專利名稱：測(cè)定卷煙及其主流煙氣中中草藥大黃添加劑有效成分的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及大黃有效成分的測(cè)定方法，特別是測(cè)定卷煙及其主流煙氣中大黃有效 成分含量的方法。
背景技術(shù)：
隨著全球性控?zé)熯\(yùn)動(dòng)的不斷推進(jìn)，社會(huì)公眾對(duì)于吸煙與健康問題日益關(guān)注，煙草 行業(yè)如何通過技術(shù)創(chuàng)新，切實(shí)降低卷煙危害性，滿足廣大消費(fèi)者的利益成為關(guān)乎行業(yè)持續(xù) 健康發(fā)展的關(guān)鍵問題。我國(guó)具有豐富的中草藥資源和悠久的中草藥研究歷史，在利用中草 藥資源降低卷煙危害性方面，行業(yè)中已開展了相關(guān)研究，取得了初步效果，形成了一批市場(chǎng) 反應(yīng)良好、風(fēng)格特征顯著、具有較低危害性的中式卷煙產(chǎn)品。中草藥大黃是為蓼科植物掌葉 大黃、唐古特大黃或藥用大黃的干燥根及根莖，其主要有效效成分為1，8_ 二羥基蒽醌類衍 生物，包括大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等，這些物質(zhì)及其苷類具有消 炎、抗癌等多種生理活性。將中草藥大黃的提取物作為添加劑加入卷煙后，不僅可以降低卷 煙煙氣中自由基、特有亞硝胺等有害成分的含量，而且具有生津、緩解咽喉不適等功效。這 些功效與中草藥大黃的有效成分密切相關(guān)，但是目前關(guān)于添加中草藥大黃添加劑的卷煙煙 絲，尤其是卷煙主流煙氣中大黃有效成分含量的研究尚未見報(bào)道，其主要原因是卷煙煙絲 中大黃有效成分的含量往往很低，尤其是在燃燒過程中，這些有效成分可能經(jīng)熱裂解、化學(xué) 反應(yīng)等產(chǎn)生變化，造成這些有效成分在卷煙主流煙氣中的含量更低，給分析檢測(cè)帶來很大 的誤差與不便。目前中草藥大黃五種有效成分的分析方法主要是高效液相色譜法。這種方法雖然 可以實(shí)現(xiàn)這五種化合物的基線分離，但是受檢測(cè)器靈敏度低、自身抗干擾能力弱等方面的 限制，在分析低含量樣品時(shí)容易造成定量不準(zhǔn)確或因含量太低無法定量，不適用于卷煙煙 絲及卷煙主流煙氣中中草藥大黃添加劑有效成分的測(cè)定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的正是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足之處，提供一種測(cè)定卷煙及主流煙 氣中中草藥大黃添加劑有效成分的方法。該方法首先能夠有效地將添加中草藥大黃添加劑 的卷煙煙絲及其主流煙氣粒相物中大黃主要有效成分完全提取，可實(shí)現(xiàn)快速、準(zhǔn)確定量分 析。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的一種測(cè)定卷煙及其主流煙氣中大黃有效成分含量的方法，包括以下步驟(1)對(duì)于添加中草藥大黃添加劑的卷煙，將其在21_23°C、相對(duì)濕度58% -62%的 條件下平衡47-49小時(shí)后，測(cè)定50支卷煙的平均質(zhì)量和平均吸阻，按照平均質(zhì)量士0. Olg 和平均吸阻士49Pa挑選出合適的煙支。(2)卷煙煙絲的處理取10-20支卷煙的煙絲于玻璃容器中，加入50_250mL的醇類試劑作為提取溶劑，稱重，經(jīng)提取后，得到大黃的主要有效成分，用上述醇類試劑補(bǔ)足重 量，過濾，濾液稀釋1-10倍后，得樣品1。(3)卷煙主流煙氣粒相物的捕集與處理在吸煙機(jī)上，使用92mm的玻璃纖維濾片， 捕集10-20支卷煙主流煙氣的粒相物，放置3-5min后取出濾片，將濾片置于玻璃容器中，加 入50-250mL的醇類試劑作為提取溶劑，稱重，經(jīng)提取后，得到大黃的主要有效成分，用上述 醇類試劑補(bǔ)足重量，過濾后得樣品2。(4)對(duì)所得樣品1和樣品2進(jìn)行超高效液相色譜_串聯(lián)質(zhì)譜分析a.色譜條件分析柱Waters Acquity UPLC BEH C8 (1. 7 μ m，2. 1 X 100mm)；流動(dòng) 相A相為5-20mmol/L含有機(jī)鹽I的水溶液，B相為0. -0. 5% (V/V)含有機(jī)酸II的乙 腈溶液，梯度洗脫；流速0. 25mL/min ；柱溫30°C。b.質(zhì)譜條件根據(jù)大黃主要有效成分各化合物的質(zhì)譜碎裂規(guī)律，選擇串聯(lián)質(zhì)譜的 特定掃描模式進(jìn)行分析。具體參數(shù)如下氣簾氣20mL/min ；碰撞氣中；離子源氣1 :50mL/ min ；離子源氣2 :60mL/min ；接口加熱器開 ’溫度600°C ；離子噴霧電壓_4200V。c.大黃主要有效成分的定性定量分析通過對(duì)比各個(gè)化合物標(biāo)準(zhǔn)品和樣品1、2 中各化合物的色譜保留時(shí)間以及質(zhì)譜碎裂的離子碎片進(jìn)行定性，各化合物的離子碎片信息 如表1所示。分別將大黃酸、蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚溶于上述醇類試劑，根據(jù) 需要配成一系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(5ug/L-500ug/L)，進(jìn)樣，記錄各化合物響應(yīng)的峰 面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，以濃度為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得到線性回歸方程。在同樣的分 析條件下對(duì)樣品1、2進(jìn)行分析，以外標(biāo)法計(jì)算各有效成分的含量。本發(fā)明中，所述卷煙為添加了中草藥大黃添加劑的卷煙。所述提取過程可為超聲 波提取，也可為震蕩提取，或浸泡提取。所述醇類試劑可為甲醇，也可為乙醇；所述有機(jī)鹽I可為甲酸銨，也可為乙酸銨； 有機(jī)酸II可為甲酸，也可為乙酸；所述特定的掃描模式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明能夠有效地將添加中草藥大黃添加劑的卷煙煙絲及 其主流煙氣粒相物中大黃主要有效成分完全提取，然后經(jīng)過超高效液相色譜分離，串聯(lián)質(zhì) 譜的特定掃描模式分析，從而實(shí)現(xiàn)大黃有效成分的快速、準(zhǔn)確定量分析。所述方法的檢測(cè)限 在IOng/支左右，遠(yuǎn)低于高效液相色譜法的檢測(cè)限(IOug/支左右)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果，煙絲中 各有效成分的含量為l_5ug/支，主流煙氣粒相物中各有效成分的含量為20-500ng/支，明 顯比高效液相色譜法更適合于卷煙煙絲及煙氣中大黃有效成分的分析檢測(cè)。另外本方法的 選擇性強(qiáng)，具有更好的抗干擾能力，測(cè)定結(jié)果更加準(zhǔn)確、可靠。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明以下將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步描述，但并不限定本發(fā)明的實(shí)施范圍。實(shí)施例1a、對(duì)于添加中草藥大黃提取物的卷煙，將其在22°C、相對(duì)濕度60%的條件下平 衡48小時(shí)后，測(cè)定50支卷煙的平均重量和平均吸阻，按照平均重量士0. Olg和平均吸阻 士 49Pa挑選出合適的煙支。b、卷煙煙絲樣品的處理取10支卷煙的煙絲于250mL的具塞錐形瓶中，用移液管準(zhǔn)確加入IOOmL甲醇溶液，稱重，在常溫下，在超聲功率350W和超聲波頻率為70KHz下超聲 30min，靜置5min，補(bǔ)足重量，過濾。準(zhǔn)確移取ImL濾液于IOmL容量瓶中，以甲醇定容至刻 度，搖勻，經(jīng)0. 22 μ m微米濾膜過濾后，即可進(jìn)行分析。C、卷煙主流煙氣粒相物的捕集與處理卷煙煙氣的捕集使用一張92毫米玻璃纖 維濾片，在溫度22 °C、相對(duì)濕度60 %條件下，用RM200 二十孔道轉(zhuǎn)盤式吸煙機(jī)捕集卷煙主流 煙氣。抽吸結(jié)束后，空吸2 口，取出捕集器，放置3分鐘后取出濾片，移至250mL錐形瓶中， 用移液管準(zhǔn)確加入IOOmL甲醇溶液，稱重，在超聲功率350W和超聲波頻率為70KHz下超聲 30min,靜置2min，補(bǔ)足重量，經(jīng)0. 22 μ m濾膜過濾后，即可進(jìn)行分析。d、對(duì)所得樣品進(jìn)行超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析1.色譜條件分析柱Waters Acquity UPLC BEH C8 (1. 7 μ m，2. 1 X IO(Mim)；流 動(dòng)相A為lOmmol/L的甲酸銨水溶液，B為0. 2%的甲酸乙腈溶液(V/V)；梯度條件0min， A B(35 % 65 % ),3min, A B(70 % 30 % ),5min, A B(70 % 30 % ),7min, A B(35% 65%)。流速0. 25mL/min ；柱溫 30°C。2.質(zhì)譜條件采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式進(jìn)行定量分析，各化合物的特征母離 子-子離子對(duì)如下表所示表1大黃5種有效成分的碎片信息
權(quán)利要求
一種測(cè)定卷煙及其主流煙氣中大黃有效成分含量的方法，其特征在于包括以下步驟(1)對(duì)于添加中草藥大黃添加劑的卷煙，將其在21 23℃、相對(duì)濕度58％ 62％的條件下平衡47 49小時(shí)后，測(cè)定50支卷煙的平均質(zhì)量和平均吸阻，按照平均質(zhì)量±0.01g和平均吸阻±49Pa挑選出合適的煙支；(2)卷煙煙絲的處理取10 20支卷煙的煙絲于玻璃容器中，加入50 250mL的醇類試劑作為提取溶劑，稱重，經(jīng)提取后，得到大黃的主要有效成分，用上述醇類試劑補(bǔ)足重量，過濾，濾液稀釋1 10倍后，得樣品1；(3)卷煙主流煙氣粒相物的捕集與處理在吸煙機(jī)上，使用92mm的玻璃纖維濾片，捕集10 20支卷煙主流煙氣的粒相物，放置3 5min后取出濾片，將濾片置于玻璃容器中，加入50 250mL的醇類試劑作為提取溶劑，稱重，經(jīng)提取后，得到大黃的主要有效成分，用上述醇類試劑補(bǔ)足重量，過濾后得樣品2；(4)對(duì)所得樣品1和樣品2進(jìn)行超高效液相色譜 串聯(lián)質(zhì)譜分析a.色譜條件分析柱Waters Acquity UPLC BEH C8；流動(dòng)相A相為5 20mmol/L含有機(jī)鹽I的水溶液，B相為含有體積占0.1％ 0.5％的機(jī)酸II的乙腈溶液，梯度洗脫；流速0.25mL/min；柱溫30℃；b.質(zhì)譜條件根據(jù)大黃主要有效成分的質(zhì)譜碎裂規(guī)律，選擇串聯(lián)質(zhì)譜的特定掃描模式進(jìn)行分析；具體參數(shù)如下氣簾氣20mL/min；碰撞氣中；離子源氣150mL/min；離子源氣260mL/min；接口加熱器開；溫度600℃；離子噴霧電壓 4200V。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定卷煙及其主流煙氣中大黃有效成分含量的方法，其 特征在于所述卷煙為添加了中草藥大黃添加劑的卷煙。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定卷煙及其主流煙氣中大黃有效成分含量的方法，其 特征在于所述提取過程可為超聲波提取，也可為震蕩提取，或浸泡提取。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測(cè)定卷煙及其主流煙氣中大黃有效成分含量的方法，其 特征在于所述醇類試劑可為甲醇，也可為乙醇；所述有機(jī)鹽I可為甲酸銨，也可為乙酸銨； 有機(jī)酸II可為甲酸，也可為乙酸；所述特定的掃描模式為多反應(yīng)監(jiān)測(cè)掃描模式。
全文摘要
一種測(cè)定卷煙及其主流煙氣中中草藥大黃添加劑有效成分的方法，涉及大黃有效成分的測(cè)定方法。包括以下步驟(1)按照平均質(zhì)量和平均吸阻挑選出合適的煙支。(2)對(duì)卷煙煙絲進(jìn)行大黃有效成分的提取。(3)對(duì)卷煙主流煙氣粒相物的捕集及大黃有效成分的提取。(4)對(duì)所提取的大黃的有效成成進(jìn)行超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明能夠有效地將添加中草藥大黃添加劑的卷煙煙絲及其主流煙氣粒相物中大黃主要有效成分完全提取，然后經(jīng)過超高效液相色譜分離，串聯(lián)質(zhì)譜的特定掃描模式分析，從而實(shí)現(xiàn)大黃有效成分的快速、準(zhǔn)確定量分析。
文檔編號(hào)G01N30/02GK101975826SQ201010182228
公開日2011年2月16日 申請(qǐng)日期2010年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2010年5月25日
發(fā)明者廖堃, 樊海燕, 蔡繼寶, 郭磊 申請(qǐng)人:江西中煙工業(yè)有限責(zé)任公司