一種檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條的制作方法
【專利摘要】本實用新型屬于試紙條【技術領域】，具體涉及一種檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條。該試紙條包括底板，底板上附著有由左至右緊密相連的樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水膜和吸水濾紙，樣片墊與玻璃纖維膜緊密相連時樣品墊壓著玻璃纖維膜，玻璃纖維膜與硝酸纖維素膜緊密相連時玻璃纖維膜壓著硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜與吸水膜緊密相連時吸水膜壓著硝酸纖維素膜，吸水膜與吸水濾紙緊密相連時吸水濾紙壓著吸水膜。本實用新型的設計簡單，可以有效地減少誤差，操作簡便快速，結(jié)果顯示形象，直觀準確、成本低，靈敏度高。
【專利說明】-種檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條

【技術領域】 [0001]
[0002] 本實用新型屬于試紙條【技術領域】，具體涉及一種檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕 因子的膠體金試紙條。

【背景技術】 [0003]
[0004] 類風濕關節(jié)炎（Rheumatoid arthritis縮寫RA.)是風濕病的一種，主要是因為長 期進行涼水的接觸或風吹導致。類風濕活動性一般常常持續(xù)3-6個月，游走痛為機體關節(jié) 疼痛，游走不定，時而在肩，時而在肘，時而在上肢。它是一種以慢性侵蝕性關節(jié)炎為特征的 全身性自身免疫病。類風濕關節(jié)炎的病變特點為滑膜炎，以及由此造成的關節(jié)軟骨和骨質(zhì) 破壞，最終導致關節(jié)畸形?；ぱ壮志梅磸桶l(fā)作，可導致關節(jié)內(nèi)軟骨和骨的破壞，關節(jié)功能 障礙，如果不經(jīng)過正規(guī)治療，約75%的患者在3年內(nèi)會出現(xiàn)殘廢。
[0005] 類風濕關節(jié)炎分布于世界各地，在不同人群中的患病率為0. 189Γ1. 07%，其發(fā)病具 有一定的種族差異，印地安人高于白種人，白種人高于亞洲黃種人，在我國的總患病人數(shù)超 過500萬。類風濕關節(jié)炎在各年齡中皆可發(fā)病，高峰年齡在3(Γ50歲左右，一般女性發(fā)病多 于男性。
[0006] 迄今為止，針對RA的早期診斷主要還是依據(jù)臨床表現(xiàn)；而血清學手段主要是檢測 類風濕因子（RF)。RF可以作為RA的靈敏血清學標志物，特異性大約是70%。1998年，國 夕卜，首次報道的抗環(huán)瓜氨酸肽抗體（anti-cyclic cirullinated peptide antibodies,抗 CCP抗體）的檢測，對RA具有較高的特異性，能彌補RF的特異性差的缺陷，是RA新的血清 標志物。2012年國內(nèi)北京大學人民醫(yī)院牽頭全國12家醫(yī)院共同參與提出了早期類風濕關 節(jié)炎（ERA)的分類標準其中血清學檢查有一項：抗瓜氨酸化蛋白抗體(包括抗CCP抗體和抗 MCV抗體)，至少有一項高滴度陽性。
[0007] 因此，抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體和類風濕因子（RF)聯(lián)合檢測能及時準確診斷類風 濕性關節(jié)炎。因此，對于類風濕關節(jié)炎的早診斷具有非常重要的意義。
[0008] 抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體和類風濕因子（RF)檢測試劑盒（膠體金法）采用高度特 異性的抗原抗體反應及免疫層析分析技術。
[0009] 抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體測定采用雙抗原夾心法免疫測定原理：試紙條上含有預 先包被在玻璃纖維膜上膠體金標記的抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗原以及包被在硝酸纖維素膜 上的抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗原。檢測時，若樣本含有抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體，會在抗環(huán)瓜 氨酸肽（CCP)抗體測試區(qū)上形成雙抗原夾心復合物，有紫紅色的條帶；若是陰性樣本，則抗 環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體測試區(qū)上沒有紫紅色條帶。
[0010] 類風濕因子（RF)測定采用雙抗原夾心法免疫測定原理：試紙條上含有預先包被 的在玻璃纖維膜上的熱聚人IgG (作為抗原）以及包被在硝酸纖維素膜上的熱聚人IgG (作 為抗原）。檢測時，若樣本呈陽性，會在類風濕因子（RF)測試區(qū)上形成雙抗原夾心復合物， 有紫紅色的條帶；若是陰性樣本，則類風濕因子（RF)測試區(qū)上沒有紫紅色條帶。


【發(fā)明內(nèi)容】
[0011]
[0012] 本實用新型的目的在于提供一種同時檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠 體金試紙條。
[0013] 本實用新型采用以下技術方案：
[0014] 一種檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條，包括底板，底板上附 著有由左至右緊密相連的樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水膜和吸水濾紙，樣片墊 與玻璃纖維膜緊密相連時樣品墊壓著玻璃纖維膜l-3mm，玻璃纖維膜與硝酸纖維素膜緊密 相連時玻璃纖維膜壓著硝酸纖維素膜l_3mm，硝酸纖維素膜與吸水膜緊密相連時吸水膜壓 著硝酸纖維素膜l_3mm，吸水膜與吸水濾紙緊密相連時吸水濾紙壓著吸水膜l-3mm。
[0015] 所述玻璃纖維素膜上吸附有膠體金標記的環(huán)瓜氨酸肽抗原和熱聚人IgG。
[0016] 所述硝酸纖維素膜上包被有環(huán)瓜氨酸肽抗原、熱聚人IgG (作為抗原）和鼠抗人 IgG。
[0017] 環(huán)瓜氨酸肽抗原、熱聚人IgG和鼠抗人IgG均呈條帶狀由左至右依次包被在硝酸 纖維素膜上。
[0018] 吸水濾紙能吸收不低于500微升的液體。
[0019] 本實用新型使用時將檢測液體加至樣品墊上，樣品墊可以將檢測液體充分吸收， 檢測液體先層析至玻璃纖維膜上與噴涂的金標抗原完全接觸充分反應，再層析至硝酸纖維 素膜上進行反應，當抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體和類風濕因子（RF)在樣本中的含量高于試紙 條對其的最低檢測限時，在對應測試區(qū)有紫紅色的條帶。抗環(huán)瓜氨酸肽（CCP)抗體和類風 濕因子（RF)在樣本中的含量低于試紙條對其的最低檢測限時，在對應測試區(qū)沒有紫紅色的 條帶。
[0020] 陰性結(jié)果：只在硝酸纖維素膜的鼠抗人IgG包被處有紅紫線出現(xiàn)，如圖2b所示。
[0021] 陽性結(jié)果：除了在硝酸纖維素膜的鼠抗人IgG包被處有紅紫線，在硝酸纖維素膜 的環(huán)瓜氨酸肽抗原、熱聚人IgG包被處也有一條或兩條紅紫線出現(xiàn)，具體是：在硝酸纖維 素膜的鼠抗人IgG包被處、硝酸纖維素膜的環(huán)瓜氨酸肽抗原包被處均有紅紫線出現(xiàn)(見圖 2d)，表明環(huán)瓜氨酸肽抗體陽性；在硝酸纖維素膜的鼠抗人IgG包被處、硝酸纖維素膜的熱 聚人IgG包被處均有紅紫線出現(xiàn)(見圖2c)，表明類風濕因子陽性；在硝酸纖維素膜的鼠抗 人IgG包被處、硝酸纖維素膜的環(huán)瓜氨酸肽抗原、熱聚人IgG包被處均有紅紫線出現(xiàn)(見圖 2e)，說明環(huán)瓜氨酸肽抗體、類風濕因子均為陽性。
[0022] 無效：當質(zhì)控線(硝酸纖維素膜的鼠抗人IgG包被處）不顯示出紅色條帶，則無論 檢測線顯示出紅色條帶與否，該試紙卡判為無效，如圖2a所示。
[0023] 本實用新型的設計簡單，可以有效地減少誤差，操作簡便快速，結(jié)果顯示形象，直 觀準確、成本低，靈敏度高。

【專利附圖】

【附圖說明】 [0024]
[0025] 圖1為本實用新型的結(jié)構(gòu)示意圖；
[0026] 圖2為本實用新型的顯色示意圖，2a為試紙卡判為無效時的示意圖，2b為陰性結(jié) 果示意圖，2c為類風濕因子陽性結(jié)果示意圖、2d為環(huán)瓜氨酸肽抗體陽性結(jié)果示意圖、2e為 環(huán)瓜氨酸肽抗體、類風濕因子均為陽性結(jié)果示意圖。

【具體實施方式】 [0027]
[0028] 如圖1所示的檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條，包括底板8， 底板8上附著有由左至右緊密相連的樣品墊1、玻璃纖維膜2、硝酸纖維素膜3、吸水膜7和 吸水濾紙9,樣片墊1與玻璃纖維膜2緊密相連時樣品墊1壓著玻璃纖維膜2 l-3mm，玻璃 纖維膜2與硝酸纖維素膜3緊密相連時玻璃纖維膜2壓著硝酸纖維素膜3 l-3mm，硝酸纖維 素膜3與吸水膜7緊密相連時吸水膜7壓著硝酸纖維素膜3 l-3mm，吸水膜7與吸水濾紙9 緊密相連時吸水濾紙9壓著吸水膜7 1-3_ ;玻璃纖維素膜2上吸附有膠體金標記的環(huán)瓜 氨酸肽抗原和熱聚人IgG。;硝酸纖維素膜3上包被有由左至右均呈條帶狀的環(huán)瓜氨酸肽抗 原4、熱聚人IgG (作為抗原）5和鼠抗人IgG 6。
[0029] 使用時將檢測液體加至樣品墊1上，樣品墊1可以將檢測液體充分吸收，檢測液體 先層析至玻璃纖維膜2上與噴涂的金標抗原完全接觸充分反應，再層析至硝酸纖維素膜3 上進行反應。具體的結(jié)果判斷如下：
[0030] 陰性結(jié)果：只在控制區(qū)C (硝酸纖維素膜3的鼠抗人IgG包被處）有紅紫線出現(xiàn)， 如圖2b所示。
[0031] 陽性結(jié)果：除了在控制C區(qū)(硝酸纖維素膜3的鼠抗人IgG6包被處）有紅紫線，在 檢測區(qū)域(硝酸纖維素膜3的環(huán)瓜氨酸肽抗原4、熱聚人IgG5包被處)也有一條或兩條紅紫 線出現(xiàn)，具體是：在硝酸纖維素膜3的鼠抗人IgG6包被處、硝酸纖維素膜3的環(huán)瓜氨酸肽抗 原4包被處均有紅紫線出現(xiàn)(見圖2d)，表明環(huán)瓜氨酸肽抗體陽性；在硝酸纖維素膜3的鼠 抗人IgG6包被處、硝酸纖維素膜3的熱聚人IgG5包被處均有紅紫線出現(xiàn)(見圖2c)，表明類 風濕因子陽性；在硝酸纖維素膜3的鼠抗人IgG6包被處、硝酸纖維素膜3的環(huán)瓜氨酸肽抗 原4、熱聚人IgG5包被處均有紅紫線出現(xiàn)(見圖2e)，說明環(huán)瓜氨酸肽抗體、類風濕因子均為 陽性。
[0032] 無效：當質(zhì)控線(硝酸纖維素膜3的鼠抗人IgG6包被處）不顯示出紅色條帶，則無 論檢測線顯示出紅色條帶與否，該試紙卡判為無效，如圖2a所示。
【權(quán)利要求】
1. 一種檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條，包括底板，其特征在于， 底板上附著有由左至右緊密相連的樣品墊、玻璃纖維膜、硝酸纖維素膜和吸水膜和吸水濾 紙，樣片墊與玻璃纖維膜緊密相連時樣品墊壓著玻璃纖維膜，玻璃纖維膜與硝酸纖維素膜 緊密相連時玻璃纖維膜壓著硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜與吸水膜緊密相連時吸水膜壓著 硝酸纖維素膜，吸水膜與吸水濾紙緊密相連時吸水濾紙壓著吸水膜。
2. 如權(quán)利要求1所述的檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條，其特征 在于，所述玻璃纖維素膜上吸附有膠體金標記的環(huán)瓜氨酸肽抗原和熱聚人IgG。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條，其 特征在于，所述硝酸纖維素膜上包被有環(huán)瓜氨酸肽抗原、熱聚人IgG和鼠抗人IgG。
4. 如權(quán)利要求3所述的檢測抗環(huán)瓜氨酸肽抗體和類風濕因子的膠體金試紙條，其特征 在于，環(huán)瓜氨酸肽抗原、熱聚人IgG和鼠抗人IgG均呈條帶狀由左至右依次包被在硝酸纖維 素膜上。
【文檔編號】G01N33/68GK203838159SQ201420082575
【公開日】2014年9月17日 申請日期:2014年2月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月26日
【發(fā)明者】劉奇, 張森 申請人:鄭州浪峰生物技術有限公司, 劉奇