專利名稱：用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，確切地說，涉及一種用PVP/CdS量子點修飾電極作為蛋白質(zhì)高效液相色譜(HPLC)-電化學(xué)檢測器(ECD)體系中的ECD的電極，實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，屬于納米修飾電極和生物檢測的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
蛋白質(zhì)是一種信息大分子，在生命過程中起關(guān)鍵作用。人類基因組序列提前完成后，蛋白質(zhì)組學(xué)研究引起了生命科學(xué)工作者的極大關(guān)注。尋找快速高效的蛋白質(zhì)分離與檢測手段成為人們關(guān)注的熱點。
HPLC是蛋白質(zhì)分離中最重要的手段之一，常與HPLC聯(lián)用的蛋白質(zhì)檢測方法為紫外分光光度法，它的理論基礎(chǔ)是朗伯比爾定律。該檢測方法具有普遍、通用的優(yōu)點，但選擇性較差、靈敏度較低。與紫外檢測器相比，ECD具有更加完善的靈敏度和檢測限，克服了光學(xué)檢測光程短的缺點，具有死體積小、響應(yīng)速度快、方便靈活等優(yōu)點，而且儀器的制造成本也低。傳統(tǒng)的HPLC-ECD體系中的ECD通常是薄層ECD，如圖3所示。薄層ECD含工作電極1、對電極2、參比電極3、薄層電解池4、電極座5、進(jìn)液孔6、出液孔7、工作電極座8和套管10。工作電極1是玻碳電極。對電極2是不銹鋼電極。對電極2上有進(jìn)液孔6和出液孔7。參比電極3是Ag/AgCl電極。工作電極1嵌在工作電極座8中。對電極2固定在電極座5上。參比電極3固定在套管10中。套管10嵌在電極座5中。薄層電解池4是開在聚四氟乙烯薄膜上的圓孔。工作電極座8以將薄層電解池4夾在工作電極1與對電極2之間和以工作電極1與對電極2分居薄層電解池4兩邊的方式固定在電極座5上。所述的薄層ECD與HPLC組成的HPLC-ECD體系已成功地應(yīng)用于對兒茶酚胺及其代謝產(chǎn)物如多巴胺、去甲腎上腺素等神經(jīng)遞質(zhì)，電活性氨基酸如半胱氨酸、谷胱甘肽等生物活性小分子的檢測，但是至今尚未見有所述的薄層ECD應(yīng)用于HPLC-ECD體系實現(xiàn)對蛋白質(zhì)分離檢測的報道。主要原因是由于蛋白質(zhì)龐大的三維空間結(jié)構(gòu)使其電活性中心被包埋在多肽鏈中，而且蛋白質(zhì)在玻碳電極表面的吸附變性會引起電極表面的鈍化，所以蛋白質(zhì)在玻碳電極上的電子轉(zhuǎn)移速度很慢，不會產(chǎn)生有效的電流響應(yīng)，使玻碳電極在蛋白質(zhì)的直接電化學(xué)研究的應(yīng)用受到限制。
量子點(quantum dot，QD)是顯示量子尺寸效應(yīng)的半導(dǎo)體納米晶體，其尺寸小于其相應(yīng)體相半導(dǎo)體的波爾直徑，通常在2～20nm。量子點隨著晶體尺寸的減小，半導(dǎo)體能級愈來愈分離，有效帶隙增加，可以獲得獨特的光學(xué)和電學(xué)性質(zhì)。這種獨特的電學(xué)性質(zhì)可望用來制作量子點修飾電極，實現(xiàn)對蛋白質(zhì)，如血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素c等在電極上的直接電化學(xué)檢測。本發(fā)明人曾將量子點應(yīng)用于化學(xué)修飾電極，制得PVP/CdS量子點修飾電極，實現(xiàn)對生物分子的直接電化學(xué)檢測，并申請了發(fā)明名稱和申請?zhí)柗謩e為 “PVP/CdS量子點修飾電極及其制備方法”和“200510027143.2”的中國發(fā)明專利。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是推出一種用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，即PVP/CdS量子點修飾電極在蛋白質(zhì)高效液相色譜分離電化學(xué)檢測方面的應(yīng)用方法。該方法有靈敏度高、穩(wěn)定性好、成本低廉、能實現(xiàn)對蛋白質(zhì)的電化學(xué)檢測的優(yōu)點。
本發(fā)明解決上述技術(shù)問題采用的技術(shù)方案是所述的方法需在含蛋白質(zhì)色譜柱的、HPLC與工作電極1為PVP/CdS量子點修飾電極的ECD組成的HPLC-ECD體系內(nèi)實施，用HPLC技術(shù)分離蛋白質(zhì)，HPLC泵驅(qū)動流經(jīng)蛋白質(zhì)色譜柱的流動相和待測液直接進(jìn)入ECD，用工作電極1，即PVP/CdS量子點修飾電極對分離的蛋白質(zhì)進(jìn)行電化學(xué)檢測?，F(xiàn)對所述的HPLC-ECD體系簡要介紹如下。
如圖4所示，本發(fā)明采用的HPLC-ECD體系包括分離和檢測兩大部分。分離部分含流動相貯液瓶、HPLC泵、進(jìn)樣閥和蛋白質(zhì)色譜柱。各部件由色譜體系專用的Peak管連接成為流動相的流動通道。檢測部分含ECD、電化學(xué)工作站、數(shù)據(jù)記錄儀和廢液缸。ECD是薄層ECD；電化學(xué)工作站是CHI832電化學(xué)分析儀；數(shù)據(jù)記錄儀是計算機(jī)。電化學(xué)工作站與ECD和數(shù)據(jù)記錄儀之間分別由數(shù)據(jù)線連接；ECD經(jīng)Peak管與蛋白質(zhì)色譜柱和廢液缸連接蛋白質(zhì)色譜柱出液端通過Peak管與ECD的進(jìn)液孔6連接，ECD的出液孔7通過Peak管與廢液缸連接。特別要指出的是，本發(fā)明所采用的薄層ECD由圖3所示的傳統(tǒng)薄層ECD改良而成用PVP/CdS量子點修飾電極代替?zhèn)鹘y(tǒng)薄層ECD的玻碳電極作工作電極1，換句話說，本發(fā)明所采用的薄層ECD以PVP/CdS量子點修飾電極為工作電極1，分別以Ag/AgCl電極和不銹鋼電極為參比電極3和對電極2，工作電極1、對電極2和參比電極3組成本發(fā)明的薄層ECD的三電極體系。帶有圓孔的聚四氟乙烯薄膜夾在工作電極1與對電極2之間，聚四氟乙烯薄膜的圓孔部分作薄層電解池4。在對電極2上有進(jìn)液孔6和出液孔7。PVP/CdS量子點修飾電極具有以下結(jié)構(gòu)以已有的玻碳電極為基體電極，在基體電極的表面12上依次沉積有PVP/CdS量子點復(fù)合材料膜13和Nafion膜114。
現(xiàn)結(jié)合附圖詳細(xì)說明本發(fā)明的技術(shù)方案。
一種用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，其特征在于，需在含蛋白質(zhì)色譜柱的、HPLC與工作電極1為PVP/CdS量子點修飾電極的ECD組成的HPLC-ECD體系內(nèi)實施，其操作步驟如下第一步流動相溶液的配置流動相A液為含0.1％三氟乙酸，即TFA的乙腈，B液為含0.1％TFA的水，將配好的流動相溶液分別放入流動相貯液瓶A和B中；第二步HPLC-ECD體系的運行在選定的蛋白質(zhì)色譜柱條件下，啟動HPLC泵，流動相的流速在1.0～5.0mL/min的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)，流動相的梯度在20％～60％A梯度范圍內(nèi)以2％/min～10％/min的速度變化，通過計算機(jī)啟動并控制電化學(xué)工作站在ECD上施加電壓為-0.2～-0.4V的工作電位，計算機(jī)實時記錄流動相在ECD上的電流響應(yīng)情況，預(yù)運行10～15min后體系達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)流動相流速恒定、蛋白質(zhì)色譜柱柱壓穩(wěn)定、薄層ECD電化學(xué)響應(yīng)i-t基線穩(wěn)定，所述的電化學(xué)工作站是CHI832電化學(xué)分析儀；第三步蛋白質(zhì)的分離檢測的定標(biāo)用多種蛋白質(zhì)以每次一種的方式對所述的HPLC-ECD體系進(jìn)行定標(biāo)，分別配置一種蛋白質(zhì)一系列標(biāo)準(zhǔn)濃度為1.0×10-8mol/L～1.0×10-4mol/L的樣品溶液，每次進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液20μL，由計算機(jī)實時記錄出峰時間及響應(yīng)電流，用于定標(biāo)的蛋白質(zhì)與待測蛋白質(zhì)的混合樣品中待測蛋白質(zhì)相對應(yīng)，因蛋白質(zhì)而異的出峰時間是相應(yīng)的蛋白質(zhì)在所確定的分離條件下的定性分析標(biāo)準(zhǔn)，按同種蛋白質(zhì)不同濃度及其相應(yīng)的響應(yīng)電流值繪制的濃度—電流工作曲線是確定該蛋白質(zhì)的濃度的定量分析標(biāo)準(zhǔn)；第四步蛋白質(zhì)的分離檢測進(jìn)20μL待測蛋白質(zhì)的混合樣品，由計算機(jī)實時記錄色譜峰的出峰時間及響應(yīng)電流值，通過將測得的色譜峰的出峰時間與第三步所得的標(biāo)準(zhǔn)出峰時間對比，確定與該色譜峰對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)的種類；通過將測得的響應(yīng)電流值與第三步所得的工作曲線對比，確定與該響應(yīng)電流值對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)的濃度。
本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步的特征在于，所述的蛋白質(zhì)色譜柱是美國VARIAN公司的VARIAN Microsorb 300-5 C4色譜柱。
本發(fā)明的技術(shù)方案的進(jìn)一步的特征在于，第二步中，流動相的最佳流速為1.0～2.0mL/min，ECD的最佳工作電位為-0.3V。
工作原理。
ECD采用CHI832電化學(xué)分析儀，利用該工作站中的i-t直流安培技術(shù)，通過計算機(jī)控制、傳輸、采集、記錄數(shù)據(jù)。在以PVP/CdS量子點修飾電極為工作電極1，分別以Ag/AgCl電極和不銹鋼電極為參比電極3和對電極2的薄層ECD的三電極體系中，在工作電極1與參比電極3之間施加工作電位，為樣品發(fā)生還原反應(yīng)提供所需的電位。在-0.2V～-0.4V電位范圍內(nèi)，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)經(jīng)過蛋白質(zhì)色譜柱分離，在不同的時間流經(jīng)ECD的薄層電解池4時，在PVP/CdS量子點修飾電極上發(fā)生還原反應(yīng)，產(chǎn)生還原電流峰，這種電化學(xué)響應(yīng)在以玻碳電極為工作電極1的傳統(tǒng)HPLC-ECD體系中是無法實現(xiàn)的，PVP/CdS量子點修飾電極能得到已有的玻碳電極上所無法得到的對蛋白質(zhì)的電化學(xué)響應(yīng)的原因是PVP/CdS量子點復(fù)合材料的粒子的粒徑為2～5nm，由于粒徑大大減小，使PVP/CdS量子點修飾電極具有高的比表面積，極大地增加了PVP/CdS量子點修飾電極與蛋白質(zhì)的直接表面接觸，提高了電子傳遞效率，促進(jìn)了電子的迅速高效傳遞。
在蛋白質(zhì)色譜柱、流動相組成、流速、梯度等分離條件確定的情況下，蛋白質(zhì)的色譜峰的出峰時間因蛋白質(zhì)而異同種蛋白質(zhì)，出峰時間相同，不同種蛋白質(zhì)，出峰時間不同。因此色譜峰的出峰時間是蛋白質(zhì)的定性分析標(biāo)準(zhǔn)。在同一ECD上所施加工作電位一定時，在蛋白質(zhì)的線性濃度范圍內(nèi)，隨著蛋白質(zhì)濃度的增加，峰電流線性地增加，通過一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的濃度與相應(yīng)電流值的關(guān)系繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線是蛋白質(zhì)的定量分析標(biāo)準(zhǔn)。對實際樣品，即混合樣品進(jìn)行測定時，將其峰響應(yīng)電流值代入工作曲線，就可得到蛋白質(zhì)的濃度。
與背景技術(shù)相比，本發(fā)明的方法具有以下優(yōu)點1、本發(fā)明的方法用以PVP/CdS量子點修飾電極為工作電極1的ECD與HPLC體系聯(lián)用，能檢測到在以玻碳電極為工作電極1的傳統(tǒng)的HPLC-ECD系統(tǒng)上無法檢測到的蛋白質(zhì)電化學(xué)響應(yīng)。
2、本發(fā)明的方法能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白質(zhì)的快速分離、高靈敏度檢測。
3、本發(fā)明的方法對蛋白質(zhì)分離檢測的線性范圍寬，檢測限低。線性范圍大于2個數(shù)量級，檢測限低于5.0×10-8mol/L。與傳統(tǒng)的UV-Vis法的檢測限在10-5mol/L數(shù)量級相比，本發(fā)明的方法的靈敏度提高了100倍以上，因此，本發(fā)明的方法適于用來快速分離檢測含微量蛋白質(zhì)，如血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素c等的樣品，且重現(xiàn)性好、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小。
4、本發(fā)明的方法拓寬了PVP/CdS量子點修飾電極的應(yīng)用范圍，使其不但可以實現(xiàn)靜態(tài)電解池中蛋白質(zhì)的直接電化學(xué)測定，而且還可以實現(xiàn)對HPLC體系分離的蛋白質(zhì)進(jìn)行實時電化學(xué)測定。
5、本發(fā)明的方法操作簡便，檢測成本低廉。


圖1是已有的玻碳電極的結(jié)構(gòu)示意圖。其中宏觀圖中1是工作電極，工作電極1是玻碳電極，微觀圖中12是工作電極1的表面，即玻碳電極的表面，微觀圖是宏觀圖中工作電極1的表面，即玻碳電極的電極端面處的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖2是本發(fā)明的方法所采用的PVP/CdS量子點修飾電極的結(jié)構(gòu)示意圖。其中宏觀圖中1是工作電極，工作電極1是PVP/CdS量子點修飾電極，微觀圖中12為玻碳電極的表面，13為PVP/CdS量子點復(fù)合材料膜，14為Nafion膜，微觀圖是宏觀圖中工作電極1，即PVP/CdS量子點修飾電極的電極端面處的結(jié)構(gòu)示意圖。
圖3是PVP/CdS量子點修飾電極用于薄層ECD的分解圖。其中1是工作電極、2是對電極、3是參比電極、4是薄層電解池、5是電極座、6是進(jìn)液孔、7是出液孔、8是工作電極座和10是套管。
圖4是HPLC-ECD系統(tǒng)的工作流程示意圖。
具體實施例方式
所有的實施例均按照發(fā)明內(nèi)容所述方法的操作步驟進(jìn)行操作。
實施例1 用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法之一蛋白質(zhì)色譜柱是美國VARIAN公司的VARIAN Microsorb 300-5C4色譜柱。
第二步中，流動相的流速為1.0mL/min，流動相在20％～60％A梯度范圍內(nèi)以2％/min的速度變化，電化學(xué)工作站施加在ECD上的工作電壓為-0.3V，預(yù)運行10min。第三步中，分別配置標(biāo)準(zhǔn)濃度為1.0×10-8mol/L～1.0×10-4mol/L的三種蛋白質(zhì)血紅蛋白、肌紅蛋白和細(xì)胞色素c的溶液，三種蛋白質(zhì)血紅蛋白、肌紅蛋白和細(xì)胞色素c的色譜峰的出峰時間分別為12.49min、9.02min和6.33min，其濃度—電流工作曲線分別為y＝1.0841x+2×10-8，y＝1.1537x+1×10-8和y＝1.2451x+1×10-8，其中y和x分別為響應(yīng)峰電流值(A)和蛋白質(zhì)濃度值(mol/L)。用于定標(biāo)的三種蛋白質(zhì)與待測蛋白質(zhì)的混合樣品中待測蛋白質(zhì)相對應(yīng)。第四步中，待測蛋白質(zhì)混合樣品進(jìn)樣后，在6.33min、9.02min、12.49min分別出現(xiàn)了三個色譜峰，峰電流值依次為4.42μA、6.48μA和6.13μA。通過與第三步測得的標(biāo)準(zhǔn)出峰時間對比，可以確定與三個色譜峰對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)分別是細(xì)胞色素c、肌紅蛋白和血紅蛋白。通過與第三步測得的工作曲線對比，可以確定三種待測蛋白質(zhì)細(xì)胞色素c、肌紅蛋白和血紅蛋白的濃度分別為3.54×10-6mol/L、5.61×10-6mol/L和5.64×10-6mol/L。
實施例2 用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法之二第二步中，除以下條件與實施例1的不同外，其他條件與實施例1相同流動相的流速為2.0mL/min，流動相在20％～60％A梯度范圍內(nèi)以4％/min的速度變化，預(yù)運行12min。第三步中，血紅蛋白、肌紅蛋白和細(xì)胞色素c的色譜峰的出峰時間分別為6.25min、4.51min和3.17min；在第四步中，混合樣品進(jìn)樣后，在3.17min、4.51min和6.25min分別出現(xiàn)了三個色譜峰，峰電流分別為0.73μA、0.51μA和0.89μA。通過與第三步測得的標(biāo)準(zhǔn)出峰時間對比，可以確定與三個色譜峰對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)分別是細(xì)胞色素c、肌紅蛋白和血紅蛋白。通過與第三步測得的工作曲線對比，可以確定三種待測蛋白質(zhì)細(xì)胞色素c、肌紅蛋白和血紅蛋白的濃度分別為5.78×10-7mol/L、4.33×10-7mol/L和8.03×10-7mol/L。
實施例3 用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法之三第二步中，除以下條件與實施例1的不同外，其他條件與實施例1相同流動相的流速為5.0mL/min，流動相在20％～60％A梯度范圍內(nèi)以10％/min的速度變化，預(yù)運行15min。第三步中，血紅蛋白、肌紅蛋白和細(xì)胞色素c的出峰時間分別為2.49min、1.80min和1.23min。第四步中，混合樣品3進(jìn)樣后，在1.23min、1.80min和2.49min分別出現(xiàn)了三個色譜峰，峰電流值分別為98nA、75nA和84nA。通過與第三步測得的標(biāo)準(zhǔn)出峰時間對比，以確定與三個色譜峰對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)分別是細(xì)胞色素c、肌紅蛋白和血紅蛋白。通過與第三步測得的工作曲線對比，可以確定三種待測蛋白質(zhì)細(xì)胞色素c、肌紅蛋白和血紅蛋白的濃度分別為5.94×10-8mol/L、6.41×10-8mol/L和7.19×10-8mol/L。
綜上，只要在ECD上施加的工作電位(-0.2～-0.4V)確定，按照本發(fā)明的方法就可以確定待測蛋白質(zhì)的工作曲線，利用該工作曲線就可以進(jìn)一步對蛋白質(zhì)樣品進(jìn)行定量分析。
權(quán)利要求
1.一種用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，其特征在于，需在含蛋白質(zhì)色譜柱的、HPLC與工作電極1為PVP/CdS量子點修飾電極的ECD組成的HPLC-ECD體系內(nèi)實施，其操作步驟如下第一步 流動相溶液的配置流動相A液為含0.1％三氟乙酸，即TFA的乙腈，B液為含0.1％TFA的水，將配好的流動相溶液分別放入流動相貯液瓶A和B中；第二步 HPLC-ECD體系的運行在選定的蛋白質(zhì)色譜柱條件下，啟動HPLC泵，流動相的流速在1.0～5.0mL/min的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)，流動相的梯度在20％～60％A梯度范圍內(nèi)以2％/min～10％/min的速度變化，通過計算機(jī)啟動并控制電化學(xué)工作站在ECD上施加電壓為-0.2～-0.4V的工作電位，計算機(jī)實時記錄流動相在ECD上的電流響應(yīng)情況，預(yù)運行10～15min后體系達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)流動相流速恒定、蛋白質(zhì)色譜柱柱壓穩(wěn)定、薄層ECD電化學(xué)響應(yīng)i-t基線穩(wěn)定，所述的電化學(xué)工作站是CH1832電化學(xué)分析儀；第三步 蛋白質(zhì)的分離檢測的定標(biāo)用多種蛋白質(zhì)以每次一種的方式對所述的HPLC-ECD體系進(jìn)行定標(biāo)，分別配置一種蛋白質(zhì)一系列標(biāo)準(zhǔn)濃度為1.0×10-8mol/L～1.0×10-4mol/L的樣品溶液，每次進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液20μL，由計算機(jī)實時記錄出峰時間及響應(yīng)電流，用于定標(biāo)的蛋白質(zhì)與待測蛋白質(zhì)的混合樣品中待測蛋白質(zhì)相對應(yīng)，因蛋白質(zhì)而異的出峰時間是相應(yīng)的蛋白質(zhì)在所確定的分離條件下的定性分析標(biāo)準(zhǔn)，按同種蛋白質(zhì)不同濃度及其相應(yīng)的響應(yīng)電流值繪制的濃度—電流工作曲線是確定該蛋白質(zhì)的濃度的定量分析標(biāo)準(zhǔn)；第四步 蛋白質(zhì)的分離檢測進(jìn)20μL待測蛋白質(zhì)的混合樣品，由計算機(jī)實時記錄色譜峰的出峰時間及響應(yīng)電流值，通過將測得的色譜峰的出峰時間與第三步所得的標(biāo)準(zhǔn)出峰時間對比，確定與該色譜峰對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)的種類；通過將測得的響應(yīng)電流值與第三步所得的工作曲線對比，確定與該響應(yīng)電流值對應(yīng)的待測蛋白質(zhì)的濃度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，其特征在于，所述的蛋白質(zhì)色譜柱是美國VARIAN公司的VARIAN Microsorb 300-5 C4色譜柱。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，其特征在于，第二步中，流動相的最佳流速為1.0～2.0mL/min，ECD的最佳工作電位為-0.3V。
全文摘要
一種用PVP/CdS量子點修飾電極實現(xiàn)蛋白質(zhì)分離檢測的方法，屬于納米修飾電極和生物檢測的技術(shù)領(lǐng)域。該方法需在含蛋白質(zhì)色譜柱的、HPLC與工作電極為PVP/CdS量子點修飾電極的ECD組成的HPLC－ECD體系內(nèi)實施，用HPLC技術(shù)分離蛋白質(zhì)，HPLC泵驅(qū)動流經(jīng)蛋白質(zhì)色譜柱的流動相和待測液直接進(jìn)入ECD，PVP/CdS量子點修飾電極對分離的蛋白質(zhì)進(jìn)行電化學(xué)檢測。該方法有靈敏度高、穩(wěn)定性好、成本低廉、能實現(xiàn)對蛋白質(zhì)的電化學(xué)檢測等優(yōu)點。
文檔編號G01N30/02GK1731174SQ20051002893
公開日2006年2月8日 申請日期2005年8月19日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月19日
發(fā)明者金利通, 劉梅川, 張莉, 程欲曉, 張文, 鮮躍仲, 施國躍 申請人:華東師范大學(xué)