本發(fā)明涉及亞臨界萃取及注入領(lǐng)域，具體涉及一種適用于食品、煙草及藥食保健等行業(yè)，工藝簡單、設(shè)備投入低，整個過程都在常溫或低溫條件下進(jìn)行，壓力相對較低，不會對葡萄籽樣品、花青素及被注入樣品的功能性成分造成破壞的葡萄籽花青素的亞臨界注入方法。

背景技術(shù)：

葡葡籽含有豐富的原花青素成分。原花青素是自然界中廣泛存在的聚多酚類混合物，主要由兒茶素的單體、二聚體、三聚體、……十聚體等組合而成。其中，二至五聚體為低聚原花青素(oligomericproantho2cyanidin，opc)，以高效、低毒、高生物利用率著稱。根據(jù)資料報道，opc擁有強有力的抗氧化能力。在體內(nèi)其抗氧化、清除自由基的能力是ve的50倍、vc的20倍。國外關(guān)于opc

的性能研究較多，該物質(zhì)廣泛用于食品、飲料、化妝品及保健品等領(lǐng)域。在美國，原花青素被認(rèn)為是最受公眾青睞、并風(fēng)靡美國草藥市場的植物藥。到目前為止、已從葡萄籽和皮中分離、鑒定了16種原花青素，其中有8個二聚體、4個三聚體、其它為四聚體、五聚體和六聚體等。

目前提取這些成分一般采用溶劑萃取法。溶劑萃取法的實驗室流程如下：葡萄籽烘干-粉碎-脫脂-萃取-濃縮-沉淀得到opc。針對目前對于花青素都是經(jīng)過繁瑣的提取精制純化后直接食用、口感差、價格貴。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡單、設(shè)備投入低，整個過程都在常溫或低溫條件下進(jìn)行，壓力相對較低，不會對葡萄籽樣品、花青素及被注入樣品的功能性成分造成破壞的葡萄籽花青素的亞臨界注入方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案是這樣實現(xiàn)的：

一種葡萄籽花青素的亞臨界注入方法，包括以下步驟：

步驟一）預(yù)處理：將葡萄籽干燥至水分含量在4%以下，并在進(jìn)行粉碎后過100目篩；

步驟二）萃?。簩㈩A(yù)處理后的葡萄籽置于密閉萃取罐中，抽真空后向萃取罐內(nèi)注入萃取用亞臨界流體作為萃取溶劑，將葡萄籽完全浸沒，并注入萃取用夾帶劑后進(jìn)行萃??；萃取結(jié)束后，將液體溶劑抽進(jìn)蒸發(fā)罐，對葡萄籽和液體溶劑分別進(jìn)行恒溫脫溶處理，即得到含有葡萄籽花青素的提取物；

步驟三）注入：將步驟二）得到的含有葡萄籽花青素的提取物與需要進(jìn)行注入的物料按1:20～30g/g的質(zhì)量比一同置入亞臨界注入罐，抽真空后向亞臨界注入罐內(nèi)加入注入用亞臨界流體作為注入溶劑，注入用亞臨界流體將提取物和需要進(jìn)行注入的物料完全浸沒，并加入注入用夾帶劑后進(jìn)行注入，注入結(jié)束后，對注入罐進(jìn)行恒溫脫溶處理，脫溶結(jié)束即得到含有葡萄籽花青素的物料。

步驟二）中所述的葡萄籽和萃取溶劑的質(zhì)量體積比為1:10～30g/ml，萃取用夾帶劑為體積分?jǐn)?shù)為15～95%的乙醇溶液，夾帶量為1～10%，萃取時間為10～30分鐘，溫度為30～40℃，壓力為0.1～0.6mpa，循環(huán)萃取1～4次。

所述的萃取用亞臨界流體為二甲醚或液氨中的一種。

步驟三）中所述的含有葡萄籽花青素的提取物和需要進(jìn)行注入的物料，與注入溶劑的質(zhì)量體積比為1:10～30g/ml，注入過程中可加入注入用夾帶劑，注入用夾帶劑包括體積分?jǐn)?shù)為15～95%的乙醇溶液夾帶量為0～10%，注入時間為20～30分鐘，溫度為30～40℃，壓力為0.1～0.6mpa。

所述的注入用亞臨界流體為二甲醚、液氨中的一種。

所述的亞臨界萃取及注入過程中葡萄籽和液體溶劑中蒸發(fā)出的溶劑氣體，經(jīng)過壓縮冷凝，液態(tài)的溶劑流回溶劑貯存罐，循環(huán)使用。

所述的需要進(jìn)行注入的物料包括茶葉、麥片、煙葉、藥材。

本發(fā)明的積極效果是：亞臨界萃取技術(shù)是利用亞臨界萃取溶劑，在密閉、無氧、低壓的萃取罐內(nèi)，依據(jù)有機物相似相溶的原理，通過萃取物料與萃取溶劑在萃取過程中的分子擴散過程，使物料中的天然活性成分轉(zhuǎn)移到液態(tài)的萃取溶劑中，再通過減壓蒸發(fā)的過程將萃取溶劑與目的產(chǎn)物分離，最終得到目的產(chǎn)物的一種新型萃取與分離技術(shù)。亞臨界萃取技術(shù)相比其它分離方法有許多優(yōu)點：無毒、無害，環(huán)保、無污染、非熱加工、不破壞產(chǎn)品活性、防止氧化，產(chǎn)能大、可工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，節(jié)能、運行成本低，易于和產(chǎn)物分離等，具有十分廣闊的應(yīng)用前景。

亞臨界注入是一個全新的方法，是在亞臨界條件下利用功能性成分在亞臨界流體中的運動，選擇性地將功能性成分注入物料內(nèi)部，實現(xiàn)物料內(nèi)部成分的變更或使不同物料中的成分進(jìn)行交換的一種新技術(shù)。亞臨界萃取技術(shù)得到葡萄籽花青素的同時，并不破壞葡萄籽中的脂肪、蛋白和氨基酸，使得其仍舊能夠用于其它用途；而其所得的花青素活性保存完好，在同樣的亞臨界條件下注入到食品、煙草及藥食保健等行業(yè)的固體類樣品中，如茶葉、麥片、煙葉及各種藥材等，賦予了被注入樣品抗氧化、抗突變、預(yù)防心腦血管疾病、保護肝臟、保護微血管作用、防止近視再加深、預(yù)防重度近視及視網(wǎng)膜剝離病變等功效，使得經(jīng)注入處理后的樣品成為十分理想的保健樣品。

注入處理后的茶葉中花青素的含量為5.3～6.4μg/g，長期飲用具有抗氧化、抗突變、預(yù)防心腦血管疾病、保護肝臟、保護微血管作用、防止近視再加深、預(yù)防重度近視及視網(wǎng)膜剝離病變等功效；注入處理后的麥片中花青素的含量為4.6μg/g，長期飲用具有抗氧化、抗突變、預(yù)防心腦血管疾病、保護肝臟、保護微血管作用、防止近視再加深、預(yù)防重度近視及視網(wǎng)膜剝離病變等功效。

具體實施方式

一種葡萄籽花青素的亞臨界注入方法，包括以下步驟：

步驟一）預(yù)處理：將葡萄籽干燥至水分含量在4%以下，并在進(jìn)行粉碎后過40～100目篩；

步驟二）萃?。簩㈩A(yù)處理后的葡萄籽置于密閉萃取罐中，抽真空后向萃取罐內(nèi)注入萃取用亞臨界流體作為萃取溶劑，將葡萄籽完全浸沒，并注入萃取用夾帶劑后進(jìn)行萃取；萃取條件為，萃取用亞臨界流體為二甲醚或液氨中的一種，葡萄籽和萃取溶劑的質(zhì)量體積比為1:10～30g/ml，萃取用夾帶劑為體積分?jǐn)?shù)為15～95%的乙醇溶液，夾帶量為1～10%；萃取時間為10～30分鐘，溫度為30～40℃，壓力為0.1～0.6mpa，循環(huán)萃取1～4次，萃取結(jié)束后，將液體溶劑抽進(jìn)蒸發(fā)罐，對葡萄籽和液體溶劑分別進(jìn)行恒溫脫溶處理，液體溶劑脫溶即得到含有葡萄籽花青素的提取物；

步驟三）注入：將步驟二）得到的含有葡萄籽花青素的提取物與需要進(jìn)行注入的物料按1:20～30g/g的質(zhì)量比一同置入亞臨界注入罐，需要進(jìn)行注入的物料包括茶葉、麥片、煙葉、藥材，抽真空后向亞臨界注入罐內(nèi)加入注入用亞臨界流體作為注入溶劑，注入用亞臨界流體將提取物和需要進(jìn)行注入的物料完全浸沒，并加入注入用夾帶劑后進(jìn)行注入，注入條件為：注入用亞臨界流體為二甲醚、液氨中的一種，含有葡萄籽花青素的提取物和需要進(jìn)行注入的物料，與注入溶劑的質(zhì)量體積比為1:10～30g/ml，注入過程中可加入注入用夾帶劑，注入用夾帶劑包括體積分?jǐn)?shù)為15～95%的乙醇溶液夾帶量為0～10%，注入時間為20～30分鐘，溫度為30～40℃，壓力為0.1～0.6mpa，注入結(jié)束后，對注入罐進(jìn)行恒溫脫溶處理，脫溶結(jié)束即得到含有葡萄籽花青素的物料。

亞臨界萃取及注入過程中葡萄籽和液體溶劑中蒸發(fā)出的溶劑氣體，經(jīng)過壓縮冷凝，液態(tài)的溶劑流回溶劑貯存罐，循環(huán)使用。

實施例1

將200g干燥后的葡萄籽粉碎后過100目篩，置于亞臨界萃取罐中，抽真空，向亞臨界萃取罐內(nèi)注入萃取用亞臨界流體二甲醚作為萃取溶劑，葡萄籽和萃取溶劑的質(zhì)量體積比為1:10g/ml，夾帶劑為體積分?jǐn)?shù)為15%的乙醇溶液，夾帶量10%，萃取時間為30分鐘，溫度為30℃，壓力為0.6mpa，萃取循環(huán)4次；萃取結(jié)束后，將液體溶劑抽進(jìn)蒸發(fā)罐，對葡萄籽和液體溶劑分別進(jìn)行恒溫脫溶處理，液體溶劑脫溶即得到含有葡萄籽花青素的提取物。

將上述提取物與市售信陽毛尖茶葉按1:20g/g的質(zhì)量比一同置入亞臨界注入罐，抽真空后向罐內(nèi)注入亞臨界流體二甲醚作為注入溶劑，將信陽毛尖茶葉完全浸沒，信陽毛尖茶葉和注入溶劑的質(zhì)量體積比為1:30g/ml，夾帶劑為體積分?jǐn)?shù)為15%的乙醇溶液，夾帶量10%，注入時間為20分鐘，溫度為30℃，壓力為0.6mpa，注入結(jié)束后，對注入罐進(jìn)行恒溫脫溶處理，脫溶結(jié)束即得到含有葡萄籽花青素的信陽毛尖茶葉。

經(jīng)檢測注入處理后的信陽毛尖茶葉中花青素的含量為6.4μg/g，長期飲用具有抗氧化、抗突變、預(yù)防心腦血管疾病、保護肝臟、保護微血管作用、防止近視再加深、預(yù)防重度近視及視網(wǎng)膜剝離病變等功效。因此，經(jīng)注入處理后的茶葉是一種十分理想的保健茶。

實施例2

將200g干燥后的葡萄籽粉碎后過40目篩，置于亞臨界萃取罐中，抽真空，向罐內(nèi)注入萃取用亞臨界流體液氨作為萃取溶劑，葡萄籽和萃取溶劑的質(zhì)量體積比為1:30g/ml，夾帶劑為95%的乙醇溶液，夾帶量1%，萃取時間為10分鐘，溫度為40℃，壓力為0.1mpa，循環(huán)萃取2次；萃取結(jié)束后，將液體溶劑抽進(jìn)蒸發(fā)罐，對葡萄籽和液體溶劑分別進(jìn)行恒溫脫溶處理，液體溶劑脫溶即得到含有葡萄籽花青素的提取物。

將上述提取物與市售大紅袍茶葉按1:30g/g的質(zhì)量比一同置入亞臨界注入罐，抽真空后向罐內(nèi)注入亞臨界流體液氨作為注入溶劑，將大紅袍茶葉完全浸沒，上述提取物和大紅袍茶葉與注入溶劑的質(zhì)量體積比為1:15g/ml，夾帶劑為95%的乙醇溶液，夾帶量5%，注入時間為25分鐘，溫度為40℃，壓力為0.1mpa，注入結(jié)束后，對注入罐進(jìn)行恒溫脫溶處理，脫溶結(jié)束即得到含有葡萄籽花青素的大紅袍茶葉。

經(jīng)檢測注入處理后的大紅袍茶葉中花青素的含量為5.3μg/g，長期飲用具有抗氧化、抗突變、預(yù)防心腦血管疾病、保護肝臟、保護微血管作用、防止近視再加深、預(yù)防重度近視及視網(wǎng)膜剝離病變等功效。因此，經(jīng)注入處理后的茶葉是一種十分理想的保健茶。

實施例3

將100g干燥后的葡萄籽粉碎后過60目篩，置于亞臨界萃取罐中，抽真空，向罐內(nèi)注入萃取用亞臨界流體二甲醚作為萃取溶劑，葡萄籽和萃取溶劑的質(zhì)量體積比為1:15g/ml，夾帶劑為50%的乙醇溶液，夾帶量5%，萃取時間為15分鐘，溫度為35℃，壓力為0.58mpa，萃取1次；萃取結(jié)束后，將液體溶劑抽進(jìn)蒸發(fā)罐，對葡萄籽和液體溶劑分別進(jìn)行恒溫脫溶處理，液體溶劑脫溶后即得到含有葡萄籽花青素的提取物3.09g。

將上述提取物與市售麥片按1:25g/g的質(zhì)量比一同置入亞臨界注入罐，抽真空后向罐內(nèi)注入亞臨界流體二甲醚作為注入溶劑，將麥片完全浸沒，提取物和麥片與注入溶劑的質(zhì)量體積比為1:10g/ml，夾帶劑量0%，注入時間為30分鐘，溫度為35℃，壓力為0.58mpa，注入結(jié)束后，對注入罐進(jìn)行恒溫脫溶處理，脫溶結(jié)束即得到含有葡萄籽花青素的麥片。

經(jīng)檢測注入處理后的麥片中花青素的含量為4.6μg/g，長期飲用具有抗氧化、抗突變、預(yù)防心腦血管疾病、保護肝臟、保護微血管作用、防止近視再加深、預(yù)防重度近視及視網(wǎng)膜剝離病變等功效。因此，經(jīng)注入處理后的麥片是一種十分理想的保健食品。