專利名稱：一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法。
技術(shù)背景
和絡(luò)舒肝膠囊由白芍、制香附、莪術(shù)、炒白術(shù)、三棱、當歸、木瓜、大黃、紅花、炙鱉甲、桃仁、郁金、茵陳、海藻、昆布、玄參、地黃、熟地黃、虎杖、土鱉蟲、柴胡、制何首烏、凌霄花、蜣螂、五靈脂、黑豆、半邊蓮二十七味中藥組成。其功能為疏肝理氣，清化濕熱，活血化瘀，滋養(yǎng)肝腎，常用于治療慢性肝炎輕、中度及早期肝硬化等癥，是一種治療肝病的中藥制劑。
和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量標準收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準中藥成方制劑第二冊》(標準號WS3-B-0310-90)。該標準中的鑒別方法主要是從外觀上進行鑒別，表述為“和絡(luò)舒肝膠囊為膠囊，內(nèi)容物顯棕褐色；氣微香，味微苦”。對于該產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法而言，沒有制定相應(yīng)的檢測方法及主要成分的控制指標，且內(nèi)容相對簡單，不能有效控制其內(nèi)在質(zhì)量。該標準存在質(zhì)量可控性差、重現(xiàn)性差、可操作性差及行文欠科學嚴謹?shù)缺撞。瑖乐赜绊懥藢χ兴幹苿┑陌踩院陀行缘挠行Э刂?，無法滿足藥品生產(chǎn)質(zhì)量控制、藥品經(jīng)營質(zhì)量把關(guān)等工作的需要，因此，完善、提高中藥的質(zhì)量標準是一項迫在眉睫的重要工作。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是要解決和絡(luò)舒肝膠囊現(xiàn)有的質(zhì)量標準存在存在質(zhì)量可控性差、重現(xiàn)性差、可操作性差的問題，提供一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法。
本發(fā)明中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，按以下步驟進行一、以α-香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分；二、以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分；三、以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分；四、以芍藥苷為對照品， 采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分；五、以白術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分；六、以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分；七、以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量，即完成和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測。
本發(fā)明的有益效果如下
1.本發(fā)明的檢測方法在《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準的基礎(chǔ)上， 增加了對照藥材和對照品的薄層色譜鑒別檢驗方法，并制定了高效液相色譜法進行含量測定的方法。
2.本發(fā)明充分應(yīng)用TLC技術(shù)，以化學成分和對照藥材為對照來評價藥品的內(nèi)在質(zhì)量。該標準質(zhì)量可控性強、重現(xiàn)性穩(wěn)定、可操作性強及行文科學嚴謹，顯著提高了對中藥制劑的安全性和有效性的有效控制，滿足了藥品生產(chǎn)質(zhì)量控制、藥品經(jīng)營質(zhì)量把關(guān)和藥品監(jiān)督檢驗等工作的需要。而且對于確保批次間的穩(wěn)定，保證其臨床用藥的安全性和有效性，促進中藥標準及中藥應(yīng)用的現(xiàn)代化和國際化，發(fā)揮著極其重要的作用。
3.和絡(luò)舒肝膠囊由27味中藥成分組成，處方中各藥味處理方式不同，工藝提取方式繁復，緊靠一個檢查項對質(zhì)量控制作用的局限性較大。且中藥飲片經(jīng)過炮制加工其內(nèi)在質(zhì)量會受到影響。本發(fā)明通過大量數(shù)據(jù)實驗對比研究，確定了幾種可排除陰性干擾的檢測方法，即采用TLC法對和絡(luò)舒肝膠囊中的香附、莪術(shù)、柴胡等成分進行定性測定，用HPLC法對和絡(luò)舒肝膠囊中的芍藥苷進行定量測定，并根據(jù)中藥品種的特殊性制定不同的定性、定量指標，切實起到了質(zhì)量控制的目的，從而進一步完善、提高和統(tǒng)一了該品種的質(zhì)量標準。 對制定統(tǒng)一完善的國家標準，規(guī)范其鑒別、含量測定項目，更完善的對藥物的質(zhì)量做出整體評價意義重大。


圖1為具體實施方式
九中香附的薄層色譜檢測結(jié)果；圖2為具體實施方式
九中莪術(shù)的薄層色譜檢測結(jié)果；圖3為具體實施方式
九中柴胡的薄層色譜檢測結(jié)果；圖4為具體實施方式
九中芍藥的薄層色譜檢測結(jié)果；圖5為具體實施方式
九中白術(shù)的薄層色譜檢測結(jié)果；圖6為具體實施方式
九中當歸的薄層色譜檢測結(jié)果；圖7為具體實施方式
九中標準溶液的高效液相色譜圖；圖8為具體實施方式
九中供試品1的高效液相色譜圖；圖9為具體實施方式
九中供試品2的高效液相色譜圖；圖10為具體實施方式
九中陰性樣品的高效液相色譜圖。
具體實施方式
本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實施方式
，還包括各具體實施方式
間的任意組合。
具體實施方式
一本實施方式中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，按以下步驟進行一、以α-香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分；二、以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分；三、以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分； 四、以芍藥苷為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分；五、 以白術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分；六、以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分；七、以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量，即完成和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測。
具體實施方式
二 本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟一中以α-香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分的方法為1.1、 供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加20mL乙醇，超聲處理15min，濾過，濾液揮干，殘渣加IOmL乙酸乙酯，超聲處理lOmin，濾過，濾液濃縮至0. 5mL，做為供試品溶液； 1.2、取α-香附酮為對照品，加乙酸乙酯制成lmg/mL的溶液，作為對照品溶液；1. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除香附以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟1. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；1. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯19 1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈254nm 下檢視；1.5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有香附成分的條件為供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的深蘭色斑點，陰性樣品無干擾；噴以二硝基苯胼乙醇試液， 放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，陰性樣品亦無干擾。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟1. 3中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為白術(shù)、白芍、三棱、莪術(shù)、當歸、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余二十味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
具體實施方式
三本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟二中以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分的方法為2. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加15mL正己烷，超聲處理5min，濾過，取續(xù)濾液做為供試品溶液；2. 2、另取莪術(shù)對照藥材lg，加15mL正己烷，超聲處理5min，濾過，取續(xù)濾液做為對照品溶液；2. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取處除莪術(shù)以外的其他藥材，按照 《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟 2. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；2. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以60 90°C的石油醚-乙酸乙酯 15 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；2. 5、 鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有莪術(shù)成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試品中含有莪術(shù)成分；其中步驟2. 4中所述5%香草醛硫酸溶液的配制方法是向5g香草醛加入質(zhì)量濃度為98%的硫酸定容至100毫升。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟2. 3中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為白術(shù)、白芍、三棱、香附、當歸、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余二十味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
具體實施方式
四本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟三中以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分的方法為3. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加30mL甲醇，超聲處理30min，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加IOmL質(zhì)量濃度為20%的NaOH溶液，加熱溶解，放冷，轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次15mL，合并正丁醇液，加入等體積的氨試液，搖勻，放置至分層，分取上層液，減壓回收正丁醇至干，殘渣加ImL甲醇使溶解，作為供試品溶液；3. 2、另取柴胡對照藥材3g，加30mL甲醇，冷浸12h，取上清液蒸干，加30mL甲醇，加熱回流30min，濾過，濾液減壓回收甲醇至干，殘渣加水15mL使溶解，轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次15mL，合并正丁醇液，加入等體積的氨試液，搖勻，放置至分層，分取上層液， 減壓回收正丁醇至干，殘渣加ImL甲醇使溶解，作為對照品溶液；3. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除柴胡以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟3. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；3. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各5 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水13 7 2于10°C以下放置得到的下層溶液為展開劑，展開，展距10cm，取出，晾干，噴以5%對二甲氨基苯甲酸的10%硫酸乙醇溶液，在150°C加熱至斑點顯色清晰；3. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有柴胡成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的粉紅色的斑點，陰性樣品無干擾；置紫外光燈 365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點，陰性樣品亦無干擾，表明供試品中含有柴胡成分。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟3. 3中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為白術(shù)、白芍、三棱、莪術(shù)、香附、當歸、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余十九味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
本實施方式所述5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液的配制方法是向5g 對二甲氨基苯甲醛加入體積濃度為10%的硫酸乙醇溶液定容至100毫升。
具體實施方式
五本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟四中以芍藥苷為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分的方法為4. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加甲醇20mL，超聲提取20min，濾過，濾液揮干， 殘渣加水20mL溶解，用乙醚提取2次，每次20mL，棄去乙醚液，水層用水飽和正丁醇提取2 次，每次20mL，合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加乙醇lmL，拌2g中性氧化鋁，水浴上拌勻，干燥，裝入一預(yù)先裝填好的中性氧化鋁小柱頂部，以甲醇40mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇ImL使溶解，作為供試品溶液，其中所述中性氧化鋁小柱為200 300目，lg，內(nèi)徑為 10 15mm ；4. 2、取芍藥苷為對照品，用甲醇制成0. 5mg/mL的溶液，作為對照品溶液；4. 3、 按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白芍以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟4. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；4. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各IOyL分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸40 5 10 0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；4. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有白芍成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試樣品中含有白芍成分。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟4. 3中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為白術(shù)、香附、三棱、莪術(shù)、當歸、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余二十味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
具體實施方式
六本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟五中以白術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分的方法為5. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加20mL30 60°C的石油醚，超聲提取lOmin， 濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為供試品溶液；5. 2、另取白術(shù)對照藥材 0. 35g，加30 60°C的石油醚5mL，超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為對照品溶液；5. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白術(shù)以外的其他藥材，按照 《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟 5. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；5. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以60 90°C的石油醚-乙酸乙酯 50 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；5. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有白術(shù)成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試品中含有白術(shù)成分；其中步驟 5. 4中所述5 %香草醛硫酸溶液的配制方法是向5g香草醛加入質(zhì)量濃度為98 %的硫酸定容至100毫升。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟5. 3中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為香附、白芍、三棱、莪術(shù)、當歸、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余二十味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
具體實施方式
七本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟六中以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分的方法為6. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加20mL30 60°C的石油醚，超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為供試品溶液；6. 2、取0. 5g當歸對照藥材，加 IOmL 30 60°C的石油醚，超聲處理20min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為對照品溶液；6. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除當歸以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟6. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；6. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各IOyL分別點于同一硅膠薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯9 1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視；6. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有當歸成分的條件為 供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性樣品無干擾， 表明供試樣品中含有當歸成分。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟6. 3中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為白術(shù)、白芍、三棱、莪術(shù)、香附、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余二十味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
具體實施方式
八本實施方式與具體實施方式
一不同的是步驟七中以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量的方法為7. 1、液相色譜條件的設(shè)定檢測波長為230nm，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈_0. 磷酸溶液15 85為流動相；理論板數(shù)按芍藥苷峰計算不低于2000 ;7. 2、標準溶液的制備稱取芍苷對照品，加甲醇制成60 μ g/mL的溶液，作為標準溶液；7. 3、供試品溶液的制備取Ig 和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加體積濃度為50%的乙醇溶液45mL，超聲處理30min，取出，放冷，加體積濃度為50%的乙醇溶液至50mL，搖勻，離心，取上清液，用0. 45 μ m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液，其中所述超聲處理的功率為MOW、頻率為45kHz ；7. 4、陰性樣品溶液的制備按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白芍以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟7. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；7. 5、測定白芍色譜圖分別吸取供試品溶液、標準溶液和陰性樣品溶液各20 μ L，注入液相色譜儀，測定，即得；7. 6、根據(jù)色譜圖計算得到和絡(luò)舒肝膠囊中白芍的含量，和絡(luò)舒肝膠囊處方中白芍含量合格的條件為和絡(luò)舒肝膠囊每粒含白芍以芍藥苷不少于0. 45mg。其它與具體實施方式
一相同。
本實施方式步驟7. 4中按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備的具體方法為白術(shù)、香附、三棱、莪術(shù)、當歸、木瓜粉碎成細粉，過篩，混勻；其余二十味藥加水煎煮二次，每次1. 5小時，合并煎液，濾過，濾液濃縮至稠膏狀，與上述粉末混勻，制成顆粒，干燥，即得。
具體實施方式
九本實施方式針對待檢的兩個和絡(luò)舒肝膠囊(供試品1和供試品 2)進行質(zhì)量檢測，中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，按以下步驟進行一、以α-香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分；二、以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分；三、以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分；四、以芍藥苷為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分；五、以白術(shù)為對照藥材， 采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分；六、以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分；七、以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量，即完成和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測。
步驟一中以α -香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分的方法為1. 1、供試品溶液的制備取5g供試品1的內(nèi)容物，加20mL乙醇， 超聲處理15min，濾過，濾液揮干，殘渣加IOmL乙酸乙酯，超聲處理lOmin，濾過，濾液濃縮至0. 5mL，做為供試品溶液1 ；同法取5g供試品2制備供試品溶液2 ;1. 2、取α -香附酮為對照品，加乙酸乙酯制成lmg/mL的溶液，作為對照品溶液；1. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除香附以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟1. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；1. 4、取供試品溶液1、供試品溶液2、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯19 1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈254nm下檢視；1.5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有香附成分的條件為供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的深蘭色斑點，陰性樣品無干擾；噴以二硝基苯胼乙醇試液，放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，陰性樣品亦無干擾。結(jié)果如圖1所示，圖中al為陰性樣品，a2為供試品1，a3為供試品2，a4為對照品。
步驟二中以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分的方法為2. 1、供試品溶液的制備取5g和供試品1的內(nèi)容物，加15mL正己烷，超聲處理5min，濾過，取續(xù)濾液做為供試品溶液；2. 2、另取莪術(shù)對照藥材lg，加15mL正己烷， 超聲處理5min，濾過，取續(xù)濾液做為對照品溶液1 ；同法取5g供試品2制備供試品溶液2 ； 2. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取處除莪術(shù)以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟2. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；2. 4、取供試品溶液1、供試品溶液2、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以80°C的石油醚-乙酸乙酯15 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；2. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有莪術(shù)成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試品中含有莪術(shù)成分；其中步驟2. 4中所述5 %香草醛硫酸溶液的配制方法是向5g香草醛加入質(zhì)量濃度為98 %的硫酸定容至100毫升。結(jié)果如圖2所示，圖中，bl為供試品1』2為供試品2，b3為對照品，b4為陰性樣品。
步驟三中以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分的方法為3. 1、供試品溶液的制備取5g供試品1的內(nèi)容物，加30mL甲醇，超聲處理30min，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加IOmL質(zhì)量濃度為20%的NaOH溶液，加熱溶解，放冷，轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次15mL，合并正丁醇液，加入等體積的氨試液，搖勻，放置至分層，分取上層液，減壓回收正丁醇至干，殘渣加ImL甲醇使溶解， 作為供試品溶液1 ；同法取5g供試品2制備供試品溶液2 ；3. 2、另取柴胡對照藥材3g，加 30mL甲醇，冷浸1池，取上清液蒸干，加30mL甲醇，加熱回流30min，濾過，濾液減壓回收甲醇至干，殘渣加水15mL使溶解，轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次15mL，合并正丁醇液，加入等體積的氨試液，搖勻，放置至分層，分取上層液，減壓回收正丁醇至干， 殘渣加ImL甲醇使溶解，作為對照品溶液；3. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除柴胡以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟3. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；3. 4、取供試品溶液1、供試品溶液2、對照品溶液和陰性樣品溶液各5 μ L分別點于同一硅膠薄層板上， 以三氯甲烷-甲醇-水13 7 2于10°C以下放置得到的下層溶液為展開劑，展開，展距 10cm，取出，晾干，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，在150°C加熱至斑點顯色清晰；3. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有柴胡成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的粉紅色的斑點，陰性樣品無干擾；置紫外光燈365nm 下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點，陰性樣品亦無干擾，表明供試品中含有柴胡成分。結(jié)果如圖3所示，圖中cl為對照品，c2為供試品 1，c3為供試品2，c4為陰性樣品。
步驟四中以芍藥苷為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分的方法為4. 1、供試品溶液的制備取5g和供試品1的內(nèi)容物，加甲醇20mL，超聲提取20min，濾過，濾液揮干，殘渣加水20mL溶解，用乙醚提取2次，每次20mL，棄去乙醚液， 水層用水飽和正丁醇提取2次，每次20mL，合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加乙醇lmL，拌2g 中性氧化鋁，水浴上拌勻，干燥，裝入一預(yù)先裝填好的中性氧化鋁小柱頂部，以甲醇40mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇ImL使溶解，作為供試品溶液1 ；同法取5g供試品2制備供試品溶液2 ；其中所述中性氧化鋁小柱為200目，lg，內(nèi)徑為IOmm ；4. 2、取芍藥苷為對照品，用甲醇制成0. 5mg/mL的溶液，作為對照品溶液；4. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白芍以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備， 取制備得到的顆粒5g，按步驟4. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液； 4. 4、取供試品溶液1、供試品溶液2、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸40 5 10 0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；4. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有白芍成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試樣品中含有白芍成分。結(jié)果如圖4所示，圖中，dl為陰性樣品，d2為供試品1，d3為供試品2，d4為對照品。
步驟五中以白術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分的方法為5. 1、供試品溶液的制備取5g和供試品1的內(nèi)容物，加20mL50°C的石油醚，超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為供試品溶液1 ；同法取5g供試品2制備供試品溶液2 ；5. 2、另取白術(shù)對照藥材0. 35g，加50°C的石油醚5mL， 超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為對照品溶液；5. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白術(shù)以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟5. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；5. 4、取供試品溶液1、供試品溶液2、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以80°C的石油醚-乙酸乙酯50 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；5. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有白術(shù)成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試品中含有白術(shù)成分；其中步驟5. 4中所述5%香草醛硫酸溶液的配制方法是向5g香草醛加入質(zhì)量濃度為98%的硫酸定容至100毫升。結(jié)果如圖5所示，圖中，el為陰性樣品，e2為供試品1，e3為供試品2，e4為對照品。
步驟六中以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分的方法為6. 1、供試品溶液的制備取5g供試品1的內(nèi)容物，加20mL50°C的石油醚，超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為供試品溶液1 ；同法取5g供試品2制備供試品溶液2 ；6. 2、取0. 5g當歸對照藥材，加IOmL 50°C的石油醚，超聲處理20min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為對照品溶液；6. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除當歸以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟6. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；6. 4、取供試品溶液1、供試品溶液2、對照品溶液和陰性樣品溶液各 IOyL分別點于同一硅膠薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯9 1為展開劑，展開，取出，晾干， 置紫外燈365nm下檢視；6. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有當歸成分的條件為供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性樣品無干擾，表明供試樣品中含有當歸成分。結(jié)果如圖6所示，圖中，fl為陰性樣品，f2為供試品1，f3為供試品 2，f4為對照品。
步驟七中以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量的方法為-J. 1、液相色譜條件的設(shè)定檢測波長為230nm，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈-0.1%磷酸溶液15 85為流動相；理論板數(shù)按芍藥苷峰計算不低于2000 ；7. 2、標準溶液的制備稱取芍苷對照品，加甲醇制成60μ g/mL的溶液，作為標準溶液；7. 3、供試品溶液的制備取Ig和供試品1的內(nèi)容物，加體積濃度為50%的乙醇溶液 45mL,超聲處理30min，取出，放冷，加體積濃度為50%的乙醇溶液至50mL，搖勻，離心，取上清液，用0. 45 μ m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液1 ；同法取Ig供試品2制備供試品溶液2 ；其中所述超聲處理的功率為MOW、頻率為45kHz ；7. 4、陰性樣品溶液的制備按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白芍以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟7. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；7. 5、測定白芍色譜圖分別吸取供試品溶液1、供試品溶液2、 標準溶液和陰性樣品溶液各20 μ L，注入液相色譜儀，測定，即得；7. 6、根據(jù)色譜圖計算得到和絡(luò)舒肝膠囊中白芍的含量，和絡(luò)舒肝膠囊處方中白芍含量合格的條件為和絡(luò)舒肝膠囊每粒含白芍以芍藥苷不少于0. 45mg。
圖7為標準溶液，圖8為供試品1，圖9為供試品2，圖10為陰性樣品。由圖1至圖10可知，供試品1和供試品2中均含有香附、白芍、柴胡、莪術(shù)、白術(shù)和當歸；圖7、圖8和圖9在16min (士 lmin)處均有芍藥苷的主峰出現(xiàn)，而圖10中在16min (士 lmin)處沒有芍藥苷的主峰出現(xiàn)，陰性樣品無干擾，表明供試樣品中含有白芍成分，經(jīng)圖譜數(shù)據(jù)處理得到，和絡(luò)舒肝膠囊每粒含白芍以芍藥苷>0. 45mg，即可證明該藥品中白芍成分含量符合規(guī)定。
權(quán)利要求
1.一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，按以下步驟進行一、以α-香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分；二、以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分；三、以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分；四、以芍藥苷為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分；五、以白術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分；六、以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分；七、以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量，即完成和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步驟一中以α -香附酮為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分的方法為1. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加20mL乙醇，超聲處理 15min,濾過，濾液揮干，殘渣加IOmL乙酸乙酯，超聲處理lOmin，濾過，濾液濃縮至0. 5mL,做為供試品溶液；1.2、取α-香附酮為對照品，加乙酸乙酯制成lmg/mL的溶液，作為對照品溶液；1. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除香附以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》 中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟1. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；1. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各 10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯19 1為展開劑，展開，取出，晾干， 置紫外燈254nm下檢視；1. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有香附成分的條件為供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的深蘭色斑點，陰性樣品無干擾；噴以二硝基苯胼乙醇試液，放置片刻，斑點漸變?yōu)槌燃t色，陰性樣品亦無干擾。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步驟二中以莪術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分的方法為2. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加15mL正己烷，超聲處理 5min，濾過，取續(xù)濾液做為供試品溶液；2. 2、另取莪術(shù)對照藥材lg，加15mL正己烷，超聲處理5min，濾過，取續(xù)濾液做為對照品溶液；2. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取處除莪術(shù)以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟2. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；2. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以60 90°C 的石油醚-乙酸乙酯15 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風吹至斑點顯色清晰；2. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有莪術(shù)成分的條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試品中含有莪術(shù)成分；其中步驟2. 4中所述5%香草醛硫酸溶液的配制方法是向5g香草醛加入質(zhì)量濃度為98%的硫酸定容至100毫升。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步驟三中以柴胡為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分的方法為3. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加30mL甲醇，超聲處理 30min,放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加IOmL質(zhì)量濃度為20%的NaOH溶液，加熱溶解，放冷， 轉(zhuǎn)入分液漏斗中，用水飽和正丁醇振搖提取3次，每次15mL，合并正丁醇液，加入等體積的氨試液，搖勻，放置至分層，分取上層液，減壓回收正丁醇至干，殘渣加ImL甲醇使溶解，作 為供試品溶液；3. 2、另取柴胡對照藥材3g，加30mL甲醇，冷浸12h，取上清液蒸干，加30mL 甲醇，加熱回流30min，濾過，濾液減壓回收甲醇至干，殘渣加水15mL使溶解，轉(zhuǎn)入分液漏斗 中，用水飽和正丁醇振搖提取3次，毎次15mL，合并正丁醇液，加入等體積的氨試液，搖勻， 放置至分層，分取上層液，減壓回收正丁醇至干，殘渣加ImL甲醇使溶解，作為對照品溶液；-3.3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除柴胡以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中 藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟3. 1所述供試品溶液 的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；3. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各 5P L分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水13 7 2于10°C以下放置得到 的下層溶液為展開劑，展開，展距10cm，取出，晾干，噴以5%對ニ甲氨基苯甲醛的10%硫酸 乙醇溶液，在150°C加熱至斑點顯色清晰；3. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有柴胡成分的 條件為日光下，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的粉紅色的斑點，陰 性樣品無干擾；置紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上， 顯相同的黃色熒光斑點，陰性樣品亦無干擾，表明供試品中含有柴胡成分。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ー種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于 步驟四中以芍藥苷為對照品，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成 分的方法為4. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加甲醇20mL，超聲提取 20min,濾過，濾液揮干，殘渣加水20mL溶解，用乙醚提取2次，每次20mL，棄去乙醚液，水 層用水飽和正丁醇提取2次，毎次20mL，合并正丁醇提取液，蒸干，殘渣加乙醇lmL，拌2g 中性氧化鋁，水浴上拌勻，干燥，裝入ー預(yù)先裝填好的中性氧化鋁小柱頂部，以甲醇40mL洗 脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇ImL使溶解，作為供試品溶液，其中所述中性氧化鋁小柱 為200 300目，lg，內(nèi)徑為10 15mm ;4. 2、取芍藥苷為對照品，用甲醇制成0. 5mg/mL的 溶液，作為對照品溶液；4. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白芍以外的其他藥材，按照 《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟-4.1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；4. 4、取供試品溶液、對照品溶液 和陰性樣品溶液各10 y L分別點于同一硅膠薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲 酸40 5 10 0.2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯 色清晰；4. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有白芍成分的條件為日光下，供試品色譜中，在 與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試樣品中含有白 芍成分。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ー種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步 驟五中以白術(shù)為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白木成分的 方法為5. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加20mL30 60°C的石油醚， 超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為供試品溶液；5. 2、另取 白術(shù)對照藥材0. 35g，加30 60°C的石油醚5mL，超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加 乙酸乙酯ImL使溶解，作為對照品溶液；5. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白木以外 的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到 的顆粒5g，按步驟5. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；5. 4、取供試品 溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 y L分別點于同一硅膠薄層板上，以60 90°C的石油醚-乙酸乙酯50 1為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點顯色清晰；5. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有白術(shù)成分的條件為日光下，供試品色譜中， 在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明供試品中含有白術(shù)成分；其中步驟5. 4中所述5%香草醛硫酸溶液的配制方法是向5g香草醛加入質(zhì)量濃度為98%的硫酸定容至100毫升。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步驟六中以當歸為對照藥材，采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分的方法為6. 1、供試品溶液的制備取5g和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加20mL30 60°C的石油醚，超聲提取lOmin，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為供試品溶液；6. 2、取 0. 5g當歸對照藥材，加IOmL 30 60°C的石油醚，超聲處理20min，濾過，濾液揮干，殘渣加乙酸乙酯ImL使溶解，作為對照品溶液；6. 3、按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除當歸以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟6. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；6. 4、取供試品溶液、對照品溶液和陰性樣品溶液各10 μ L分別點于同一硅膠薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯9 1為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外燈365nm下檢視；6. 5、鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中含有當歸成分的條件為供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，陰性樣品無干擾，表明供試樣品中含有當歸成分。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，其特征在于步驟七中以芍藥苷為對照品，采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量的方法為7. 1、液相色譜條件的設(shè)定檢測波長為230nm，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑， 以乙腈-0.1%磷酸溶液15 85為流動相；理論板數(shù)按芍藥苷峰計算不低于2000 ;7. 2、 標準溶液的制備稱取芍苷對照品，加甲醇制成60μ g/mL的溶液，作為標準溶液；7. 3、供試品溶液的制備取Ig和絡(luò)舒肝膠囊內(nèi)容物，加體積濃度為50%的乙醇溶液45mL，超聲處理30min，取出，放冷，加體積濃度為50%的乙醇溶液至50mL，搖勻，離心，取上清液，用 0. 45 μ m微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，作為供試品溶液，其中所述超聲處理的功率為MOW、頻率為45kHz ；7. 4、陰性樣品溶液的制備按和絡(luò)舒肝膠囊處方的配比稱取除白芍以外的其他藥材，按照《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第二冊原標準上制法制備，取制備得到的顆粒5g，按步驟7. 1所述供試品溶液的制備方法制備，作為陰性樣品溶液；7. 5、測定白芍色譜圖分別吸取供試品溶液、標準溶液和陰性樣品溶液各20 μ L，注入液相色譜儀，測定，即得；7. 6、根據(jù)色譜圖計算得到和絡(luò)舒肝膠囊中白芍的含量，和絡(luò)舒肝膠囊處方中白芍含量合格的條件為和絡(luò)舒肝膠囊每粒含白芍以芍藥苷不少于0. 45mg。
全文摘要
一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法，涉及一種中藥制劑和絡(luò)舒肝膠囊的質(zhì)量檢測方法。是要解決和絡(luò)舒肝膠囊現(xiàn)有的質(zhì)量標準存在質(zhì)量可控性差、重現(xiàn)性差、可操作性差的問題。方法采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有香附成分；采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有莪術(shù)成分；采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有柴胡成分；采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白芍成分；采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有白術(shù)成分；采用薄層色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中是否含有當歸成分；采用高效液相色譜法鑒別和絡(luò)舒肝膠囊處方中的白芍含量。本發(fā)明方法重現(xiàn)性穩(wěn)定、可操作性強、質(zhì)量可控性強。
文檔編號G01N30/02GK102507838SQ20111033795
公開日2012年6月20日 申請日期2011年10月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月31日
發(fā)明者郎偉君 申請人:哈爾濱樂泰藥業(yè)有限公司