專(zhuān)利名稱(chēng)：苦皮藤素原藥、以及它的制備方法和質(zhì)量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物源農(nóng)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及了一種苦皮藤素原藥及其水乳劑，以及它們的制備方法和質(zhì)量檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
苦皮藤(Celastrusangulatus MaXim)系衛(wèi)矛科(Celastraceae)南蛇藤屬(Celastrus)多年生藤狀灌木植物，分布在河北、山東、河南、陜西、湖北、甘肅、江蘇、安徽等省[中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志.科學(xué)出版社，1999，45 (3): 102]。苦皮藤是我國(guó)傳統(tǒng)的殺蟲(chóng)植物，民間用其根、皮作蔬菜等農(nóng)作物的天然無(wú)毒殺蟲(chóng)劑，故得名“菜藥”、“蘿卜藥”研究證明其中所含的生物活性成分主要是β - 二氫沉香呋喃多元醇酯類(lèi)化合物及其生物堿，這類(lèi)化合物一般具有強(qiáng)殺蟲(chóng)，抗腫瘤等生理活性。[①趙天增，等.苦 皮藤中一個(gè)倍半菇醇醋新活性化合物的結(jié)構(gòu).中草藥，1999，30(4) :241.②吳文君.植物殺蟲(chóng)劑苦皮藤素研究與應(yīng)用[M].化學(xué)工業(yè)出版社，2010]。目前文獻(xiàn)報(bào)道的苦皮藤的提取方法均為溶劑回流法，提取溶劑包括石油醚、苯、丙酮、乙醚、甲苯、甲醇、乙醇等；其中工業(yè)化生產(chǎn)大多采用苯[朱文麗，等.苦皮藤根皮的化學(xué)成分.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(13),271-276.]。雖然乙醇為環(huán)保溶劑，但與其他溶劑提取物相比，苦皮藤乙醇提取物化學(xué)成分極其復(fù)雜、多樣，含有大量黃酮、衛(wèi)矛醇、三萜等其他成分，β - 二氫沉香呋喃多元醇酯類(lèi)化合物含量很低(如苦皮素A含量O. 5%左右)左右，溶解性較差，難于制成相應(yīng)劑型。因此，苦皮藤基本不采用乙醇提取。大孔吸附樹(shù)脂(macroporous absorption resin)是近40余年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一類(lèi)有機(jī)高聚物吸附劑，利用其多孔結(jié)構(gòu)和選擇性吸附功能可從中藥提取液中分離精制有效成分或有效部位，最大限度地去粗取精，并可實(shí)現(xiàn)大規(guī)模工業(yè)化。目前大孔吸附樹(shù)脂在植物源農(nóng)藥領(lǐng)域已有應(yīng)用，但應(yīng)用于苦皮藤相關(guān)產(chǎn)品的工業(yè)化生產(chǎn)和乙醇提取物的分離均未見(jiàn)報(bào)道?？嗥ぬ偎氐钠焚|(zhì)不在于某個(gè)單一成分，其效果是多個(gè)成分協(xié)同配比的結(jié)果。研究證明苦皮藤中主要?dú)⑾x(chóng)活性成分是以4-ΟΗ-β - 二氫沉香呋喃倍半萜骨架的多元醇酯化合物及其生物堿，統(tǒng)稱(chēng)苦皮藤素?？嗥ぬ偎鼗瘜W(xué)成分非常復(fù)雜，含有以苦皮素B、苦皮素A為主的多種殺蟲(chóng)成分，但目前苦皮藤原藥中苦皮藤素組分的檢測(cè)方法一是測(cè)定苦皮藤原藥中水解后產(chǎn)生的苯甲酸，操作步驟極其復(fù)雜，結(jié)果不可靠，可行性差；二是參照制劑僅對(duì)其中一個(gè)組分苦皮素A (或苦皮藤素V)進(jìn)行定量分析[①吳文君，等.植物殺蟲(chóng)劑0. 2%苦皮藤素乳油的研究與開(kāi)發(fā)· Pesticides (農(nóng)藥)，2001，40 (3) : 17.②盧桂榮，等· RP-HPLC法測(cè)定苦皮藤素中苦皮素A的含量.河南科學(xué),2007, 25 (3):395.]。這種針對(duì)單一成分進(jìn)行定量分析的質(zhì)量控制模式不能有效控制苦皮藤原藥的內(nèi)在質(zhì)量，無(wú)法滿(mǎn)足當(dāng)前對(duì)于客觀有效地評(píng)價(jià)和控制苦皮藤產(chǎn)品質(zhì)量的迫切要求。指紋圖譜技術(shù)已成為國(guó)際公認(rèn)的區(qū)別評(píng)價(jià)植物天然產(chǎn)物及其原料的最有效的手段[羅國(guó)安，等.中藥指紋圖譜的分類(lèi)和發(fā)展.中國(guó)新藥雜志，2002，11(1) :46. J0目前關(guān)于苦皮藤提取物及其產(chǎn)品的指紋圖譜未見(jiàn)報(bào)道。
I⑶核磁共振碳譜偶聯(lián)(I⑶13C NMR coupling)指紋圖譜技術(shù)，也叫反門(mén)控去偶核磁共振碳譜偶聯(lián)指紋圖譜技術(shù)，是在已研究多年的核磁共振氫譜(1H NMR)指紋圖譜技術(shù)[趙天增，等.1HNMR指紋法鑒定植物中藥.中草藥，2000，31 (11):868-870.]的基礎(chǔ)上聯(lián)合其他技術(shù)(例如目前應(yīng)用最廣泛的高效液相(HPLC)指紋圖譜技術(shù))提出的一種新的非單一手段綜合指紋圖譜技術(shù)。隨著藥品、食品安全日益受到國(guó)家和社會(huì)的高度重視，可廣泛應(yīng)用于無(wú)公害蔬菜、農(nóng)作物和非作物類(lèi)的害蟲(chóng)防治的苦皮藤素需求量很大，為IG D核磁共振碳譜偶聯(lián)指紋圖譜技術(shù)的應(yīng)用提供了廣闊的基礎(chǔ)?？嗥ぬ偎卦幖捌?制劑的IGD核磁共振碳譜偶聯(lián)指紋圖譜技術(shù)的研究與應(yīng)用，不僅可以解決其中活性成分的定性問(wèn)題，也為加強(qiáng)其內(nèi)在成分研究的系統(tǒng)化與標(biāo)準(zhǔn)化，加快植物源農(nóng)藥苦皮藤素現(xiàn)代化的發(fā)展，實(shí)現(xiàn)與國(guó)際接軌提供了科學(xué)的保證。隨著該技術(shù)在其他中藥材及其提取物、植物源農(nóng)藥中的推廣應(yīng)用，該技術(shù)的重大科學(xué)價(jià)值必將日趨突出。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決植物源農(nóng)藥現(xiàn)有技術(shù)、質(zhì)量等方面存在的問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于，提供一種優(yōu)良的植物源農(nóng)藥苦皮藤素原藥及其水乳劑。本發(fā)明的另一目的在于，提供一種所述苦皮藤素原藥及其水乳劑的制備方法。本發(fā)明的又一目的在于，提供一種所述苦皮藤素原藥及其水乳劑的質(zhì)量檢測(cè)方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的一種苦皮藤素原藥，其中含有以下質(zhì)量百分含量的活性成分苦皮素A6. (T9. 5%，苦皮素B7. 5 9. 5%，苦皮素C和苦皮素F4. 0 6· 5%，苦皮素G6. 5" 0. 5%,苦皮素Α、苦皮素Ε、苦皮藤素C和苦皮藤素ΧΙΧ11. 5 15. 5%,苦皮素Η3. 5飛.0%。本發(fā)明苦皮藤素原藥中的所述活性成分均為4-ΟΗ-β - 二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物。其中，苦皮藤素C的質(zhì)量百分含量為O. 5^2. 0%，苦皮藤素XIX的質(zhì)量百分含量為O. 4 I. 5%。本發(fā)明所述苦皮藤原藥中各活性成分(4-ΟΗ-β-二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物)總的質(zhì)量百分含量不小于35%。進(jìn)一步地，苦皮藤原藥中各活性成分總的質(zhì)量百分含量為35. (Γ45. 0%。更進(jìn)一步地，品種為陜西寶雞的苦皮藤原藥中活性成分總的質(zhì)量百分含量為35. (Γ38. 5%，品種為陜西華縣的苦皮藤原藥中活性成分總的質(zhì)量百分含量為42. (Γ45. 0%。本發(fā)明提供的苦皮藤素原藥為固體狀。本發(fā)明提供的苦皮藤素原藥的制備方法包括稱(chēng)取苦皮藤根或/和皮粉碎，加入體積為2飛倍量、9(Γ95%的乙醇于6(T80°C下回流或超聲提取2 3次，每次提取廣2小時(shí)，過(guò)濾后合并濾液，減壓濃縮；取濃縮后的濾液，用其重量為廣2倍量的大孔吸附樹(shù)脂裝柱，先后以20 25%乙醇、40 50%乙醇、75% 85%乙醇和90 95%乙醇沖柱，收集75% 85%乙醇洗脫液，減壓蒸干，即得苦皮藤素原藥。這里表示乙醇濃度的百分?jǐn)?shù)均為質(zhì)量比。進(jìn)一步地，所述大孔吸附樹(shù)脂的型號(hào)為HP-20、D-101、D-201或SP-70，優(yōu)選HP-20，D-101。進(jìn)一步地，所述大孔吸附樹(shù)脂的徑高比為8: f 15:1，優(yōu)選1(Γ12:1。進(jìn)一步地，苦皮藤根或/和皮粉碎后過(guò)1(Γ24目篩。進(jìn)一 步地，濃縮后濾液的密度為O. 9(Tl. 19。進(jìn)一步地，用于沖柱的乙醇的體積為濃縮后濾液的2(Γ40倍，優(yōu)選四次沖柱的體積分別為25，30，40，20倍?？嗥ぬ俑?和皮中的活性成分，除了本發(fā)明苦皮藤素原藥所述的成分外，還包括苦皮素U、x ;苦皮素P、苦皮藤素IV、苦皮藤素VII、苦皮藤素XIX ;苦皮素J、苦皮藤素III等4-ΟΗ-β - 二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物，以及黃酮、生物堿、三萜等其他類(lèi)別的成分。本發(fā)明提供的苦皮藤原藥，可以制成水懸浮劑、可濕性粉劑、水乳劑等各種劑型用于植物源農(nóng)藥殺蟲(chóng)劑。本發(fā)明提供的一種苦皮藤素水乳劑，包含所述苦皮藤素原藥。本發(fā)明提供的所述苦皮藤素水乳劑，包括以下重量份的成分所述苦皮藤素原藥8 10份，乳化劑8 12份，抗凍劑3 5份。本發(fā)明提供的所述苦皮藤素水乳劑，優(yōu)選地，包括以下重量份的成分所述苦皮藤素原藥8、份，乳化劑 Γ Ο份，抗凍劑5份。其中，所述乳化劑為烷基芳基聚氧乙烯聚氧丙烯醚或烷基芳基聚氧乙烯聚氧乙烯醚，優(yōu)選烷基芳基聚氧乙烯聚氧丙烯醚。其中，所述抗凍劑為乙二醇或丙二醇，優(yōu)選乙二醇。 本發(fā)明提供的一種苦皮藤素水乳劑，還包括溶劑。其中，溶劑為水。本發(fā)明所述的苦皮藤素水乳劑，其中的輔料，S卩乳化劑、抗凍劑以及溶劑，也可以是本領(lǐng)域的常規(guī)種類(lèi)及用量。還可以使用助劑，也是本領(lǐng)域的常規(guī)選擇。本發(fā)明所述苦皮藤素水乳劑中各活性成分(4-ΟΗ-β-二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物)的總的質(zhì)量百分含量不小于3%。進(jìn)一步地，苦皮藤水乳劑中各活性成分總的質(zhì)量百分含量為3. (Γ4. 0%。更進(jìn)一步地，品種為陜西寶雞的苦皮藤原藥中活性成分總的質(zhì)量百分含量為3. (Γ3. 5%，品種為陜西華縣的苦皮藤原藥中活性成分總的質(zhì)量百分含量為3. (Γ3. 5%。本發(fā)明提供的所述苦皮藤素水乳劑的制備方法，包括將所述苦皮藤素原藥與乳化劑、抗凍劑和溶劑按所述比例混合，即得。本發(fā)明提供的苦皮藤素原藥的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括以下步驟I)對(duì)苦皮藤素原藥進(jìn)行提取，得到含有活性成分組的苦皮藤素原藥特征提取物；2)對(duì)苦皮藤素原藥特征提取物進(jìn)行IGD核磁共振碳譜指紋圖譜檢測(cè)，根據(jù)指紋圖譜得到所述苦皮藤素原藥特征提取物中若干個(gè)活性成分特征峰峰強(qiáng)度；并用相同方式(IGD核磁共振碳譜指紋圖譜)測(cè)定出所述各活性成分相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)參照品的特征峰峰強(qiáng)度；3)通過(guò)定量分析手段測(cè)定得到苦皮藤素原藥中所述標(biāo)準(zhǔn)參照品的絕對(duì)含量；4)利用所述特征峰峰強(qiáng)度(各活性成分特征峰峰強(qiáng)度及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)參照品的特征峰峰強(qiáng)度)的比值和所述絕對(duì)含量，計(jì)算出苦皮藤素原藥中各活性成分的含量及該類(lèi)活性成分的總含量，即活性成分組的含量。其中，步驟I)中，苦皮藤素原藥特征提取物的制備方法，包括稱(chēng)取苦皮藤素原藥，加入體積為6 12倍的氯仿，75 85°C下超聲或回流提取2(T40min，過(guò)濾后減壓濃縮，回收溶劑至干，即得苦皮藤素特征提取物?？嗥ぬ偎卦幪卣魈崛∥锾幚砑皺z測(cè)方法如下取苦皮藤素原藥特征提取物，溶于CDCl3中，作IGD核磁共振碳譜指紋圖譜檢測(cè)。其中，步驟2)中，所述苦皮藤素原藥特征提取物中的活性成分特征峰為C_15吸收峰，其化學(xué)位移為Sc 60. (Γ66. O。進(jìn)一步地，選擇C-8作為特征峰進(jìn)一步區(qū)別苦皮素A、苦皮素E、苦皮藤素C和苦皮藤素XIX，其(C-8)化學(xué)位移為δ c73. 3^74. 7 ;選擇C_9作為特征峰進(jìn)一步區(qū)別苦皮素C、苦皮素F，其(C-9)化學(xué)位移為SJ0. 6 72. 6。其中，步驟2 )中，所述峰強(qiáng)度，可以采用峰高法、面積積分法或重量法計(jì)算。其中，步驟3)中，所述標(biāo)準(zhǔn)參照品的絕對(duì)含量是指用定量分析手段測(cè)定的苦皮藤素原藥中標(biāo)準(zhǔn)參照品的質(zhì)量百分含量。其中，所述定量分析手段為高效液相色譜(HPLC)法。進(jìn)一步地，HPLC法的條件為色譜柱以十八烷基鍵合硅膠為填料，流動(dòng)相為甲醇乙腈和水=(30 40) :(20 30) :(35 45)的混合溶劑，流速為lmL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為242nm。乙腈水優(yōu)選35:25:40。其中，所述標(biāo)準(zhǔn)參照品為苦皮素B。其中，苦皮藤素原藥中各活性成分的含量及該類(lèi)活性成分的總含量計(jì)算是通過(guò)偶聯(lián)計(jì)算公式將IGD核磁共振碳譜和定量分析手段偶聯(lián)，即步驟4)中，計(jì)算各活性成分的含量的偶聯(lián)公式為
權(quán)利要求
1.一種苦皮藤素原藥,含有以下質(zhì)量百分含量的活性成分苦皮素A6. (Γ9. 5%,苦皮素B7. 5 9. 5%，苦皮素C和苦皮素F4. 0 6· 5%，苦皮素G6. 5 10. 5%，苦皮素A、苦皮素E、苦皮藤素C和苦皮藤素XIXl I. 5^15. 5%，苦皮素H3. 5^6. 0% ;所述活性成分均為4-0H- β - 二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求I的苦皮藤素原藥，其特征在于，其中苦皮藤素C的質(zhì)量百分含量為O.5 2. 0%，苦皮藤素XIX的質(zhì)量百分含量為O. ri. 5%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的苦皮藤素原藥，其特征在于，4-ΟΗ-β-二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物總的質(zhì)量百分含量不小于35% ;優(yōu)選為35. (Γ45. 0%。
4.權(quán)利要求Γ3任意一項(xiàng)所述苦皮藤素原藥的制備方法，包括稱(chēng)取苦皮藤根或/和皮粉碎，加入體積為2飛倍量、9(Γ95%的乙醇于6(T80°C下回流或超聲提取2 3次，每次提取廣2小時(shí)，過(guò)濾后合并濾液，減壓濃縮；取濃縮后的濾液，用其重量為廣2倍量的大孔吸附樹(shù)脂裝柱，先后以20 25%乙醇、40 50%乙醇、75% 85%乙醇和90 95%乙醇沖柱，收集709Γ80%乙醇洗脫液，減壓蒸干，即得苦皮藤素原藥。
5.一種苦皮藤素水乳劑，包含權(quán)利要求廣3任意一項(xiàng)所述的苦皮藤素原藥。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的苦皮藤素水乳劑，其特征在于，包括以下重量份的成分所述苦皮藤素原藥8 10份，乳化劑8 12份，抗凍劑3飛份。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的苦皮藤素水乳劑，其特征在于，所述乳化劑為烷基芳基聚氧乙烯聚氧丙烯醚或烷基芳基聚氧乙烯聚氧乙烯醚；所述抗凍劑為乙二醇或丙二醇。
8.根據(jù)權(quán)利要求5 7任意一項(xiàng)所述的苦皮藤素水乳劑，其特征在于，該苦皮藤素水乳劑中4-ΟΗ-β - 二氫沉香呋喃倍半萜多醇酯類(lèi)化合物的總的質(zhì)量百分含量不小于3% ;優(yōu)選為 3. 0 4· 0%。
9.一種權(quán)利要求f 3任意一項(xiàng)所述苦皮藤素原藥的質(zhì)量檢測(cè)方法，包括以下步驟 1)對(duì)所述苦皮藤素原藥進(jìn)行提取，得到含有活性成分組的苦皮藤素原藥特征提取物； 2)對(duì)苦皮藤素原藥特征提取物進(jìn)行IGD核磁共振碳譜指紋圖譜檢測(cè)，根據(jù)指紋圖譜得到所述苦皮藤素原藥特征提取物中若干個(gè)活性成分特征峰峰強(qiáng)度；并用相同方式測(cè)定出所述各活性成分相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)參照品的特征峰峰強(qiáng)度； 3)通過(guò)定量分析手段測(cè)定得到苦皮藤素原藥中所述標(biāo)準(zhǔn)參照品的絕對(duì)含量； 4)利用各活性成分特征峰峰強(qiáng)度及相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)參照品的特征峰峰強(qiáng)度的比值和所述絕對(duì)含量，計(jì)算出苦皮藤素原藥中各活性成分的含量及活性成分組的含量。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述苦皮藤素原藥特征提取物的制備方法，包括稱(chēng)取苦皮藤素原藥，加入體積為6 12倍的氯仿，75 85°C下超聲或回流提取2(T40min，過(guò)濾后減壓濃縮，回收溶劑至干，即得苦皮藤素原藥特征提取物。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟2)中，所述苦皮藤素原藥特征提取物中的活性成分特征峰為C-15吸收峰，其化學(xué)位移為δ C60. (Γ66. O ;優(yōu)選地，選擇C-8作為特征峰進(jìn)一步區(qū)別苦皮素Α、苦皮素Ε、苦皮藤素C和苦皮藤素XIX，C-8的化學(xué)位移為δ C73. 3^74. 7 ;選擇C-9作為特征峰進(jìn)一步區(qū)別苦皮素C和苦皮素F，C-9的化學(xué)位移為SC70. 6 72. 6。
12.根據(jù)權(quán)利要求 Γ I任意一項(xiàng)所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟3)中，所述標(biāo)準(zhǔn)參照品的絕對(duì)含量是指用定量分析手段測(cè)定的苦皮藤素原藥中標(biāo)準(zhǔn)參照品的質(zhì)量百分含量；所述定量分析手段為高效液相色譜法。
13.根據(jù)權(quán)利要求擴(kuò)12任意一項(xiàng)所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)參照品為苦皮素B。
14.根據(jù)權(quán)利要求擴(kuò)13任意一項(xiàng)所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，步驟4)中，計(jì)算各活性成分的含量的偶聯(lián)公式為
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于，計(jì)算苦皮藤素原藥中各活性成分的系數(shù)和總系數(shù)的公式為
16.一種權(quán)利要求51任意一項(xiàng)所述苦皮藤素水乳劑的質(zhì)量檢測(cè)方法，利用權(quán)利要求9^15任意一項(xiàng)所述方法檢測(cè)得到苦皮藤素原藥中各活性成分的含量，再利用以下公式推算出苦皮藤素水乳劑中各活性成分的質(zhì)量百分含量=Xn=X1Fn ;其中 Xn為苦皮藤素水乳劑中某一活性成分質(zhì)量百分含量； X1為用定量分析手段測(cè)定得到的苦皮藤素水乳劑中某一活性成分對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)參照品的絕對(duì)含量； Fn為權(quán)利要求15所述的苦皮藤素原藥中某一活性成分與其對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)參照品質(zhì)量百分含量的比值系數(shù)； 苦皮藤素水乳劑中活性成分組的含量為各活性成分Xn相加之和；該苦皮藤素水乳劑由苦皮藤素原藥制備得到。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種苦皮藤素原藥及其水乳劑，以及它們的制備方法和質(zhì)量檢測(cè)方法。所述苦皮藤素原藥，含有以下質(zhì)量百分含量的活性成分苦皮素A 6.0~9.5%，苦皮素B 7.5~9.5%，苦皮素C和苦皮素F 4.0~6.5%，苦皮素G 6.5~10.5%，苦皮素A、苦皮素E、苦皮藤素C和苦皮藤素XIX 11.5~15.5%，苦皮素H 3.5~6.0%。該苦皮藤素原藥采用大孔吸附樹(shù)脂法制備得到，質(zhì)量檢測(cè)方法采用IGD核磁共振碳譜偶聯(lián)指紋圖譜技術(shù)；本發(fā)明的苦皮藤素原藥含量大幅提高，質(zhì)量檢測(cè)方法準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性、重復(fù)性和可行性也較高。
文檔編號(hào)G01N30/02GK102893989SQ201210374789
公開(kāi)日2013年1月30日 申請(qǐng)日期2012年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月29日
發(fā)明者張海艷, 趙天增, 董建軍, 于立芹, 劉雨晴, 范毅, 郭唯, 常霞, 王偉, 魏悅, 王濤 申請(qǐng)人:河南省科高植物天然產(chǎn)物開(kāi)發(fā)工程技術(shù)有限公司, 河南省生物技術(shù)開(kāi)發(fā)中心