專利名稱：一類羅丹明熒光染料，其制備方法及應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及ー類熒光探針化合物及其制備方法和用途，該化合物適用于精細化工領域中pH的檢測。
背景技術：
溶酶體是細胞內的ー種非常重要的亞細胞器，其內包含能夠分解廢棄材料和細胞碎片的酸性水解酶，他們能夠消化過量的或磨損的細胞器、食物粒子，并且能夠吞沒病毒或細菌，因此溶酶體被喻為細胞的胃部。細胞內的pH是ー個非常重要的生理參數。細胞內質子的濃度并不是均一分布的，如細胞質的PH大約在7. 2左右，線粒體則更偏堿性ー些，而溶酶體的pH為4. 5-5. 5。溶 酶體內的酸度與細胞的很多生物功能密切相關，如水解酶的最佳活性，細胞自噬，細胞凋亡等。因此，檢測溶酶體內的PH具有重要意義。熒光探針具有非侵入性、易操作、能夠實現(xiàn)可視化檢測等特點，受到普遍的重視。目前許多溶酶體的定位染料都包含一條弱堿性鏈，可以使探針向酸性的溶酶體細胞器聚集。弱堿性的定位基團通常包含N，N-甲基或嗎啉，而含氮的官能團往往容易對熒光團產生光誘導電子轉移(PET)作用，使突光團的突光淬滅或降低，如Invitrogen公司設計的LysoSensor系列探針(LysoSensor Yellow/Blue DND-160除外)在中性或喊性條件下熒光信號微弱，而在PH較小的溶酶體環(huán)境中，PET作用被抑制，熒光增強，從而實現(xiàn)對溶酶體內PH的檢測。但是此類探針的缺點是背景熒光較強，導致非特異性定位。除此之夕卜，含氮定位基團的PET作用也限制了探針在溶酶體中對于其他被檢測物的測定，如H2O2(Dayoung Song, Jung Mi Lim, Somin Cho, Su-Jin ParK, Jaeheung Cno, Dongmin Kang, SueGoo Rhee, Youngmin You, and Wonwoo Nam, Chem. Commun. , 2012, 48, 5449-5451 ) 因此開發(fā)ー種不依賴于含氮的溶酶體定位基團具有重要意義。羅丹明類熒光染料具有優(yōu)異的光化學物理性質，例如高的摩爾小光系數、良好的光穩(wěn)定性、高的熒光量子產率等優(yōu)點。其特有的螺環(huán)“開-關”結構，對質子敏感，可用于對PH的檢測，而且可以解決通常pH探針背景熒光較高的弊端。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一類帶有新型溶酶體定位基團的pH探針的合成及應用。本發(fā)明首先公開ー類羅丹明熒光染料，具有如下結構通式I :.盤
權利要求
1.一類羅丹明熒光染料，具有如下結構通式I:
2.權利要求I所述的羅丹明熒光染料，其特征在于所述的Rltl為H或2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基。
3.權利要求2所述的熒光染料，其特征在于所述的Rltl是2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基。
4.權利要求f3中任一權利要求所述的羅丹明熒光染料，其特征在于所述的Rp R2, R3和R4各自獨立地選自氫或乙基；R5、R6和R7各自獨立地選自氫或甲基。
5.權利要求4所述的羅丹明熒光染料，其特征在于所述的RpR2, R3和R4均為乙基。
6.權利要求5所述的羅丹明熒光染料，其特征在于所述的R5、R6和R7均為H。
7.權利要求I所述的羅丹明熒光染料的制備方法，是首先使用式II的化合物與通式為ClCOCH2R11的酰氯反應，然后以四氫呋喃為反應溶劑、在堿存在條件下與通式為HO-R12的醇按照摩爾比1:1飛反應所得；
8.權利要求8所述的制備方法，其特征在于所述的堿是氫化納。
9.權利要求I所述的羅丹明熒光染料在溶酶體熒光特異性標記中的應用。
10.權利要求I所述的羅丹明熒光染料在監(jiān)測細胞凋亡中的應用。
全文摘要
一類羅丹明熒光染料，其制備方法及應用。所述的羅丹明熒光染料具有如下結構通式I。本發(fā)明所述的羅丹明類熒光染料具有優(yōu)異的光化學物理性質，高的摩爾小光系數、良好的光穩(wěn)定性、高的熒光量子產率等優(yōu)點。其特有的螺環(huán)“開-關”結構，對質子敏感，可用于對pH的檢測，而且可以解決通常pH探針背景熒光較高的弊端?？捎糜谌苊阁w熒光特異性標記及監(jiān)測細胞凋亡中的應用。
文檔編號G01N1/30GK102796395SQ20121029451
公開日2012年11月28日 申請日期2012年8月17日 優(yōu)先權日2012年8月17日
發(fā)明者樊江莉, 朱浩, 彭孝軍, 徐群利 申請人:大連理工大學