專利名稱：一種基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明提供一種基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，屬于顯微鏡研究 技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
激光掃描共聚焦顯微鏡由顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)、激光光源、掃描裝置和計(jì)算機(jī)操作系 統(tǒng)構(gòu)成，整套儀器由計(jì)算機(jī)控制，各部件之間的操作切換都可在計(jì)算機(jī)操作平臺界面中方 便靈活地進(jìn)行。激光掃描共聚焦顯微鏡采用激光作為光源，利用放置在光源后的照明針孔 和放置在檢測器前的探測針孔實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測，來自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的 光聚焦在樣品焦平面的某個點(diǎn)上，該點(diǎn)所發(fā)射的熒光成像在探測針孔上，該點(diǎn)以外的發(fā)射 光被探測針孔阻擋。照明針孔與探測針孔對被照射點(diǎn)或被探測點(diǎn)來說是共軛的，因此被探 測點(diǎn)即共焦點(diǎn)，被探測點(diǎn)所在的平面即共焦平面。使用共聚焦顯微鏡，可以采集組織或細(xì)胞內(nèi)部的熒光標(biāo)記信號、觀察活細(xì)胞內(nèi)離 子濃度的變化、觀察組織或細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化和內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)。同時，還可以對采集的圖像 進(jìn)行三維重構(gòu)和熒光標(biāo)記強(qiáng)度的半定量分析；對熒光原位雜交、基因定位和原位實(shí)時PCR 產(chǎn)物進(jìn)行分析。目前，激光掃描共聚焦顯微鏡已成為細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)、藥理學(xué)、組織解 剖學(xué)研究的重要手段。普通光學(xué)顯微鏡不能用于頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)的觀察，觀察頭發(fā)絲的鱗片狀結(jié)構(gòu)一 般需要采用掃描電子顯微鏡，但掃描電子顯微鏡樣品制備較為復(fù)雜，設(shè)備較為昂貴。本發(fā)明 采用激光掃描共聚焦顯微鏡觀察頭發(fā)絲，可以采集頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)圖像，方法簡便；建立 了可見光作為光源分析頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，其技術(shù) 方案為采用0.5%吖啶橙標(biāo)記頭發(fā)絲15分鐘，并用去離子水沖洗1分鐘；采用激光掃描共 聚焦顯微鏡氬離子激光器488nm波長的激光掃描頭發(fā)絲樣品，并采用XYZ掃描程序采集圖 像；采集信號波長為520 600nm。該方法操作簡單，可觀察頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有如下優(yōu)點(diǎn)1、操作簡便，成本低；2、采用可見光源采集頭發(fā)的精細(xì)結(jié)構(gòu)；3、應(yīng)用范圍較廣，可用于人頭發(fā)絲或其它動物毛發(fā)的顯微結(jié)構(gòu)觀察。


附圖是本發(fā)明的實(shí)施例的頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1剪取頭發(fā)絲Icm采用0. 5%吖啶橙標(biāo)記頭發(fā)絲15分鐘，并用去離子水沖洗1分鐘； 采用激光掃描共聚焦顯微鏡氬離子激光器488nm波長的激光掃描頭發(fā)絲樣品，并采用XYZ 掃描程序采集圖像；采集信號波長為520 600nm。該方法操作簡單，可觀察頭發(fā)絲鱗片狀 結(jié)構(gòu)。
權(quán)利要求
1.一種基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，其特征在于(1)采用0. 5%吖 啶橙標(biāo)記頭發(fā)絲15分鐘，用去離子水沖洗1分鐘；(2)采用激光掃描共聚焦顯微鏡氬離子 激光器488nm波長的激光掃描、采集圖像；采集信號波長為520 600nm。(2)采用激光掃 描共聚焦顯微鏡XYZ掃描程序采集圖像。該方法操作簡單，可觀察頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)。
2.如權(quán)利要求1所述的基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，其特征在于 采用0. 5%吖啶橙標(biāo)記頭發(fā)絲，標(biāo)記時間為15分鐘。
3.如權(quán)利要求1所述的基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，其特征在于 采用激光掃描共聚焦顯微鏡氬離子激光器488nm波長的激光掃描、采集圖像；采集信號波 長為520 600nm。
4.如權(quán)利要求1所述的基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，其特征在于 采用激光掃描共聚焦顯微鏡XYZ掃描程序采集圖像。
全文摘要
本發(fā)明提供一種基于激光掃描共聚焦顯微鏡的頭發(fā)絲成像方法，其特征在于采用0.5％吖啶橙標(biāo)記頭發(fā)細(xì)絲，并用去離子水沖洗1分鐘；采用激光掃描共聚焦顯微鏡氬離子激光器488nm波長的激光掃描頭發(fā)絲樣品，并采用XYZ掃描程序采集圖像。該方法操作簡單，可觀察頭發(fā)絲鱗片狀結(jié)構(gòu)。
文檔編號G01N21/63GK102095705SQ20101058482
公開日2011年6月15日 申請日期2010年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月9日
發(fā)明者劉東武, 陳志偉 申請人:山東理工大學(xué)