方可開啟微波。滅菌時間設(shè)定為10分鐘，滅菌溫度為70℃。微波滅菌完畢，關(guān)真空、關(guān)微波排氣出料，將滅菌后的金銀花裝入雙層PE袋中并用扎帶“n”扎口，稱量、記錄。
A50、超微粉碎：檢查確認(rèn)生產(chǎn)環(huán)境清場合格與超微粉碎機待運行狀態(tài)后，超微粉碎崗位操作人員將物料裝入料筒中，每次裝料1/3桶～2/3桶，開啟超微粉碎機進行粉碎，粉碎時間設(shè)定為45分鐘，溫度設(shè)定為-25℃至-10℃；取少量粉碎后物料用300目篩網(wǎng)檢測其粒徑，應(yīng)能絕大部分通過，如出現(xiàn)較多物料不能通過300目篩網(wǎng)則需重新進行超微粉碎。將粉碎好的金銀花超微細粉裝入雙層PE袋中并用扎帶“n”扎口，稱量、填寫并貼好容器內(nèi)容物標(biāo)簽轉(zhuǎn)入物料暫存間，填寫崗位操作記錄。
A60、制粒、干燥、整粒：將粉碎后的金銀花超微細粉按每次20KG加入高速混合制粒機制軟材，濕潤劑為純化水，濕潤劑的加入量為2KG，制粒機的參數(shù)為切割頻率25Hz混合頻率35Hz，混合2min～5min，軟材以“輕握成團，輕搓即散”為宜。軟材放入搖擺式顆粒機中，通過20目篩網(wǎng)搖擺出粒。濕金銀花顆粒用熱風(fēng)循環(huán)烘箱進行干燥，烘箱溫度設(shè)定為55℃，水分≤6％時出料。將金銀花顆粒分別過20目及60目篩網(wǎng)，剔除掉過大或過小的顆粒，保留20目～60目的顆粒。裝入雙層PE袋中并用扎帶“n”扎口，稱量、記錄。向質(zhì)檢部遞交請驗單申請對中間品進行性狀、水分(≤6％)、含量測定檢驗，由質(zhì)量監(jiān)督員QA取樣并將樣品送至實驗室檢測，檢驗合格后方允許放行到下一個工序。
A70、分裝：分裝崗位操作人員根據(jù)批包裝指令開具領(lǐng)料單，憑領(lǐng)料單到倉庫領(lǐng)取包裝材料，倉庫管理員按《物料領(lǐng)用、發(fā)放、退庫管理規(guī)程》發(fā)放包裝材料，并認(rèn)真做好記錄。生產(chǎn)前確認(rèn)現(xiàn)場清場合格后，分裝崗位操作人員根據(jù)批包裝指令與檢測報告單核對品名、數(shù)量、批號、包裝規(guī)格后，按照包裝要求對金銀花顆粒進行分裝，裝量范圍為 2g±7％，平均裝量不少于2g。裝量抽檢：分裝前對電子天平進行校驗，校驗合格后開始進行分裝，前10袋每袋抽檢裝量，后面每30分鐘抽檢6袋，當(dāng)一組中出現(xiàn)有不符合裝量時，對不合格品進行重新分裝，然后再抽取6袋進行復(fù)檢。如仍有裝量不合格者，對本批分裝產(chǎn)品進行全部復(fù)檢，并通知工藝員查找原因，及時糾正，并詳細記錄于生產(chǎn)記錄中。將分裝好的金銀花顆粒做好標(biāo)識暫存于中間站，等待包裝。
A80、包裝：包裝崗位操作人員按照批包裝指令開具領(lǐng)料單，憑領(lǐng)料單到倉庫領(lǐng)取包裝材料，倉庫管理員按相關(guān)規(guī)定發(fā)放產(chǎn)品專屬包裝材料，將已分裝好的金銀花細胞破壁粉獨立最小包裝(2g/袋)按20袋/盒進行裝盒，每盒放入防偽合格證、產(chǎn)品手冊、雙藥檢報告、牛油紙，每盒均套上收縮袋，進行熱收縮處理使其塑封。將已裝盒的產(chǎn)品按24盒/箱進行裝箱，每箱放入普通合格證、雙藥檢報告、手提袋。
A90、入庫：將包裝后的成品入庫存放于待檢區(qū)，向質(zhì)檢部遞交請驗單申請對成品品進行全項檢驗，檢驗合格后方允許放行出庫銷售。
本發(fā)明提供了金銀花細胞破壁粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括了感官指標(biāo)、理化指標(biāo)和微生物指標(biāo)三方面的內(nèi)容。
金銀花細胞破壁粉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)如下所示：
金銀花細胞破壁粉
拼音名稱：Jinyinhua Xibao Pobifen
包裝：聚酯/鋁/聚乙烯藥品包裝用復(fù)合膜、袋。
感官指標(biāo)
實驗要求：檢驗員感官功能正常。本項檢驗所用檢測室應(yīng)具有良好的光線等，即環(huán)境符合檢測要求。
檢測方法：取5g樣品于清潔的白瓷盤中，在自然光線下觀測其組織形態(tài)、色澤及雜質(zhì)；取適量樣品，按食用方法沖調(diào)后，即嗅其氣味，品其滋味。
結(jié)果判定：本品為金銀花細胞破壁粉特有的色澤(淡褐色至深褐色)的粉末顆粒；具有金銀花特有的香甜味，純正無異味，呈均勻粉末顆粒，無肉眼可見的外來雜質(zhì)。
理化指標(biāo)
綠原酸，按《中華人民共和國藥典》2010年版一部金銀花項下中的方法測定，以干燥品計，不得少于1.5mg/kg。
檢測儀器：電子天平、高效液相色譜儀。
檢測方法：
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.4％磷酸溶液(13∶87)為流動相，檢測波長為327nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于1000。
對照品溶液的制備精密稱取綠原酸對照品10mg置250ml棕色量瓶中，加50％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(在10℃以下保存)。
供試品溶液的制備取本品粉末(過四號篩)約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(250W，35kHz)30分鐘，放冷，稱 定重量，用50％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5ml，置25ml棕色量瓶中，加50％甲醇至刻度，搖勻，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
檢測限度：本品按干燥品計算，含綠原酸(C16H18O9)不得少于1.5％。
木犀草苷，按《中華人民共和國藥典》2010年版一部金銀花項下中的方法測定，以干燥品計，不得少于0.050mg/kg。
檢測儀器：電子天平、高效液相色譜儀。
檢測方法：
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以苯基硅烷鍵合硅膠為填充劑(Agilent ZORBAX SB-phenyl4.6mm×250mm，5μm)；以乙腈為流動相A，以0.5％冰醋酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為350nm。理論板數(shù)按木犀草苷峰計算應(yīng)不低于20000。
對照品溶液的制備精密稱取木犀草苷對照品10mg置250ml量瓶中，加70％甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末(過四號篩)約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理(250W，35kHz)60分鐘，放冷，稱定重量，用70％甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液20ml，回收溶劑至干，
殘渣用70％甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加70％甲醇至刻度，搖勻，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
檢測限度：本品按干燥品計算，含木犀草苷(C21H20O11)不得少于0.050％。
未破壁細胞限度，按附錄A規(guī)定的方法測定。
實驗要求：本項檢驗所用檢測室應(yīng)具有良好的光線等，即環(huán)境符合檢測要求。
檢測儀器：天平、100倍顯微鏡、超聲波儀。
檢測方法：稱取本品0.010g，加入水合氯醛試液-水(1∶1)0.5ml，超聲處理至完全溶散，吸取所有溶液裝片，每片以不溢出、無氣泡、顆粒分布均勻，在100倍顯微鏡下檢視，大于100μm且完整的細胞的顆粒數(shù)目(如多個完整的細胞連成一片，且整片也超過100μm的，以整片為一個計算)不得超過100個。
檢測限度：大于100μm且完整的細胞的顆粒數(shù)目(如多個完整的細胞連成一片，且整片也超過100μm的，以整片為一個計算)不得超過100個。
粒徑分布D90，按附錄B規(guī)定的方法測定。
實驗要求：本項檢驗所用檢測室應(yīng)具有良好的光線等，即環(huán)境符合檢測要求。
檢測儀器：天平、激光粒度分析儀、超聲波儀。
檢測方法：取本品0.1g，加水40ml，超聲處理5分鐘，時時振搖，溶散后立即用激光粒度分析儀(詳見儀器操作規(guī)程，文件號：JDJF-JS-A-010)測定，按體積計數(shù)。
檢測限度：粒徑分布D90不得過35.0μm。
水分，按GB5009.3規(guī)定的方法測定。
檢測儀器：電子天平、干燥箱。
檢測方法：取潔凈鋁制或玻璃制的扁形稱量瓶，置于101℃～105℃干燥箱中，瓶蓋斜支于瓶邊，加熱1.0h，取出蓋好，置干燥器內(nèi)冷卻0.5h，稱量，并重復(fù)干燥至前后兩次質(zhì)量差不超過2mg，即為恒重。將混合均勻的試樣迅速磨細至顆粒小于2mm，不易研磨的樣品應(yīng)盡可能切碎，稱取2g～10g試樣(精確至0.0001g)，放入此稱量瓶中，試樣厚度不超過5mm，如為疏松試樣，厚度不超過10mm，加蓋，精密稱量后，置101℃～105℃干燥箱中，瓶蓋斜支于瓶邊，干燥2h～4h后，蓋好取出，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱量。然后再放入101℃～105℃干燥箱中干燥1h左右，取出，放入干燥器內(nèi)冷卻0.5h后再稱量。并重復(fù)以上操作至前后兩次質(zhì)量差不超過2mg，即為恒重。
檢測限度：減失重量應(yīng)不得過7.0％。
灰分，按GB5009.4規(guī)定的方法測定。
檢測儀器：電子天平、馬弗爐。
檢測方法：將潔凈的坩堝置入馬弗爐中，在550±25℃灼燒0.5小時，降溫至200℃左右，取出，放入干燥器中放冷30分鐘，準(zhǔn)確稱重。重復(fù)灼燒至前后兩次稱量相差不超過0.5mg為恒重。稱取3～10g試樣(精確至0.0001g)，放入此坩堝中，先在電熱板上以小火加熱使試樣充分碳化至無煙，然后置于馬弗爐中，在550±25℃灼燒4小時。降溫至200℃左右，取出，放入干燥器中放冷30分鐘，稱量前如發(fā)現(xiàn)灼燒殘渣有炭粒時，應(yīng)向試樣中滴入少許水濕潤，使結(jié)塊松散，蒸干水分再次灼燒至無炭粒即表示炭化完全，方可稱量。重復(fù)灼燒至前后兩次稱量相差不超過0.5mg為恒重。
檢測限度：遺留殘渣應(yīng)不得過10.0％。
酸不溶灰分，按《中華人民共和國藥典》2010版第一部附錄IXK規(guī)定的方法測定。
檢測儀器：電子天平、馬弗爐。
檢測方法：本實驗在灰分檢驗項下進行。將灰分檢驗項目所得的殘渣，在坩堝中小心加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘渣用水洗于濾紙上，并洗滌至洗液至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。
檢測限度：根據(jù)殘渣重量，計算供試品中酸不溶性灰分的含量，不得過3.0％。
二氧化硫殘留量
檢測儀器：電子天平、電熱套
方法：按《中華人民共和國藥典》2015年版四部二氧化硫殘留量測定法(通則2331)中第一法(酸堿滴定法)測定
檢測方法：取供試品約10g，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300～400ml。打開回流冷凝管開關(guān)給水，將冷凝管的上端E口處連接一橡膠導(dǎo)氣管置于100ml錐形瓶底部。錐形瓶內(nèi)加入3％過氧化氫溶液50ml作為吸收液(橡膠導(dǎo)氣管的末端應(yīng)在吸收液液面以下)。使用前，在吸收液中加入3滴甲基紅乙醇溶液指示劑(2.5mg/ml)，并用0.01mol/L氫氧化鈉滴定液滴定至黃色(即終點；如果超過終點，則應(yīng)舍棄該吸收溶液)。開通氮氣，使用流量計調(diào)節(jié)氣體流量至約0.2L/min；打開分液漏斗C的活塞，使鹽酸溶液(6mol/L)10ml流入蒸餾瓶，立即加熱兩頸燒瓶內(nèi)的溶液至沸，并保持微沸；燒瓶內(nèi)的水沸騰1.5小時后，停止加熱。吸收液放冷后，置于磁力攪拌器上不斷攪拌，用氫氧化鈉滴定液(0.01mol/L)滴定，至黃色持續(xù)時間20秒不褪，并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正。
結(jié)果判定：本品二氧化硫殘留量不得過150mg/kg。
重金屬及有害元素：鉛、鎘、總砷、總汞、銅
儀器及用具：電子天平、原子吸收分光光度計
方法：照《中華人民共和國藥典》2015年版四部鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(通則2321)測定
鉛的測定(石墨爐法)
測定條件參考條件：波長283.3nm，干燥溫度100～120℃，持續(xù)20秒；灰化溫度400～750℃，持續(xù)20～25秒；原子化溫度1700～～2100℃，持續(xù)4～5秒。
鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鉛(Pb)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含鉛0ng、5ng、20ng、40ng、60ng、80ng的溶液。分別精密量取1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取20μl注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備B法稱取供試品1g，精密稱定，置凱氏燒瓶中，加硝酸-高氯酸(4∶1)混合溶液5～10ml，混勻，瓶口加一小漏斗，浸泡過液。置電熱板上加熱消解，保持微沸，若變棕黑色，再加硝酸-高氯酸(4∶1)混合溶液適量，持續(xù)加熱至溶液澄明后升高溫度，繼續(xù)加熱至冒煙，直至白煙散盡，消解液呈無色透明或略帶黃色，放冷，轉(zhuǎn)入50ml量瓶中，用2％硝酸溶液洗滌容器，洗液合并于量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。同時同法制備空白溶液。
測定法精密量取空白溶液與供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，精密吸取10～20μl，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下方法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中鉛(Pb)的含量，計算，即得。
鎘的測定(石墨爐法)
測定條件參考條件：波長228.8nm，干燥溫度100～120℃，持續(xù)20秒；灰化溫度300～500℃，持續(xù)20～25秒；原子化溫度1500～1900℃，持續(xù)4～5秒。
鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含鎘(Cd)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含鎘0ng、0.8ng、2.0ng、4.0ng、6.0ng、8.0ng的溶液。分別精密吸取10μl，注入石墨爐原子化器，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10～20μl，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下方法測定吸光度(若供試品有干擾，可分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液、空白溶液和供試品溶液各1ml，精密加含1％磷酸二氫銨和0.2％硝酸鎂的溶液0.5ml，混勻，依法測定)，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中鎘(Cd)的含量，計算，即得。
總砷的測定(氫化物法)
測定條件采用適宜的氫化物發(fā)生裝置，以含硼氫化鈉和0.3％氫氧化鈉溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮氣為載氣，檢測波長為193.7nm。
砷標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取砷單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含砷(As)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取砷標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液稀釋制成每1ml分別含砷0ng、5ng、10ng、20ng、30ng、40ng的溶液。分別精密量取10ml，置25ml量瓶中，加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，加10％抗壞血酸溶液(臨用前配制)1ml，搖勻，用鹽酸溶液(20→100)稀釋至刻度，搖勻，密塞，置80℃水浴中加熱3分鐘，取出，放冷。取適量，吸入氫化物發(fā)生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液各10ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下，自“加25％碘化鉀溶液(臨用前配制)1ml”起，依法測定。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中砷(As)的含量，計算，即得。
總汞的測定(冷蒸氣吸收法)
測定條件采用適宜的氫化物發(fā)生裝置，以含0.5％硼氫化鈉和0.1％氫氧化鈉的溶液(臨用前配制)作為還原劑，鹽酸溶液(1→100)為載液，氮氣為載氣，檢測波長為253.6nm。
汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含汞(Hg)1μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液0ml、0.1ml、0.3ml、0.5ml、0.7ml、0.9ml，置50ml量瓶中，加20％硫酸溶液10ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，用水稀釋至刻度，搖勻。取適量，吸入氫化物發(fā)生裝置，測定吸收值，以峰面積(或吸光度)為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備B法稱取供試品1g，精密稱定，置凱氏燒瓶中，加硝酸-高氯酸(4∶1)混合溶液5～10ml，混勻，瓶口加一小漏斗，浸泡過液。置電熱板上，于120～140℃加熱消解4～8小時(必要時延長消解時間，至消解完全)，放冷，加20％硫酸溶液5ml、5％高錳酸鉀溶液0.5ml，搖勻，滴加5％鹽酸羥胺溶液至紫紅色恰消失，轉(zhuǎn)入25ml量瓶中， 用水洗滌容器，洗液合并于量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，必要時離心，取上清液，即得。同時同法制備空白溶液。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的方法測定從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中汞(Hg)的含量，計算，即得。
銅的測定(火焰法)
測定條件檢測波長為324.7nm，采用空氣-乙炔火焰，必要時進行背景校正。
銅標(biāo)準(zhǔn)貯備液的制備精密量取銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用2％硝酸溶液稀釋，制成每1ml含銅(Cu)10μg的溶液，即得(0～5℃貯存)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別精密量取銅標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，用2％硝酸溶液制成每1ml分別含銅0μg、0.05μg、0.2μg、0.4μg、0.6μg、0.8μg的溶液。依次噴入火焰，測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
供試品溶液的制備同鉛測定項下供試品溶液的制備。
測定法精密吸取空白溶液與供試品溶液適量，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項下的方法測定。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中銅(Cu)的含量，計算，即得。
結(jié)果判定：本品含鉛不得過1.0mg/kg、鎘不得過0.2mg/kg、總砷不得過0.5mg/kg、總汞不得過0.06mg/kg、銅不得過20.0mg/kg。
黃曲霉毒素B1，按《中華人民共和國藥典》2010版第一部附錄IXV規(guī)定的方法測定。
檢測儀器：電子天平、高效液相色譜儀。
檢測方法：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水(40∶18∶42)為流動相，流速每分鐘0.8ml；采用柱后衍生法檢測，衍生溶液為0.05％的碘-甲醇溶液，衍生化泵流速度每分鐘0.3ml，衍生化溫度70℃；以熒光檢測器檢測，激發(fā)波長為360nm(或365nm)，發(fā)射波長為450nm，兩個相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。
標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備精密量取黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品(黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素B2、黃曲霉毒素G1、黃曲霉毒素G2標(biāo)示濃度分別為1.0μg/ml、0.3μg/ml、1.0μg/ml、0.3μg/ml)0.5ml，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，作為儲備液。精密量取儲備液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末(過二號篩)約15g，精密稱定，加入氯化鈉3g置于均質(zhì)器中，精密加入70％甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘(攪拌速度大于11000轉(zhuǎn)/分鐘)，離心5分鐘(離心速度2500轉(zhuǎn)/分鐘)，精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，量取續(xù)率液20.0ml，通過免疫親和柱(AflaT-est@P)，流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進入柱子，將水?dāng)D出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法分別精密吸取上述混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液5μl、10μl、15μl、20μl、25μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，進樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。另精密吸取上 述供試品溶液20μl，注入液相色譜儀，測定峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法求得供試品中黃曲霉毒素B1的量，計算，即得。
檢測限度：本品含黃曲霉毒素B1應(yīng)不得過5.0μg/kg。
六六六、滴滴涕、五氯硝基苯，按GB/T5009.19規(guī)定的方法測定。
檢測儀器：電子天平、振蕩器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氣相色譜儀等。
凝膠凈化柱：長30cm，內(nèi)徑2.3cm～2.5cm具活塞玻璃層析柱，柱底墊少許玻璃棉。用洗脫劑乙酸乙酯-環(huán)已烷(1+1)浸泡的凝膠(200目～400目聚苯乙烯凝膠)，以濕法裝入柱中，柱床高約26cm，凝膠始終保持在洗脫劑中。
檢測方法：
色譜條件
色譜柱：DM-5石英彈性毛細管或等效柱規(guī)格：30m×0.32mm×0.25μm
柱溫：程序升溫
90℃(1min)40℃/min170℃2.3℃/min230℃(17min)40℃/min280℃(5min)
進樣口溫度：280℃ 進樣方式：不分流 進樣量：1μl
檢測器：電子捕獲檢測器(ECD) 檢測器溫度：300℃
載氣：氮氣 流速：1ml/min 尾吹：25ml/min 柱前壓：0.5MPa
標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液的制備分別取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品(1ml/支)六六六(α-HCH、β-HCH、γ-HCH、δ-HCH)、滴滴涕(p，p`-DDE、o，p`-DDT、p，p`-DDD、P，P`-DDT)、五氯硝基苯(PCNB)(注：依次為GSB05-2276-2008、GSB05-2277-2008、GSB05-2278-2008、GSB05-2279-2008，GSB05-2280-2008、GSB05-2281-2008、GSB05-2282-2008、GSB05-2283-2008，GSB05-1845-2008)各1支(100μg/ml)，在室溫下放置15分鐘后打開，全部移入10ml棕色量瓶中，用正已烷洗安瓿瓶2～3次，定容至刻度，搖勻，分別制成每1ml含10μg的標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液。
標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液的制備精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液，用正已烷制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
供試品溶液的制備稱取試樣20g(精確到0.01g)，加水適量使總水量約20ml，加丙酮40ml，振蕩30min，加氯化鈉6g，搖勻。加石油醚(30～60℃)30ml，再振蕩30min，靜置分層后，將有機相全部轉(zhuǎn)移至100ml具塞三角瓶中經(jīng)無水硫酸鈉干燥，并量取35ml于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，濃縮至約1ml，加入2ml乙酸乙酯-環(huán)已烷(1+1)溶液再濃縮，如此重復(fù)3次，濃縮至1ml，供凝膠色譜層析凈化使用，或?qū)饪s液轉(zhuǎn)移至全自動凝膠滲透色譜系統(tǒng)配套的進樣試管中，用乙酸乙酯-環(huán)已烷(1+1)溶液洗滌旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶數(shù)次，將洗滌液合并至試管中，定容至10ml，搖勻。將上述試液經(jīng)凝膠柱以乙酸乙酯-環(huán)已烷(1+1)溶液洗脫，棄去0ml～35ml流分，收集35ml～70ml流分。將其旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至約1ml，再經(jīng)凝膠柱凈化收集35ml～70ml流分，蒸發(fā)濃縮，用氮氣吹除溶劑，用正已烷定容至1ml，留待GC分析。
測定法分別精密吸取上述混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液與供試品溶液1μl，注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，以保留時間定性，出峰順序為：α-六六六、β-六六六、γ-六六六、五氯硝基苯、δ-六六六、P，P`-滴滴伊、p，p`-滴滴滴、o，p`-滴滴涕、p，p`-滴滴涕。按峰面積以外標(biāo)法計。
檢測限度：六六六、滴滴涕均不得過0.2mg/kg，五氯硝基苯不得過0.1mg/kg。
溴氰菊酯、氯氰菊酯，按《中華人民共和國藥典》2015年版四部農(nóng)藥殘留量測定法(通則2341)中第三法擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量測定法-色譜法測定
檢測儀器：電子天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氣相色譜儀。
檢測方法：
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以(5％苯基)甲基聚硅氧烷為固定液的彈性石英毛細管柱(30m×0.32mm×0.25μm)，63Ni-ECD電子捕獲檢測器。進樣口溫度270℃，檢測器溫度330℃。不分流進樣(或根據(jù)儀器設(shè)置選擇最佳的分流比)。程序升溫：初始160℃，保持1分鐘，每分鐘10℃升至278℃，保持0.5分鐘，每分鐘1℃升至290℃，保持5分鐘。理論板數(shù)按溴氰菊酯峰計算應(yīng)不低于105，兩個相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。
標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液的制備分別取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品(1ml/支)溴氰菊酯(GSB05-2310-2008)、氯氰菊酯(GSB05-2308-2008)各1支(100μg/ml)，在室溫下放置15分鐘后打開，全部移入10ml棕色量瓶中，用石油醚(60～90℃)洗安瓿瓶2～3次，定容至刻度，搖勻，分別制成每1ml含10μg的標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液。
標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液的制備精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液，用石油醚(60～90℃)制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
供試品溶液的制備取供試品約1～2g，精密稱定，置100ml具塞錐形瓶中，加石油醚(60～90℃)-丙酮(4∶1)混合溶液30ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣再重復(fù)上述操作2次后，合并濾液，濾液用適量無水硫酸鈉脫水后，于40～45℃減壓濃縮至近干，用少量石油醚(60～90℃)反復(fù)操作至丙酮除凈，殘渣用適量石油醚(60～90℃)溶解，置混合小柱[從上至下依次為無水硫酸鈉2g、弗羅里硅土4g、微晶纖維素1g、微晶纖維素1g、氧化鋁1g、無水硫酸鈉2g，用石油醚(60～90℃)-乙醚(4∶1)混合溶液20ml預(yù)洗]上，用石油醚(60～90℃)-乙醚(4∶1)混合溶液90ml洗脫，收集洗脫液，于40～45℃減壓濃縮至近干，再用石油醚(60～90℃)3～4ml重復(fù)操作至乙醚除凈，用石油醚(60～90℃)溶解并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應(yīng)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標(biāo)法計算供試品中2種擬除蟲菊酯農(nóng)藥殘留量。
檢測限度：溴氰菊酯不得過10mg/kg，氯氰菊酯不得過20mg/kg。
樂果、敵敵畏，按《中華人民共和國藥典》2015年版四部農(nóng)藥殘留量測定法(通則2341)有機磷類農(nóng)藥殘留量測定法第二法測定。
檢測儀器：電子天平、氮吹儀、氣相色譜儀。
檢測方法：
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以50％苯基50％二甲基聚硅氧烷或(5％苯基)甲基聚 硅氧烷為固定液的彈性石英毛細管柱(30m×0.25mm×0.25μm)，氮磷檢測器(NPD)或火焰光度檢測器(FPD)。進樣口溫度220℃，檢測器溫度300℃，不分流進樣。程序升溫：初始120℃，每分鐘10℃升至200℃，每分鐘5℃升至240℃，保持2分鐘，每分鐘20℃升至270℃，保持0.5分鐘。理論板數(shù)按敵敵畏峰計算應(yīng)不低于6000，兩個相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。
標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液的制備分別取農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品(1ml/支)樂果(GSB05-2286-2008)、敵敵畏(GSB05-2298-2008)各1支(100μg/ml)，在室溫下放置15分鐘后打開，全部移入10ml棕色量瓶中，用乙酸乙酯洗安瓿瓶2～3次，定容至刻度，搖勻，分別制成每1ml含10μg的標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液。
標(biāo)準(zhǔn)品混合溶液的制備精密量取上述標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液，用乙酸乙酯制成每1ml含0.1μg、0.5μg、1μg、2μg、5μg的系列混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。
供試品溶液的制備藥材或飲片取供試品約5g，精密稱定，加無水硫酸鈉5g，加入乙酸乙酯50～100ml，冰浴超聲處理3分鐘，放置，取上層液濾過，藥渣加入乙酸乙酯30～50ml，冰浴超聲處理2分鐘，放置，濾過，合并兩次濾液，用少量乙酸乙酯洗滌濾紙及殘渣，與上述濾液合并。取濾液于40℃以下減壓濃縮至近干，用乙酸乙酯轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，并稀釋至刻度；精密吸取上述溶液1ml，置石墨化炭小柱(250mg/3ml用乙酸乙酯5ml預(yù)洗)上，用正已烷-乙酸乙酯(1∶1)混合溶液5ml洗脫，收集洗脫液，置氮吹儀上濃縮至近干，加乙酸乙酯定容至1ml，渦旋使溶解，即得。
測定法分別精密吸取供試品溶液和與之相對應(yīng)濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液各1μl，注入氣相色譜儀，按外標(biāo)法計算供試品中2種有機磷農(nóng)藥殘留量。
檢測限度：樂果不得過1.0mg/kg，敵敵畏不得過0.2mg/kg。
微生物指標(biāo)
菌落總數(shù)，按GB4789.2規(guī)定的方法檢驗。
準(zhǔn)備工作：在開展實驗前，應(yīng)填寫相關(guān)記錄：檢驗室溫度、濕度、日期，確認(rèn)檢驗環(huán)境符合要求。按本項實驗要求準(zhǔn)備相關(guān)滅菌服等必需用品。
培養(yǎng)基和試劑：平板計數(shù)瓊脂(PCA)培養(yǎng)基；0.85％生理鹽水或磷酸鹽緩沖液等
結(jié)果判定：菌落總數(shù)不得過1000CFU/g。
大腸菌群，按GB/T4789.3-2003規(guī)定的方法檢驗。
準(zhǔn)備工作：在開展實驗前，應(yīng)填寫相關(guān)記錄：檢驗室溫度、濕度、日期，確認(rèn)檢驗環(huán)境符合要求。按本項實驗要求準(zhǔn)備相關(guān)滅菌服等必需用品。
培養(yǎng)基和試劑：乳糖膽鹽發(fā)酵管；伊紅美藍瓊脂平板；乳糖發(fā)酵管；EC肉湯；0.85％生理鹽水；革蘭氏染色液等
結(jié)果判定：大腸菌群不得過40MPN/100g。
霉菌，按GB4789.15規(guī)定的方法檢驗。
準(zhǔn)備工作：在開展實驗前，應(yīng)填寫相關(guān)記錄：檢驗室溫度、濕度、日期，確認(rèn)檢驗環(huán)境符合要求。按本項實驗要求準(zhǔn)備相關(guān)滅菌服等必需用品。
培養(yǎng)基和試劑：馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基或孟加拉紅培養(yǎng)基；滅菌蒸餾水等
結(jié)果判定：霉菌不得過50CFU/g。
致病菌(沙門氏菌)，按GB4789.4規(guī)定的方法檢驗。
準(zhǔn)備工作：在開展實驗前，應(yīng)填寫相關(guān)記錄：檢驗室溫度、濕度、日期，確認(rèn)檢驗環(huán)境符合要求。按本項實驗要求準(zhǔn)備相關(guān)滅菌服等必需用品。
培養(yǎng)基和試劑：緩沖蛋白胨水(BPW)、四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液、亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液、亞硫酸鉍(BS)瓊脂、HE瓊脂、木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂、沙門氏菌屬顯色培養(yǎng)基、三糖鐵(TSI)瓊脂、蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑、尿素瓊脂、氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基、賴氨酸脫羧酶試驗培養(yǎng)基、糖發(fā)酵管、鄰硝基酚β-D半乳糖苷(ONPG)培養(yǎng)基、半固體瓊脂、丙二酸鈉培養(yǎng)基、沙門氏菌O和H診斷血清、生化鑒定試劑盒等
結(jié)果判定：不得檢出沙門氏菌。
致病菌(金黃色葡萄球菌)，按GB4789.10第二法規(guī)定的方法檢驗。
準(zhǔn)備工作：在開展實驗前，應(yīng)填寫相關(guān)記錄：檢驗室溫度、濕度、日期，確認(rèn)檢驗環(huán)境符合要求。按本項實驗要求準(zhǔn)備相關(guān)滅菌服等必需用品。
培養(yǎng)基和試劑：Baird-Parker平板等
結(jié)果判定：金黃色葡萄球菌不得過1000CFU/g。
凈含量，按JJF1070規(guī)定的方法檢驗。
實驗要求：應(yīng)記錄檢驗所用的天平室溫度與濕度。本項檢驗所用天平應(yīng)經(jīng)過計量檢定，應(yīng)記錄天平等級、量程、最小分度值、檢定有效期。
檢驗儀器：電子天平。
檢測方法：
根據(jù)產(chǎn)品規(guī)格選取適宜的天平。
依照J(rèn)JF1070規(guī)定抽取待測批的樣品量，首先檢查包裝印刷應(yīng)準(zhǔn)確、清析，其次檢查標(biāo)注字符最小高值為2mm，最后進行重量的計量檢驗。
計算公式為：凈含量(實際含量qi)＝實際總重(GWi)-皮重(TWi)，凈含量偏差(D)＝凈含量(qi)-標(biāo)注凈含量(Qn)。
檢測限度：凈含量應(yīng)在1.86g～2.14g之間，平均凈含量不允許出現(xiàn)短缺量。