專利名稱：采用spe-gc/ecd測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法
采用SPE-GC/ECD測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于痕量分析技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種采用SPE-GC/ECD測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法。
背景技術(shù)：
腈菌唑?yàn)槿蝾悮⒕鷦?，能夠抑制病原菌表角留醇的生物合成，具有?qiáng)內(nèi)吸性，藥效高、對(duì)作物安全、持效期長(zhǎng)。主要用于防治子囊菌、擔(dān)子菌等病原菌引起的多種病害，對(duì)白粉病、銹病、黑星病、灰斑病、褐斑病具有很好的防效，是一種前景較好的殺菌劑。近年來(lái)隨著腈菌唑在國(guó)內(nèi)外的大量應(yīng)用，其在環(huán)境和農(nóng)產(chǎn)品上的殘留問題日益突出，受到人們的高度關(guān)注。
目前對(duì)腈菌唑在小麥、黃瓜和辣椒等作物和蔬菜上的殘留分析已有相關(guān)報(bào)道，一般是采用丙酮、甲醇提取蔬菜水果中的腈菌唑農(nóng)藥殘留，經(jīng)二氯甲烷萃取與層析柱凈化，用氣相色譜法氮磷檢測(cè)器(NPD)或電子捕獲檢測(cè)器(ECD)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)實(shí)踐發(fā)現(xiàn)，這種殘留分析方法雖然提取效率較高，但存在以下不足:1)由于采用丙酮、甲醇作為提取劑，糖類、脂肪、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)也容易被提取出來(lái)，對(duì)腈菌唑的檢測(cè)存在較大的干擾，雖然用二氯甲烷多次萃取，但增加了操作步驟，不僅增加了工作量，而且容易造成誤差。2)提取劑和水相難分離，使得提取和凈化過程相對(duì)繁瑣。3)采用柱層析的方法不僅操作復(fù)雜，而且重現(xiàn)性差，并不適應(yīng)于煙草類含大量色素、油脂、雜質(zhì)的樣品，凈化不當(dāng)，雜質(zhì)峰極易干擾檢測(cè)結(jié)果。
但是目前的檢測(cè)方法如果用來(lái)檢測(cè)煙葉中腈菌唑殘留量存在的缺陷是:干擾較多，尤其是煙堿和蛋白質(zhì)類等雜質(zhì)容易對(duì)腈菌唑殘留量的檢測(cè)形成干擾。煙葉中煙堿含量較多，煙堿含量可達(dá)1_3%，煙葉中蛋白質(zhì)含量也非常高，一般可達(dá)15%，最多可達(dá)到17%。上述方法雖然操作簡(jiǎn)便，但是并不能有效去除煙葉中的煙堿和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。在檢測(cè)時(shí)，煙堿和蛋白質(zhì)的存在容易形成干擾峰，影響對(duì)目標(biāo)物的檢測(cè)準(zhǔn)確性。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)現(xiàn)有腈菌唑檢測(cè)技術(shù)的不足，提供一種操作較簡(jiǎn)單、對(duì)目標(biāo)物干擾少，采用SPE-GC/ECD準(zhǔn)確檢測(cè)煙草中腈菌唑殘留的檢測(cè)方法。該方法具有簡(jiǎn)便迅速、準(zhǔn)確可靠的特點(diǎn)，對(duì)指導(dǎo)腈菌唑在煙草上的安全合理使用，控制煙草中腈菌唑殘留具有重要價(jià)值。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，
一種采用SPE-GC/E⑶測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，包括以下步驟:
(I)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:稱取腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑溶解定容，制成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋，配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液；
(2)提取:準(zhǔn)確稱取鮮煙葉樣品置于錐形瓶中，然后加入適量酸性乙腈溶液，震蕩提取后加氯化鈉靜置分層，再用無(wú)水硫酸鈉除水，濃縮近干；
(3)凈化:對(duì)步驟(2)所得的濃縮殘留物進(jìn)行凈化分離，先將濃縮殘留物用丙酮-正己烷混合溶液溶解，然后轉(zhuǎn)入丙酮-正己烷混合溶液預(yù)淋洗的弗羅里硅土固相小柱中，利用丙酮-正己烷混合溶液溶劑進(jìn)行淋洗，收集淋洗液，濃縮，定容；
(4)儀器檢測(cè):待儀器狀態(tài)穩(wěn)定后，用第(I)步中的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣，氣相色譜檢測(cè)，在此基礎(chǔ)上，對(duì)第(3)步收集的凈化樣品進(jìn)行氣相色譜檢測(cè)；
(5)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(6)結(jié)果分析:按以下公式計(jì)算試樣中腈菌唑的含量
權(quán)利要求
1.一種采用SPE-GC/E⑶測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于包括以下步驟: (I)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:稱取腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑溶解定容，制成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋，配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液； (2)提取:準(zhǔn)確稱取煙葉樣品置于錐形瓶中，然后加入適量酸性乙腈溶液，震蕩提取后加氯化鈉靜置分層，再用無(wú)水硫酸鈉除水，濃縮近干； (3)凈化:對(duì)步驟(2)所得的濃縮殘留物進(jìn)行凈化，先將濃縮殘留物用丙酮-正己烷混合溶液溶解，然后轉(zhuǎn)入丙酮-正己烷混合溶液預(yù)淋洗的弗羅里硅土固相小柱中，利用丙酮-正己烷混合溶液溶劑進(jìn)行淋洗，收集淋洗液，濃縮，定容； (4)儀器檢測(cè):待儀器狀態(tài)穩(wěn)定后，用第(I)步中的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)樣，氣相色譜檢測(cè)，在此基礎(chǔ)上，對(duì)第(3)步收集的凈化樣品進(jìn)行氣相色譜檢測(cè)； (5)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立:以進(jìn)樣濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線； (6)結(jié)果分析:按以下公式計(jì)算試樣中腈菌唑的含量 Cix.Vix S2 X V2 ~ FsxSvkW R一樣品中腈菌唑殘留量，單位mg/kg ； C1 一標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位mg/L ； V1 一標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣體積，單位ML ； V2—樣品溶液最終定容體積，單位mL ； V3—樣品溶液進(jìn)樣體積，單位Λ ； 51—標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高，AU； 52—樣品溶液的峰高，AU； W—樣品稱取質(zhì)量，單位g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(5)中的氣相色譜檢測(cè)條件如下:氣相色譜儀采用電子捕獲檢測(cè)器，Agilent 6890N ； 色譜柱:熔融毛細(xì)管柱DB-1，30 mX0.32 mmX0.25 μπι ； 檢測(cè)條件:進(jìn)樣口溫度230°C，檢測(cè)器溫度30(TC，程序升溫； 柱溫升溫過程:初始溫度150°C，以5°C /min升至280°C，保持10 min ； 進(jìn)樣量:1 ML。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(2)中的酸性乙腈溶液，是指醋酸和乙腈體積比為1:99的混合溶液；適量是指酸性乙腈溶液能夠保證煙葉完全浸泡。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(2)中的震蕩提取，是指在震蕩提取器上震蕩提取40 60 min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(2)中的濃縮，是指用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將提取樣品在40°C 50°C的范圍內(nèi)濃縮近干。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(3)中的丙酮-正己烷混合溶液是指丙酮和正己烷體積比為2:8的混合溶液。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(I)中的所述系列濃度，是指5.0,2.0、1.0,0.5,0.1,0.05 mg/L的腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)曲線工作液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(I)中的有機(jī)溶劑為丙酮。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，其特征在于:所述步驟(I)中的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液是指 制成100 mg/L儲(chǔ)備液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種采用SPE-GC/ECD測(cè)定煙草中腈菌唑殘留量的方法，包括以下步驟(1)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)品，用有機(jī)溶劑溶解定容，制成標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液逐級(jí)稀釋，配制成系列濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液；(2)提取試樣中殘留；(3)凈化以丙酮-正己烷混合溶液溶解，然后轉(zhuǎn)入丙酮-正己烷混合溶液預(yù)淋洗的弗羅里硅土固相小柱中，利用丙酮-正己烷混合溶液淋洗；(5)利用氣相色譜檢測(cè)樣品中腈菌唑殘留量；(4)標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立;(6)計(jì)算分析腈菌唑殘留量。本發(fā)明的檢測(cè)方法具有簡(jiǎn)便迅速、準(zhǔn)確可靠的特點(diǎn)，對(duì)指導(dǎo)腈菌唑在煙草上的安全合理使用，控制煙草中腈菌唑殘留具有重要價(jià)值。
文檔編號(hào)G01N30/88GK103163265SQ201310086339
公開日2013年6月19日 申請(qǐng)日期2013年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月18日
發(fā)明者王秀國(guó), 李義強(qiáng), 王鳳龍, 孔凡玉, 徐金麗, 徐光軍, 孫惠青, 鄭曉 申請(qǐng)人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院煙草研究所