專利名稱：一種氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片及其操作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微型化細(xì)胞操作技術(shù)領(lǐng)域的一種細(xì)胞芯片，具體涉及一種用于實(shí)時(shí)控制性細(xì)胞捕獲與釋放的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片及其操作方法。
背景技術(shù)：
微型化細(xì)胞操作技術(shù)是有效開展生命微觀世界科學(xué)探索的重要條件。微流控芯片技術(shù)，作為本世紀(jì)具有代表性的微型操作與分析平臺(tái)技術(shù)之一，顯示出極強(qiáng)的細(xì)胞精確操作能力。迄今為止，涉及微流控芯片細(xì)胞操作的方法主要包括機(jī)械操作、微流體操作、磁學(xué)操作、光學(xué)操作、電場(chǎng)操作以及聲學(xué)操作等。其中，機(jī)械操作依賴性細(xì)胞芯片以其制備簡(jiǎn)單、操作快捷、能夠開展實(shí)時(shí)高通量且無需輔助電子儀器等優(yōu)勢(shì)，長(zhǎng)期為國內(nèi)外研究學(xué)者所 采納。然而，目前芯片內(nèi)用于細(xì)胞研究的機(jī)械操作多屬于被動(dòng)式細(xì)胞操作，缺乏操作的靈活性和可逆性。常見的細(xì)胞機(jī)械定位元件(例如微壩和微孔)由于其高度固定，細(xì)胞一旦被捕獲則難以完全清除，因此無法完成細(xì)胞回收和細(xì)胞再捕獲操作，即只能進(jìn)行一次性細(xì)胞捕獲。這樣，不僅造成了芯片材料的大量消耗，同時(shí)在很大程度上也限制了所捕獲細(xì)胞的后期試驗(yàn)研究范圍。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種基于微流控芯片技術(shù)的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片及其操作方法。能夠?qū)崿F(xiàn)捕獲微結(jié)構(gòu)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的空間調(diào)節(jié)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞捕獲、保護(hù)、釋放及再捕獲的時(shí)間與空間控制操作。其操作簡(jiǎn)單快捷，易于廣大細(xì)胞研究人員掌握。為了實(shí)現(xiàn)上述任務(wù)，本發(fā)明采取如下的技術(shù)解決方案一種氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，其特征在于，由流動(dòng)層和氣動(dòng)層組成；所述的流動(dòng)層由8個(gè)細(xì)胞微腔組成，各細(xì)胞微腔通過對(duì)稱分布的微管道網(wǎng)絡(luò)相互連接，每個(gè)細(xì)胞微腔設(shè)有進(jìn)口和出口 ；流動(dòng)層還設(shè)有一個(gè)進(jìn)樣入口，該進(jìn)樣入口通過微管道與各個(gè)細(xì)胞微腔的進(jìn)口相連通。所述的氣動(dòng)層由48個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的48個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)組成，其中，每6個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的6個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)構(gòu)成一個(gè)陣列單元，該陣列單元與流動(dòng)層的單個(gè)細(xì)胞微腔相對(duì)應(yīng)，各個(gè)U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)通過微管道網(wǎng)絡(luò)相連接，微管道上設(shè)置進(jìn)氣入口 ；各保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)也通過微管道網(wǎng)絡(luò)相連接，微管道上同樣設(shè)置進(jìn)氣入口。所述的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)存在二維和三維的基本空間狀態(tài)，即當(dāng)在一定氣壓作用下，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)受到激發(fā)從而形成三維結(jié)構(gòu)；當(dāng)在大氣壓下，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)為二維結(jié)構(gòu)；其中，“U”型三維氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)用于對(duì)細(xì)胞的攔截捕獲操作，而三維保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)用于對(duì)捕獲細(xì)胞的保護(hù)，防止液流對(duì)細(xì)胞的力學(xué)作用。本發(fā)明的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片材料為PDMS聚合物，與涂有PDMS聚合物的玻璃材料進(jìn)行不可逆封接，保證芯片質(zhì)量和微管道網(wǎng)絡(luò)的獨(dú)立性。上述氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片的操作方法，其特征在于，在一定流速下，將細(xì)胞懸液由流動(dòng)層入口，通過均勻分布的微管道，分別灌注進(jìn)入8個(gè)細(xì)胞微腔內(nèi)；然后由“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口給予“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)一定氣壓，使“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)由二維結(jié)構(gòu)變?yōu)槿S結(jié)構(gòu)，從而形成“U”型微壩并完成對(duì)細(xì)胞的陣列式攔截捕獲；當(dāng)捕獲操作完成后，通過對(duì)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口給予保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)一定氣壓，阻斷細(xì)胞微腔內(nèi)液流進(jìn)入“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)，從而保護(hù)已捕獲的細(xì)胞；
當(dāng)一次細(xì)胞操作與分析完成后，分別撤銷施加于保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的氣壓，還原為大氣壓狀態(tài)，從而使保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)恢復(fù)至二維結(jié)構(gòu)，進(jìn)而使捕獲細(xì)胞隨液流排出細(xì)胞微腔。本發(fā)明的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，其帶來的技術(shù)效果在于可以在單個(gè)微流控芯片內(nèi)連續(xù)完成細(xì)胞的捕獲、保護(hù)、釋放及再捕獲操作。相對(duì)于以往微流控芯片內(nèi)的機(jī)械操作，其在細(xì)胞操作方面具有更好的時(shí)間與空間控制性及靈活性，同時(shí)具有操作簡(jiǎn)單快捷、樣品與能量低消耗等特點(diǎn)，能夠廣泛應(yīng)用于多種平行高通量與多重復(fù)式細(xì)胞操作與分析應(yīng)用以及細(xì)胞樣品再分析應(yīng)用。


圖I是本發(fā)明的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片的流動(dòng)層和氣動(dòng)層平面結(jié)構(gòu)示意圖，其中標(biāo)記分別表示1表示流動(dòng)層進(jìn)樣入口，2和3表示流動(dòng)層管道出口，4和5表示氣動(dòng)層“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口，6表示氣動(dòng)層的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口。圖2是流動(dòng)層中的單個(gè)細(xì)胞微腔和氣動(dòng)層的單組氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)陣列單元示意圖，其中的標(biāo)記21表示細(xì)胞和液流入口，22為細(xì)胞和液流出口，標(biāo)記23表示氣動(dòng)層“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口，標(biāo)記24表不氣動(dòng)層保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口，標(biāo)記25表不氣動(dòng)層“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)，標(biāo)記26表示氣動(dòng)層保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)，標(biāo)記27表示流動(dòng)層細(xì)胞微腔內(nèi)的微柱子。圖3是未施加一定氣壓情況下的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)不意圖,其中標(biāo)記31表不“U，，型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的二維狀態(tài)；圖4是施加一定氣壓情況下的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)示意圖，其中標(biāo)記41表示“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的三維狀態(tài)，標(biāo)記42表不施加氣壓的進(jìn)氣入口。圖5是微流控芯片內(nèi)細(xì)胞進(jìn)樣示意圖，其中標(biāo)記51表示單個(gè)細(xì)胞，標(biāo)記52表示二維狀態(tài)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)，標(biāo)記53表示二維狀態(tài)的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu),標(biāo)記54表示細(xì)胞進(jìn)樣入口，標(biāo)記55表示細(xì)胞進(jìn)樣出口。圖6是微流控芯片內(nèi)氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲示意圖,其中標(biāo)記61表示已捕獲的細(xì)胞團(tuán)，標(biāo)記62表不三維狀態(tài)的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)。圖7是微流控芯片內(nèi)氣動(dòng)陣列化細(xì)胞保護(hù)示意圖，其中標(biāo)記71表示三維狀態(tài)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)。圖8是微流控芯片內(nèi)捕獲細(xì)胞的釋放示意圖，其中標(biāo)記81表示釋放的捕獲細(xì)胞。圖9是微流控芯片內(nèi)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)捕獲細(xì)胞的熒光標(biāo)記圖。圖10是微流控芯片內(nèi)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)對(duì)微腔液流屏蔽的可視化模擬操作結(jié)果圖，其中標(biāo)記101表示液流屏蔽前,標(biāo)記102表示液流屏蔽后Os,標(biāo)記103表示液流屏蔽后0. 5s,標(biāo)記104表示液流屏蔽后IOs,標(biāo)記105表示液流屏蔽后20s,標(biāo)記106表示液流屏蔽后30s,標(biāo)記107表示液流屏蔽后40s,標(biāo)記108表示液流屏蔽撤銷,標(biāo)記109表示未施加氣壓的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)，標(biāo)記1010表施加氣壓的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu),標(biāo)記1011-1015表不液流擴(kuò)散,標(biāo)記1016表不氣壓撤銷后的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)。以下將結(jié)合附圖和發(fā)明人給出的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。應(yīng)當(dāng)理解，這些實(shí)施例是本發(fā)明較優(yōu)的例子，僅為了更進(jìn)一步理解本發(fā)明，本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :本實(shí)施例給出一種申請(qǐng)人的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)并制備的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片的材料選擇PDMS聚合物，不可逆封接于涂有PDMS薄膜的玻璃表面。如圖I所示，該氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片由流動(dòng)層和氣動(dòng)層組成；流動(dòng)層主要由8個(gè)微型細(xì)胞腔組成，8個(gè)微型細(xì)胞腔對(duì)稱分布，通過對(duì)稱分布管道網(wǎng)絡(luò)相互連接，每個(gè)微型細(xì)胞腔設(shè)有進(jìn)口和出口(2或3);流動(dòng)層還設(shè)有一個(gè)進(jìn)樣入口 1，該進(jìn)樣入口 I通過管路分別與8個(gè)微型細(xì)胞腔相連接；氣動(dòng)層主要由48個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的48個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)組成，其中，每6個(gè)氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的6個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)構(gòu)成一個(gè)陣列單元，該陣列單元與流動(dòng)層的單個(gè)細(xì)胞微腔相對(duì)應(yīng)，各個(gè)U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)由末端封閉的管道網(wǎng)絡(luò)相連接，管道上設(shè)置進(jìn)氣口 6 ;各保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)也由末端封閉的管道網(wǎng)絡(luò)連接，管道上同樣設(shè)置進(jìn)氣口(4或5)。如圖2所示，流動(dòng)層中的單個(gè)細(xì)胞微腔和氣動(dòng)層的單組氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)陣列單元，包括細(xì)胞和液流入口 21，細(xì)胞和液流出口 22，氣動(dòng)層的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)25，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)25有進(jìn)氣入口 23，氣動(dòng)層的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)26，保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)26有進(jìn)氣入口 24，流動(dòng)層的細(xì)胞微腔內(nèi)的微柱子27。因此，可同時(shí)實(shí)現(xiàn)48個(gè)平行細(xì)胞捕獲操作。當(dāng)未施加壓力(Opsi)時(shí)，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)31呈二維形態(tài)(圖3所示);當(dāng)進(jìn)氣入口 42施加一定氣壓(7psi)時(shí)，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)41呈三維形態(tài)(圖4所示)，形成“U”型微壩，便于實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的陷阱式捕獲操作。實(shí)施例2: 采用實(shí)施例的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，對(duì)A549肺癌細(xì)胞陣列化捕獲與釋放的操作過程是，首先對(duì)實(shí)施例I所示氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片進(jìn)行細(xì)胞微灌注，即通過微量注射泵將細(xì)胞密度為IO6個(gè)/mL的細(xì)胞懸液以10iiL/min的流量由芯片流動(dòng)層入口 I注入，細(xì)胞經(jīng)均分微管道分別進(jìn)入8個(gè)細(xì)胞微腔內(nèi)(圖5所示);對(duì)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)施加一定氣壓(如實(shí)施例I中所述)使其呈現(xiàn)為三維微壩形態(tài)，從而捕獲A549肺癌細(xì)胞(如圖6所示)；捕獲操作完成后，對(duì)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)施加一定氣壓(20psi)，使其呈現(xiàn)為三維形態(tài)，阻止液流對(duì)捕獲細(xì)胞的力學(xué)作用，實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的保護(hù)(圖7所示)；然后進(jìn)行細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測(cè)分析(圖9所示);當(dāng)細(xì)胞分析完成后，撤銷施加氣壓使其降至Opsi，分別是保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和“u”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)還原為二維形態(tài)，進(jìn)而是捕獲的A549肺癌細(xì)胞隨液流排出細(xì)胞微腔(圖8所示)，完成細(xì)胞的釋放操作。實(shí)施例3 如實(shí)施例2中所述施加氣壓的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞微腔內(nèi)液流的阻止。如圖10所示，當(dāng)對(duì)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)施加一定氣壓后，其能夠完全屏蔽液流，使液流不能直接通過。通過光學(xué)檢測(cè)可以發(fā)現(xiàn)，液流分子只能通過擴(kuò)散(1011-1015)的形式與保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)所保護(hù)區(qū)域進(jìn)行交流。由于每一個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)對(duì)應(yīng)于一個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)(圖2所示)，因此，施加氣壓的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)能夠阻止液流對(duì)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)捕獲細(xì)胞的力學(xué)作用。權(quán)利要求
1.一種氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，其特征在于，由流動(dòng)層和氣動(dòng)層組成； 所述的流動(dòng)層由8個(gè)細(xì)胞微腔組成，各細(xì)胞微腔通過對(duì)稱分布的微管道網(wǎng)絡(luò)相互連接，每個(gè)細(xì)胞微腔設(shè)有進(jìn)口和出口；流動(dòng)層還設(shè)有一個(gè)進(jìn)樣入口，該進(jìn)樣入口通過微管道與各個(gè)細(xì)胞微腔的進(jìn)口相連通； 所述的氣動(dòng)層由48個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的48個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)組成，其中，每6個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的6個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)構(gòu)成一個(gè)陣列單元，該陣列單元與流動(dòng)層的單個(gè)細(xì)胞微腔相對(duì)應(yīng)，各個(gè)U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)通過微管道網(wǎng)絡(luò)相連接，微管道上設(shè)置進(jìn)氣口 ；各保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)也通過微管道網(wǎng)絡(luò)相連接，微管道上同樣設(shè)置進(jìn)氣口。
2.如權(quán)利要求I所述的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，其特征在于，所述的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片的材料選擇PDMS聚合物。
3.如權(quán)利要求I所述的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，其特征在于，所述的“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)存在二維和三維的基本空間狀態(tài)，即當(dāng)在一定氣壓作用下，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)受到激發(fā)從而形成三維結(jié)構(gòu)；當(dāng)在大氣壓下，“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)為二維結(jié)構(gòu)；其中，“U”型三維氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)用于對(duì)細(xì)胞的攔截捕獲操作，而三維保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)用于對(duì)捕獲細(xì)胞的保護(hù)，防止液流對(duì)細(xì)胞的力學(xué)作用。
4.權(quán)利要求I所述的氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片的操作方法，其特征在于，在一定流速下，將細(xì)胞懸液由流動(dòng)層入口，通過均勻分布的微管道，分別灌注進(jìn)入8個(gè)細(xì)胞微腔內(nèi)；然后由“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口給予“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)一定氣壓，使“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)由二維結(jié)構(gòu)變?yōu)槿S結(jié)構(gòu)，從而形成“U”型微壩并完成對(duì)細(xì)胞的陣列式攔截捕獲； 當(dāng)捕獲操作完成后，通過對(duì)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的進(jìn)氣入口給予保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)一定氣壓，阻斷細(xì)胞微腔內(nèi)液流進(jìn)入“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)，從而保護(hù)已捕獲的細(xì)胞； 當(dāng)一次細(xì)胞操作與分析完成后，分別撤銷施加于保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)的氣壓，還原為大氣壓狀態(tài)，從而使保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)恢復(fù)至二維結(jié)構(gòu)，進(jìn)而使捕獲細(xì)胞隨液流排出細(xì)胞微腔。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種氣動(dòng)陣列化細(xì)胞捕獲與釋放芯片，由流動(dòng)層和氣動(dòng)層組成；流動(dòng)層由8個(gè)細(xì)胞微腔組成，氣動(dòng)層由48個(gè)“U”型氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)和相對(duì)應(yīng)的48個(gè)保護(hù)傘狀氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)組成，能夠?qū)崿F(xiàn)氣動(dòng)微結(jié)構(gòu)實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的空間調(diào)節(jié)，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)陣列化細(xì)胞捕獲、保護(hù)、釋放及再捕獲的時(shí)間與空間控制性操作。該微流控芯片涉及的細(xì)胞操作簡(jiǎn)單、快捷，且具有極強(qiáng)的靈活性，易于廣大細(xì)胞研究人員掌握，可廣泛應(yīng)用于多種平行高通量與多重復(fù)式細(xì)胞操作與分析應(yīng)用以及細(xì)胞樣品回收再分析應(yīng)用。
文檔編號(hào)B01L3/00GK102728423SQ201210207999
公開日2012年10月17日 申請(qǐng)日期2012年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月21日
發(fā)明者劉文明, 劉瑞, 張艷榮, 李天保, 涂琴, 王堯磊, 王建春, 王進(jìn)義, 申少飛, 袁茂森, 許娟, 趙磊 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)