專利名稱：一種分離和檢測食用植物油中的氧化甘油酯的方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化合物分離檢測領(lǐng)域，涉及一種分離和檢測食用植物油中的氧化甘油酯的方法及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
餐廚廢油脂，即廣義的地溝油，主要包括三大類陰溝油(狹義的地溝油)、泔水油 (潲水油)、煎炸老油。陰溝油是指賓館、酒樓等地溝隔油池中撈取的油膩漂浮物，呈黑褐色液膏狀，有酸腐惡臭氣味。泔水油是指剩飯、剩菜(通稱泔水)收集后的上層浮油，經(jīng)過提煉呈金黃色至暗紅色，有酸腐味。煎炸老油是指在高溫下反復(fù)用于煎炸食品，發(fā)生劣變，不可再繼續(xù)食用的油脂。三類餐廚廢油脂都可通過不同程度地精煉加工來改變其感官性質(zhì)和理化性質(zhì)。餐廚廢油脂的精煉加工工藝簡單，一般先將收集的餐廚廢油脂(水、渣、油混合物)加熱、脫渣，成為粗毛油。再通過加熱和脫色(活性碳、白土、雙氧水等)，成為脫色油。 脫色油再經(jīng)過高溫脫臭，成為脫臭油。以餐廚廢油脂為原料加工生產(chǎn)的粗毛油，以及經(jīng)不同程度精煉加工生產(chǎn)的脫色油和脫臭油，在本專利中都稱為二次油。通過精煉加工餐廚廢油脂，特別是脫臭的二次油，其色澤、氣味、滋味等感官指標(biāo)，以及酸價(jià)和過氧化值等理化指標(biāo)接近或完全達(dá)到國家《食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(GB2716-2005)，難以與合格食用植物油區(qū)分。二次油因餐廚廢油脂來源不同、精煉加工程度不同，不僅亞油酸、亞麻酸等必需脂肪酸，植物留醇、生育酚等油脂伴隨物含量大幅降低，營養(yǎng)價(jià)值顯著降低，而且還殘留數(shù)量不等的重金屬、真菌毒素、油脂氧化物等有毒有害成分。該油被食用以后，特別是長期或大量食用，對人體健康不利。本發(fā)明中所稱摻入食用植物油中的餐廚廢油脂，指上述源于餐廚廢油脂的二次油。餐廚廢油脂多在簡陋的小作坊加工，人員素質(zhì)低，環(huán)境衛(wèi)生差，設(shè)備試劑不符合食品生產(chǎn)要求等。二次油與大豆油、菜籽油、玉米油等普通的食用植物油相比，原料便宜、加工成本低。因此，二次油的價(jià)格，遠(yuǎn)低于普通的大豆油等食用植物油。經(jīng)營二次油的不法分子， 是將二次油摻混至食用植物油中，假冒合格食用植物油銷售。食用植物油中摻入餐廚廢油脂，一般不直接將粗毛油往合格食用植物油中摻兌， 通常是將精煉加工后的脫色油或脫臭油按一定比例混入合格的食用植物油中，假冒合格食用植物油銷售獲利。通常難以從色澤等感官指標(biāo)，甚至酸價(jià)等理化指標(biāo)來鑒別合格食用植物油中是否摻有二次油，特別是摻入的脫臭的二次油。以下為現(xiàn)有的餐廚廢油脂的檢測技術(shù)及存在的不足對于餐廚廢油脂的檢測方法，已有較多的報(bào)道，如下舉八例。現(xiàn)有的各種方法無一例外，都存在特征指標(biāo)專一性不強(qiáng)， 或者檢測靈敏度不高，或者檢測準(zhǔn)確性不高，僅能在一定范圍內(nèi)適用特定類型的餐廚廢油脂的檢測判定。 方法一常規(guī)油脂理化指標(biāo)法根據(jù)目前各類食用植物油相關(guān)的質(zhì)量和衛(wèi)生國家標(biāo)準(zhǔn)，檢測油脂的多種常規(guī)理化指標(biāo)，如酸值、過氧化值、羰基價(jià)等。若這些常規(guī)理化指標(biāo)中有一個(gè)或多個(gè)的檢測數(shù)據(jù)不符合國家標(biāo)準(zhǔn)的強(qiáng)制性規(guī)定，則判定該油脂為餐廚廢油脂。本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷一是餐廚廢油脂可通過精煉，各項(xiàng)常規(guī)理化指標(biāo)可達(dá)到完全符合或接近國家各類質(zhì)量和衛(wèi)生國家標(biāo)準(zhǔn)。二是在食用油脂的生產(chǎn)加工、貯藏運(yùn)輸和使用過程中，有多種不同因素，可使油脂的常規(guī)理化指標(biāo)不符合國家標(biāo)準(zhǔn)，常規(guī)理化指標(biāo)不達(dá)標(biāo)未必是餐廚廢油脂。方法二 膽固醇含量判定法一般植物油中僅含有極其微量(低于50PPM)的膽固醇，而動(dòng)物油中含有大量的膽固醇。餐廚廢油脂常是多種不同來源的廢棄食用油脂混合而成，往往含動(dòng)物油脂。本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷是有的餐飲廢油脂中不含動(dòng)物油，如用于煎炸面制品的煎炸老油等。該方法代表性不足，會造成誤判。而且，目前國內(nèi)檢測油脂中膽固醇含量的主要方法是氣相色譜技術(shù)，其檢測靈敏度較低。當(dāng)食用植物油中摻入的餐廚廢油脂比例少于10%時(shí)，難以檢出其中的膽固醇。方法三薄層色譜檢測極性物法薄層色譜技術(shù)對餐廚廢油脂的二級氧化產(chǎn)物醛、酮類等進(jìn)行分離檢測。本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷是餐廚廢油脂的極性成分醛、酮類物質(zhì)在油脂的深度精煉(如脫臭)過程中，可以大部分被去除，而薄層色譜技術(shù)檢測靈敏度極低，不適于檢測深度精煉的餐廚廢油脂。方法四電導(dǎo)率法餐廚廢油脂會混入大量的水溶性物質(zhì)，如食鹽等調(diào)味品、洗滌劑等，這類物質(zhì)會大幅度升高水的電導(dǎo)率，而正常的食用油脂中水溶性物質(zhì)含量極低。本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷是通過深度精煉，可以將餐廚廢油脂中絕大部分的水溶性物質(zhì)去除，不適用于深度精煉餐廚廢油脂。方法五頂空-氣相色譜聯(lián)用質(zhì)譜檢測油脂的揮發(fā)性成分該方法采用頂空取樣技術(shù)或頂空固相微萃取進(jìn)樣技術(shù)，收集餐廚廢油脂氧化產(chǎn)生的小分子揮發(fā)性物質(zhì)，并進(jìn)行氣質(zhì)聯(lián)用檢測。本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷是經(jīng)脫臭精煉，油脂中的揮發(fā)性成分大部分都除去了，不適用于深度精煉餐廚廢油脂。方法六脂肪酸相對不飽和度(U/S值)天然的食用植物油含有高含量的不飽和脂肪酸，因此有著比較高的脂肪酸相對不飽和度卬/3值)，一般在4 6.2之間。然而相對于飽和脂肪酸而言，不飽和脂肪酸的熱穩(wěn)定性比較差，在高溫下其氧化分解的速度遠(yuǎn)快于飽和脂肪酸，植物油的U/S值會不斷降低。本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷是不同來源的餐廚廢油脂的U/S值變化比較大，不同種類的植物油本身的U/S值變化也比較大，若在一個(gè)U/S比較大的植物油(如葵花籽油，U/S為6左右)中摻入一個(gè)U/S為3左右的餐廚廢油，這樣即使摻入量達(dá)50 %，最終混合油的U/S值也可達(dá)4. 5左右,而這個(gè)U/S值和正常的食用花生油和食用調(diào)和油的U/S基本一致,就很難判斷了。方法七測真菌毒素法
主要技術(shù)缺陷是并不是所有的餐廚廢油脂中都有真菌毒素的，被真菌毒素污染的餐廚廢油脂只是其中一部分。而且，通過深度精煉，可以將油脂中絕大部分的真菌毒素去除。方法八表面活性劑殘留法本技術(shù)的主要技術(shù)缺陷是并不是所有的餐廚廢油脂中都有表面活性劑殘留的。 而且，通過深度精煉，可以將油脂中大部分的表面活性劑殘留去除?？傊?，由于餐廚廢油脂不是一種化學(xué)組分固定不變的物質(zhì)，因來源不同、精煉加工程度不同，其內(nèi)在物質(zhì)組成會呈現(xiàn)或多或少的差異。因此，包括以上列舉的現(xiàn)有的餐廚廢油脂檢測技術(shù)，都未能針對餐廚廢油脂獨(dú)有的特征指標(biāo)及其量值，來進(jìn)行檢測判斷，檢測結(jié)果的判定都不能適用所有類型的餐廚廢油脂。理論上，要研究建立一個(gè)完善的餐廚廢油脂鑒別方法，有兩個(gè)關(guān)鍵。第一、餐廚廢油脂的特征組分或?qū)Ｒ恍灾笜?biāo)的確立，該指標(biāo)充分體現(xiàn)餐廚廢油脂的特性，并與合格食用植物油有顯著性差異。第二、研究用的餐廚廢油脂樣品具有代表性。餐廚廢油脂樣品組分多變，無論何種類別、來源、精煉加工程度，都具備其特征性的樣品才具有代表性，據(jù)此研究的數(shù)據(jù)才具價(jià)值。制約餐廚廢油脂檢測技術(shù)研究的因素之一是取樣難。餐廚廢油脂的加工和交易多具隱蔽性和黑道規(guī)則，研究機(jī)構(gòu)難以取到真實(shí)交易中的精煉餐廚廢油脂，更不用說滿足大樣本量的要求。通常研究人員都是模擬餐廚廢油脂工廠的加工精煉方法，利用實(shí)驗(yàn)室的條件，對采集的餐廚廢油脂原油進(jìn)行紙過濾、白土或活性炭脫色、水洗、真空脫臭，自制各級實(shí)驗(yàn)用的餐廚廢油脂樣品。即便是自制餐廚廢油脂樣品，也罕見大樣本量的研究結(jié)果的統(tǒng)計(jì)報(bào)道。另一困擾地溝油檢測技術(shù)研究的因素是其組分多變。深入地對大樣本的各種來源與精煉程度的餐廚廢油脂的組分系統(tǒng)分析與統(tǒng)計(jì)，提煉出二次油的共性特征及其量值的研究工作，始終未見突破。研究中所用的餐廚廢油脂樣品都被假定具有代表性。因此，也就不難理解，目前已有的餐廚廢油脂檢測方法僅在一定范圍內(nèi)有效，缺乏廣泛的適用性，應(yīng)用時(shí)或多或少暴露出誤判、漏判的問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種分離和檢測食用植物油中氧化甘油酯的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中難以分離并準(zhǔn)確檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的問題，為解決現(xiàn)有技術(shù)中難以有效、準(zhǔn)確的檢測食用植物油中是否摻有餐廚廢油脂問題的重要步驟。本發(fā)明的食用植物油指摻有或未摻有餐廚廢油脂的食用植物油。所述的摻入食用植物油中的餐廚廢油脂是指所有源于餐廚廢油脂的二次油，主要包括以陰溝油、泔水油(潲水油、泔腳油)或煎炸老油為原料加工生產(chǎn)的粗毛油，以及由這些粗毛油再經(jīng)不同程度精煉而加工生產(chǎn)的餐廚廢油脂。合格食用植物油在成為二次油的過程中，因餐具、調(diào)味料、水池、地溝、儲運(yùn)容器、 精煉加工環(huán)節(jié)的影響，造成餐廚廢油脂受到不同性質(zhì)、不同程度的外源性污染。包括六種主要的重金屬(Pb、Cu、Fe、Zn、Mn、Cr)、十二烷基磺酸鈉、膽固醇、真菌毒素等。以及因氧化導(dǎo)致的酸價(jià)、過氧化值、色澤、氣味等理化指標(biāo)的變化。由于外源性污染具有污染源的變異性和污染程度的差異性，所有外源性指標(biāo)都難以成為餐廚廢油脂理想的特異性指標(biāo)。而且，經(jīng)過精煉易改善的理化指標(biāo)也不適合作為餐廚廢油脂的特征指標(biāo)。本發(fā)明的技術(shù)原理如下無論哪種類型的餐廚廢油脂，陰溝油或者泔水油(潲水油)或者煎炸老油，作為二次油，都必定經(jīng)歷或者高溫、或者空氣接觸、或者光照射，因此食用植物油脂遭受到較高程度的氧化。作為食用植物油脂主要成分的甘油三酯，尤其是不飽和的甘油三酯，極易氧化成氧化甘油酯(其主要成分為氧化甘油三酯)。氧化甘油酯一旦形成，難以通過脫膠、脫酸、脫色、脫臭等油脂精煉加工后去除(甘油三酯氧化一般規(guī)律如圖I 所示)。其含量，合格食用植物油會顯著低于餐廚廢油脂。而氧化甘油酯在高溫有氧的條件下，氧化甘油酯之間會進(jìn)一步發(fā)生聚合反應(yīng)形成聚甘油酯(主要是指由植物油中的氧化甘油酯聚合產(chǎn)生的氧化甘油三酯聚合物)。餐廚廢油脂理想的特征指標(biāo)應(yīng)當(dāng)高度關(guān)注食用植物油的主要成分——甘油三酯(國標(biāo)一級食用油中含量約95%以上)在氧化過程中的化學(xué)結(jié)構(gòu)的變化。這種變化具有以下特點(diǎn)第一、內(nèi)源性，不受外界污染源影響。第二、普遍性， 與泔水油、陰溝油、煎炸老油的類別無關(guān)，只要是食用植物油。因此，探究內(nèi)源性的甘油三酯在氧化過程中兼具特異性和穩(wěn)定性(難以精煉去除)的產(chǎn)物，有望獲得餐廚廢油脂理想的特征指標(biāo)。本發(fā)明就是在此原理基礎(chǔ)上提供了一種分離和檢測食用植物油中氧化甘油酯的方法。本發(fā)明所述的食用植物油中氧化甘油酯的分子量一般在700 1200道爾頓左右 (45 70碳原子左右)；所述的食用植物油中聚甘油酯的分子量一般在> 1500道爾頓左右 (彡80碳原子左右)。本發(fā)明的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，包括以下步驟I)、采用正相柱層析法分離提取食用植物油中的極性成分，所述極性成分主要包括聚甘油酯(oxidized triglyceride polymer, TGP)和氧化甘油酯(oxidized triglyceride, ox_TG)；所述極性成分還包括甘油二酯、游離脂肪酸和留醇以及其它油脂極性伴隨物。2)、采用HPLC-GPC技術(shù)(高效體積排阻凝膠色譜法)從步驟I)獲得的極性成分中分離氧化甘油酯；其中GPC指凝膠滲透色譜法；進(jìn)一步的，所述正相柱層析法分離提取食用植物油中的極性成分，具體包括如下步驟I)將食用植物油溶解于有機(jī)溶劑中，得到食用植物油的溶液；2)將食用植物油的溶液上柱層析柱，固定相為極性固體吸附劑；3)用石油醚和乙醚的混合液作為洗滌液沖洗柱層析柱，棄去洗滌液；4)洗滌之后，用洗脫液對柱層析柱進(jìn)行洗脫，并收集洗脫液；5)洗脫液脫溶后獲得所述極性成分。較佳的，所述正相柱層析法采用中壓快速制備型液相色譜法。較佳的，所述正相柱層析法采用的層析柱為中壓快速制備型液相FLASH柱。步驟I)中，所述有機(jī)溶劑為30 60°C沸程的石油醚、60 90°C沸程的石油醚、正己烷、環(huán)己烷和氯仿中的一種或多種溶劑組成的混合液；步驟2)中，所述極性固體吸附劑選自硅膠、硅酸鎂和氧化鋁；較佳的，所述極性固體吸附劑的粒徑為100 500目或25 150 U m。例如，硅膠
7優(yōu)選的目數(shù)為100 400目。更佳的，所述極性固體吸附劑的含水量為5%。若采普通柱層析法，極性固體吸附劑的粒徑可為100 500目。若采用中壓快速制備型液相色譜法，極性固體吸附劑的粒徑可為25-150 ;優(yōu)選的，粒徑可為40 eOym。進(jìn)一步的，采用中壓快速制備型液相色譜法，所述極性固體吸附劑的孔徑可為60A。本發(fā)明的中壓快速制備型液相色譜法的壓力控制為I 25Psi，流速控制為2 BOmT ,/mi n。步驟3)中，所述石油醚和乙醚的混合液中乙醚的體積百分比為0. 5% 20%，所述混合液中的石油醚選自30 60°C沸程的石油醚和60 90°C沸程的石油醚；優(yōu)選的，乙醚的體積百分比為13% ；步驟4)中，所述洗脫液為乙醚、四氫呋喃、甲基叔丁基醚和二氯甲烷中的一種或多種溶劑組成的混合液；步驟5)中，所述洗脫液脫溶(即脫除溶劑或者干燥除去溶劑)可采用不高于60°C 的溫度下，用惰性氣體將洗脫液吹干；所述惰性氣體為氮?dú)饣驓鍤?；也可采用不高?0°C 的溫度下，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干。步驟2)至4)中，若采用普通柱層析法，極性固體吸附劑人工裝填于玻璃的層析柱內(nèi)形成分離用色譜柱，人工或機(jī)械地控制洗滌液、洗脫液的流速和組成比例以及被洗脫物質(zhì)的收集。若采用中壓快速制備型液相色譜法，通過工業(yè)化的裝柱機(jī)(裝填機(jī))，極性固體吸附劑預(yù)裝填入不同規(guī)格的塑料制備型FLASH柱內(nèi)，鋁箔密封包裝后成為商品化的分離用色譜柱，其最大能耐受200Psi的液體壓力，同時(shí)采用的儀器是中壓快速制備液相純化系統(tǒng)，與商品化的分離用制備型FLASH柱相配套，能自動(dòng)化、實(shí)時(shí)精確的控制洗滌液、洗脫液的流速和組成配比，安裝有檢測器能同步監(jiān)測被洗脫物質(zhì)的組分和洗脫時(shí)間，配備自動(dòng)收集器能部分或全部收集被選中的洗脫物質(zhì)，中壓快速制備液相純化系統(tǒng)最大能耐受200Psi 的液體壓力。進(jìn)一步的，采用所述HPLC-GPC技術(shù)從獲得的極性成分中分離氧化甘油酯，具體包括如下步驟I)、將所得的極性成分溶解于四氫呋喃中，得到極性成分的四氫呋喃溶液；2)、將所得的極性成分的四氫呋喃溶液用尼龍濾膜過濾后，在高壓下注入填有固定相的高效體積排阻凝膠色譜柱，采用流動(dòng)相進(jìn)行洗脫分離，收集含有分子量為700 1200道爾頓的洗脫液，即為氧化甘油酯洗脫液；所述固定相為苯乙烯-二乙烯苯交聯(lián)共聚凝膠，所述流動(dòng)相為氯仿、四氫呋喃、甲苯、二甲基甲酰胺、丙酮、甲基叔丁基醚、二氯甲烷和乙酸乙酯中的一種或多種溶劑組成的混合液；進(jìn)一步的，步驟2)中，所述苯乙烯-二乙烯苯交聯(lián)共聚凝膠的孔徑為5 50nm、 粒徑為5 u m，具有高分辨率；所述尼龍濾膜的公稱孔徑優(yōu)選為0. 22和0. 45um ;所述高效體積排阻凝膠色譜柱為不銹鋼柱，所述不銹鋼柱可采用內(nèi)徑為7 9_、長為300_的不銹鋼柱，且采用所述不銹鋼柱的流動(dòng)相的流速可以為0. 5 2mL/分鐘；所述色譜柱的柱溫可以為 20 45°C。本發(fā)明的檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的方法，包括如下步驟I)在采用上述分離氧化甘油酯方法中所述的HPLC-GPC技術(shù)分離氧化甘油酯時(shí)，洗脫并采用蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)或示差折光檢測器(RI)對洗脫物質(zhì)進(jìn)行分析檢測， 得到洗脫物質(zhì)的HPLC-GPC色譜圖(高效體積排阻凝膠色譜圖)；2)以標(biāo)準(zhǔn)的甘油三酯單體為標(biāo)準(zhǔn)定量和/或定性物質(zhì)，依據(jù)步驟I)所得色譜圖中氧化甘油酯色譜峰的出峰面積計(jì)算獲得食用植物油中氧化甘油酯的含量。步驟2)中，具體為以標(biāo)準(zhǔn)的甘油三酯單體為標(biāo)準(zhǔn)定量和/或定性物質(zhì)，采用峰面積歸一化定量法，即以步驟I)所得色譜圖中氧化甘油酯色譜峰的出峰面積占所有出峰物質(zhì)總峰面積的百分比為氧化甘油酯在極性成分中的質(zhì)量百分含量，此質(zhì)量百分含量再乘以極性成分在食用植物油中的質(zhì)量百分含量，即可計(jì)算獲得食用植物油中氧化甘油酯的質(zhì)量百分含量。步驟2)中，所述氧化甘油酯色譜峰為分子量相當(dāng)于或接近于標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯單體分子量的物質(zhì)的色譜峰；所述標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯單體的分子量為900道爾頓左右；進(jìn)一步的，所述標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯單體的分子量為800 900道爾頓。優(yōu)選的,所述蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)的載氣為純度大于99%的氮?dú)?；氣體流速為5 95mL/分鐘；蒸發(fā)管溫度為40 120°C。優(yōu)選的，所述的示差折光檢測器檢測池溫度為20 40°C ;進(jìn)一步的，檢測池溫度為30 45°C。所述采用示差折光檢測器的進(jìn)樣量可以為10 20ul。本發(fā)明中，利用正相柱層析法分離提取油脂樣品中極性成分(氧化甘油酯、聚甘油酯、甘油二酯、游離脂肪酸和留醇以及其它油脂極性伴隨物)，原理如下氧化甘油酯的理化性質(zhì)及分子量與正常的甘油三酯相近，兩者間唯一顯著的區(qū)別是，氧化甘油酯有一定的極性，在一定的條件下，可被極性固體吸附劑(如硅膠、硅酸鎂、氧化鋁等)所遲滯或吸附，而正常的甘油三酯極性極弱，不能被極性固體吸附劑所遲滯或吸附。聚甘油酯也能被極性固體吸附劑所遲滯或吸附，但其分子量一般明顯大于正常甘油三酯的分子量。HPLC-GPC技術(shù)是一種特殊的高效液相色譜(HPLC)法，是將被檢測的物質(zhì)溶于溶液中，再把樣品溶液以高壓的方式注入裝填有固相吸附劑的全封閉的分離分析型色譜柱中。由于不同物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)不同，它們在固相吸附劑上的吸附和解吸附的性質(zhì)、速度也不同，進(jìn)而把不同物質(zhì)相互分離開來，并先后從色譜柱上洗脫下來，最終被相應(yīng)的檢測器所檢測，并轉(zhuǎn)化為數(shù)字信息。采用HPLC-GPC技術(shù)對氧化甘油酯和聚甘油酯進(jìn)一步分離與定量測定，原理如下 HPLC-GPC法中，被檢測物質(zhì)在色譜柱上的吸附和解吸附的性質(zhì)，與該物質(zhì)的化學(xué)性質(zhì)無關(guān)， 僅僅由該物質(zhì)的分子量所決定。物質(zhì)的分子量越大，越難被HPLC-GPC色譜柱所吸附，就越早被洗脫出峰。氧化甘油酯和聚甘油酯的化學(xué)性質(zhì)比較接近，用一般的HPLC法，很難將它們分離測定。但是采用HPLC-GPC法，由于聚甘油酯的分子量遠(yuǎn)大于氧化甘油酯，因此聚甘油酯率先從極性成分中洗脫分離出來，隨后氧化甘油酯洗脫分離出來。所述分離出來的氧化甘油酯可以進(jìn)一步被檢測，采用峰面積歸一化定量技術(shù)，所得色譜圖中氧化甘油酯色譜峰的出峰面積占所有出峰物質(zhì)總峰面積的百分比，乘以極性成分在食用植物油中的質(zhì)量百分含量，即可計(jì)算獲得食用植物油中氧化甘油酯的質(zhì)量百分含量。本發(fā)明的分離和檢測食用植物油中氧化甘油酯的方法，采用正相柱層析法和 HPLC-GPC技術(shù)將氧化甘油酯從食用植物油中分離出來，進(jìn)而與蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD) 或示差折光檢測器(RI)聯(lián)用，通過高效體積排阻凝膠色譜圖中氧化甘油酯的出峰面積分析并定量檢測氧化甘油酯在食用植物油中的含量，均為有效、準(zhǔn)確的檢測食用植物油中是否摻有餐廚廢油脂的重要步驟；本發(fā)明采用正相柱層析法以及高效體積排阻凝膠色譜法與蒸發(fā)光散射檢測器/示差折光檢測器聯(lián)用(HPLC-GPC-ELSD/RI)可直接分離并檢測食用植物油中的氧化甘油酯，并直接應(yīng)用到定性和定量檢測食用植物油中是否含有餐廚廢油脂。


圖I.甘油三酯氧化為氧化甘油酯和聚甘油酯的一般規(guī)律示意圖。圖2. HPLC-GPC-RI 色譜3制備脫色油的反應(yīng)系統(tǒng)示意圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明，應(yīng)理解，實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。實(shí)施例I不同樣本中氧化甘油酯含量的比較。氧化甘油酯含量的檢測方法一)、油脂極性成分的提取方法I)普通柱層析法先精確稱油脂樣品2. 5克(M)，用20mL的30 60°C沸程的石油醚完全溶解后，再用30 60°C沸程的石油醚定容至50mL，取20mL樣品溶液上硅膠層析柱(內(nèi)徑為21mm、長450mm的玻璃柱，內(nèi)裝填25克、含水量為5%的100 200目的硅膠)，用150mL的洗滌液(30 60°C沸程的石油醚乙醚=87 13)以2 2. 5mL/分鐘的流速沖洗硅膠層析柱，棄去洗滌液；再用150mL的乙醚以2 2. 5mL/分鐘的流速洗脫硅膠層析柱，收集全部的乙醚洗脫液于一個(gè)已經(jīng)恒重稱重的250mL的燒瓶中(空白燒瓶的質(zhì)量為M1克)，在不高于60°C的溫度下，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干全部的乙醚后再恒重稱重，此時(shí)獲得殘留物和燒瓶的總質(zhì)量為M2克，[(M2-M1VM] X 100%即為殘留物——極性成分在油脂樣品中的質(zhì)量百分含量，再用[(M2-M1) X 100]mL的四氫呋喃溶解極性成分，極性成分溶液經(jīng)過0. 45 y m的尼龍濾膜過濾后，進(jìn)行高效體積排阻凝膠色譜(HPLC-GPC，配備ELSD檢測器或 RI檢測器)檢測。方法2)中壓快速制備液相色譜法取2支新的制備型FLASH柱(內(nèi)徑為30mm、長 115mm的玻璃柱，內(nèi)裝填20克粒徑為40 60um、孔徑為60A的無定形娃膠)，上下串聯(lián)后，連接入中壓快速液相制備純化系統(tǒng)的溶劑管路內(nèi)，用洗滌液(30 60°C沸程的石油醚乙醚 =87 13)以25mL/分鐘的流速沖洗平衡串聯(lián)的FLASH柱10 12分鐘。然后稱油脂樣品 I. 0克(M)，用5mL的30 60°C沸程的石油醚完全溶解后，再用IOmL的注射器注入串聯(lián)的 FLASH柱的液體入口處。用洗滌液(30 60°C沸程的石油醚乙醚=87 13)以25mL/分鐘的流速洗滌串聯(lián)的FLASH柱20分鐘，棄去洗滌液，再用乙醚以25mL/分鐘的流速洗脫串聯(lián)的FLASH柱25分鐘，收集全部的乙醚洗脫液于一個(gè)已經(jīng)恒重稱重的500mL的燒瓶中(空白燒瓶的質(zhì)量為M1克)，在不高于60°C的溫度下，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀蒸干全部的乙醚后再恒重稱重，此時(shí)獲得殘留物和燒瓶的總質(zhì)量為M2克，[(M2-M1VM] X 100%即為殘留物——極性成分在油脂樣品中質(zhì)量百分含量，再用[(M2-M1) X 100]mL的四氫呋喃溶解極性成分，極性成分溶液經(jīng)過0. 45um的尼龍濾膜過濾后，進(jìn)行高效體積排阻凝膠色譜(HPLC-GPC，配備ELSD 檢測器或RI檢測器)檢測。高效體積排阻凝膠色譜檢測參數(shù)如下色譜柱高效體積排阻凝膠色譜柱，內(nèi)徑為7. 6mm,長300mm的不銹鋼柱，內(nèi)填有孔徑為10nm、粒徑為5um的高分辨率苯乙烯-二乙烯苯交聯(lián)共聚凝膠，雙柱聯(lián)用。流動(dòng)相色譜純的四氫呋喃。流速0. 8mL/分鐘。柱溫35°C。檢測器蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)(載氣純度大于99%的氮?dú)?；氣體流速SmL/分鐘；蒸發(fā)管溫度90°C )或示差折光檢測器(RI) (檢測池溫度35°C )。進(jìn)樣量10ul。以標(biāo)準(zhǔn)的甘油三酯單體的分子量為參照，對檢測獲得的高效體積排阻凝膠色譜圖進(jìn)行分析，凡是分子量相當(dāng)于或接近于標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯單體分子量(分子量為800 900道爾頓)的色譜峰均為氧化甘油酯的色譜峰。采用峰面積歸一化定量法，即以所得色譜圖中氧化甘油酯色譜峰的出峰面積占所有出峰物質(zhì)總峰面積的百分比為氧化甘油酯在極性成分中的質(zhì)量百分含量，此質(zhì)量百分含量再乘以極性成分在食用植物油中的質(zhì)量百分含量， 即可計(jì)算獲得食用植物油中氧化甘油酯的質(zhì)量百分含量。按以上方法，每一個(gè)樣品連續(xù)進(jìn)行5次氧化甘油酯含量的檢測，即5次平行性檢測實(shí)驗(yàn)，要求這5次平行性檢測的結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于12%，符合此條件的某個(gè)樣品的5次平行性檢測結(jié)果的平均值為該樣品的最終測定值。樣品檢測陰溝油來自某飯店隔油池泔水油從某飯店的泔腳中分離獲得煎炸老油來自某飯店的煎炸用油鍋一、粗毛油樣本的制備I)泔水油粗毛油的制備先將泔水原油放入40°C 60°C的恒溫烘箱中，加熱數(shù)小時(shí)，直至泔水原油完全熔化呈液態(tài)。用一個(gè)布氏漏斗，其中漏斗底部先墊上3層中速定性濾紙，再在其上鋪一層 0. 5cm厚的娃藻土,最后在娃藻土層上再墊I層中速定性濾紙。用抽濾的方式，趁熱對熔化的泔水原油進(jìn)行過濾，并收集濾油，即為泔水油粗毛油。2)陰溝油粗毛油的制備先將陰溝油原油放入40°C 60°C的恒溫烘箱中，加熱數(shù)小時(shí)，直至陰溝油原油完全熔化呈液態(tài)。用一個(gè)布氏漏斗，其中漏斗底部先墊上3層中速定性濾紙，再在其上鋪一層 0. 5cm厚的娃藻土,最后在娃藻土層上再墊I層中速定性濾紙。用抽濾的方式，趁熱對熔化的陰溝油原油進(jìn)行過濾，并收集濾油，即為陰溝油粗毛油。3)煎炸老油粗毛油的制備先將煎炸老油原油放入40°C 60°C的恒溫烘箱中，加熱數(shù)小時(shí)，直至煎炸老油原油完全熔化呈液態(tài)。用一個(gè)布氏漏斗，其中漏斗底部先墊上3層中速定性濾紙，再在其上鋪一層0. 5em厚的娃藻土,最后在娃藻土層上再墊I層中速定性濾紙。用抽濾的方式，趁熱對熔化的煎炸老油原油進(jìn)行過濾，并收集濾油，即為煎炸老油粗毛油。二、脫色油樣本的制備I)泔水油脫色油樣品的制備
稱取150 300克的泔水油粗毛油于600mL的燒杯中，均等地倒入2個(gè)250mL梨形分液漏斗中，用加熱至70 95°C的蒸餾水振搖洗滌2次，每次IOOmL的蒸餾水，振搖2 3分鐘。每次振搖洗滌后，靜置分層，棄去下層的洗滌水。配制0.5 5%的磷酸水溶液， 并加熱至70 95°C。向每只分液漏斗中加入IOOmL的熱磷酸溶液，充分振搖2 3分鐘后，靜置分層，棄去下層的酸水溶液，再加入70 95°C的新的磷酸水溶液，如此反復(fù)酸洗3 次。然后再用70 95°C的蒸餾水進(jìn)行水洗，每次入IOOmL的熱蒸餾水，充分振搖2 3分鐘后，靜置分層，棄去下層的水洗溶液，反復(fù)洗3 4次，直到下層水洗溶液用廣泛pH試紙測定的PH值為4 7左右。將水洗后的泔水油粗毛油全部倒入一個(gè)500mL的三口燒瓶中， 并稱重獲得油重。將燒瓶密封后，連接上蒸餾冷凝管，再連接上真空泵，再把三口燒瓶放在溫控式磁螺旋攪拌加熱器的加熱頭上，形成一個(gè)密閉的反應(yīng)系統(tǒng)(見圖3所示)。以300 800rpm/min的速度進(jìn)行攪拌,邊攪拌邊把油溫加熱至50 70°C,同時(shí)打開真空泵，維持整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)。此時(shí)，油內(nèi)會有大量沸騰的氣泡產(chǎn)生(是水蒸汽)，維持加熱和真空狀態(tài)，直到油中再無明顯的氣泡產(chǎn)生。關(guān)閉真空泵，解除反應(yīng)系統(tǒng)的真空狀態(tài)。在維持?jǐn)嚢璧臓顟B(tài)下，把泔水油粗毛油加熱至50 70°C，然后向三口燒瓶的泔水油中加入油質(zhì)量1% 5%的活性白土和油質(zhì)量1% 5%的活性碳。密封反應(yīng)系統(tǒng)，開啟真空泵，維持系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)，攪拌速度調(diào)至300 800rpm/min，維持50 70°C的油溫，反應(yīng)15 50鐘。而后，將泔水油粗毛油加熱至75 105°C，繼續(xù)反應(yīng)15 50分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，關(guān)閉真空泵、冷凝水、攪拌和加熱。取下裝有泔水油脫色混合物的三口燒瓶，將其中的混合物倒入墊有三層濾紙的布氏漏斗中，進(jìn)行抽濾。抽濾下的濾油收集于一個(gè)500mL的抽濾瓶中。第一次抽濾完成后，將獲得的濾油重新倒入同一個(gè)布氏漏斗中再抽濾一次，收集濾油于一個(gè)新的500mL抽濾瓶中，即為脫色泔水油。2)陰溝油脫色油樣品的制備稱取150 300克的陰溝油粗毛油于600mL的燒杯中，均等地倒入2個(gè)250mL梨形分液漏斗中，用加熱至70 95°C的蒸餾水振搖洗滌2次，每次IOOmL的蒸餾水，振搖2 3分鐘。每次振搖洗滌后，靜置分層，棄去下層的洗滌水。配制0.5 5%的磷酸水溶液，并加熱至70 95°C。向每只分液漏斗中加入IOOmL的熱磷酸溶液，充分振搖2 3分鐘后， 靜置分層，棄去下層的酸水溶液，再加入70 95°C的新的磷酸水溶液，如此反復(fù)酸洗3次。 然后再用70 95°C的蒸餾水進(jìn)行水洗，每次入IOOmL的熱蒸餾水，充分振搖2 3分鐘后， 靜置分層，棄去下層的水洗溶液，反復(fù)洗3 4次，直到下層水洗溶液用廣泛pH試紙測定的 pH值為4 7左右。將水洗后的陰溝油粗毛油全部倒入一個(gè)500mL的三口燒瓶中，并稱重獲得油重。將燒瓶密封后，連接上蒸餾冷凝管，再連接上真空泵，再把三口燒瓶放在溫控式磁螺旋攪拌加熱器的加熱頭上，形成一個(gè)密閉的反應(yīng)系統(tǒng)(見圖4所示)。以300 SOOrpm/ min的速度進(jìn)行攪拌，邊攪拌邊把油溫加熱至50 70 °C，同時(shí)打開真空泵，維持整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)。此時(shí)，油內(nèi)會有大量沸騰的氣泡產(chǎn)生(是水蒸汽)，維持加熱和真空狀態(tài)，直到油中再無明顯的氣泡產(chǎn)生。關(guān)閉真空泵，解除反應(yīng)系統(tǒng)的真空狀態(tài)。在維持?jǐn)嚢璧臓顟B(tài)下，把陰溝油粗毛油加熱至50 70°C，然后向三口燒瓶的陰溝油粗毛油中加入油質(zhì)量1% 5%的活性白土和油質(zhì)量1% 5%的活性碳。密封反應(yīng)系統(tǒng)，開啟真空泵，維持系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)，攪拌速度調(diào)至300 800rpm/min，維持50 70°C的油溫，反應(yīng)15 50鐘。而后，將陰溝油粗毛油加熱至75 105°C，繼續(xù)反應(yīng)15 50分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，關(guān)閉真空泵、冷凝水、攪拌和加熱。取下裝有陰溝油脫色混合物的三口燒瓶，將其中的混合物倒入墊有三層濾紙的布氏漏斗中，進(jìn)行抽濾。抽濾下的濾油收集于一個(gè)500mL的抽濾瓶中。第一次抽濾完成后，將獲得的濾油重新倒入同一個(gè)布氏漏斗中再抽濾一次，收集濾油于一個(gè)新的500mL抽濾瓶中，即為脫色陰溝油。3)煎炸老油脫色油樣品的制備稱取150 300克的煎炸老油粗毛油于600mL的燒杯中，均等地倒入2個(gè)250mL梨形分液漏斗中，用加熱至70 95°C的蒸餾水振搖洗滌2次，每次IOOmL的蒸餾水，振搖2 3分鐘。每次振搖洗滌后，靜置分層，棄去下層的洗滌水。配制0.5 5%的磷酸水溶液，并加熱至70 95°C。向每只分液漏斗中加入IOOmL的熱磷酸溶液，充分振搖2 3分鐘后，靜置分層，此時(shí)在頂層油層和底層酸水層間可能會出現(xiàn)乳化層，棄去酸水層合乳化層，盡可能保留頂層的油層，再加入70 95°C的新的磷酸水溶液，如此反復(fù)酸洗3次。然后再用70 95°C的蒸餾水進(jìn)行水洗，每次入IOOmL的熱蒸餾水，充分振搖2 3分鐘后，靜置分層，棄去下層的水洗溶液，反復(fù)洗3 4次，直到下層水洗溶液用廣泛pH試紙測定的pH值為4 7 左右。將水洗后的煎炸老油粗毛油全部倒入一個(gè)500mL的三口燒瓶中，并稱重獲得油重。將燒瓶密封后，連接上蒸餾冷凝管，再連接上真空泵，再把三口燒瓶放在溫控式磁螺旋攪拌加熱器的加熱頭上，形成一個(gè)密閉的反應(yīng)系統(tǒng)(見圖4所示)。以300 800rpm/min的速度進(jìn)行攪拌，邊攪拌邊把油溫加熱至50 70°C，同時(shí)打開真空泵，維持整個(gè)反應(yīng)系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)。此時(shí)，油內(nèi)會有大量沸騰的氣泡產(chǎn)生(是水蒸汽)，維持加熱和真空狀態(tài)，直到油中再無明顯的氣泡產(chǎn)生。關(guān)閉真空泵，解除反應(yīng)系統(tǒng)的真空狀態(tài)。在維持?jǐn)嚢璧臓顟B(tài)下，把煎炸老油粗毛油加熱至50 70°C，然后向三口燒瓶的煎炸老油粗毛油中加入油質(zhì)量1% 5%的活性白土和油質(zhì)量1% 5%的活性碳。密封反應(yīng)系統(tǒng)，開啟真空泵，維持系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)，攪拌速度調(diào)至300 800rpm/min，維持50 70°C的油溫，反應(yīng)15 50鐘。而后，將煎炸老油粗毛油加熱至75 105°C，繼續(xù)反應(yīng)15 50分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，關(guān)閉真空泵、冷凝水、攪拌和加熱。取下裝有煎炸老油脫色混合物的三口燒瓶，將其中的混合物倒入墊有三層濾紙的布氏漏斗中，進(jìn)行抽濾。抽濾下的濾油收集于一個(gè)500mL的抽濾瓶中。第一次抽濾完成后，將獲得的濾油重新倒入同一個(gè)布氏漏斗中再抽濾一次，收集濾油于一個(gè)新的500mL抽濾瓶中，即為脫色煎炸老油。三、脫臭油樣本的制備I)泔水油脫臭油樣品的制備將脫色泔水油倒入一個(gè)新的500mL三口燒瓶中，燒瓶放入溫控式加熱套內(nèi)。將燒瓶密封后，連接上蒸餾冷凝管，再連接上真空泵，形成密閉的反應(yīng)系統(tǒng)。打開真空泵和冷凝水，維持系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)。然后打開加熱套，把油溫升至170 250°C， 維持真空狀態(tài)，反應(yīng)2 5小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將三口燒瓶從加熱套中取出，冷卻至室溫后， 關(guān)閉真空泵和冷凝水，即獲得脫臭泔水油。2)陰溝油脫臭油樣品的制備將脫色陰溝油倒入一個(gè)新的500mL三口燒瓶中，燒瓶放入溫控式加熱套內(nèi)。將燒瓶密封后，連接上蒸餾冷凝管，再連接上真空泵，形成密閉的反應(yīng)系統(tǒng)。打開真空泵和冷凝水，維持系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)。然后打開加熱套，把油溫升至170 250°C， 維持真空狀態(tài)，反應(yīng)2 5小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將三口燒瓶從加熱套中取出，冷卻至室溫后，關(guān)閉真空泵和冷凝水，即獲得脫臭陰溝油。3)煎炸老油脫臭油樣品的制備將脫色煎炸老油倒入一個(gè)新的500mL三口燒瓶中，燒瓶放入溫控式加熱套內(nèi)。將燒瓶密封后，連接上蒸餾冷凝管，再連接上真空泵，形成密閉的反應(yīng)系統(tǒng)。打開真空泵和冷凝水，維持系統(tǒng)700 740毫米汞柱的負(fù)壓狀態(tài)。然后打開加熱套，把油溫升至170 250°C，維持真空狀態(tài)，反應(yīng)2 5小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將三口燒瓶從加熱套中取出，冷卻至室溫后，關(guān)閉真空泵和冷凝水，即獲得脫臭煎炸老油。樣本及檢測結(jié)果
權(quán)利要求
1.一種分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，包括如下步驟1)、采用正相柱層析法分離提取食用植物油中的極性成分，所述極性成分主要為聚甘油酯和氧化甘油酯；2)、采用HPLC-GPC技術(shù)從步驟I)獲得的極性成分中分離氧化甘油酯。
2.如權(quán)利要求I所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，所述極性成分還包括甘油二酯、游離脂肪酸和留醇以及其它油脂極性伴隨物。
3.如權(quán)利要求I所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，所述正相柱層析法分離提取食用植物油中的極性成分，具體包括如下步驟1)將食用植物油溶解于有機(jī)溶劑中，得到食用植物油的溶液；2)將食用植物油的溶液上柱層析柱，固定相為極性固體吸附劑；3)用石油醚和乙醚的混合液作為洗滌液沖洗柱層析柱，棄去洗滌液；4)洗滌之后，用洗脫液對柱層析柱進(jìn)行洗脫，并收集洗脫液；5)洗脫液脫溶后獲得所述極性成分。
4.如權(quán)利要求3所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，步驟I)中， 所述有機(jī)溶劑為30 60°C沸程的石油醚、60 90°C沸程的石油醚、正己烷、環(huán)己烷和氯仿中的一種或多種溶劑組成的混合液；步驟2)中，所述極性固體吸附劑為硅膠、硅酸鎂或氧化招；
5.如權(quán)利要求4所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，步驟2)中， 所述極性固體吸附劑的粒徑為100 500目或25 150 u m。
6.如權(quán)利要求3所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，步驟3)中， 所述混合液中乙醚的體積百分比為0. 5% 20% ;所述混合液中的石油醚選自30 60°C 沸程的石油醚和60 90°C沸程的石油醚；步驟4)中，所述洗脫液為乙醚、四氫呋喃、甲基叔丁基醚和二氯甲烷中的一種或多種溶劑組成的混合液。
7.如權(quán)利要求1-6任一所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，所述正相柱層析法采用普通柱層析法或中壓快速制備型液相色譜法。
8.如權(quán)利要求7所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，所述正相柱層析法采用的層析柱為普通柱層析柱或中壓快速制備型液相FLASH柱。
9.如權(quán)利要求1-8任一所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法，其特征在于，所述HPLC-GPC技術(shù)分離氧化甘油酯，具體包括如下步驟1)、將所得的極性成分溶解于四氫呋喃中，得到極性成分的四氫呋喃溶液；2)、將所得的極性成分的四氫呋喃溶液用尼龍濾膜過濾后，在高壓下注入填有固定相的高效體積排阻凝膠色譜柱，采用流動(dòng)相進(jìn)行洗脫分離，收集含有分子量為700 1200道爾頓洗脫物質(zhì)的洗脫液；所述固定相為苯乙烯-二乙烯苯交聯(lián)共聚凝膠，所述流動(dòng)相為氯仿、四氫呋喃、二甲基甲酰胺、丙酮、甲苯、甲基叔丁基醚、二氯甲烷和乙酸乙酯中的一種或多種溶劑組成的混合液。
10.如權(quán)利要求1-9任一所述的分離食用植物油中氧化甘油酯的方法在摻入食用植物油中的餐廚廢油脂的檢測中的應(yīng)用。
11.一種檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的方法，包括如下步驟I)在采用權(quán)利要求1-9任一所述的HPLC-GPC技術(shù)分離氧化甘油酯時(shí)，洗脫并采用蒸發(fā)光散射檢測器或示差折光檢測器對洗脫物質(zhì)進(jìn)行分析檢測，得到洗脫物質(zhì)的HPLC-GPC色譜圖；2)以標(biāo)準(zhǔn)的甘油三酯單體為標(biāo)準(zhǔn)定量和/或定性物質(zhì)，依據(jù)步驟I)所得色譜圖中氧化甘油酯色譜峰的出峰面積計(jì)算獲得食用植物油中氧化甘油酯的含量。
12.如權(quán)利要求11所述的檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的方法，其特征在于，步驟2)具體為以步驟I)所得色譜圖中氧化甘油酯色譜峰的出峰面積占所有出峰物質(zhì)總峰面積的百分比為氧化甘油酯在極性成分中的質(zhì)量百分含量，此質(zhì)量百分含量再乘以極性成分在食用植物油中的質(zhì)量百分含量，即可計(jì)算獲得食用植物油中氧化甘油酯的質(zhì)量百分含量。
13.如權(quán)利要求11所述的檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的方法，其特征在于，所述氧化甘油酯色譜峰為分子量相當(dāng)于或接近于標(biāo)準(zhǔn)甘油三酯單體分子量的物質(zhì)的色譜峰。
14.如權(quán)利要求11所述的檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的方法，其特征在于，所述蒸發(fā)光散射檢測器的載氣為純度大于99%的氮?dú)?，氣體流速為5 95mL/分鐘，蒸發(fā)管溫度為40 120°C ;所述的示差折光檢測器的檢測池溫度為20 40°C。
15.如權(quán)利要求11-14任一所述的檢測食用植物油中氧化甘油酯含量的方法在摻入食用植物油中的餐廚廢油脂的檢測中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明屬于化合物分離檢測領(lǐng)域，涉及一種分離和檢測食用植物油中的氧化甘油酯(oxidizedtriglyceride,ox-TG)的方法及其應(yīng)用。本發(fā)明的分離和檢測食用植物油中氧化甘油酯的方法，采用正相柱層析法和HPLC-GPC技術(shù)將氧化甘油酯從食用植物油中分離出來，進(jìn)而與蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)或示差折光檢測器(RI)聯(lián)用，通過色譜圖中氧化甘油酯的出峰面積分析并定量檢測氧化甘油酯在食用植物油中的含量，均為有效、準(zhǔn)確的檢測食用植物油中是否摻有餐廚廢油脂的重要步驟；本發(fā)明方法可直接分離和檢測食用植物油中的氧化甘油酯，并直接應(yīng)用到定性檢測食用植物油中是否含有餐廚廢油脂。
文檔編號G01N30/08GK102539586SQ201110402800
公開日2012年7月4日 申請日期2011年12月7日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月14日
發(fā)明者孫禧華, 曹文明, 李奇章, 薛斌 申請人:上海市糧食科學(xué)研究所, 上海良友(集團(tuán))有限公司