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茶多酚檢測試紙及其標準比色卡和它們的用途的制作方法

文檔序號:5836240閱讀:932來源:國知局

專利名稱::茶多酚檢測試紙及其標準比色卡和它們的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明涉及植物有效成分檢測技術(shù),具體屬于一種茶多酚檢測試紙及其標準比色卡和它們的用途。
背景技術(shù)
:茶葉是全球三大天然飲料之一,茶多酚是茶葉重要的活性成分,是決定茶葉風(fēng)味和品質(zhì)的主要物質(zhì)。目前,關(guān)于植物多酚含量的測定方法主要包括高效液色譜測定法,原子吸收法,紫外一可見分光光度法、滴定法和電化學(xué)法等。高效液色譜測定法測定物質(zhì)中各組分得到分離并且進行定性定量分析,該法可同時測定不同的多酚組分以及多種有效成分的指紋圖譜。原子吸收法是利用堿式乙酸鉛與茶多酚絡(luò)合形成黃色沉淀,通過測定上清液中過量的鉛離子,間接測定茶多酚的含量。流動注射-抑制化學(xué)發(fā)光法是在堿性條件下,茶多酚還原H202,抑制魯米諾-H202-KI04體系的化學(xué)發(fā)光,其抑制發(fā)光的程度與茶多酚的含量成線形關(guān)系。分光光度法也是常用方法,主要包括分光光度比色法、三波長分光光度法和差示分光光度法。分光光度法主要是高等植物及產(chǎn)品中的植物多酚與不同的顯色物質(zhì)反應(yīng),通過顯色物質(zhì)的光密度與多酚的濃度成相關(guān)關(guān)系來測定多酚含量,待測物中不同多酚與相同或者是不同的顯色劑成色,具有特征吸收峰,可以通過多波長和差示分光光度測定。茶多酚與高錳酸鉀、重氮鹽、鉬酸銨、酒石酸亞鐵及相關(guān)金屬離子等顯色劑顯色,形成了酒石酸亞鐵比色法(GB8313287)、重氮化-偶合分比色法鉬酸銨分光光度法、高錳酸鉀滴定法及電位滴定法等一系列茶多酚測定方法。另外還有茶多酚在酸性條件下還原F^+為Fe2+,F(xiàn)^+與鐵氰化鉀生成可溶性蘭色配合物KFe[Fe(CN)6],通過比色間接測定茶多酚的含量。中國農(nóng)業(yè)大學(xué)(專利號CN1811391A)也描述了一種利用圖像采集儀器采集茶多酚顯色的圖像信息,基于計算機色度識別系統(tǒng)處理,進行茶多酚含量測定的方法。其優(yōu)點是以圖像采集儀替代了昂貴的分光光度儀,可以預(yù)存標準曲線,只對待測樣品進行測量即可得到其濃度。其測定原理是酒石酸亞鐵與茶多酚顯色,在比色池中直接采集顯色的圖像信息,待測樣品的色度與標準樣品的色度比較,進行茶多酚含量的測定。現(xiàn)有測定茶多酚的方法中,有的方法精密度高、有的方法針對性強,但是需要價格昂貴的精密儀器;滴定法雖然不需要精密儀器,但需要配制試劑和經(jīng)過滴定的過程。所以,建立一種簡單、方便、快捷的茶多酚檢測方法是非常必要的。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種茶多酚檢測試紙及其標準比色卡,并提供一種利用該檢測試紙和標準比色卡方便、快捷地測定樣品中茶多酚含量的方法。本發(fā)明提供的一種茶多酚檢測試紙,通過包括如下歩驟的方法制得稱取粘合劑加入蒸餾水中,使其溶解,配制成濃度為0.2-5%的粘合劑溶液;將絡(luò)合劑加入到粘合劑溶液中,攪拌溶解,使其濃度為0.2-1.5mol/L;再加入過渡金屬鹽顯色劑,攪拌溶解,使其濃度為0.3-1.5mol/L,即得顯色液;將濾紙浸入顯色液中浸泡3-20分鐘,取出,干燥,剪裁,整形,包裝,即得多酚檢測試紙;所述的粘合劑選自可溶性淀粉、聚乙烯醇、瓊脂、聚丙烯酰胺凝膠或明膠等;絡(luò)合劑選自酒石酸、檸檬酸、草酸、氫氟酸或它們中每一種的鉀鹽或鈉鹽或酒石酸鉀鈉等;顯色劑選自鐵、銅或鋅等的金屬鹽。本發(fā)明提供的一種與茶多酚檢測試紙配套使用的標準比色卡,通過包括如下歩驟的方法制得配制濃度在O-IOmg/mL內(nèi)的3-15種不同濃度的茶多酚標準溶液;用權(quán)利要求1所述的茶多酚檢測試紙分別在不同濃度的茶多酚標準溶液中進行顯色,依據(jù)顯色結(jié)果制作標準色塊,將標準色塊按茶多酚標準溶液濃度依次排列、粘貼,制得標準比色卡。所述的依據(jù)顯色結(jié)果制作標準色塊,是依據(jù)顯色結(jié)果利用計算機進行圖像掃描、處理制備得到茶多酚標準色塊。也可以用顏料調(diào)色的方法得到。所述的試紙可用于植物或植物制品中茶多酚含量的測定,特別是茶葉中茶多酚含量的測定。一種茶葉中茶多酚含量的測定方法,其特征在于,包括如下步驟稱量待測茶葉,加入25—50倍體積95'C—100'C的水(g/mL),浸提20分鐘制得待測溶液;取上述茶多酚檢測試紙滴加或蘸取待測溶液,在20秒_10分鐘內(nèi)與上述配套使用的標準比色卡比對,得到茶多酚含量。茶多酚含量可根據(jù)下式計算或根據(jù)事先做好的列表査得。茶多酚含量(mg/g)=(比色值xV)/(WxP)式中比色值(mg/mL):與比色卡比對獲得;V:提取液的體積(mL);P:第一次茶多酚提取率(%)如茶葉以50倍體積水浸提時約為84.30%;W:待測樣品的質(zhì)量(g)。也可根據(jù)公式計算制成茶多酚含量表。與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明以顯色劑、絡(luò)合劑、粘合劑及濾紙等為主要原料制備了茶多酚檢測試紙,這種檢測試紙適用于植物或植物制品中茶多酚含量的測定,特別是茶葉中茶多酚含量的測定。該方法具有簡單、方便、快捷等特性,可以直觀的檢測茶多酚,無需大型精密儀器,也無需專業(yè)技術(shù)人員或經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn),更不受環(huán)境的約束,也避免試驗條件的限制和試劑配制的繁瑣過程,力便于大眾普及和隨時隨地使用,另外,價格便宜向且便于攜帶,試紙的保存時間長。圖l:可溶性淀粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵制備的茶多酚檢測試紙在0-10mg/mL不同茶多酚濃度中的顯色與依據(jù)其制備成的標準比色卡。上圖為標準比色卡,下圖為實際顯色。圖2:可溶性淀粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵制備的茶多酚檢測試紙測定花茶和龍井茶的顯色,與相應(yīng)比色卡比對。圖3:瓊脂粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵制備的茶多酚檢測試紙測定普洱茶和碧螺春茶的顯色,與相應(yīng)比色卡比對。具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例,進一步闡述本發(fā)明。實施例/試紙的制備稱取可溶性淀粉2.5g,溶于80mL水中,加熱至無色透明,配制成2.5%(W/V)的淀粉溶液,稱取酒石酸鉀鈉28.2g,溶于配制好的淀粉溶液中,攪拌溶解,再加入三氯化鐵27.0g,繼續(xù)攪拌溶解,定溶至100mL,即得顯色溶液,其中酒石酸鉀鈉和三氯化鐵的摩爾濃度均為1.Omol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡10分鐘,取出置于玻璃板上于37°C烘箱十燥,即得茶多酚檢測試紙。標準比色卡的制備以茶多酚配制成濃度(mg/mL)分別為0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0的標準液。以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色,以標準濃度的茶多酚顯色為基準,利用計算機AdobePhotoshop編輯不同顏色的RGB值,以RGB值編輯成各種顏色的色塊,數(shù)碼沖印制作出所有色塊。再與標準濃度茶多酚的顯色試紙同時掃描,兩者經(jīng)計算機軟件進行顏色比對,反復(fù)編輯、數(shù)碼沖印、掃描、比對的步驟,直到比對出與標準多酚濃度相匹配的顏色,在數(shù)碼沖印制作出的編輯色塊中裁剪出與標準茶多酚溶液在試紙上顯色相匹配顏色的色塊,并按茶多酚濃度標準顯色排列、粘貼,制成茶多酚濃度標準比色卡,見圖1所示。茶葉中茶多酚含量的測定待測樣品的制備稱量待測樣品碧螺春、鐵觀音、龍井、普洱、紅茶和花茶,分別加入50倍體積95'C—IOO'C的水(g/mL),浸提20分鐘,制得各種茶葉的待測溶液。茶多酚含量測定取茶多酚檢測試紙滴加或蘸取待測溶液,在30秒內(nèi)采用目測'比色與標準比色卡比對,即得比色值;每份樣品測定三次,取平均值,按下列公式計算茶葉多酚含量。多酚含量(mg/g)=(比色值xV)/(WxP)。其中比色值與比色卡比對獲得;V:提取液的體積(mL);P:第一次提取液茶多酚提取率,按84.30%計;W:待測樣品的質(zhì)量(g)。結(jié)果見表1和圖2,圖2展示可溶性淀粉、酒石酸鉀鈉和三氯化鐵制備的茶多酚檢測試紙的標準顯色卡以及測定花茶茶和龍井茶的顯色結(jié)果。結(jié)果表明茶多酚檢測試紙目測法結(jié)果與國標法相比相對偏差小于10%,適合于茶葉茶多酚的快速測定。表J本發(fā)明方法與國標法(GB8313287)茶葉茶多酚含量測定比較<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實施例21.試紙的制備稱取瓊脂粉0.2g,溶于80mL水中,加熱至無色透明,配制成0.2%(W/V)的淀粉溶液,稱取酒石酸鉀鈉28.2g,溶于配制好的淀粉溶液中,攪拌溶解,再加入三氯化鐵27.09,繼續(xù)攪拌溶解,定溶至100mL,即得顯色溶液,其中酒石酸鉀鈉和三氯化鐵的摩爾濃度均為1.0mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘,取出置于玻璃板上于陰涼干燥處涼干,即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的制備茶多酚配制成濃度(mg/mL)分別為0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0的標準液。以上述茶多酚測定試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準,用繪畫顏料調(diào)色的方法制得標準比色卡。3.待測樣品的制備和含量測定按實施例l的方法進行。結(jié)果表明茶多酚檢測試紙目測結(jié)果與國標法相比相對偏差小于10%,適合于茶葉茶多酚的快速測定。實施例1.試紙的制備稱取可溶性淀粉2.0g,溶于80mL水中,加熱至無色透明,配制成2%(W/V)的淀粉溶液,稱取草酸鈉4.02g,溶于配制好的淀粉溶液中,攪拌溶解,再加入三氯化鐵13.5g,繼續(xù)攪拌溶解,定溶至lOOmL,即得顯色溶液,其中草酸鈉和三氯化鐵的摩爾濃度分別為0.3mol/L禾卩0.5mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘,取出置于玻璃板上于37。C烘箱干燥,即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的制備以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準,制備其相應(yīng)標準比色卡,制作方法同實施例1。實施例41.試紙的制備:稱取可溶性淀粉4.0s,溶于80mL水中,加熱至無色透明,配制成4%(W/V)的淀粉溶液,稱取草酸鈉2.68g,溶于配制好的淀粉溶液中,攪拌溶解,再加入硝酸鐵12.123,繼續(xù)攪拌溶解,定溶至100mL,即得顯色溶液,其中草酸鈉和硝酸鐵的摩爾濃度分別為0.2mol/L禾卩0.3mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘,取出置于玻璃板上于37'C烘箱干燥,即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的制備配制成茶多酚濃度(mg/mL)分別為0、0.5、1.5、2.5、3.5、4.5、5.5的標準液。以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準,制備相應(yīng)標準比色卡,制作方法見實施例1。3.待測樣品紅茶和碧螺春茶葉,按實施例1的方法制備成待測液。4.含量測定采用茶多酚檢測試紙目測法測定,結(jié)果見圖3。實施例51.試紙的制備稱取可溶性淀粉1.5g,溶于80mL水中,加熱至無色透明,配制成1.5%(W/V)的淀粉溶液,稱取氟化鈉4.2g,溶于配制好的淀粉溶液中,攪拌溶解,再加入三氯化鐵40.59,繼續(xù)攪拌溶解,定溶至100mL,即得顯色溶液,其中氟化鈉和三氯化鐵的摩爾濃度分別為1.0md/L和1.5mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡5分鐘,取出置于玻璃板上于37'C烘箱干燥,即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色卡的制備以上述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準,制備相應(yīng)標準比色卡,制作方法同實施例l。實施例61.試紙的制備稱取可溶性淀粉2.5s,溶于80mL水中,加熱至無色透明,配制成2.5%(W/V)的淀粉溶液,稱取氟化鈉4.2g,溶于配制好的淀粉溶液中,攪拌溶解,再加入硝酸鐵40.4g,繼續(xù)攪拌溶解,定溶至100mL,即得顯色溶液,其中氟化鈉和硝酸鐵的摩爾濃度均為1.0mol/L。將定性濾紙浸入顯色溶液中浸泡IO分鐘,取出置于玻璃板上于37。C烘箱干燥,即得茶多酚檢測試紙。2.標準比色一的制備以i述茶多酚檢測試紙對不同標準濃度的茶多酚顯色為基準,制備相應(yīng)標準比色卡,制作方法同實施例1。權(quán)利要求1、一種茶多酚檢測試紙,其特征在于,通過包括如下步驟的方法制得稱取粘合劑加入蒸餾水中,使其溶解,配制成濃度為0.2-2.5%的粘合劑溶液;將絡(luò)合劑加入到粘合劑溶液中,攪拌溶解,使其濃度為0.3-1.0mol/L;再加入過渡金屬鹽顯色劑,攪拌溶解,使其濃度為0.3-1.0mol/L,即得顯色液;將濾紙浸入顯色液中浸泡3-20分鐘,取出,干燥,剪裁,整形,包裝,即得多酚檢測試紙;所述的粘合劑選自可溶性淀粉、聚乙烯醇、瓊脂、聚丙烯酰胺凝膠或明膠;絡(luò)合劑選自酒石酸、檸檬酸、草酸、氫氟酸、磺基水楊酸或它們中每一種的鉀鹽或鈉鹽或酒石酸鉀鈉;顯色劑選自鐵、銅或鋅的金屬鹽。2、一種標準比色卡,其特征在于,通過包括如下歩驟的方法制得配制濃度在0-10mg/ml內(nèi)的3-15種不同濃度的茶多酚標準溶液;用權(quán)利要求1所述的茶多酚檢測試紙分別在不同濃度的茶多酚標準溶液中進行顯色,依據(jù)顯色結(jié)果制作標準色塊,將標準色塊按茶多酚標準溶液濃度依次排列、粘貼,制得標準比色卡。3、按照權(quán)利要求2所述的標準比色卡,其特征在于,所述的依據(jù)顯色結(jié)果制作標準色塊,是依據(jù)顯色結(jié)果利用計算機進行圖像掃描、處理制備得到茶多酚標準色塊。4、按照權(quán)利要求1所述的試紙用于植物或植物制品中茶多酚含量的測定。5、按照權(quán)利要求1所述的試紙用于茶葉中茶多酚含量的測定。6、一種茶葉中茶多酚含量的測定方法,其特征在于,包括如下步驟稱量待測茶葉,加入25—50倍體積95。C一100。C的水(g/mL),浸提20分鐘制得待測溶液;取茶多酚檢測試紙滴加或蘸取待測溶液,在20秒一10分鐘內(nèi)與標準比色卡比對,得出茶多酚含量。全文摘要本發(fā)明提供了一種茶多酚檢測試紙,是以鐵等過渡金屬鹽為顯色劑,以酒石酸、檸檬酸、草酸、氫氟酸、磺基水楊酸或它們中每一種的鉀鹽或鈉鹽或酒石酸鉀鈉為絡(luò)合劑,以可溶性淀粉、聚乙烯醇、瓊脂、聚丙烯酰胺凝膠或明膠為粘合劑制備而成。同時制備了茶多酚濃度標準比色卡??筛鶕?jù)待測樣品對檢測試紙的顯色與標準比色卡對比,快速目測茶多酚含量。這種檢測試紙適用于植物或植物制品中茶多酚含量的快速測定,特別適用于茶葉中茶多酚含量的測定。利用本發(fā)明檢測茶多酚的方法簡單、方便、快捷、成本低廉、易于實施推廣。文檔編號G01N21/77GK101294912SQ20081005504公開日2008年10月29日申請日期2008年6月4日優(yōu)先權(quán)日2008年6月4日發(fā)明者史通麟,鵬田,川董,趙艮貴申請人:山西大學(xué)
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