專利名稱：用于多種重金屬的抗原的合成及其應(yīng)用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種環(huán)境污染物檢測技術(shù)領(lǐng)域的方法，具體是一種用于多種重金屬的抗原的合成及其應(yīng)用方法。
背景技術(shù)：
環(huán)境中的重金屬污染，是目前威脅人類健康的一個嚴峻問題。各種有毒有害重金屬包括鎘、鉛、汞、鋅、銅等，在污染了水體和農(nóng)產(chǎn)品之后，通過生物富集作用，富集于食物鏈頂端的人體內(nèi)，產(chǎn)生毒害作用，如重金屬鎘中毒會引起“痛痛病”，鉛中毒損害神經(jīng)和臟器等。要從源頭上控制重金屬污染對人類可能產(chǎn)生的危害，首要的是對重金屬污染的樣品 (包括土壤、水及農(nóng)產(chǎn)品等)進行有效地監(jiān)控與檢測，傳統(tǒng)的重金屬檢測方法如電感耦合等離子發(fā)射光譜等檢測重金屬的方法，雖然能精確定量地檢測重金屬的含量與種類，但需要的儀器代價高昂，對操作人員的要求也很高，同時前處理等工作非常復(fù)雜，檢測的周期也很長，很難滿足大批量快速檢測重金屬并控制其危害的要求。目前國內(nèi)外廣泛開展研究的免疫檢測技術(shù)能較好地滿足這樣的要求，免疫技術(shù)是利用抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)，達到定量檢測重金屬含量的目的。該技術(shù)的關(guān)鍵在于合成重金屬相關(guān)抗原和制備重金屬相關(guān)抗體。重金屬作為一種小分子物質(zhì)不能直接用于免疫動物，也很難產(chǎn)生針對重金屬離子的特異性抗體，所以通常需要一種雙功能螯合劑螯合重金屬與載體蛋白連接，制備可以用于免疫動物的重金屬完全抗原。經(jīng)過對現(xiàn)有技術(shù)的檢索發(fā)現(xiàn)，近年有關(guān)重金屬Cd2+、Hg2+、m32+、U6+、CU2+、ai2+等的抗體都有一定的研究報道，他們合成抗原運用的雙功能螯合劑包括EDTA、DTPA等的衍生物， 但普遍的側(cè)重點在于其抗體的制備，對抗原合成與鑒定研究的報道很少，所用的方法技術(shù)細節(jié)也各有不同，很難找到一種普遍的適用于多種重金屬抗原的合成與鑒定方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，提供一種用于多種重金屬的抗原的合成及其應(yīng)用方法，合成了多種重金屬包括鎘、鉛、汞、鋅等的完全抗原，并經(jīng)過純化、表征鑒定其結(jié)構(gòu)與偶聯(lián)比等關(guān)鍵參數(shù)，確立了一種簡單快速有效的重金屬抗原合成方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明涉及一種用于多種重金屬的抗原，人工合成的抗原分子結(jié)構(gòu)如下所示
權(quán)利要求
1. 一種用于多種重金屬的抗原，其特征在于，抗原分子結(jié)構(gòu)如下所示
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗原的合成方法，其特征在于，通過將雙功能螯合劑 2-(4-氨苯基)_ 二乙三胺五乙酸帶有苯胺基的一端用戊二醛與載體蛋白偶聯(lián)，將帶有羧基的一端螯合重金屬，形成用于多種重金屬的抗原。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是，所述的載體蛋白為大分子蛋白。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的合成方法，其特征是，所述的載體蛋白為鑰孔血藍蛋白、 牛血清白蛋白或卵清蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是，所述的偶聯(lián)是指將p-NH2-Bn-DTPA溶于緩沖液中，利用戊二醛法將P-NH2-Bn-DTPA上的氨基與載體蛋白的氨基偶聯(lián)，再通過超濾離心法或透析去除未反應(yīng)的小分子，制備得到雙功能螯合劑與蛋白的偶聯(lián)化合物溶液。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的合成方法，其特征是，所述的螯合是指將偶聯(lián)得到的化合物溶液中加入目標(biāo)重金屬，經(jīng)過螯合反應(yīng)后形成的重金屬完全抗原。
7.根據(jù)權(quán)利要求2或6所述的合成方法，其特征是，所述的重金屬為鎘、鉛、汞或鋅。
8.一種根據(jù)上述任一權(quán)利要求所述抗原的應(yīng)用，其特征在于，用于制備復(fù)合物相關(guān)多克隆抗體、單克隆抗體及重金屬免疫檢測試劑盒或用于檢測重金屬含量。
全文摘要
一種環(huán)境污染檢測技術(shù)領(lǐng)域的用于多種重金屬的抗原的合成及其應(yīng)用方法，其分子結(jié)構(gòu)為本發(fā)明合成了多種重金屬包括鎘、鉛、汞、鋅等的完全抗原，并經(jīng)過純化、表征鑒定其結(jié)構(gòu)與偶聯(lián)比等關(guān)鍵參數(shù)，確立了一種簡單快速有效的重金屬抗原合成方法。
文檔編號G01N33/53GK102260347SQ20111015714
公開日2011年11月30日 申請日期2011年6月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月13日
發(fā)明者周培, 奚濤, 支月娥, 詹學(xué)佳, 邢海波 申請人:上海交通大學(xué)