一種快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法。該方法包括如下步驟：（1）向血必凈注射液中添加不同質(zhì)量的吐溫-80，配制至少15種含有不同濃度吐溫-80的血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品；（2）采集所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的近紅外光譜圖；（3）采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，建立所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的含量與所述近紅外光譜圖之間的校正模型；（4）采集待測(cè)血必凈注射液的近紅外光譜圖，并輸入至所述校正模型中，即得到待測(cè)血必凈注射液中吐溫-80的含量。本發(fā)明方法作為一種快速測(cè)定方法，亦可用于生產(chǎn)過(guò)程中血必凈注射液關(guān)鍵生產(chǎn)工藝點(diǎn)的中間體的快速在線(xiàn)測(cè)定，為生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制提供一種實(shí)時(shí)在線(xiàn)快速的檢測(cè)方法。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法，具體涉及一種近紅外光譜法快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法，屬于中藥注射液的質(zhì)量檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]中藥注射液按照《中國(guó)藥典》(2010年版)的定義是“系指藥材經(jīng)提取、純化后制成的供注入體內(nèi)的溶液、乳狀液及供臨用前配制成溶液的粉末或濃溶液的無(wú)菌制劑”。血必凈注射液是由紅花、赤芍、川芎、丹參、當(dāng)歸等中藥材經(jīng)過(guò)現(xiàn)代生產(chǎn)工藝，并輔以適當(dāng)輔料制成的現(xiàn)代中藥制劑，其具有活血化瘀、疏通經(jīng)絡(luò)、潰散毒邪的作用。中藥注射液通過(guò)血管給藥方式大大提聞了中藥對(duì)人身的藥物有效供給和生物利用率，并進(jìn)而提聞了功效。目如，中藥注射液在心腦血管疾病、抗腫瘤、抗細(xì)菌感染等方面有明顯長(zhǎng)處。但是中藥注射液(血必凈注射液)的不良反應(yīng)時(shí)有發(fā)生，嚴(yán)重危害著患者的身體健康，提不我們必須進(jìn)一步提聞中藥注射液的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，作為質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究中重要的一項(xiàng)內(nèi)容一吐溫-80，目前仍采用傳統(tǒng)方法測(cè)定，但是這種方法需要繁瑣操作、耗時(shí)長(zhǎng)等局限性，且該操作只能離線(xiàn)操作，需要對(duì)待分析樣品進(jìn)行相應(yīng)的預(yù)處理，無(wú)法及時(shí)反饋待測(cè)樣品的質(zhì)量問(wèn)題，存在分析結(jié)果滯后，費(fèi)力費(fèi)時(shí)等不足，這些不利于血必凈注射液的在線(xiàn)快速質(zhì)量分析，提高生產(chǎn)效率，不適合中藥現(xiàn)代化生產(chǎn)發(fā)展的需要。因此，迫切需要研究一種快速、高效、準(zhǔn)確且能實(shí)現(xiàn)在線(xiàn)監(jiān)測(cè)的分析檢測(cè)方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法，本發(fā)明的方法能夠有效實(shí)現(xiàn)血必凈注射液中吐溫-80的快速測(cè)定，提高了生產(chǎn)效率。
[0004]本發(fā)明所提供的快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法，包括如下步驟:
[0005](I)向血必凈注射液中添加不同質(zhì)量的吐溫-80，配制至少15種含有不同濃度吐溫-80的血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品；
[0006](2)采集所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的近紅外光譜圖；
[0007](3)采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，建立所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的含量與所述近紅外光譜圖之間的校正模型；
[0008](4)采集待測(cè)血必凈注射液的近紅外光譜圖，并輸入至所述校正模型中，即得到待測(cè)血必凈注射液中吐溫-80的含量。
[0009]上述的方法中，步驟(I)中，所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的質(zhì)量百分含量可為O?2.5%，具體可以0.05%作為間隔濃度梯度；
[0010]配制標(biāo)準(zhǔn)品所用的血必凈注射液中不含有吐溫-80 ；
[0011]該步驟中，需要注意的是，要選擇具有代表性的含有不同濃度吐溫-80的血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品:根據(jù)樣品的生產(chǎn)廠家、批次、年份等因素，應(yīng)盡可能的增大這些因子的變異范圍，以得到代表性盡可能好的校正樣本集。
[0012]上述的方法中，步驟(2)中，采集所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品在波長(zhǎng)為800?2500nm(波數(shù)為12000?4000cm-l)的近紅外光下的近紅外光譜圖；
[0013]步驟(4)中，采集所述待測(cè)血必凈注射液在波長(zhǎng)為800?2500nm(波數(shù)為12000?4000cm-l)的近紅外光下的近紅外光譜圖；
[0014]具體可采用在線(xiàn)近紅外光譜儀或者便攜式近紅外光譜儀進(jìn)行光譜數(shù)據(jù)的采集。
[0015]上述的方法中，步驟(3)中，在建立所述校正模型之前，所述方法還包括對(duì)所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的近紅外光譜圖進(jìn)行預(yù)處理的步驟，所述預(yù)處理的步驟可為卷積平滑、一階卷積求導(dǎo)、二階卷積求導(dǎo)、多元散色校正、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變換和歸一化中至少一種。
[0016]使用本發(fā)明的方法時(shí)，校正模型需要不斷的更新修正與維護(hù)。當(dāng)樣品的測(cè)定條件(時(shí)間或者空間)發(fā)生改變時(shí)，必須進(jìn)行校驗(yàn)，如果發(fā)現(xiàn)模型的預(yù)測(cè)能力降低，就需要在校正樣品集中增加這一檢驗(yàn)樣品，并重新按照本發(fā)明的上述步驟修改校正樣本集。一個(gè)預(yù)測(cè)效果良好且穩(wěn)定的模型需要不斷的進(jìn)行完善，才能在實(shí)際應(yīng)用中發(fā)揮最大作用。
[0017]上述的方法中，步驟(3)中，將所述校正模型輸入至化學(xué)計(jì)量學(xué)分析軟件中，這樣，當(dāng)向所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析軟件中輸入紅外譜圖參數(shù)時(shí)，就會(huì)輸出吐溫-80的含量。
[0018]上述的方法中，所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析軟件可為Matlab V7.0、0PUS7.0、UnscrambIer9.7 和 TQ 中任一種。
[0019]本發(fā)明提供的方法具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0020]本發(fā)明的血必凈注射液中吐溫-80的快速測(cè)定方法快速簡(jiǎn)單，準(zhǔn)確可靠,重現(xiàn)性好；本發(fā)明方法作為一種應(yīng)用前景極好的快速質(zhì)量控制方法，可以解決血必凈注射液傳統(tǒng)離線(xiàn)測(cè)定耗時(shí)長(zhǎng)、效率低、檢測(cè)滯后等問(wèn)題，同時(shí)為血必凈注射液等品種的質(zhì)量提升提供有力的技術(shù)保障；本發(fā)明方法作為一種快速測(cè)定方法，亦可用于生產(chǎn)過(guò)程中血必凈注射液關(guān)鍵生產(chǎn)工藝點(diǎn)的中間體的快速在線(xiàn)測(cè)定，為生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量控制提供一種實(shí)時(shí)在線(xiàn)快速的檢測(cè)方法。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0021]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1中血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的近紅外光譜圖(其中，圖1 (A)為原始光譜；圖1 (B)為無(wú)預(yù)處理光譜圖；圖1 (C)為卷積平滑后的光譜；圖1 (D)為一階卷積求導(dǎo)后的光譜；圖1 (E)為二階卷積求導(dǎo)后的光譜；圖1 (F)為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變換后的光譜；圖1 (G)為多元散色校正后的光譜；圖1 (H)為歸一化后的光譜；圖1 (I)為一階卷積求導(dǎo)與多元散色校正后的光譜)
【具體實(shí)施方式】
[0022]下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。
[0023]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無(wú)特殊說(shuō)明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0024]實(shí)施例1、快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量
[0025]( I)建立血必凈注射液校正模型樣本集
[0026]采用比重法配制含有不同濃度吐溫-80的血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品，吐溫-80的濃度為O?2.5%(g/g)，且以0.05%作為一個(gè)間隔梯度，均勻分布的吐溫-80標(biāo)準(zhǔn)溶液51個(gè)，混合均勻，備用；
[0027]收集血必凈注射液代表性樣品共4批次4個(gè)樣品，其中I批次為陰性對(duì)照樣品(按照同樣工藝生產(chǎn)，不含吐溫-80，其他均與血必凈注射液一致)，取原液，備用；
[0028]利用近紅外光譜儀采集血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品原始光譜數(shù)據(jù):在室溫(15?30°C)下，校正集每個(gè)樣品各取IMl，利用TENS0R37型紅外光譜儀(德國(guó)布魯克光譜儀器公司，德國(guó)，光源:鹵鎢燈，檢測(cè)器=InGaAs檢測(cè)器，分辨率JcnT1，掃描次數(shù):32次，掃描光譜范圍:12000?4000CHT1，光程:2mm)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，得到血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的原始近紅外光譜數(shù)據(jù)；
[0029](2)血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的測(cè)定
[0030]按照血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的標(biāo)示量0.14% (g/g)，記為其真實(shí)值。
[0031](3)校正模型的建立與檢驗(yàn)
[0032]將步驟(I)獲得的血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的原始數(shù)據(jù)經(jīng)過(guò)光譜預(yù)處理和波長(zhǎng)范圍選擇，以最佳回歸算法對(duì)得到的吐溫-80含量特征光譜信息和吐溫-80的含量值進(jìn)行關(guān)聯(lián)，建立相應(yīng)校正模型；然后采用一定的參數(shù)檢驗(yàn)(RMSECV、SEC、R2)比較校正模型，篩選出最優(yōu)的校正模型，備用；
[0033]校正集樣品原始光譜經(jīng)過(guò)預(yù)處理方法的篩選和波長(zhǎng)范圍的選擇時(shí)，應(yīng)注意以下問(wèn)題:
[0034](一)、不同的光譜預(yù)處理方法對(duì)校正模型的影響
[0035]在近紅外光譜的采集過(guò)程中，不可避免的由于儀器狀態(tài)、環(huán)境干擾以及測(cè)定條件的細(xì)微差異導(dǎo)致光譜的變化，通過(guò)對(duì)光譜信號(hào)進(jìn)行預(yù)處理以消除此類(lèi)影響，改善模型的性能。本實(shí)施例主要采用了多種預(yù)處理方法:無(wú)預(yù)處理(Nonpretreatment)、卷積平滑(Convolution smoothing, CS)、一階卷積求導(dǎo)(One dimension convolution, 1DC)、二階卷積求導(dǎo)(Two dimension convolution, 2DC)、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變換(Standard normalvariable transformation, SNV)、多兀散色校正(Multiplicative scatter correction,MSC)和歸一化(Normalization)及相互組合算法等方法中的一種或者數(shù)種對(duì)光譜進(jìn)行優(yōu)化。原始光譜與部分優(yōu)化后的光譜如圖1所示，其中，圖1 (A)為原始光譜；圖1 (B)為無(wú)預(yù)處理光譜圖；圖(C)為卷積平滑后的光譜；圖1 (D)為一階卷積求導(dǎo)后的光譜；圖1 (E)為二階卷積求導(dǎo)后的光譜；圖1 (F)為標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變換后的光譜；圖1 (G)為多元散色校正后的光譜；圖1 (H)為歸一化后的光譜；圖1 (I)為一階卷積求導(dǎo)與多元散色校正后的光
-1'TfeP曰。
[0036](二 )、不同波長(zhǎng)范圍對(duì)校正模型的影響
[0037]在近紅外光譜區(qū)域，不同波長(zhǎng)的光譜吸收信息對(duì)于最后建立的模型的貢獻(xiàn)價(jià)值不同，在特定的波長(zhǎng)范圍處，針對(duì)特定組分的吸收強(qiáng)度可能小于雜質(zhì)的吸收或者干擾因素影響，且難以抽取對(duì)特征信息進(jìn)行有效提取。采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法尤其偏最小二乘法可以對(duì)全譜數(shù)據(jù)信息進(jìn)行處理，但是為了改善模型的性能，提高計(jì)算速度，應(yīng)該在建模過(guò)程中對(duì)光譜的波長(zhǎng)范圍進(jìn)行優(yōu)選。本實(shí)施例主要采用了不同波段選擇方法如全波長(zhǎng)、相關(guān)系數(shù)法、迭代優(yōu)化等方法中的一種或者數(shù)種對(duì)光譜進(jìn)行優(yōu)化。本實(shí)施例采用Matlab V7.0對(duì)不同規(guī)格的預(yù)處理方法和波長(zhǎng)范圍的選擇進(jìn)行矩陣式計(jì)算，篩選出在某一種波長(zhǎng)選擇方法下的最優(yōu)光譜預(yù)處理方法，如表I中所示。[0038]表1不同波長(zhǎng)選擇方法的校正模型參數(shù)
[0039]
【權(quán)利要求】
1.一種快速測(cè)定血必凈注射液中吐溫-80含量的方法，包括如下步驟: (1)向血必凈注射液中添加不同質(zhì)量的吐溫-80，配制至少15種含有不同濃度吐溫-80的血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品； (2)采集所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的近紅外光譜圖； (3)采用化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，建立所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的含量與所述近紅外光譜圖之間的校正模型； (4)采集待測(cè)血必凈注射液的近紅外光譜圖，并輸入至所述校正模型中，即得到待測(cè)血必凈注射液中吐溫-80的含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于:步驟(I)中，所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品中吐溫-80的質(zhì)量百分含量為O?2.5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于:步驟(2)中，采集所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品在波長(zhǎng)為800?2500nm的近紅外光下的近紅外光譜圖； 步驟(4)中，采集所述待測(cè)血必凈注射液在波長(zhǎng)為800?2500nm的近紅外光下的近紅外光譜圖。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，在建立所述校正模型之前，所述方法還包括對(duì)所述血必凈注射液標(biāo)準(zhǔn)品的近紅外光譜圖進(jìn)行預(yù)處理的步驟，所述預(yù)處理的步驟為卷積平滑、一階卷積求導(dǎo)、二階卷積求導(dǎo)、多元散色校正、標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)變量變換和歸一化中至少一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于:步驟(3)中，將所述校正模型輸入至化學(xué)計(jì)量學(xué)分析軟件中。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于:所述化學(xué)計(jì)量學(xué)分析軟件為MatlabV7.0、0PUS7.0、UnscrambIer9.7 和 TQ 中任一種。
【文檔編號(hào)】G01N21/3577GK103940773SQ201410140478
【公開(kāi)日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月9日
【發(fā)明者】梁瓊麟, 肖雪, 羅國(guó)安, 王義明, 孫長(zhǎng)海, 高俊敏, 張桂萍 申請(qǐng)人:清華大學(xué), 天津紅日藥業(yè)股份有限公司