一種連翹及含連翹產(chǎn)品的檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種連翹及含連翹產(chǎn)品的檢測(cè)方法,其對(duì)照品為五?;ㄜ账?,或用連翹苷對(duì)照品為五福花苷酸替代物,用校正因子計(jì)算五?;ㄜ账岷?。在現(xiàn)有產(chǎn)品中,有個(gè)別商家為了以次充好,用連翹葉來(lái)替代連翹果實(shí),導(dǎo)致最終產(chǎn)品效果差,發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn):連翹葉中不含五?;ㄜ账?,利用檢測(cè)五?;ㄜ账峥梢钥刂七B翹產(chǎn)品質(zhì)量的合法性,以保證含連翹產(chǎn)品的質(zhì)量。
【專利說(shuō)明】一種連翹及含連翹產(chǎn)品的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥的檢測(cè)方法領(lǐng)域,具體涉及一種連翹及含連翹產(chǎn)品的檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 連翹是中國(guó)臨床常用傳統(tǒng)中藥之一,又名黃花條、連殼、青翹、落翹、黃奇丹等,果 實(shí)入藥。連翹是清熱解毒的中藥,主治熱病初起,風(fēng)熱感冒,發(fā)熱,心煩,咽喉腫痛,急性腎炎 等。
[0003] 連翅的入藥部位為連翅(Forsythiasuspensa(Thunb. )Vahl)的干燥果實(shí)。秋季 果實(shí)初熟尚帶綠色時(shí)采收,除去雜質(zhì),蒸熟,曬干,習(xí)稱青翹;果實(shí)熟透時(shí)采收,曬干,除去雜 質(zhì),習(xí)稱老翹。
[0004] 在《中國(guó)藥典》2010年版中,有連翹提取物和連翹的含量檢測(cè)方法,具體如下:
[0005] 連翹,有兩種成分連翹苷(C27H34O14)、連翹酯苷(C29H36O15),限定連翹苷不低于 0. 15 %,連翹酯苷A不少于0. 25 %,具體含量檢測(cè)方法為:
[0006] 連翹苷
[0007] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn),以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-水 (25 :75)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為277nm,理論板數(shù)按連翹苷峰應(yīng)不低于3000;
[0008] 對(duì)照品溶液的制備:取連翹苷對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每Iml含0.2mg 的溶液,即得;
[0009] 供試品溶液的制備:取本品粉末(過(guò)五號(hào)篩)約lg,精密稱定,置具塞錐形瓶中, 精密加入甲醇15ml,稱定重量,浸漬過(guò)夜,超聲處理(功率250W,頻率40kHz) 25分鐘,放冷, 再稱定重量,用甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),精密量取續(xù)濾液5ml,蒸至近干,加中性氧 化鋁0. 5g拌勻,加在中性氧化鋁柱(100-200目,lg,內(nèi)徑為1-1. 5cm)上,用70%乙醇80ml 洗脫,收集洗脫液,濃縮至干,殘?jiān)?0 %甲醇溶解,轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中,并稀釋至刻度,搖 勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
[0010] 測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各?〇μ1,注入液相色譜儀,測(cè) 定,即得。
[0011] 連翹酯苷A
[0012] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn),以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈-0. 4% 冰醋酸溶液(15 :85)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為330nm,理論板數(shù)按連翹酯苷F峰計(jì)算應(yīng)不低于 5000;
[0013] 對(duì)照品溶液的制備:取連翹酯苷A對(duì)照品適量,精密稱定,加甲醇制成每Iml含 O-Img的溶液,即得(臨用配制);
[0014] 供試品溶液的制備:取本品粉末(過(guò)五號(hào)篩)約〇.5g,精密稱定,置具塞錐形瓶 中,精密加入70%甲醇15ml,密塞,稱定重量,超聲處理(功率250W,頻率40kHz) 30分鐘,放 冷,再稱定重量,用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
[0015]測(cè)定法:分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各1〇μ1,注入液相色譜儀,測(cè) 定,即得。
[0016] 連翹提取物中,連翹苷A不得少于6.0%,連翹苷不得少于0.5%。其制備方法為, 取連翹,粉碎成粗粉,加水煎煮三次,每次1. 5小時(shí),濾過(guò),合并濾液,濾液于60°C以下減壓 濃縮至相對(duì)密度1. 10-1. 20 (室溫)的清膏,放冷,加入4倍量乙醇,攪勻,靜置2小時(shí),濾過(guò), 濾液減壓回收乙醇,濃縮液噴霧干燥,即得。
[0017] 關(guān)于連翹提取物的含量測(cè)定方法,具體為:
[0018] 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn),以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以甲醇為流動(dòng) 相A,以水為流動(dòng)相B,按照下表進(jìn)行梯度洗脫,檢測(cè)波長(zhǎng)為235nm,理論板數(shù)按連翹酯苷F峰 計(jì)算應(yīng)不低于4000 ;
[0019]
[0020]
【權(quán)利要求】
1. 一種連翹及含連翹產(chǎn)品的檢測(cè)方法,其對(duì)照品為五?;ㄜ账幔蛴眠B翹苷對(duì)照品為 五?;ㄜ账崽娲铮眯U蜃佑?jì)算五?;ㄜ账岷?。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述含連翹產(chǎn)品為連翹與其他中藥 組合制成的產(chǎn)品,優(yōu)選地,所述含連翹產(chǎn)品為雙黃連口服液、雙黃連注射液、雙黃連膠囊、雙 黃連顆粒、雙黃連片、雙黃連糖漿、雙黃連滴丸、雙黃連泡騰片、雙黃連氣霧劑、注射用雙黃 連(凍干)、雙黃連栓、小兒熱速清口服液、小兒熱速清糖楽、小兒熱速清顆粒、復(fù)方苳蘭口 服液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,雙黃連口服液中每lml含五?;ㄜ账?以連翹苷計(jì)不得少于〇. 4mg。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法,其特征在于,該方法包括五?;ㄜ账岬?檢測(cè)方法,具體為:色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、對(duì)照品的制備、供試品的制備、檢測(cè)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)為: 色譜柱:Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18,以0.05%甲酸乙腈溶液為流動(dòng)相A,以0.05% 甲酸溶液為流動(dòng)相B,;柱溫為20°C;流速為每分鐘0. 9ml ;檢測(cè)器:二極管陣列檢測(cè)器,定性 鑒別檢測(cè)條件:波長(zhǎng)掃描范圍:190-400nm,檢測(cè)波長(zhǎng):236nm,278nm ;定量測(cè)定檢測(cè)條件:檢 測(cè)波長(zhǎng):〇min,236nm,20min,278nm,理論板數(shù)按連翅苷峰計(jì)算不低于6000。
6. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述梯度洗脫的程序見(jiàn)下表:
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7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于所述供試品溶液的制備: 連翹藥材:取藥材l_2g,置錐形瓶中,加40%甲醇25-50ml,搖勻,稱重,超聲2小時(shí),補(bǔ) 重,用0. 22ym的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得;或 含連翹產(chǎn)品:精密量取本品lml(或0.5g)置5ml量瓶中,加40%甲醇稀釋至刻度,搖 勻,用0. 22ym的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得。
8. 根據(jù)權(quán)利要求4-7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法,其特征在于,該方法包括以下步驟: 對(duì)照品溶液的制備:取五福花苷酸對(duì)照品適量,精密稱定,加40%甲醇制成每lml含 100ug的溶液,即得; 供試品溶液的制備: 連翹藥材:取藥材l_2g,置錐形瓶中,加40%甲醇25-50ml,搖勻,稱重,超聲2小時(shí),補(bǔ) 重,用0. 22ym的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得;或 含連翹產(chǎn)品:精密量取本品lml(或0.5g)至5ml量瓶中,加40%甲醇稀釋至刻度,搖 勻,用0. 22ym的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得; 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):色譜柱:AgilentZorbaxEclipse父08-(:18(150111111\4.61111111.(1.,511111),配父08-(:18預(yù)柱 ;流動(dòng)相:以0.05%甲酸乙腈溶液為 流動(dòng)相A,以0. 05%甲酸溶液為流動(dòng)相B,線性梯度洗脫程序見(jiàn)下表;流速:0. 9ml/min;檢 測(cè)波長(zhǎng):〇min236nm,20min278nm;柱溫:20°C;進(jìn)樣量:5iU;
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9.根據(jù)權(quán)利要求4-7任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法,其特征在于,該方法包括以下步驟: 對(duì)照品溶液制備:取連翹苷對(duì)照品適量,精密稱定,加40 %甲醇制成每lml含 200-260yg的溶液,即得; 對(duì)照藥材溶液制備:取連翹對(duì)照藥材〇. 1-0. 5g至5ml量瓶中,精密稱定,加40%甲醇 至近5ml,密塞,超聲處理2小時(shí),功率250W,頻率40kHz,放冷,加40%甲醇至刻度,搖勻, lOOOOrpm離心lOmin,取上清液,再用0. 22ym的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得; 供試品溶液制備: 連翹藥材:取藥材l_2g,置錐形瓶中,加40%甲醇25-50ml,搖勻,稱重,超聲2小時(shí),補(bǔ) 重,用0. 22ym的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得;或 含連翹產(chǎn)品:精密量取本品〇. 5-2ml(或0. 5-2g)至5ml量瓶中,加40%甲醇稀釋至刻 度,搖勻,用〇. 22 的微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液即得; 色譜條件:色譜柱:AgilentZorbaxEclipseXDB-C18(150mmX4.6mmi.d.,5um),配 XDB-C18預(yù)柱;流動(dòng)相:(0.01 %-0.4%)(甲酸、乙酸、磷酸)乙腈溶液(A)-(0.01 %-0.4%)(甲酸、乙酸、磷酸)溶液(B),按照線性梯度洗脫表運(yùn)行41min,具體見(jiàn)下表;色譜圖記錄 35min ;流速:0? 80-1. 10ml/min ;柱溫:20-25°C;進(jìn)樣量:2-10 iil,檢測(cè)器:二極管陣列檢測(cè) 器,定性鑒別條件:波長(zhǎng)掃描范圍:190-400nm,檢測(cè)波長(zhǎng):236nm,278nm ;定量檢測(cè)條件:檢 測(cè)波長(zhǎng):〇min,236nm,20min,278nm ;
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10.權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法在檢測(cè)連翹及含連翹產(chǎn)品的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104483411SQ201410835171
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年12月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月29日
【發(fā)明者】方同華, 邵青, 葛志偉, 岳大彪, 許照芹, 周廣紅, 席桂才, 代喜國(guó), 王倩, 馮慧, 賈文娟 申請(qǐng)人:黑龍江珍寶島藥業(yè)股份有限公司