專利名稱：：具有共享區(qū)的分析裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于測定被分析物的存在或程度的分析裝置、全套元件及方法。具體涉及超過擴(kuò)大的濃度范圍的被分析物的測定。
背景技術(shù)：
：簡易側(cè)向流動免疫測定裝置已經(jīng)得到發(fā)展并被商品化，用于檢測液體試樣中的被分析物，參見實例EP291194。這種裝置一般包含有孔載體，該載體包含干燥的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑和固定的結(jié)合試劑，該干燥的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑能夠結(jié)合到所述被分析物上，該固定的結(jié)合試劑同樣能夠結(jié)合到在標(biāo)記結(jié)合試劑下游的檢測區(qū)所提供的被分析物。在檢測區(qū)中的固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測表明，試樣中存在被分析物?？蛇x擇地，如果感興趣的被分析物為半抗原，該免疫測定裝置可以采用競爭反應(yīng)，其中標(biāo)記被分析物或被分析物類似物，與試樣中存在的被分析物競爭在檢測區(qū)的固定的結(jié)合試劑?？蛇x擇地，該分析裝置可以采用抑制反應(yīng)，借以向固定的被分析物或被分析物的類似物提供檢測區(qū)，該分析裝置包含用于被分析物的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑。分析裝置可以測定不只一種被分析物。例如，就測定濫用藥物存在的分析來說，該裝置能夠測定一整面板的藥物。這種側(cè)向流動免疫測定裝置設(shè)有多個檢測區(qū)，這些區(qū)在單個或多個側(cè)向流動載體上提供。分析結(jié)果的測定傳統(tǒng)上是通過眼睛進(jìn)行。然而，該裝置要求使用者對結(jié)果進(jìn)行解釋，這會引入不希望的主觀程度。同樣，數(shù)字裝置發(fā)展成含有排列以測定分析結(jié)果的光學(xué)檢測裝置，以及顯示分析結(jié)果的顯示裝置。數(shù)字分析讀取器與分析試驗帶結(jié)合使用，用于測定液體試樣中被分析物的濃度和/或量，被認(rèn)為是含有完整的數(shù)字分析讀取器的分析裝置。來自例如發(fā)光二極管(LED)的光源的光照射在有孔載體的一部分上，用光電探測器檢測反射光或透射光。一般地，讀取器將具有不只一個LED，以照亮載體的不同區(qū)，并為多個LED中的每一個提供相應(yīng)的光電探測器。EP1484601公開了一種側(cè)向流動試驗帶數(shù)字讀取裝置的光學(xué)排列，該光學(xué)排列考慮了減少裝置中光電探測器數(shù)目的可能性，包含擋板排列。該裝置經(jīng)常設(shè)計成單個使用，因此希望保持該裝置的成本盡可能低，尤其是涉及到昂貴的光學(xué)及電子元件的地方。
發(fā)明內(nèi)容依據(jù)本發(fā)明的一個方面的目的在于提供一種具有一個或多個共享區(qū)的分析裝置，使得含有兩個或多個分析流路的分析裝置所需光學(xué)元件的數(shù)目減少。根據(jù)第一個方面，本發(fā)明提供了一種用于測定液體試樣中一種或多種被分析物的存在和/或程度的分析裝置，所述分析裝置包含a)第一和第二分析，各包含一流路，所述流路具有用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑進(jìn)行的檢測，可以表明一種或多種被分析物的存在和/或程度；b)共享參比區(qū)；c)一個或多個光源，用于照亮檢測區(qū)及參比區(qū)；d)—個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)及參比區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生信號，其信號強(qiáng)度與檢測的光量相關(guān)；以及e)信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號。本發(fā)明的另一個目的是提供一種分析讀取器，所述分析讀取器用于與含有兩個或多個分析流路的一個或多個分析試驗帶一起使用，所述分析讀取器在一般所需的光學(xué)元件的數(shù)目上有所減少。根據(jù)第二個方面，本發(fā)明提供一種分析讀取器，用于讀取各含有一流路的第一及第二分析的結(jié)果，每個流路包含一個用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑進(jìn)行的檢測，可以表明一種或多種被分析物的存在和/或程度，以及共享參比區(qū)；所述分析讀取器包含a)—個或多個光源，用于照亮檢測區(qū)及共享參比區(qū)；b)—個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)及參比區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生信號，其信號的強(qiáng)度與檢測的光量有關(guān)；以及信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號，其中從共享參比區(qū)所得到的信號用于補償從檢測區(qū)所得信號的值。優(yōu)選地操作讀取器可讀取的分析在一個或多個分析試驗帶上進(jìn)行，所述分析試驗帶包含第一及第二流路，每個流路包含相應(yīng)的一個所述檢測區(qū)。第一和/或第二分析可以包含標(biāo)記結(jié)合試劑，在裝置使用之前、以干燥狀態(tài)、在檢測區(qū)上游、以不固定形式提供所述標(biāo)記結(jié)合試劑。共享參比區(qū)可以作為第一或者第二分析的部分被包含?？蛇x擇地，參比區(qū)可以在第一及第二分析的輔助流路上提供。參比區(qū)可以選自不對應(yīng)于檢測區(qū)的流路的部分、或者干燥標(biāo)記試劑在檢測區(qū)上游所存在的位置，不對應(yīng)于干燥標(biāo)記試劑所存在的位置的部分中選擇。參比區(qū)可以在檢測區(qū)下游或上游提供。參比區(qū)的測量能夠?qū)牧髀贩瓷涞幕蛲干涞墓獾谋尘八竭M(jìn)行測量。背景水平可能受到某些影響，例如，有孔載體的光學(xué)反射、液體試樣或如標(biāo)記結(jié)合試劑的分析元件的存在。在檢測區(qū)測量的光水平因此相對于到背景光的水平被校正，以提供補償?shù)男盘枺_地表明在檢測區(qū)存在的標(biāo)記結(jié)合試劑的量。在參比區(qū)的測量也補償在應(yīng)用于分析裝置的液體試樣之間的任何差異，例如，尿樣可以在顏色上有很大程度的差異。在參比區(qū)所得到的一個分析的信號值，用于補償在檢測區(qū)所得到的另一個分析中的信號值。像這樣，參比區(qū)被兩個分析之間"共享"。共享參比區(qū)的提供能夠減少分析裝置所需的元件數(shù)目，這是因為每個參比區(qū)一般需要一個光源。共享參比區(qū)的概念相當(dāng)違反直覺。參比測量的目的是考慮到信號背景讀數(shù)的變化，這種變化尤其是可能作為試劑或分析帶成分變化的結(jié)果。因此，正常慣例是在每個分析時用分隔的參比區(qū)，這樣，每個分析可以進(jìn)行"專一的"參比測量。然而本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，分離的參比區(qū)可以被省掉，用一個共享參比區(qū)進(jìn)行代替足夠。光源適宜地為LED?？梢圆捎枚鄠€LED。在一個實施例中，分析中的每個區(qū)(檢測區(qū)、參比區(qū)或控制區(qū))被相應(yīng)的LED所照亮。一個或多個光電探測器可以適宜地包含光電二極管。在一個優(yōu)選的實施例中，采用單一的光電二極管或其他光電探測器。在一個實施例中，有四個LED和單個光電二極管。分析裝置還可以包含控制區(qū)，該控制區(qū)可以是作為第一或者第二分析的部分而提供的單個控制區(qū)?？蛇x擇地，控制區(qū)可以在第一或第二分析的附屬流路上提供。單個控制區(qū)的提供進(jìn)一步減少所需光源的數(shù)目?？刂茀^(qū)的目的是表明分析已被正確地執(zhí)行，即液體試樣已經(jīng)應(yīng)用于裝置，標(biāo)記結(jié)合試劑已經(jīng)沿流路移動至某種程度?？刂茀^(qū)可在檢測區(qū)下游提供。EP291194中公開了合適的控制區(qū)，所述控制區(qū)可以含有固定結(jié)合試劑，用于標(biāo)記結(jié)合試劑。標(biāo)記結(jié)合試劑的單獨的種群可以在檢測區(qū)和控制區(qū)上游提供，其中所述標(biāo)記結(jié)合試劑的單獨種群能夠被固定在控制區(qū)，但在檢測區(qū)，在被分析物存在或不存在的條件下，并不會變得固定。控制區(qū)一般在檢測區(qū)下游提供。在控制區(qū)所得到的信號也可以相對于在參比區(qū)所得到的信號被參考。因此，在控制區(qū)信號的測量提供了對于該分析試驗被正確(或不正確)地進(jìn)行的值或指示。例如，如果控制區(qū)表明對于一個分析，試驗已經(jīng)被正確地進(jìn)行，則假設(shè)在另一個分析中，試驗被正確地進(jìn)行。因此，控制區(qū)可以被認(rèn)為是在分析裝置的各分析間"共享的"。就共享參比區(qū)來說，單個的或"共享的"控制區(qū)的提供，使得裝置中所用的光學(xué)元件的數(shù)目減少。作出該假設(shè)的原理在于，如果液體試樣已經(jīng)應(yīng)用于一個分析流路，則液體試樣非常有可能已經(jīng)用于其他流路，如果例如通過公共試樣接收裝置，如有孔的試樣接收器，兩個分析流路相互連接，尤其是這樣。此外，如果分析裝置已經(jīng)受到例如環(huán)境的影響，如水分的進(jìn)入，例如會導(dǎo)致不固定試劑較差的再懸浮性，或高溫會使結(jié)合試劑變性，全部兩個流路都很可能會受到影響。就共享參比區(qū)來說，共享控制區(qū)的概念也是違反直覺的?？刂茀^(qū)信號相對于參比區(qū)的信號被計算。參比及控制區(qū)可以作為相同分析的部分被提供，或作為不同分析的部分被提供。在一個示例性實施例中，共享參比區(qū)及控制區(qū)分別在單獨的分析中被提供，例如，一個分析包含檢測區(qū)和參比區(qū)，另一個分析包含檢測區(qū)和控制區(qū)。根據(jù)第三個方面，本發(fā)明提供一種分析裝置，用于測定液體試樣中一種或多種被分析物的存在和/或程度，所述分析裝置包含a)第一和第二分析，各包含一流路，所述流路具有一個用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中，在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑進(jìn)行的檢測，可以表明一種或多種被分析物的存在和/或程度；b)共享控制區(qū)；C)一個或多個光源，用來照亮檢測區(qū)及控制區(qū)；d)—個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)及控制區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生信號，其信號強(qiáng)度與檢測的光量相關(guān)；以及e)信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號。根據(jù)第四個方面，本發(fā)明提供一種分析讀取器，用于讀取第一及第二分析的結(jié)果，所述第一及第二分析的每個包含一流路，每個流路包含用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中，在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑進(jìn)行的檢測，可以表明一種或多種被分析物的存在和/或程度；以及共享控制區(qū)；所述分析讀取器包含a)—個或多個光源，用來照亮檢測區(qū)及共享控制區(qū)；b)貯存的控制信號閾值；c)一個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)及控制區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生控制信號及檢測信號，其信號強(qiáng)度與檢測的光量相關(guān)；以及d)信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號，并對從控制區(qū)所得到的信號與控制信號閾值進(jìn)行比較，如果控制信號等于或大于控制信號閾值，確定兩個分析均被正確地進(jìn)行。依據(jù)本發(fā)明的第一、第二、第三個方面的分析裝置及讀取器可以含有控制信號閾值?？刂菩盘栭撝悼梢源鎯υ谘b置或讀取器中。從控制區(qū)測量的信號可以與控制信號閾值相比較，以確定是否有足夠的標(biāo)記結(jié)合試劑已在所述區(qū)變得固定。如果控制信號的值等于或超過控制信號閾值，裝置或讀取器可以確定分析被滿意地進(jìn)行。如果控制信號低于控制信號閾值，裝置或讀取器將確定分析并未被滿意地進(jìn)行，并將給出錯誤信息。從控制區(qū)檢測的信號可以對由參比區(qū)得到的信號有參考作用。依據(jù)第三個方面，分析裝置也可以含有一個共享參比區(qū)。第一和/或第二分析可以適宜地包含在檢測區(qū)以固定的形式提供的標(biāo)記結(jié)合試劑或用于被分析物的結(jié)合試劑。通過采用共享參比區(qū)和/或共享控制區(qū)，本發(fā)明的分析裝置為減少了需要被詢問的區(qū)的數(shù)目，從而，減少了所需采用的光學(xué)元件的數(shù)目的減少而提供。當(dāng)?shù)谝缓偷诙治龅姆治鼋Y(jié)構(gòu)非常相似時，或者如果參比區(qū)和/或控制區(qū)是在一個多個附屬流路上提供，當(dāng)一個或多個附屬流路的分析結(jié)構(gòu)與第一和第二分析相似時，如果參比區(qū)和/或控制區(qū)是在一個或多個附屬流路上提供，共享區(qū)的應(yīng)用最為有效。因此，例如，兩個分析一般地都含有相似材料的有孔載體(例如兩者都含有硝基纖維素載體)。每個分析都選用相同的液體試樣也是非常有利的。這可以通過提供與兩個分析液體聯(lián)通的普通的公共試樣應(yīng)用區(qū)，很方便地完成達(dá)到，該區(qū)以液體與兩個分析相聯(lián)系。因此，通過公共試樣應(yīng)用區(qū)應(yīng)用于該裝置的單一的個液體試樣，經(jīng)普通的試樣應(yīng)用區(qū)，可流動通過第一個和第二兩個個全部兩分析。假使第一和第二分析并不完全相同，提供一個共享參比區(qū)區(qū)是可接受的，只要每個分析中需檢測的光的背景強(qiáng)度水平彼此十分相似，提供共享參比區(qū)是可接受的。信號處理裝置可含有一個中央處理單元，所述單元能夠處理由各個區(qū)光電探測器從各區(qū)所得到的信號，和在測試區(qū)所得到的相對于參比區(qū)的計算值。測量數(shù)據(jù)可在分析過程中的不同時間獲得，也可在裝置開啟后，但在液體試樣應(yīng)用于裝置之前得到，以獲得干燥狀態(tài)下的光透射或反射的光學(xué)數(shù)值?？晌盏?池"能在分析流路的遠(yuǎn)端提供。可以提供公共池或可以在每個分析流路的遠(yuǎn)端提供池。吸收池可優(yōu)選含有高吸收性材料，例如，CF7Whatman濾紙，并能提供足夠的吸收容量，用于從檢測區(qū)、參比區(qū)及控制區(qū)的附近除去任何未結(jié)合的結(jié)合物。作為該池的代替物，具有延伸超過檢測區(qū)的長度的有孔固相材料足夠。提供高吸收性池的優(yōu)勢在于，該池可以從各個分析的流路中除去或基本上除去過量的標(biāo)記結(jié)合試劑。這具有將各區(qū)附近未結(jié)合的標(biāo)記結(jié)合試劑的范圍最小化的作用，因此，使得裝置中將采用的分析流路可以具有不同量的標(biāo)記結(jié)合試劑。作為提供在檢測區(qū)的固定結(jié)合試劑的替代物，結(jié)合試劑可以以不固定的形式提供，該形式能夠結(jié)合到被分析物標(biāo)記結(jié)合試劑復(fù)合物上。例如，結(jié)合試劑可以結(jié)合到如瓊脂糖的大粒子上，檢測區(qū)可包含過濾器，過濾器的孔徑尺寸小于大粒子，但大于標(biāo)記結(jié)合試劑的尺寸，使得過濾器能夠捕捉任何存在的標(biāo)記結(jié)合試劑/被分析物/結(jié)合試劑復(fù)合物，未復(fù)合到捕獲試劑上的任何標(biāo)記結(jié)合試劑，都能夠通過濾器。然而，可選擇地，試劑在檢測區(qū)可以以固定的形式提供，該試劑能夠結(jié)合不固定標(biāo)記結(jié)合試劑/被分析物/結(jié)合試劑復(fù)合物。例如，結(jié)合試劑可以以不固定的形式提供，并結(jié)合到如維生素的結(jié)合種上、如抗生蛋白鏈菌素的為補充的結(jié)合伴侶的固定在檢測區(qū)的試劑。分析裝置可用三明治免疫測定法和/或競爭/抑制分析法，對被分析物進(jìn)行測定。三明治免疫測定法的一個例子為，標(biāo)記結(jié)合試劑/被分析物/結(jié)合試劑復(fù)合物形成之處。裝置一般包含用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑，在檢測區(qū)上游以不固定形式提供，該區(qū)含有用于被分析物的固定的結(jié)合試劑?？蛇x擇地，尤其當(dāng)所感興趣的被分析物為半抗原時，免疫測定裝置可用競爭反應(yīng)，其中標(biāo)記被分析物或標(biāo)記被分析物的類似物與在檢測區(qū)的固定結(jié)合試劑所用試樣中存在的被分析物相競爭。標(biāo)記被分析物或標(biāo)記被分析物類似物可以以不固定的形式在檢測區(qū)上游提供。然而，可選擇地，分析裝置可選用抑制反應(yīng)，其中固定被分析物或被分析物的類似物在檢測區(qū)提供，分析裝置包含用于被分析物的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑。用于本發(fā)明目的的術(shù)語"流路"是指能夠?qū)⒁后w從第一位置運送至第二位置的底物，例如可以是毛細(xì)管通道、微射流路徑、或有孔載體，如側(cè)向流動的有孔載體。有孔載體可以包含一種或多種有孔載體材料，這些材料可以重疊在直線的或疊加的排列上或射流地相連接。有孔載體材料可以相同也可以不同。第一和第二分析可以在分離的底物或在公共底物上提供，使得液體沿第一分析的流路運送，不能橫越第二分析的流路。例如，第一和第二分析可在相同的有孔載體上提供，使得第一和第二流路彼此隔離。例如，這可以通過激光切割有孔載體的部分，使其無孔而實現(xiàn)，因此，將第一和第二分析進(jìn)行分離。可選擇地，無孔阻斷材料可以沿帶應(yīng)用，以在相同有孔載體上提供兩個(一般基本上平行)流路。尤其流路可以是側(cè)向流動的有孔載體?？梢圆捎眠m宜的材料作為有孔載體，包括硝基纖維素、醋酸纖維、纖維素或纖維素衍生物、聚酯、聚烯烴、或玻璃纖維。有孔載體可以包含硝基纖維素。這具有以下優(yōu)勢未經(jīng)過預(yù)先的化學(xué)處理，結(jié)合試劑可以被牢牢地固定。例如，如果有孔固相材料包含紙，在第二區(qū)抗體的固定需要通過化學(xué)偶合來完成，偶合需要用到例如CNBr、羰二咪唑，或三氟代乙垸磺酰氯。術(shù)語"結(jié)合試劑"是指結(jié)合對的一個成員，即，兩種不同的分子，其中，一個分子與第二個分子通過化學(xué)和/或物理手段相結(jié)合。兩個分子在以下意義上相關(guān)它們相互結(jié)合，使得它們能夠從其他具有相似性質(zhì)的分析成分中區(qū)別出其結(jié)合伴侶。結(jié)合對的成員是指作為配體和受體(抗配體)、結(jié)合對成員及結(jié)合對伴侶等等。分子也可以是分子聚合物的結(jié)合對成員；例如抗體依第二抗體的免疫復(fù)合物突起，其相應(yīng)的抗原可被認(rèn)為是免疫復(fù)合物的結(jié)合對成員。除抗原和抗體結(jié)合對成員外，作為非限制性的例子，其他結(jié)合對包括維生素和抗生物素蛋白、糖類和外源凝集素、互補的核苷酸序列、互補的肽序列、效應(yīng)器和感受器分子、酶輔助因子和酶、酶抑制劑和酶、肽序列和對序列或整個蛋白具有特異性的抗體、聚合酸和堿、染料和蛋白結(jié)合劑、肽和肽和特異性蛋白質(zhì)結(jié)合(例如，核糖核酸酶、s肽、及核糖核酸酶S肽)，等等。此外，特異性結(jié)合對能包括原始特異性結(jié)合成員的類似物。在用于標(biāo)記結(jié)合試劑的上下文時，"標(biāo)記"是指任何能夠產(chǎn)生通過視覺或儀器手段可檢測到信號的物質(zhì)。本發(fā)明中所用的各種適宜的標(biāo)記物包括例如可以光學(xué)檢測到的通過化學(xué)或物理手段產(chǎn)生信號的標(biāo)記物、。這種標(biāo)記物包括酶和底物、色原體、催化劑、熒光化合物、化學(xué)發(fā)光化合物、電活化物質(zhì)、染料分子、放射性標(biāo)記及粒子標(biāo)記。被分析物本身可以固有的能夠產(chǎn)生可檢測到的信號。標(biāo)記可以共價結(jié)合到結(jié)合試劑上。標(biāo)記具體可以從光學(xué)可檢測的一類中選擇。標(biāo)記可以包括粒子，如金、銀、膠體的非金屬粒子，如硒或碲、染色的或有顏色的粒子，如結(jié)合染料的聚合粒子、或染料溶膠。染料可以是任意適宜的顏色，例如藍(lán)色。染料可以是熒光的。染料溶膠可以是由商業(yè)可獲得的疏水染料制得，如ForonBlueSRP(Sandoz)、及ResolinBlueBBLS(Bayer)。適宜的聚合物標(biāo)記可以從一系列的合成聚合物中選取，如聚苯乙烯、聚乙烯甲苯、聚苯乙烯-丙烯酸、及聚丙烯醛。所用單體通常是水不溶的，并在親水性表面活性劑的存在下乳化，從而形成單體膠束，隨后，通過向乳劑中加入引發(fā)劑，將其誘導(dǎo)聚合?；旧仙汕蛐尉酆狭Ｗ?。對于這種聚合粒子，理想的粒度范圍為約0.05^im至約0.5pm。根據(jù)一個實施例，標(biāo)記為藍(lán)色聚合粒子。干燥的結(jié)合試劑可以在包含檢測區(qū)的有孔載體材料的上游所提供的有孔載體材料上提供。上游有孔載體材料可以是大孔的。大孔載體材料應(yīng)是低或非蛋白結(jié)合，或用如BSA或PVA的試劑應(yīng)該很容易地被阻斷，從而使非特異性結(jié)合程度降至最低，同時使在大孔體被液體試樣弄濕后，促進(jìn)標(biāo)記試劑自由運動。如必要的話，大孔載體材料能夠用表面活性劑或溶劑預(yù)先處理，使其更為親水，從而促進(jìn)液體試樣的快速吸收。用于大孔載體的適宜的材料包括如聚乙烯和聚丙烯的塑料材料、或如紙或玻璃纖維的其他材料。在標(biāo)記結(jié)合試劑用可檢測的粒子標(biāo)記情況下，大孔體可以有至少大于粒子標(biāo)記最大粒子尺寸10倍的孔徑。較大的孔徑可以使標(biāo)記試劑更好地釋放。作為大孔載體的替代物，標(biāo)記結(jié)合試劑可以在檢測區(qū)上游無孔的底物上提供，所述無孔底物形成流路的一部分。有孔載體可以包含在玻璃纖維大孔載體，所述玻璃纖維大孔載體在硝酸基纖維有孔載體上游提供，并在其遠(yuǎn)端與所述硝酸基纖維有孔載體重疊。液體試樣可以源自于任何來源，如工業(yè)的、環(huán)境的、農(nóng)業(yè)的、或生物的來源。試樣可以源自或由生理學(xué)來源構(gòu)成，包括血液、血清、血漿、組織液、唾液、痰、眼晶狀體液、汗液、尿、乳、黏液、關(guān)節(jié)滑膜液、腹膜液、經(jīng)皮滲出液、咽分泌物、支氣管肺泡灌洗、氣管吸引術(shù)、腦脊髓液、精液、子宮頸粘液、陰道或尿道分泌物，以及羊水。具體來源可以是人類，具體試樣可以是尿液。此處所用的"光"意在包括無論任何波長的任何適宜的電磁輻射。盡管這樣，本發(fā)明主要意在利用在光譜的可見范圍內(nèi)的光，"光源"和"光電探測器"應(yīng)該依據(jù)圍繞各自的任何來源、及檢測方法、電磁輻射來進(jìn)行解釋，但尤其與可見波長(即，在約390-800nm范圍內(nèi))的輻射有關(guān)。光電探測器將檢測來自分析裝置一個或多個區(qū)的光。事實上，光可以源于這些區(qū)，例如，如果標(biāo)記為熒光等。然而，通常，光電探測器將檢測看起來來自以上區(qū)的光，也就是，由光源發(fā)出并經(jīng)光電探測器上的區(qū)反射和/或透射的光。被分析物包括，但不局限于，毒素、有機(jī)化合物、蛋白質(zhì)、肽、微生物、細(xì)菌、病毒、氨基酸、核酸、糖類、激素、類固醇、維生素、藥物(包括用于治療目的的給藥，以及用于違法目的的給藥)、污染物、殺蟲劑、以及上述任一物質(zhì)的代謝產(chǎn)物或抗體。術(shù)語被分析物也包括任意抗原物質(zhì)、半抗原、抗體、大分子、以及它們的復(fù)合物。分析裝置可以檢測一種或多種被分析物。分析裝置可能能夠檢測超過擴(kuò)展的被分析物范圍的被分析物的存在或含量，其中第一分析能夠測定在較低的濃度范圍內(nèi)的被分析物的水平，第二分析能夠測定在較高的濃度范圍內(nèi)的液體試樣中被分析物的水平。有幾種方法準(zhǔn)備分析，以測定在較高被分析物范圍內(nèi)的被分析物。例如，分析裝置可以包含清除劑分析，該清除劑分析包括在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑和用于被分析物的清除劑結(jié)合試劑。清除劑結(jié)合試劑用于除去過量的被分析物，并降低分析的靈敏度。這具有增加分析的動態(tài)范圍的作用，使得能夠在較高的分析物水平上進(jìn)行測量。清除劑結(jié)合試劑可以是固定的、不固定的或是既固定的又不固定的。清除劑結(jié)合試劑可以在不固定標(biāo)記結(jié)合試劑上游或下游，在有孔載體的與該不固定標(biāo)記結(jié)合試劑相同的區(qū)提供。清除劑結(jié)合試劑可以結(jié)合到與不固定標(biāo)記結(jié)合試劑相同的被分析物的結(jié)合區(qū)，或者與標(biāo)記結(jié)合試劑不同的被分析物的區(qū)。清除劑試劑對被分析物可以具有與第二分析的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑不同的親和力。在一個示例性實施例中，清除劑結(jié)合試劑對被分析物具有比第二分析的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑更高的親和力。清除劑結(jié)合試劑的量可以變化，以改變分析對被分析物濃度的靈敏度。增加存在的清除劑結(jié)合試劑的量會降低分析的靈敏度，這是因為清除劑結(jié)合試劑能夠結(jié)合更多的被分析物，有效地降低能夠結(jié)合到檢測區(qū)的標(biāo)記結(jié)合試劑的比例。為增大分析的動態(tài)范圍，分析裝置例如可以包含多個檢測區(qū)，其中，每個檢測區(qū)能夠在不同的被分析物濃度水平下結(jié)合被分析物。例如，相應(yīng)的區(qū)可以包含對被分析物具有不同的親合力的被分析物的結(jié)合試劑。其他增加分析的動態(tài)范圍的方法是提供一種分析裝置，該分析裝置包含三明治結(jié)合分析及競爭或抑制分析。例如，三明治分析可能是高靈敏度分析，即其能夠在低濃度范圍內(nèi)測量被分析物，抑制或競爭分析可能是低靈敏度的分析，即其能夠在高濃度范圍內(nèi)測量被分析物。另一種方法是改變在檢測區(qū)固定的試劑標(biāo)記或結(jié)合試劑的親和力或量。高親和力結(jié)合試劑比較低親和力結(jié)合試劑對被分析物具有更高的靈敏度。類似地，低濃度結(jié)合試劑比高濃度結(jié)合試劑對被分析物具有更低的靈敏度。分析靈敏度能夠通過改變結(jié)合試劑對標(biāo)記結(jié)合試劑的標(biāo)記的比例而進(jìn)行改變。如果用粒子作為標(biāo)記，則應(yīng)用于標(biāo)記的結(jié)合試劑的量可以改變，從而改變分析的靈敏度。另外的控制分析靈敏度的方法是改變分析中所用標(biāo)記量。例如，分析靈敏度可以通過降低結(jié)合試劑對用于標(biāo)記結(jié)合試劑的標(biāo)記種類的比例而降低。另一種控制分析靈敏度的方法是改變標(biāo)記光密度。分析法靈敏度能夠通過使用低光密度的標(biāo)記而降低。例如，這可以通過提供含有低濃度染料的聚合粒子標(biāo)記，或使用對光學(xué)檢測器具有低靈敏度的有色的標(biāo)記而實現(xiàn)。然而，另一種測量高被分析物水平的方法是采用非粒子標(biāo)記結(jié)合試劑。當(dāng)采用三明治結(jié)合分析測量高水平的被分析物時，需要高濃度的結(jié)合試劑。在標(biāo)記為粒子標(biāo)記的情況下，在有孔載體內(nèi)部或表面提供的高濃度的被分析物會引起空間位阻，從而導(dǎo)致較差的分析靈敏度。相反地，在較低的被分析物水平時，由于低光密度，用非粒子標(biāo)記結(jié)合試劑能夠產(chǎn)生低信號。然而，在高被分析物水平時，非粒子標(biāo)記可以以足夠高的水平出現(xiàn)，從而很容易被檢測。光學(xué)可檢測的非粒子標(biāo)記一個例子可以是染料。染料可以是熒光的。分析靈敏度可以受有孔載體的流速的影響。降低分析靈敏度的方法是采用具有高流速的有孔載體(如硝基纖維素)。分析的靈敏度可以通過調(diào)整流速被進(jìn)一步地控制，在該流速下，標(biāo)記結(jié)合試劑從其來源被釋放。另一個降低被分析物靈敏度的方法是，在與液體試樣接觸的過程中，提供標(biāo)記結(jié)合試劑從有孔載體中的快速釋放。能夠通過在裝置中提供糖、蛋白質(zhì)或如甲基纖維素的其他聚合物，調(diào)整標(biāo)記結(jié)合試劑的釋放。依據(jù)一個具體的實施例，分析裝置包含清除劑分析，該清除劑分析含有在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的不固定結(jié)合試劑及用于被分析物的不固定第二(清除劑)結(jié)合試劑。依據(jù)一個具體的實施例，第一分析能夠測量在較低的被分析物濃度范圍內(nèi)的被分析物，第二分析能夠測量在較高的被分析物濃度范圍內(nèi)的被分析物。第一分析可以包含共享參比區(qū)，第二分析可以包含共享控制區(qū)。第一分析可以包含在檢測區(qū)上游提供的標(biāo)記結(jié)合試劑，第二分析可以包含在檢測區(qū)上游提供的不固定清除劑結(jié)合試劑及標(biāo)記結(jié)合試劑。清除劑結(jié)合試劑可以在相同的位置或在檢測區(qū)上游的標(biāo)記結(jié)合試劑區(qū)被提供。具體待檢測的被分析物可以是hCG，在這種情況下，液體試樣可以是尿。分析裝置可以測定單個的被分析物，如hCG，其中，第一分析能夠測定在第一濃度范圍內(nèi)，液體試樣中hCG的水平，第二分析能夠測定在第二濃度范圍內(nèi)，液體試樣中hCG的水平。為測定超過一定范圍的被分析物的濃度，確保有存在足夠的標(biāo)記結(jié)合試劑使得分析信號并未達(dá)到飽和是非常重要的。大量被分析物的測量常常需要標(biāo)記結(jié)合試劑的量相應(yīng)的增加，以避免所謂的"Hook效應(yīng)"或隨著被分析物濃度的增加，分析信號達(dá)到飽和。顯示發(fā)生了控制信號的變化，尤其在存在的結(jié)合試劑的量有所增加的情況下。提供第一和第二分析之處，具有不同量的標(biāo)記結(jié)合試劑，其表明，作為分析的部分提供參比區(qū)，顯示出具有較低水平的標(biāo)記結(jié)合試劑的優(yōu)點。依據(jù)一個實施例，分析裝置能夠測量在較高的被分析物范圍內(nèi)的被分析物。有幾種方法提供該裝置。例如，分析裝置可以包含在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑及用于被分析物的第二結(jié)合試劑。第二結(jié)合試劑用于除去過量的被分析物，降低分析靈敏度。這具有增加分析動態(tài)范圍的作用，能夠在較高的被分析物水平進(jìn)行測量。第二結(jié)合試劑可以可能是固定的，不固定的或者是固定和不固定的。第二結(jié)合試劑可以在不固定標(biāo)記結(jié)合試劑的上游或下游，在有孔載體的與不固定標(biāo)記結(jié)合試劑相同的任一區(qū)提供。第二結(jié)合試劑可以結(jié)合到被分析物的與不固定標(biāo)記結(jié)合試劑相同的結(jié)合區(qū)，或被分析物的與標(biāo)記結(jié)合試劑不同的區(qū)。第二試劑可以對被分析物具有與第二分析的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑不同的親和力。在一個示例性的實施例中，比第二分析的不固定標(biāo)記結(jié)合試劑，第二結(jié)合試劑對被分析物具有更高的親和力。第二結(jié)合試劑的量可以變化，從而使分析靈敏度隨被分析物濃度的變化而變化。增加存在的第二結(jié)合試劑的量，會降低分析靈敏度，這是由于第二結(jié)合試劑能夠結(jié)合更多的被分析物，有效地降低能夠結(jié)合到檢測區(qū)的標(biāo)記結(jié)合試劑的比例。為增加分析的動態(tài)范圍，分析裝置例如可以包含多個檢測區(qū)，其中，每個檢測區(qū)能夠在不同的被分析物濃度水平下結(jié)合被分析物。例如，各個區(qū)可以包含對被分析物具有不同的親和力的被分析物的結(jié)合試劑。其他增加分析的動態(tài)范圍的方法是提供一種分析裝置，該分析裝置包含三明治結(jié)合分析及競爭或抑制分析。例如，三明治分析法可能是高靈敏度分析法，即其能夠在低濃度范圍內(nèi)對被分析物進(jìn)行測量，抑制或競爭分析可能是低靈敏度分析，即其能夠在高濃度范圍內(nèi)對被分析物進(jìn)行測量。另一方法是改變檢測區(qū)固定的試劑或標(biāo)記結(jié)合試劑的親和力或量。高親和力結(jié)合試劑比較低親和力結(jié)合試劑對被分析物具有更高的靈敏度。類似地，低濃度的結(jié)合試劑比高濃度的結(jié)合試劑對被分析物靈具有更低的敏度。分析靈敏度能夠通過改變結(jié)合試劑對標(biāo)記結(jié)合試劑的標(biāo)記的比例而改變。如果用粒子作為標(biāo)記，則應(yīng)用于標(biāo)記的結(jié)合試劑的量可以改變，從而改變分析的靈敏度。另一種控制分析靈敏度的方法是改變分析中所用標(biāo)記量。例如，分析的靈敏度的降低可以通過減小結(jié)合試劑對標(biāo)記結(jié)合試劑所用標(biāo)記種類的比例來實現(xiàn)。另一種控制分析靈敏度的方法是改變標(biāo)記光學(xué)密度。分析靈敏度能夠通過使用低光密度的標(biāo)記來降低。例如，這可以通過提供具有低濃度染料的聚合物粒子標(biāo)記，或通過使用對光學(xué)檢測器具有較低敏感性的有色標(biāo)記而實現(xiàn)。然而，另一種測量高被分析物水平的方法是采用非粒子標(biāo)記結(jié)合試劑。當(dāng)采用三明治結(jié)合分析測量高水平的被分析物時，需要高濃度的結(jié)合試劑。在標(biāo)記為粒子標(biāo)記的情況下，在有孔載體內(nèi)部或表面提供的高濃度的被分析物會引起空間位阻，從而導(dǎo)致較差的分析靈敏度。相反地，在較低的被分析物水平時，由于低光密度，用非粒子標(biāo)記結(jié)合試劑能夠產(chǎn)生低信號。然而，在高被分析物水平時，非粒子標(biāo)記可以以足夠高的水平出現(xiàn)，從而很容易被檢測。光學(xué)可檢測的非粒子標(biāo)記一個例子可以是染料。染料可以是熒光的。分析靈敏度可以受有孔載體的流速的影響。降低分析靈敏度的方法是采用具有高流速的有孔載體(如硝基纖維素)。分析的靈敏度可以通過調(diào)整流速，被進(jìn)一步地控制，在該流速下，標(biāo)記結(jié)合試劑從其來源被釋放。另一個降低被分析物靈敏度的方法是，在與液體試樣接觸的過程中，提供標(biāo)記結(jié)合試劑從有孔載體中的快速釋放。能夠通過在裝置中提供糖、蛋白質(zhì)或如甲基纖維素的其他聚合物，調(diào)整標(biāo)記結(jié)合試劑的釋放。依據(jù)一個具體的實施例，分析裝置包含在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的不固定結(jié)合試劑和用于被分析物的第二結(jié)合試劑。第二結(jié)合試劑可以在檢測區(qū)上游與標(biāo)記結(jié)合試劑相同或相似的位置提供。依據(jù)一個具體的實施例，分析裝置包含兩個分析，每個分析包含一流路，其中，第一分析能夠測量低濃度范圍內(nèi)的被分析物，第二分析能夠測量高濃度范圍內(nèi)的被分析物。第一分析可以包含共享參比區(qū)，第二分析可以包含共享控制區(qū)。本發(fā)明的分析裝置可以用于測量超過擴(kuò)大的濃度范圍的hCG的程度或存在。范圍可以在約10mlU至約250，000mlU之間變化。第二分析可以包含用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑及用于被分析物的第二結(jié)合試劑。第一分析可以包含在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑。分析裝置可以包含一個或多個測量閾值，以表明在一定被分析物范圍內(nèi)的被分析物的水平。在一個實施例中，分析裝置包含第一及第二測量閾值，其中被分析物測量信號低于第一測量閾值，表明不存在被分析物或不存在超過一定水平的被分析物，并且其中被分析物測量信號大于第二測量閾值，表明被分析物的水平在第二濃度范圍內(nèi)，測量信號小于第二閾值，表明被分析物的水平在第一濃度范圍內(nèi)。依據(jù)一個具體的實施例，分析裝置另外包含第三測量閾值，其中，被分析物測量信號大于第三閾值，表明被分析物的水平在第三濃度范圍內(nèi)。具體的分析裝置可以能夠測量在液體試樣中被分析物hCG的存在或范圍，具體是雌性哺乳動物受試者的尿。分析裝置可以包含第一測量閾值，其中hCG被分析物信號水平低于閾值表明，未懷孕，其中hCG被分析物信號水平高于或等于第一測量閾值表明，懷孕，其中，裝置包含至少另外一個測量閾值。另外，分析裝置可以提供懷孕程度的指征。分析裝置可以為用戶提供基于時間的指征，例如以天或周為單位計的懷孕程度。分析試驗測定尿液中的hCG，一般的完全分析顯影時間為3分鐘。本發(fā)明的目標(biāo)之一是減少光學(xué)元件的數(shù)目，這可以很便利地實現(xiàn)，其中參比區(qū)作為分析的部分提供，控制區(qū)作為其他分析的部分提供。依據(jù)一個實施例，參比區(qū)作為第一分析的部分被提供，具有較低水平的標(biāo)記結(jié)合試劑，控制區(qū)作為第二分析的部分被提供，具有較高水平的結(jié)合試劑。依據(jù)一個實施例，分析裝置包含四個光源，其中，光源被排列用以照亮第一及第二分析的檢測區(qū)，及共享控制和參比區(qū)，每個區(qū)由各自的光源照亮。一個或多個光電探測器可以被定位，以檢測來自各個區(qū)的反射和/或透射光。依據(jù)一個實施例，單個的光電探測器可以用于檢測來自所有區(qū)的光。這可以通過依次照亮各自區(qū)實現(xiàn)，從而使得裝置能夠識別光電探測器所檢測的光來自哪個區(qū)。依次的照亮過程可以在分析持續(xù)過程中以固定的或不同的頻率重復(fù)，使得每個區(qū)的信號水平可以隨時間被監(jiān)控。另外，從一個或多個區(qū)檢測到的光的水平的變化可用于確定液體試樣是否及何時應(yīng)用于該裝置，并測定液體試樣沿裝置的流速。流速的測定可用于作為進(jìn)一步的質(zhì)量控制檢驗，例如，如果流速快于或慢于設(shè)定水平，分析可以被拒絕。適宜的流速檢測方法及裝置在EP1484641中公開。經(jīng)一段時間的三明治免疫測定法，標(biāo)記結(jié)合試劑一般積聚在檢測區(qū)，因此信號隨時間增加的比率可以被監(jiān)測。裝置可以在信號達(dá)到平衡后或更一般地在反應(yīng)達(dá)到平衡前對結(jié)果進(jìn)行測定。裝置可以提供定量結(jié)果，如個別的值、半定量的結(jié)果或范圍，如I-IO，11-20等等、或定性結(jié)果，如YES/NO。裝置可以測定對于一個或多個信號閾值的結(jié)果。裝置可以具有固定的測量時間或在固定測量時間已經(jīng)過去之前提供早期的結(jié)果。例如，在裝置測定信號水平將不超過具體的閾值或在早期階段超過具體的閾值的情況下，早期的結(jié)果可以給出。在這些特殊情況下，裝置可以調(diào)入早期的NO或YES測量，相對于具體的基準(zhǔn)(可以是零)表明被分析物的存在或不存在。分析裝置采用早期結(jié)果測定的方法在EP1464613中公開。分析裝置可以用于測定受試者是否懷孕(即液體試樣是否含有一定水平之上的hCG)，也可以采用更多的閾值向用戶表明懷孕的程度。懷孕的程度可以根據(jù)基于時間或基于濃度的測量來表示。分析裝置一般會包含一個外殼。該外殼可以是液體不能滲透的，并由適宜的塑料材料構(gòu)成，如ABS。分析裝置還可以包含簡易的接收部件，用于接收液體試樣。試樣接收部件可以從外殼延伸。外殼可以由液體不能滲透的材料構(gòu)成。還希望外殼能夠阻擋周圍的光。如果低于10%、優(yōu)選低于5%、最優(yōu)選低于1%的入射在裝置外部上的可見光穿透入裝置內(nèi)部，將會認(rèn)為外殼或外套充分地阻擋周圍的光。光不可透過的合成塑料材料，如含有適當(dāng)?shù)墓庾钄嗌氐木郾?、聚碳酸酯、ABS、聚苯乙烯、苯乙烯、或高密度聚乙烯，是用于外殼構(gòu)造的合適選擇。在外殼的外部提供的孔徑，該孔徑與在外殼內(nèi)部空間提供的分析相通?？蛇x擇地，孔徑可用于允許有孔的試樣接收器從外殼延伸到從外殼的外部位置。外殼中一般會同時提供電源。裝置一般會包含顯示分析結(jié)果的顯示裝置，以及存儲數(shù)據(jù)的記憶裝置。方便地，顯示工具包含LCD。顯示裝置還可以顯示進(jìn)一步的信息，如錯誤信息、個人詳情、時間、日期、以及告知用戶分析已進(jìn)行測量的時間的定時器。由分析顯示的信息可以以文字、數(shù)字或標(biāo)志以任何字體、字母或語言表示，例如，"陽性"、"陰性"、"+"、"-"、"懷孕"、"未懷孕"、"去見你的醫(yī)生"、"重復(fù)試驗"。分析裝置還可以包含試樣接收器，所述試樣接收器包含試樣接收的有孔部件，所述有孔部件液體連接一個或兩個分析的流路的上游。分析裝置可以包含多于一個的分析的流路，每個分析流路包含檢測區(qū)，在該情況下，可以提供單個試樣接收有孔部件，所述試樣接收有孔部件對于多個分析流路是常見的。因此，應(yīng)用于裝置的有孔部件的液體試樣，能夠沿各自的分析的流路傳播到各自的檢測區(qū)。有孔部件可以提供在外殼內(nèi)或可以至少局部延伸出所述外殼，并可以例如用于收集尿流。有孔部件可以充當(dāng)流體貯存器。有孔部件可以由任何能夠迅速吸收液體的吸水的、有孔或纖維材料制得。材料的孔隙率可以是單向的(即具有孔隙或纖維的線路整個或大部分平行于部件的軸)或多向的(全向的，以使部件具有無定形的海綿狀結(jié)構(gòu))。有孔塑料材料，如聚丙烯、聚乙烯(優(yōu)選非常高分子量)、聚偏二氟乙烯、乙烯醋酸乙烯酯、丙烯腈及聚四氟乙烯可以使用。其他適宜的材料包括玻璃纖維。提供公共試樣接收有孔部件使得單個試樣同時提供給第一或第二分析的流路，進(jìn)一步增加提高了共享參比區(qū)和/或共享控制區(qū)的效果。第五個方面，本發(fā)明提供進(jìn)行分析以測定一種或多種被分析物的存在和/或程度的方法，該方法包含利用根據(jù)本發(fā)明的第一和第三方面的分析裝置接觸液體試樣的步驟。圖1為根據(jù)本發(fā)明的一種分析裝置的視圖2為根據(jù)發(fā)明的示例性實施例的分析流路的示意圖3為圖2所示實施例的光源及光電探測器的排列的視圖4為分析裝置的實施例的局部橫截面示意圖，表明某些分析元件的相對位置；圖5a和5b為擋板排列的底部視圖，還顯示出圖3所示的實施例的部分光學(xué)元件；以及圖6為在前述圖中所示的分析裝置實施例的局部的頂部視圖，表明側(cè)向流動試驗帶在分析裝置的原位置。具體實施例方式圖1顯示出分析裝置的外部的俯視圖。裝置10為細(xì)長的，長度約14cm，寬度約25mm。外套11可以由比如聚碳酸酯、ABS、聚苯乙烯、高密度聚乙烯、或聚丙烯的適宜的液體不能滲透的外套形成。外部的有孔試樣接收器12可以由能夠迅速吸收液體的任何吸水、有孔或纖維材料構(gòu)成。同時顯示的還有用于顯示分析結(jié)果的LCD顯示器15。雖未顯示，分析裝置中還提供分析流路、光源、光電探測器、電源及相關(guān)聯(lián)的電子元件。圖2顯示依據(jù)一個示例性實施例的分析裝置的光電探測器的布局和單獨的分析有孔載體。分析裝置20具有流體連接第一和第二分析22和23的公共試樣應(yīng)用區(qū)21。單個的光電探測器4在兩個分析中間提供，以檢測來自相應(yīng)區(qū)的光。區(qū)24和25分別對應(yīng)于第一分析22的檢測區(qū)和控制區(qū)。區(qū)26和27分別對應(yīng)于第二分析23的檢測區(qū)和參比區(qū)。未顯示相應(yīng)的四個LED，每個所述顯示器通過適當(dāng)?shù)囟ㄎ坏拇翱谡樟料鄳?yīng)的區(qū)。圖3顯示依據(jù)包含單個光電探測器32和四個LED31的實施例的排列視圖。光電檢測器的有效面積為1.5mmxl.5mm。圖4顯示分析裝置40的橫截面示意圖，顯示一些元件的相對位置。由LED41發(fā)出的光照亮帶42的區(qū)，從該區(qū)反射的光由光電探測器44探測。類似地，由LED45發(fā)出的光照亮帶46的區(qū)，反射光由光電探測器檢測。提供分隔物47避免從LED發(fā)出的光被直接入射到光電檢測器上。還提供傾斜的元件48用于防止LED41照亮帶46并對應(yīng)地防止LED45照亮帶42，同時使從相應(yīng)的試驗帶反射的光由光電檢測器檢測。傾斜的元件還用于將從試驗帶反射的光引導(dǎo)到光電檢測器。LED安裝在由印刷電路板制得的表面49上。圖5a顯示了舉例說明的實施例的擋板排列的底面視圖。來自顯示其中之一(由參考數(shù)字51表示)的LED的光通過孔徑照亮分析帶的一個區(qū)(未示出)。每個LED與各自的孔徑相關(guān)聯(lián)。在圖中，示范的孔徑由參考數(shù)字55表示。光從帶上反射到光電檢測器52上。同時顯示的為傾斜的元件53和分隔物56。相鄰的LED通過擋板54相互遮蔽。圖5b從一個不同的角度顯示了舉例說明的實施例中擋板排列的底部視圖。傾斜的元件53關(guān)于軸57對稱，并用于將反射光從所有四個LED(未示出)中引導(dǎo)到光電檢測器(未示出)上。圖6顯示分析裝置的頂部視圖，俯視定位在孔徑62上方的試驗帶61，并通過定位針63保持位置。LED及光電檢測器能夠通過孔徑部分地看到。實例1由包含低靈敏度的試驗區(qū)(用于測量高被分析物濃度)和高靈敏度的試驗區(qū)(用于測量低被分析物濃度)的分析裝置的各區(qū)測定的信號值通過如下的信號計算方法進(jìn)行確定-帶和窗口的用途，在下列表中規(guī)定(見圖2)<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>由每個窗口反射的光的測量大約每秒進(jìn)行兩次，低通數(shù)字濾波器用于抑制噪音，使數(shù)據(jù)平滑。濾波數(shù)值用于檢測流動及測定結(jié)果，并以相對衰減的標(biāo)準(zhǔn)百分比(c/。A)形式表示。這考慮到了裝置內(nèi)和裝置間的光學(xué)元件的任何差異，并使這種差異最小。測量的值與反射光的量成反比。對于每個窗口，參比、控制及試驗窗口的窗口比率等于當(dāng)有孔載體干燥時所測得的值，t=0(在加入試樣前)，除以加入試樣后在時間t所測得的值。濾波窗口比率的計算對于每個時間點t，每個窗口的窗口比率計算如下:—濾波參比窗口^^。61濾波參比窗口^^tHS比率廠濾波H誠驗窗口^胸濾波HS試驗窗口^^tLS比率t=.濾波LS試驗窗口值w^。濾波LS試驗窗口值時間=Ctrl比率t濾波Ctrl窗口值時^。濾波Ctrl窗口值時間-濾波MA值的計算相對衰減的標(biāo)準(zhǔn)百分比(n/。A)通過不同的參比(ref.)窗口的比率給出，考慮將窗口比率(控制或試驗窗口)除以參比窗口比率，再乘以100%。對于每個時間點t,計算HS試驗線、LS試驗線、和控制線的。/。A值，其中HS,(。/。A),f比率'，，驗比率'x擺。/。Ref比率，LS,(。/。A),f比率《S，驗比率'x酵/0Ref比率tW"，^比率'x腿分析裝置的結(jié)構(gòu)依據(jù)本發(fā)明的第一方面的一種分析裝置，構(gòu)成包含第一分析試驗帶，該第一分析試驗帶包含在檢測區(qū)上游提供的標(biāo)記結(jié)合試劑；和第二分析試驗帶，該第二分析試驗帶包含在檢測區(qū)和控制區(qū)上游提供的用于控制區(qū)的標(biāo)記結(jié)合試劑、用于被分析物的第二(清除劑)結(jié)合試劑和標(biāo)記結(jié)合試劑。第一分析試驗帶的制備檢測區(qū)的制備通過將在PBSA緩沖液中濃度為3mg/ml的一列抗-iS-hCG抗體(室內(nèi)克隆3468)，以1/d/cm的速度分散到尺寸為350mm長x40mm寬(Whatman)的，具有孔徑為8/mi，厚度在90-100jtim之間的硝基纖維素帶上，其被層壓至175Mm的背襯層?？?Z3-hCG抗體通過利用Biodotxyz3050分散平臺，作為一列約1.2mm寬，約300mm長，在沿硝基纖維素的長的lOmm的位置處應(yīng)用。硝基纖維素的帶用Hedinair系列#17494的干燥箱干燥，設(shè)定溫度55°C，速度為5(單個通過)。硝基纖維素隨后用阻斷緩沖液進(jìn)行阻斷，該阻斷緩沖液包含5%乙醇(BDHAnalar104766P)力口150mM氯化鈉(BDHAnalar10241AP)力口50mM三羥甲基氨基甲烷堿(SigmaT1503)加吐溫20(SigmaP1379)和1。/0(w/v)的聚乙烯醇(PVA，Sigma360627)的混合物。阻斷緩沖液在1.75pl/mm的流速下應(yīng)用到帶的近端。一旦阻斷溶液浸濕進(jìn)入膜，將用相同的器械在1.6pl/mm速度下，選用2。/。(w/v)的蔗糖溶液(SigmaS8501在去離子水中)，并允許該蔗糖溶液浸濕進(jìn)入硝基纖維素膜中約5分鐘。NC的帶隨后用Hedinair干燥箱系列#17494進(jìn)行干燥，設(shè)定溫度為75°C，速度為5(單個通過)。在第一種有孔載體材料上制備不固定標(biāo)記結(jié)合試劑標(biāo)記結(jié)合試劑依據(jù)以下試驗設(shè)計制備1.用抗-ahCG包衣乳膠顆粒用pH為8.5的100mM硼砂緩沖液(BDHAnalaR102676G)(DTB)，將藍(lán)色乳膠顆粒從DukeScientific(直徑400nm,DB1040CB在10。/。固體(w/v))稀釋到2。/。固體(w/v)。2.通過在HeraeusBiofuge17RS離心機(jī)上，在兩個Eppendorf離心機(jī)管中，于17000rpm(25，848rcf)，離心一定體積的(2mls)稀釋的乳膠IO分鐘，對稀釋的乳膠進(jìn)行洗滌。移出并棄去上清液，用100mMDTB將小丸再混懸，得到總體積為lml的4。/。固體(w/v)。3.制備乙醇和醋酸鈉的混合物(95%乙醇BDHAnalaR104766P與5%w/v醋酸鈉SigmaS-2889)。4.向第2步中洗漆的乳膠中加入lOO]ld乙醇-醋酸鈉溶液(其為乳膠體積的10°/。)。5.稀釋阻斷抗體(室內(nèi)克隆3299)以得到約1200Mg/ml的抗體的DTB溶液。6.將lml體積的由第5步得到的稀釋的抗體，于41.5°C水浴中加熱約2分鐘。并將洗過的乳膠，加上第4步得到的乙醇-醋酸鈉在相同水浴中加熱2分鐘。7.向乳膠加乙醇-醋酸鹽中加入稀釋的抗體，混合均勻，在41.5。C水浴中孵育1小時，同時用安放在混合物中的磁力攪拌子及磁力棒進(jìn)行混合。8.制備40mg/ml的牛血清白蛋白(BSA)溶液(IntergenW22903的去離子水溶液)。通過向乳膠/抗體/乙醇-醋酸鹽的混合物中加入等體積的40mg/mlBSA對乳膠進(jìn)行阻斷，并在不斷攪拌下，于41.5。C水浴中孵育30分鐘。9.如第2步所述，將混合物以17000rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，(在Eppendorf管間，將體積分成lml每份)。移出并棄去上清液，將小丸再懸浮于100mMDTB中。重復(fù)第2步所述的離心操作，移出并棄去上清液，將小丸再懸浮于噴槍緩沖液(20。/。(w/v)蔗糖SigmaS8501，10%BSA(w/v)的lOOmM三羥甲基氨基甲烷堿SigmaTl503pH達(dá)到9)中。加入噴槍緩沖液，得到4。/。固體(w/v)的乳膠。結(jié)合的乳膠在BSA與蔗糖的混合物中以速度50g/hr和110mm/s，噴霧到玻璃纖維有孔載體上(F529-09，Whatman),并用系列號為17494的Hedinar鏈條式烘箱進(jìn)行干燥，設(shè)定溫度為65°C，速度5(單個通過)。作為參比區(qū)所選擇的區(qū)在沿硝基纖維素13mm距離處，即檢測區(qū)下游。包含標(biāo)記結(jié)合試劑的玻璃纖維材料附加到硝基纖維素膜上，用澄清的粘液涂鋪的層疊膜(Ferrisgate，38mm寬)進(jìn)行排列，使得標(biāo)記結(jié)合試劑在最上面，沿硝基纖維素膜帶的長(350mm)，玻璃纖維約每2mm交疊在硝基纖維素的表面。玻璃纖維附加到硝基纖維素的末端，使得玻璃纖維在檢測區(qū)上游。層狀薄片隨后切割成包含玻璃纖維有孔載體材料、寬6mm、長25mm的試驗帶，應(yīng)用20mm標(biāo)記試劑沿玻璃纖維的長，在上游提供，并每2mm交疊，硝基纖維素膜寬6mm，長40mm。第二分析試驗帶的制備檢測區(qū)制備如下-應(yīng)用BiodotXYZ3050分散臺，將3mg/ml的MAb小鼠-抗-人類(3-hCG抗體(克隆3468)的PBSA緩沖液，以lpl/cm的速度，在10mm的位置，繪圖到硝基纖維素上(類型和尺寸依據(jù)第一分析)，以為第一分析提供單獨的檢測區(qū)?？刂茀^(qū)制備如下用BiodotXYZ3050分散臺，將2mg/ml的山羊-抗-家兔抗體(Lampire)的PBSA緩沖液，以lpl/cm的速度，在13mm處，繪圖到與第二分析所用相同的硝基纖維素上，為分析裝置提供單獨的控制區(qū)。結(jié)合到400nm藍(lán)色聚苯乙烯乳膠(DukeScientific)上的小鼠-抗-人類a-hCGmAb(克隆3299)，與3mg/ml的清除劑抗體mAb小鼠-抗-人類/3-hCG(室內(nèi)克隆3468)相混合，得到最終百分?jǐn)?shù)為3%的藍(lán)色乳膠，最終的3468的濃度為0.075mg/ml，游離抗-/3hCG抗體的濃度為0.06mg/ml。制得的混合物用BIODOTXYZS(序號1673)，以90g/hr的速度噴霧到Whatman玻璃纖維上(F52925mm寬軸)，以2.02pg/cm的速度噴霧到F529-09玻璃纖維約20mm的位置上。噴霧溶液分散形成約長7mm的帶。用于控制區(qū)的標(biāo)記結(jié)合試劑也存放于有孔載體上與用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑相同區(qū)上，如下家兔IgG(Dako)結(jié)合到400nm藍(lán)色乳膠聚苯乙烯乳膠(DukeScientific)的BSA/蔗糖溶液上，以得到最終百分?jǐn)?shù)藍(lán)色乳膠為0.7%固體，并以65g/hr的速度噴霧到玻璃纖維上。玻璃纖維用序列號17494的Hedinar鏈條式烘箱干燥，設(shè)置溫度65°C，速度為5(單個通過)。通過重復(fù)上述操作，第二次通過的乳膠被存放在玻璃纖維上，然而距噴霧的最初位置有約0.8mm的偏移(玻璃纖維的更下游)。玻璃纖維干燥如上所述。具有噴霧的乳膠的玻璃纖維材料附加到硝基纖維素膜上，用澄清的粘性鋪涂的層疊膜(Ferrisgate,38mm寬)進(jìn)行排列，使得噴霧的乳膠在最上面，沿硝基纖維素膜帶的長(350mm)，玻璃纖維約每2mm交疊在硝基纖維素的表面。玻璃纖維在硝基纖維素膜上游提供，結(jié)合試劑在接近玻璃纖維的末端提供。層狀薄片隨后切割成包含玻璃纖維有孔載體材料的、寬6mm長25mm的試驗帶，標(biāo)記試劑沿在上游提供的玻璃纖維的長被應(yīng)用20mm,在寬6mm，長40mm的硝基纖維素膜的上游設(shè)置并每2mm交疊該硝基纖維素膜。長45mm、寬12mm、厚約2.5mm的有孔的試樣接收器(Filtrona)在第一個有孔載體材料的上游提供并與該第一個有孔載體材料交疊約3mm。用于控制區(qū)的標(biāo)記結(jié)合試劑也存放于有孔載體上與用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑相同的區(qū)上，如下家兔IgG(Dako)結(jié)合到400nm藍(lán)色乳膠聚苯乙烯乳膠(DukeScientific)的BSA/蔗糖溶液上，以得到最終百分?jǐn)?shù)為0.7%固體的藍(lán)色乳膠，并以65g/hr的速度噴霧到玻璃纖維上(F529-09)。第一和第二分析試驗帶設(shè)置成相互平行，普通的聚酯纖維試樣應(yīng)用墊(505521，F(xiàn)iltrona)覆蓋在兩個分析上游的末端。普通的棉花吸收滲透墊(CF7，Whatman)覆蓋在參比區(qū)和控制區(qū)下游。分析裝置通過將平行結(jié)構(gòu)的分析帶安裝到包含光學(xué)元件的塑料外殼內(nèi)而制成。排列LED，使得四個LED定位在與各自的四個區(qū)非常接近(兩個檢測區(qū)、一個參比區(qū)、和一個對照區(qū))的一個偏離位置及分析的平面上。單個光電探測器定位在兩個分析平面之間及上方，并定位在分析帶的中間(見圖2)。權(quán)利要求1.一種分析裝置，用于測定液體試樣中一種或多種被分析物的存在和/或程度，所述分析裝置包含a)第一和第二分析，各包含一流路，所述流路具有用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中，在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測可表明一種或多種被分析物的存在和/或程度；b)共享參比區(qū)；c)一個或多個光源，用于照亮檢測區(qū)和參比區(qū)；d)一個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)和參比區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生信號，其信號強(qiáng)度與檢測的光量相關(guān)；以及e)信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的分析裝置，其中，第一和/或第二分析包括用于被分析物或被分析物類似物的標(biāo)記結(jié)合試劑，在裝置使用之前、以干燥狀態(tài)、在檢測區(qū)上游、以不固定形式提供所述標(biāo)記結(jié)合試劑。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析裝置，其中，第一和/或第二分析包括在檢測區(qū)以不固定形式提供的標(biāo)記結(jié)合試劑或用于被分析物的結(jié)合試劑。4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，所述共享參比區(qū)作為第一或者第二分析中任意一個的部分被包含。5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，還包含共享控制區(qū)。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分析裝置，其中，所述控制區(qū)作為第一或者第二分析中任意一個的部分被包含。7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的分析裝置，其中，所述控制區(qū)作為一個分析的部分被包含，共享參比區(qū)作為另一個分析的部分被包含。8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，第一分析和第二分析能夠檢測在不同濃度范圍內(nèi)的被分析物的存在。9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，第一和第二分析的流路分別包含有孔載體。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分析裝置，其中，一個/多個所述有孔載體包括硝基纖維素。11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，包含在第一和第二分析上游提供的單個有孔試樣接收器。12.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，還包含在分析流路的遠(yuǎn)端提供的池。13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，第一和第二分析分別包含不同量的標(biāo)記結(jié)合試劑。14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，包含檢測低濃度范圍的被分析物的第一分析，和檢測高濃度范圍的被分析物的第二分析。15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分析裝置，其中，第二分析比第一分析具有量更大的標(biāo)記結(jié)合試劑。16.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，第一分析包含在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑，第二分析包含在檢測區(qū)上游提供的用于被分析物的第二結(jié)合試劑和用于被分析物的標(biāo)記結(jié)合試劑。17.根據(jù)權(quán)利要求15和16所述的分析裝置，其中，第一分析包含共享參比區(qū)，第二分析包含共享控制區(qū)。18.根據(jù)權(quán)利要求n所述的分析裝置，其中，所述參比區(qū)在檢測區(qū)下游提供。19.根據(jù)權(quán)利要求17和18所述的分析裝置，其中，所述控制區(qū)在檢測區(qū)下游提供。20.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，光電探測器檢測來自多個區(qū)的光。21.根據(jù)權(quán)利要求4-20中任意一項所述的分析裝置，包含單一的光電探測器，用于檢測來自兩個檢測區(qū)、參比區(qū)和控制區(qū)的光。22.根據(jù)權(quán)利要求4-21中任意一項所述的分析裝置，包含四個光源，用來照亮兩個檢測區(qū)、參比區(qū)和控制區(qū)。23.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，由光電探測器檢測的來自檢測區(qū)和參比區(qū)的光量在試樣加入至分析裝置之前被測量，并在試樣加入至分析裝置之后被再次測量，對每個區(qū)計算兩次測量值的比率。24.根據(jù)權(quán)利要求20所述的分析裝置，其中，計算檢測區(qū)和/或控制區(qū)的相對衰減的標(biāo)準(zhǔn)百分比(。/。A),其中<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>25.—種分析裝置，用于測定液體試樣中一種或多種被分析物的存在和/或程度，所述分析裝置包含a)第一和第二分析，各包含一流路，所述流路具有用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中，在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測可表明一種或多種被分析物的存在和/或程度；b)共享控制區(qū)；C)一個或多個光源，用于照亮檢測區(qū)和控制區(qū)；d)—個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)及控制區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生信號，其信號強(qiáng)度與檢測的光量相關(guān)；以及e)信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號。26.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，所述光源包含一個或多個LED。27.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，所述待檢測的被分析物為hCG。28.根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置，其中，所述液體試樣為尿。29.—種進(jìn)行分析的方法，用于檢測液體試樣中的被分析物的存在和/或程度，所述方法包含用根據(jù)前述權(quán)利要求中任意一項所述的分析裝置接觸試樣的步驟。30.根據(jù)權(quán)利要求1-28中任意一項所述的分析裝置，如上文中所充分描述的并參考附圖。全文摘要本發(fā)明公開了一種用于測定液體試樣中一種或多種被分析物的存在和/或程度的分析裝置，分析裝置包含a)第一和第二分析，各包含一流路，所述流路具有用于固定標(biāo)記結(jié)合試劑的檢測區(qū)，其中，在一個或兩個檢測區(qū)對標(biāo)記結(jié)合試劑進(jìn)行的檢測，能夠表明一種或多種被分析物的存在和/或程度；b)共享參比區(qū)；c)一個或多個光源，用于照亮檢測區(qū)及參比區(qū)；d)一個或多個光電探測器，用于檢測來自檢測區(qū)及參比區(qū)的光，所述光電探測器產(chǎn)生信號，其信號強(qiáng)度與檢測的光量相關(guān)；以及e)信號處理裝置，用于處理來自光電探測器的信號。文檔編號G01N33/48GK101393197SQ200810211189公開日2009年3月25日申請日期2008年9月1日優(yōu)先權(quán)日2007年9月1日發(fā)明者史蒂芬·保羅·沙羅克申請人:因弗因斯醫(yī)藥瑞士股份有限公司