專利名稱：一種甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯b的高效液相—蒸發(fā)光檢測分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的高效液相-蒸發(fā)光檢測分析方法，對該藥 物的有關(guān)物質(zhì)控制及藥物質(zhì)量標準的提高具有很好的作用，屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
銀杏，降痰、清毒、殺蟲之功能，可治療“瘡疥疽瘤、乳癰潰爛、牙齒蟲齲、小兒腹瀉、 赤白帶下、慢性淋濁、遺精遺尿等癥”。入肺經(jīng)、益脾氣、定喘咳、縮小便。銀杏是廣泛應(yīng)用于 心血管等中藥復方中，其有效成分為脂溶性的二萜化合物和水溶性的黃酮類化合物。脂溶性銀杏酮中主要有銀杏黃酮、銀杏內(nèi)酯、白果內(nèi)酯等成分。甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B原料為銀杏內(nèi)酯水的衍生物，提高了銀杏內(nèi)酯水的水溶性， 其拮抗血小板活化因子的作用提高10倍以上。高效液相-蒸發(fā)光檢測分析法對甲磺酸胺 銀杏內(nèi)酯B有關(guān)物質(zhì)的控制也未見有任何報道。蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)的檢測方法消除了常見于傳統(tǒng)HPLC檢測方法中的難 點，它不同于紫外(UV)和熒光(FLD)檢測器，ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學特性，任何 揮發(fā)性低于流動相的樣品均能被檢測，不受其官能團的影響。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量 成正比，因而能用于測定樣品的純度或者檢測未知物。蒸發(fā)光散射檢測器是一種通用型的檢測器，可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣 品，而不需要樣品含有發(fā)色基團。蒸發(fā)光散射檢測器靈敏度比示差折光檢測器高，對溫度變 化不敏感，基線穩(wěn)定，適合與梯度洗脫液相色譜聯(lián)用。高效液相梯度洗脫和ELSD的聯(lián)用，可以檢測出在紫外和熒光檢測器中無法檢測 的雜質(zhì)，反映甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的真實雜質(zhì)含量。梯度洗脫可以縮短試驗周期，降低費 用，節(jié)約能源，保護環(huán)境。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的高效液相_蒸發(fā)光檢測分析方法，該方法 體現(xiàn)是用一種流動相梯度洗脫的高效液相條件能更有效、科學、便捷的控制甲磺酸胺銀杏 內(nèi)酯水藥物原料及制劑的有關(guān)物質(zhì)，為本藥物有關(guān)物質(zhì)的質(zhì)量標準的提高提供了一個有效 的方法。本發(fā)明的高效液相條件為分析柱反相色譜柱，C18柱或C8柱。流速0· 5ml/min-l. 5ml/min流動相有機相為甲醇、乙腈或兩者的混合溶液；水相為1 lOOmmol/L的甲酸、 氨水、甲酸銨等中的一種或幾種的水溶液，PH值為8. 0 10. 0。梯度洗脫在0分鐘 40分鐘內(nèi)，有機相比例從20 %變?yōu)?0 %。檢測器ELSD
采用該液相色譜條件，能有效分析出甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B原料及制劑中的雜質(zhì)， 特別是用紫外或熒光檢測器無法檢測的雜質(zhì)。
具體實施例實施例1甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的雜質(zhì)檢查高效液相_蒸發(fā)光檢測分析與高效液相 紫外(UV)分析比較。1)取本品(090201批)適量，以流動相配成5mg/ml的溶液，分別以UV和ELSD檢 測器進行雜質(zhì)檢查。分析柱C18柱流速L0ml/min漂移管溫度30°C，載氣壓力為1. Obar ；流動相條件有機相是甲醇，水相是lOmmol/L甲酸銨緩沖液(pH8. 0)梯度洗脫在0分鐘 3分鐘時，有機相比例為20%，在3至40分鐘時，有機相比例 為 80%。2) HPLC-UV等度檢測條件如下取本品(090201批)適量，以流動相配成5mg/ml的溶液，分別以UV和ELSD檢測 器進行雜質(zhì)檢查。分析柱C18柱流速L0ml/min檢測波長2IOnm流動相條件甲醇10mmol/L甲酸銨溶液(pH8. 0) = 40 60結(jié)果如下表，采用ELSD檢測，能反映甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B中雜質(zhì)的真實情況。
檢測器類型UVELSD雜質(zhì)總量(％)1.021. 58實施例2甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B原料雜質(zhì)檢查。取甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B(090201批)、注射用甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B(090201批)適 量，流動相配成5mg/ml的溶液，以ELSD檢測器進行雜質(zhì)檢查。分析柱C18柱流速L0ml/min漂移管溫度40°C，載氣壓力為1. 5bar流動相條件有機相是甲醇，水相是lOmmol/L甲酸溶液(以氨水調(diào)節(jié)pH值至 9. 0)；梯度洗脫程序
權(quán)利要求
一種甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的高效液相 蒸發(fā)光分析檢測方法，其特征是該方法采用蒸發(fā)光散射檢測器，按反相色譜法進行梯度洗脫，在0分鐘～40分鐘時，有機相比例為從20％變?yōu)?0％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效液相分析方法，其特征是流動相中有機相是甲醇、乙腈 或兩者的混合溶液，水相為1 lOOmmol/L的甲酸、氨水、甲酸銨等中的一種或幾種的水溶 液，PH值為8.0 10.0。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效液相分析方法，蒸發(fā)光散射檢測器的漂移管溫度為30 45°C，載氣壓力為1. 0 2. Obar。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效液相分析方法，其特征是色譜柱為反相色譜柱；流速是 0. 5ml/min 1. 5ml/min。
全文摘要
本發(fā)明是一種甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B的高效液相色譜-蒸發(fā)光分析檢測方法，使用不同非極性的色譜柱，用一種或幾種有機溶劑和1～100mmol/L緩沖鹽溶液作為流動相，流動相流速為0.1-1.5ml/min，梯度洗脫，在蒸發(fā)光散射檢測器檢測(漂移管溫度為30～45℃，載氣壓力為1.0～2.0bar)。對甲磺酸胺銀杏內(nèi)酯B原料藥及其制劑進行鑒別、有關(guān)物質(zhì)檢查與含量測定，以控制其質(zhì)量。
文檔編號G01N30/74GK101936958SQ20091003254
公開日2011年1月5日 申請日期2009年7月1日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月1日
發(fā)明者毛黎順, 秦引林 申請人:秦引林