施例2完全相同。
[0042] 實(shí)施例7 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例2的區(qū) 別僅在于步驟三中重金屬Cu污染土壤的pH為5的黃壤，其他各步驟與實(shí)施例2完全相同。
[0043] 實(shí)施例8 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例3的區(qū) 別僅在于步驟三中重金屬Pb污染土壤的pH為4的黃壤，其他各步驟與實(shí)施例3完全相同。
[0044] 實(shí)施例9 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例3的區(qū) 別僅在于步驟三中重金屬Pb污染土壤的pH為6的黃壤，其他各步驟與實(shí)施例3完全相同。
[0045] 實(shí)施例10 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例1的區(qū) 別僅在于步驟三中重金屬污染土壤的Ni元素的濃度為1000 mg/ kg \其他各步驟與實(shí)施 例1完全相同。
[0046] 實(shí)施例11 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例2的區(qū) 別僅在于步驟三中重金屬污染土壤的Cu元素的濃度為2000 mg/ kg \其他各步驟與實(shí)施 例2完全相同。
[0047] 實(shí)施例12 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例3的區(qū) 別僅在于步驟三中重金屬污染土壤的Pb元素的濃度為3000 mg/ kg \其他各步驟與實(shí)施 例3完全相同。
[0048] 實(shí)施例13 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例1~12 的區(qū)別在于步驟三中重金屬污染土壤為Ni、Cu復(fù)合污染土壤，Ni的濃度為500 mg/kg \ Cu 的濃度為1000 mg/kg 1，將實(shí)施例1和2培養(yǎng)的趨磁細(xì)菌以1:2的比例，加入到被重金屬Ni、 Cu復(fù)合污染的pH為5的紅壤中，添加比例滿足每畝地重金屬污染的土壤中接種20L培養(yǎng) 液，翻耕表層土壤，使吸附Ni3+和Cu 3+的混合趨磁細(xì)菌與被重金屬Ni、Cu污染的土壤充分 混合；經(jīng)過19天之后灌溉上述與趨磁細(xì)菌混合的土壤，使重金屬污染土壤保持淹水狀態(tài)， 降低土壤中的氧含量，并在土壤上面放上磁鐵，磁鐵的S極與土壤接觸；經(jīng)過22天之后收集 厚度為IOcm的上述與趨磁細(xì)菌混合的土壤，用水淋洗，收集所述淋洗液，通過趨磁細(xì)菌分 離器進(jìn)行分離，使重金屬沿規(guī)定的方向迀移，最終沉積在固體表面。
[0049] 實(shí)施例14 : 本實(shí)施例中提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其具體過程與實(shí)施例1~12 的區(qū)別在于步驟三中重金屬污染土壤為Ni、Cu、Pb復(fù)合污染土壤，Ni的濃度為800 mg/kg \ Cu的濃度為900 mg/kg \ Pb的濃度為1000 mg/kg \分別將實(shí)施例1、2、3培養(yǎng)的趨磁細(xì)菌 以1:1. 5:2的比例，加入到被重金屬Ni、Cu、Pb復(fù)合污染的pH為6的黃壤中，添加比例滿足 每畝地重金屬污染的土壤中接種25L培養(yǎng)液，翻耕表層土壤，使吸附Ni' Cu' Pb3+的混合 趨磁細(xì)菌與被重金屬Ni、Cu、Pb污染的土壤充分混合；經(jīng)過21天之后灌溉上述與趨磁細(xì) 菌混合的土壤，使重金屬污染土壤保持淹水狀態(tài)，降低土壤中的氧含量，并在土壤上面放上 磁鐵，磁鐵的S極與土壤接觸；經(jīng)過24天之后收集厚度為IOcm的上述與趨磁細(xì)菌混合的土 壤，用水淋洗，收集所述淋洗液，通過趨磁細(xì)菌分離器進(jìn)行分離，使重金屬沿規(guī)定的方向迀 移，最終沉積在固體表面。
[0050] 效果驗(yàn)證： 采用小麥幼苗實(shí)驗(yàn)法測定修復(fù)效果，小麥種子用70%的酒精消毒后，再用去離子水沖 洗干凈，放入20°C的恒溫培養(yǎng)箱中12~18h，促進(jìn)種子發(fā)芽。將發(fā)芽的種子分別種在裝有修 復(fù)前和修復(fù)后土壤的盆中，種植密度為100粒/盆，放在溫度為20°C，光照為40001x，濕 度為50~95% RH，每日照射12h的人工氣候箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)14d后，取出小麥植株，并用去 離子水將其沖洗干凈，烘干后利用硝酸-高氯酸消解直至澄清透明，然后利用ICP-AES方 法測定小麥含重金屬的含量。
[0051] 結(jié)果分析： 表1實(shí)施例比較 υ?Ν 丄λ _/·?·? 口/丄》j
由表1可知，趨磁細(xì)菌對重金屬Ni、Cu、Pb具有很好的吸附作用，明顯減低了土壤中重 金屬的含量。土壤的pH對趨磁細(xì)菌的吸附作用存在著一定的影響，對于Ni和Cu，在土壤的 pH為5時(shí)趨磁細(xì)菌的吸附率最高；對于Pb，在土壤的pH為6時(shí)趨磁細(xì)菌的吸附率最高；不 同種類的混合趨磁細(xì)菌可以修復(fù)多種重金屬污染的土壤。
[0052] 上述結(jié)果表明，本發(fā)明提供的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，在其移動 的過程中可以有效吸附土壤中的重金屬，大大降低了土壤中重金屬的積累量。該方法屬于 原位修復(fù)，操作簡單、成本低廉、修復(fù)效果好、不破壞土壤肥力、不存在土壤的二次污染；并 且趨磁細(xì)菌在吸附重金屬以后可以通過磁分離器進(jìn)行分離，有利于重金屬的回收利用。
[0053] 本發(fā)明一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法所述及的各項(xiàng)權(quán)利要求及技術(shù)支 撐已經(jīng)明確，凡依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)支撐實(shí)質(zhì)所作的任何修改與變化仍屬于本發(fā)明技術(shù)支撐 的范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于，包括以下步驟： 步驟一，分離趨磁細(xì)菌： 利用趨磁細(xì)菌收集器從水下污泥表面部分分離得到趨磁細(xì)菌； 步驟二，趨磁細(xì)菌的培養(yǎng)： 將步驟一中分離得到的趨磁細(xì)菌按照每毫升液體培養(yǎng)基中接種7X 107~1. 5X IO8個(gè)細(xì) 菌，在黑暗條件下進(jìn)行培養(yǎng)，液體培養(yǎng)基的pH為4~7,培養(yǎng)溫度為20~30°C，培養(yǎng)15~25d后， 獲得處于生長對數(shù)期的培養(yǎng)液，每毫升培養(yǎng)液中含有I. 5X 10s~3. 5X IO8個(gè)趨磁細(xì)菌； 步驟三，趨磁細(xì)菌修復(fù)重金屬污染土壤： 將步驟二中得到的培養(yǎng)液，加入到被重金屬污染的土壤中，添加比例：每畝地重金屬污 染的土壤中噴施10~30L培養(yǎng)液，翻耕表層土壤，使趨磁細(xì)菌與被重金屬污染的土壤充分混 合，趨磁細(xì)菌在地磁場的作用下向土壤深處移動，吸附深層土壤中的重金屬； 步驟四，趨磁細(xì)菌的回收： 15~20天后，灌溉步驟三中土壤，使重金屬污染土壤保持淹水狀態(tài)，在土壤上面放上磁 鐵，使趨磁細(xì)菌由土壤深層回到土壤的表面； 步驟五，趨磁細(xì)菌與重金屬的分離： 經(jīng)過20~25天之后收集步驟四中與磁鐵接觸的表面土壤，并用水淋洗，收集淋洗液，提 取重金屬，淋洗后的土壤回填原處。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于：所述 步驟一中利用趨磁細(xì)菌收集器從水下污泥表面分離得到趨磁細(xì)菌的具體方法為： 1) 取已滅菌、干燥的培養(yǎng)皿，并在培養(yǎng)皿內(nèi)設(shè)置鐵絲網(wǎng)，取水下表面0. 5~lcm處的污泥 放入培養(yǎng)皿中，蓋住鐵絲網(wǎng)； 2) 在已滅菌的趨磁細(xì)菌收集器內(nèi)裝滿無菌水，并在趨磁細(xì)菌收集器的開口端蓋上一層 濾紙，將趨磁細(xì)菌收集器迅速倒扣在所述鐵絲網(wǎng)上； 3) 在趨磁細(xì)菌收集器的底部放一磁鐵，N極朝上，靜置4~5h后，用無菌注射器從取樣孔 收集趨磁細(xì)菌。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于： 所述步驟一中的趨磁細(xì)菌收集器由塑料管（1)和隔板（3 )構(gòu)成，塑料管（1)的一端開口，另 一端的中心留有取樣孔（2)，隔板（3)位于塑料管（1)的中間位置，隔板（3)的中間留有連通 的孔。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于： 所述步驟四中的磁鐵S極與土壤接觸。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于：所述 步驟五中收集的重金屬土壤深度為8~12cm。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于：所述 重金屬污染的土壤類型為黃壤或紅壤，PH為4~6。7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于：所述 重金屬污染的土壤中含有Pb、Ni、Cu中的一種或一種以上重金屬元素。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，其特征在于：所述 重金屬污染土壤中Pb元素的濃度為500~3000 mg/kg^Ni元素的濃度為300~1000 mg/kg1， Cu元素的濃度為400~2000 mg/kg 1C3
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法，包括以下步驟：步驟一，分離趨磁性細(xì)菌；步驟二，趨磁性細(xì)菌的培養(yǎng)；步驟三，趨磁性細(xì)菌修復(fù)重金屬污染的土壤；步驟四，趨磁性細(xì)菌的回收；步驟五，趨磁性細(xì)菌與重金屬的分離。本發(fā)明提供一種重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法可以有效減少重金屬在土壤中的含量，從而降低了重金屬在植物中的積累量。本發(fā)明提出的重金屬污染土壤的微生物修復(fù)方法屬于原位修復(fù)，操作簡單、成本低廉、修復(fù)效果好，并且不破壞土壤肥力、不存在土壤的二次污染。
【IPC分類】B09C1/10
【公開號】CN105127195
【申請?zhí)枴緾N201510636157
【發(fā)明人】馬新攀
【申請人】河南行知專利服務(wù)有限公司
【公開日】2015年12月9日
【申請日】2015年9月30日