專(zhuān)利名稱(chēng)：一種甲基橙染料廢水的處理方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于應(yīng)用微生物與環(huán)境工程技術(shù)領(lǐng)域，涉及利用一種新型固定化載體固 定化微生物處理染料廢水的方法。尤其涉及利用固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜處理 甲基橙染料廢水。
背景技術(shù)：
人工合成的染料是印染、紡織和造紙等工業(yè)廢水中的重要污染物之一，通常含 有復(fù)雜的芳香環(huán)結(jié)構(gòu)，具有難降解物質(zhì)多、有機(jī)物成分復(fù)雜、濃度高、毒性大、可生化 性差、脫色困難等特點(diǎn)，如甲基橙是一種偶氮類(lèi)染料，它是對(duì)氨基苯磺酸重氮鹽與N， N-二甲基苯胺的醋酸鹽，在弱酸性介質(zhì)中偶合得到的，有毒，可在食物鏈中生物聚積， 嚴(yán)重威脅著人類(lèi)的生命安全。目前，甲基橙染料廢水的處理主要采用電催化氧化法、微 波催化氧化法、二氧化鈦電催化氧化法、泡沫分離法及超聲波法等，但這些方法存在成 本高、周期長(zhǎng)、操作穩(wěn)定性差、容易引起二次污染等缺點(diǎn)。自然界中白腐菌(Phanerochaete chrysosporium)是一種重要的生物資源，它通過(guò)
分泌木質(zhì)素降解酶系能夠降解多種結(jié)構(gòu)不同的穩(wěn)定性高的染料，該酶系主要包括木質(zhì)素 過(guò)氧化物酶(LiP)、錳過(guò)氧化物酶(MnP)和漆酶(Lac)。這些酶具有底物非特異性等特 殊性能，并能引發(fā)一系列的自由基反應(yīng)，從而對(duì)染料進(jìn)行脫色、降解和礦化。雖然白腐菌有諸多優(yōu)點(diǎn)，但其在懸浮培養(yǎng)降解體系中還存在處理效率低，酶系 統(tǒng)穩(wěn)定性差，抗逆性、抗毒性、抗高負(fù)荷能力差、固液分離困難等問(wèn)題。固定化白腐菌常用的方法有包埋法、吸附法等，常用的同定化載體有木屑、聚 氨酯泡沫、活性炭、聚乙烯醇、海藻酸鈣。但上述載體存在很多問(wèn)題，如制備過(guò)程較復(fù) 雜、固定化效率低、操作穩(wěn)定性差、廢棄后易對(duì)環(huán)境造成二次污染。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的通過(guò)對(duì)木醋桿菌產(chǎn)生的細(xì)菌纖維素膜進(jìn)行改性處理，使其成為 固定化微生物的優(yōu)良載體，進(jìn)而用于固定化白腐菌，建立一種處理甲基橙染料廢水的簡(jiǎn) 單、有效的方法，被改性細(xì)菌纖維素膜固定化的白腐菌在對(duì)甲基橙染料廢水處理過(guò)程中 活性更加穩(wěn)定，抗干擾能力更強(qiáng)，載體持久、耐用，能夠重復(fù)使用多次。一種甲基橙染料廢水的處理方法，是由如下的過(guò)程和步驟組成(1)細(xì)菌纖維素膜的制備將保存在斜面上的菌株編號(hào)為CGMCC NO 1.1812的木醋桿菌 Gluconacetobacterxylinum接入到50mL種子培養(yǎng)基中，所述的種子培養(yǎng)基中各組分用量 占種子培養(yǎng)基質(zhì)量用量的百分比分別為葡萄糖2%;蛋白胨0.5%;酵母膏0.3%; Na2HPO4 · 12H20 0.2%； KH2PO40.1%; MgSO4 · 7H20 0.025%；梓檬酸 0.2%; pH5.8 ； 氣浴恒溫?fù)u床上以160rpm培養(yǎng)2天，得到活化好的木醋桿菌培養(yǎng)液，取此木醋桿菌培養(yǎng) 液IOmL接入到125mL發(fā)酵培養(yǎng)基中，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中各組分用量占發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì)量用量的百分比分別為葡萄糖2% ；蛋白胨0.5% ；酵母膏0.3% ； Na2HPO4 · 12H20 0.2% ； KH2PO40.1% ； MgSO4 · 7H200.025% ；檸檬酸 0.2% ； pH5.8 ； 30°C靜置培養(yǎng) 7 天，在液面生成淡黃色膠質(zhì)膜，將膜取出，用蒸餾水反復(fù)沖洗，除去膜表面培養(yǎng)基及雜 質(zhì)；再將膜浸泡于O.lmol/L的NaOH溶液中，80°C煮沸60min，去除菌膜內(nèi)部的菌體和 殘留培養(yǎng)基，然后用蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，得到細(xì)菌纖維素膜；上述木醋桿菌購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，菌株編號(hào)為CGMCC NO 1.1812 ；(2)細(xì)菌纖維素膜的改性處理將20 30g步驟(1)得到的細(xì)菌纖維素膜加入到100 150mL的lmol/L氫氧 化鈉溶液中，再加入9 12mL環(huán)氧氯丙烷，于50°C恒溫水浴反應(yīng)60 90min后，取出 膜用丙酮洗滌；水洗后，再加入5 IOmL的乙二胺和95 190mL的蒸餾水；充分振搖 后，在70°C恒溫水浴中加熱20 30min，然后取出膜用蒸餾水洗至中性，再用的重 量百分含量的鹽酸洗滌3遍后，蒸餾水洗至中性，再經(jīng)丙酮潤(rùn)洗后，真空干燥至恒重， 得到改性后的細(xì)菌纖維素膜；(3)改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)菌株編號(hào)為CGMCCNO 5.776的白腐菌的固定化將3 5g步驟⑵得到的改性細(xì)菌纖維素膜加入到20 30mL的pH = 7.0、 濃度為0.2mol/L的磷酸緩沖液中，再加入2 3mL 25%重量百分含量的戊二醛水溶液； 于35°C下輕微攪拌反應(yīng)60 90min，取出膜依次用蒸餾水和0.2mol/L，pH = 7.0的磷 酸緩沖液洗滌，然后真空干燥；干燥后的細(xì)菌纖維素膜加入到80 IOOmL的白腐菌液 體限制性培養(yǎng)基中，所述的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基中各組分用量分別為KH2P042g/ L ； MgSO4 · 7H20 0.25g/L ； MnSO40.5mg/L ；無(wú)水 FeSO4O.lg/L ； NaCl l.Omg/L ； NH4N032g/L ； CaCl2O.lg/L ；葡萄糖 15g/L ； VBj.Omg/L ； pH = 6.0 7.0 ；滅菌后再 加入8 IOmL白腐菌孢子液；于30°C，120rpm搖床上培養(yǎng)48小時(shí)，取出膜后用無(wú)菌水 反復(fù)沖洗三次，此時(shí)膜表面形成了一層薄薄的白色菌膜，得到固定化白腐菌的改性細(xì)菌 纖維素膜；上述白腐菌購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776 ；(4)固定化菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776的白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)甲基 橙染料廢水的處理將1 2g步驟(3)得到的固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜，加入到50mL甲基 橙染料廢水中，上述甲基橙染料廢水的制備過(guò)程如下稱(chēng)取80 160mg/L甲基橙，溶于 IL上述步驟(3)所述的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基中，得到甲基橙染料廢水；于30°C下， 在氣浴恒溫?fù)u床上以120rpm處理5天，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，5天后，棄掉 處理后的染料廢水，保留固定化菌，再加入50mL新配制的相同濃度的染料廢水，處理?xiàng)l 件同上，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，以5天為一循環(huán)，如此重復(fù)5次，染料廢水 色度的去除率始終維持在81%以上。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比存在顯著的進(jìn)步和積極的效果①本發(fā)明為細(xì)菌纖維素膜應(yīng)用提供了新的思路和途徑。②改性后的細(xì)菌纖維素膜韌性提高，耐腐蝕能力增強(qiáng)，并且減小了載體木身對(duì)白腐菌處理甲基橙染料廢水效果的干擾。③固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜處理甲基橙染料廢水的方法具有可操作 性，并且操作簡(jiǎn)單，處理效果明顯及穩(wěn)定性好，受環(huán)境影響小。④改性細(xì)菌纖維素膜廢棄后能被環(huán)境微生物降解，并成為植物生長(zhǎng)的肥料不會(huì) 造成二次污染。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1白腐菌孢子液的制備從保存菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776 的白腐菌(Phanerochaete chrysosporium)
的斜面上挑取少量菌體，劃線法接種到固體培養(yǎng)基上，所述的固體培養(yǎng)基中各組分用 量占固體培養(yǎng)基質(zhì)量用量的百分比分別為馬鈴薯葡萄糖瓊脂3.8% ； KH2P040.3% ； MgSO4 · 7H20 0.15%, 30°C培養(yǎng)5天后，白腐菌孢子菌絲大量擴(kuò)增，向平皿中注入少量 無(wú)菌水，以推棒法刮下孢子粉，經(jīng)4層擦鏡紙濾去菌絲體，得到的乳白色孢子懸浮液即 為白腐菌孢子液，4°C冰箱保存?zhèn)溆?；上述步驟中白腐菌購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776。實(shí)施例2細(xì)菌纖維素膜的制備將保存在斜面上的菌株編號(hào)為CGMCC NO 1.1812的木醋桿菌 Gluconacetobacterxylinum接入到50mL種子培養(yǎng)基中，所述的種子培養(yǎng)基中各組分用量 占種子培養(yǎng)基質(zhì)量用量的百分比分別為葡萄糖2%;蛋白胨0.5%;酵母膏0.3%; Na2HPO4 · 12H20 0.2%； KH2PO40.1%; MgSO4 · 7H20 0.025%；梓檬酸 0.2%; pH5.8 ； 氣浴恒溫?fù)u床上以160rpm培養(yǎng)2天，得到活化好的木醋桿菌培養(yǎng)液，取此木醋桿菌培養(yǎng) 液IOmL接入到125mL發(fā)酵培養(yǎng)基中，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中各組分用量占發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì) 量用量的百分比分別為葡萄糖2% ；蛋白胨0.5% ；酵母膏0.3% ； Na2HPO4 · 12H20 0.2% ； KH2PO40.1% ； MgSO4 · 7H200.025% ；檸檬酸 0.2% ； pH5.8 ； 30°C靜置培養(yǎng) 7 天，在液面生成淡黃色膠質(zhì)膜，將膜取出，用蒸餾水反復(fù)沖洗，除去膜表面培養(yǎng)基及雜 質(zhì)；再將膜浸泡于O.lmol/L的NaOH溶液中，80°C煮沸60min，去除菌膜內(nèi)部的菌體和 殘留培養(yǎng)基，然后用蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，得到細(xì)菌纖維素膜。上述木醋桿菌購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心，菌株編號(hào)為CGMCC NO 1.1812 ；實(shí)施例3:細(xì)菌纖維素膜的改性處理取細(xì)菌纖維素膜20g放入IOOmL的lmol/L氫氧化鈉溶液中，再加入9mL的環(huán) 氧氯丙烷，于50°C恒溫水浴反應(yīng)75min后，取出膜用丙酮洗滌，以除掉膜上殘留的小分 子有機(jī)物；水洗后，再加入5mL的乙二胺和95mL蒸餾水，充分振搖后，在70°C恒溫水 浴中加熱20min，然后取出膜用蒸餾水洗至中性，再用的重量百分含量的鹽酸洗滌3 遍后，蒸餾水洗至中性，再經(jīng)丙酮潤(rùn)洗后，真空干燥至恒重，此時(shí)膜的柔韌性變強(qiáng)，表面呈淡黃色，光滑，有光澤，此即為改性后的細(xì)菌纖維素膜；改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776的白腐菌的固定化取3g上述步驟得到的改性細(xì)菌纖維素膜放到含有20mL的磷酸緩沖液 (PhosphateBuffer, 0.2mol/L, pH = 7.0)的錐形瓶中，再加入 2mL 25 % 重量百分含 量的戊二醛水溶液，35°C輕微攪拌反應(yīng)60min，取出膜依次用蒸餾水和磷酸緩沖液 (PhosphateBuffer, 0.2mol/L, pH = 7.0)洗滌，然后真空干燥；將上述戊二醛處理后 的細(xì)菌纖維素膜放到含有SOmL的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基的錐形瓶中，所述的自腐 菌液體限制性培養(yǎng)基中各組分用量分別為KH2P042g/L ； MgSO4 · 7H20 0.25g/L ； MnS040.5mg/L ；無(wú)水 FeSO4O.lg/L ； NaCl 1.0mg/L ； NH4N032g/L ； CaCl2O.lg/L ；匍萄 糖15g/L ； VB^.Omg/L ； pH = 6.0 7.0 (以下實(shí)施例中白腐菌液體限制性培養(yǎng)基組成相 同)；滅菌后再加入8mL實(shí)施例1得到的白腐菌孢子液，于30°C，120rpm搖床上培養(yǎng)48 小時(shí)，取出膜后用無(wú)菌水反復(fù)沖洗三次，此時(shí)細(xì)菌纖維素膜表面形成了一層薄薄的白色 菌膜，即為固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例4 細(xì)菌纖維素膜的改性處理取細(xì)菌纖維素膜25g放入IOOmL的lmol/L氫氧化鈉溶液中，再加入IOmL的 環(huán)氧氯丙烷，于50°C恒溫水浴反應(yīng)60min后，取出膜用丙酮洗滌，以除掉膜上殘留的小 分子有機(jī)物；水洗后，再加入5mL的乙二胺和95mL蒸餾水，充分振搖后，在70°C恒溫 水浴中加熱25min，然后取出膜用蒸餾水洗至中性，再用1 %的重量百分含量的鹽酸洗滌 3遍后，蒸餾水洗至中性，再經(jīng)丙酮潤(rùn)洗后，真空干燥至恒重，此時(shí)膜的柔韌性變強(qiáng)，表 面呈淡黃色，光滑，有光澤，此即為改性后的細(xì)菌纖維素膜；改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776的白腐菌的固定化取4g上述步驟得到的改性細(xì)菌纖維素膜放到含有25mL的磷酸緩沖液 (PhosphateBuffer, 0.2mol/L, pH = 7.0)的錐形瓶中，再加入 2.5mL 25 % 重量百分 含量的戊二醛水溶液，35°C輕微攪拌反應(yīng)75min，取出膜依次用蒸餾水和磷酸緩沖液 (PhosphateBuffer, 0.2mol/L, pH = 7.0)洗滌，然后真空干燥；將上述戊二醛處理后的 細(xì)菌纖維素膜放到含有90mL的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基的錐形瓶中，滅菌后再加入9mL 實(shí)施例1得到的白腐菌孢子液，于30°C，120rpm搖床上培養(yǎng)48小時(shí)，取出膜后用無(wú)菌水 反復(fù)沖洗三次，此時(shí)細(xì)菌纖維素膜表面形成了一層薄薄的白色菌膜，即為固定化白腐菌 的改性細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例5:細(xì)菌纖維素膜的改性處理取細(xì)菌纖維素膜30g放入150mL的lmol/L氫氧化鈉溶液中，再加入12mL的環(huán) 氧氯丙烷，于50°C恒溫水浴反應(yīng)90min后，取出膜用丙酮洗滌，以除掉膜上殘留的小分 子有機(jī)物；水洗后，再加入IOmL的乙二胺和190mL蒸餾水，充分振搖后，在70°C恒溫 水浴中加熱30min，然后取出膜用蒸餾水洗至中性，再用的重量百分含量的鹽酸洗滌 3遍后，蒸餾水洗至中性，再經(jīng)丙酮潤(rùn)洗后，真空干燥至恒重，此時(shí)膜的柔韌性變強(qiáng)，表 面呈淡黃色，光滑，有光澤，此即為改性后的細(xì)菌纖維素膜；改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776的白腐菌的固定化
取5g上述步驟得到的改性細(xì)菌纖維素膜放到含有30mL的磷酸緩沖液 (PhosphateBuffer, 0.2mol/L, pH = 7.0)的錐形瓶中，再加入 3mL25 % 重量百分含 量的戊二醛水溶液，35°C輕微攪拌反應(yīng)90min，取出膜依次用蒸餾水和磷酸緩沖液 (PhosphateBuffer, 0.2mol/L, pH = 7.0)洗滌，然后真空干燥；將上述戊二醛處理后的細(xì) 菌纖維素膜放到含有IOOmL的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基的錐形瓶中，滅菌后再加入IOmL 實(shí)施例1得到的白腐菌孢子液，于30°C，120rpm搖床上培養(yǎng)48小時(shí)，取出膜后用無(wú)菌水 反復(fù)沖洗三次，此時(shí)細(xì)菌纖維素膜表面形成了一層薄薄的白色菌膜，即為固定化白腐菌 的改性細(xì)菌纖維素膜。實(shí)施例6 固定化菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776的白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)甲基橙 染料廢水的處理取Ig固定化菌株編號(hào)為CGMCC NO: 5.776的白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜，以 及相同質(zhì)量的固定化白腐菌的聚乙烯醇海藻酸鈉，分別加入到含有50mL甲基橙染料廢水 的錐形瓶中，上述甲基橙染料廢水的制備過(guò)程如下稱(chēng)取80mg甲基橙，溶于IL白腐菌 液體限制性培養(yǎng)基中，即得到甲基橙染料廢水；于30°C下，在氣浴恒溫?fù)u床上以120rpm 搖床處理5天，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，5天后，棄掉處理后的染料廢水，保 留固定化菌，再向此錐形瓶中加入50mL新配制的80mg/L甲基橙染料廢水，處理?xiàng)l件同 上，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，以5天為一循環(huán)，如此重復(fù)5次，即用同1批固 定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜連續(xù)處理6批次染料廢水，色度去除效果如表1所示表1固定化白腐菌的不同載體對(duì)80mg/L甲基橙染料廢水的處理效果
固定化載體(Ig)
廢水批次.
80rag/L甲基橙染料廢水的色度去除率(％)
固定化 腐菌載體本身196.924,.8297.210,.0387.65.5487.74.1584.53.6683.43.2196.896..5252.744,.1343.938..1445.036..8542.734..2
改性細(xì)菌纖維素膜
聚乙烯醇-海藻酸鈉
從表1中可以看出，Ig固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)80mg/L甲基橙染料 廢水的處理效果明顯優(yōu)于相同質(zhì)量的固定化白腐菌的聚乙烯醇-海藻酸鈉，且改性細(xì)菌 纖維素膜對(duì)白腐菌處理甲基橙染料廢水效果的干擾明顯小于聚乙烯醇-海藻酸鈉。實(shí)施例7 固定化菌株編號(hào)為CGMCC NO 5.776的白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)甲基橙 染料廢水的處理取2g固定化菌株編號(hào)為CGMCC NO: 5.776的白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜，以 及相同質(zhì)量的固定化白腐菌的聚乙烯醇-海藻酸鈉，分別加入到含有50mL甲基橙染料 廢水的錐形瓶中，上述甲基橙染料廢水的制備過(guò)程如下稱(chēng)取160mg甲基橙，溶于IL 白腐菌液體限制性培養(yǎng)基中，即得到甲基橙染料廢水；于30°C下，在氣浴恒溫?fù)u床上以 120rpm搖床處理5天，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，5天后，棄掉處理后的染料廢 水，保留固定化菌，再向此錐形瓶中加入50mL新配制的160mg/L甲基橙染料廢水，處 理?xiàng)l件同上，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，以5天為一循環(huán)，如此重復(fù)5次，即用 同1批固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜連續(xù)處理6批次染料廢水，色度去除效果如表1 所示表2固定化白腐菌的不同載體對(duì)160mg/L甲基橙染料廢水的處理效果
權(quán)利要求
1. 一種甲基橙染料廢水的處理方法，是由如下的過(guò)程和步驟組成(1)細(xì)菌纖維素膜的制備將保存在斜面上的菌株編號(hào)為CGMCC NO 1.1812的木醋桿菌 Gluconacctobactcrxylinum接入到50mL種子培養(yǎng)基中，所述的種子培養(yǎng)基中各組分用量 占種子培養(yǎng)基質(zhì)量用量的百分比分別為葡萄糖2%;蛋白胨0.5%;酵母膏0.3%; Na2HPO4 · 12H20 0.2%； KH2PO40.1%; MgSO4 · 7H20 0.025%；梓檬酸 0.2%; pH5.8 ； 氣浴恒溫?fù)u床上以160rpm培養(yǎng)2天，得到活化好的木醋桿菌培養(yǎng)液，取此木醋桿菌培養(yǎng) 液IOmL接入到125mL發(fā)酵培養(yǎng)基中，所述的發(fā)酵培養(yǎng)基中各組分用量占發(fā)酵培養(yǎng)基質(zhì) 量用量的百分比分別為葡萄糖2% ；蛋白胨0.5% ；酵母膏0.3% ； Na2HPO4 · 12H20 0.2% ； KH2PO40.1% ； MgSO4 · 7H200.025% ；檸檬酸 0.2% ； pH5.8 ； 30°C靜置培養(yǎng) 7 天，在液面生成淡黃色膠質(zhì)膜，將膜取出，用蒸餾水反復(fù)沖洗，除去膜表面培養(yǎng)基及雜 質(zhì)；再將膜浸泡于O.lmol/L的NaOH溶液中，80°C煮沸60min，去除菌膜內(nèi)部的菌體和 殘留培養(yǎng)基，然后用蒸餾水反復(fù)沖洗至中性，得到細(xì)菌纖維素膜；(2)細(xì)菌纖維素膜的改性處理將20 30g步驟(1)得到的細(xì)菌纖維素膜加入到100 150mL的lmol/L氫氧化鈉 溶液中，再加入9 12mL環(huán)氧氯丙烷，于50°C恒溫水浴反應(yīng)60 90min后，取出膜用 丙酮洗滌；水洗后，再加入5 IOmL的乙二胺和95 190mL的蒸餾水；充分振搖后， 在70°C恒溫水浴中加熱20 30min，然后取出膜用蒸餾水洗至中性，再用的重量百 分含量的鹽酸洗滌3遍后，蒸餾水洗至中性，再經(jīng)丙酮潤(rùn)洗后，真空干燥至恒重，得到 改性后的細(xì)菌纖維素膜；(3)改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)菌株編號(hào)為CGMCCNO: 5.776的白腐菌的固定化將3 5g步驟⑵得到的改性細(xì)菌纖維素膜加入到20 30mL的pH = 7.0、濃 度為0.2mol/L的磷酸緩沖液中，再加入2 3mL25 %重量百分含量的戊二醛水溶液； 于35°C下輕微攪拌反應(yīng)60 90min，取出膜依次用蒸餾水和0.2mol/L，pH = 7.0的磷 酸緩沖液洗滌，然后真空干燥；干燥后的細(xì)菌纖維素膜加入到80 IOOmL的白腐菌液 體限制性培養(yǎng)基中，所述的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基中各組分用量分別為KH2P042g/ L ； MgSO4 · 7H20 0.25g/L ； MnSO40.5mg/L ；無(wú)水 FeSO4O.lg/L ； NaCl l.Omg/L ； NH4N032g/L ； CaCl2O.lg/L ；葡萄糖 15g/L ； VBj.Omg/L ； pH = 6.0 7.0 ；滅菌后再 加入8 IOmL白腐菌孢子液；于30°C，120rpm搖床上培養(yǎng)48小時(shí)，取出膜后用無(wú)菌水 反復(fù)沖洗三次，此時(shí)膜表面形成了一層薄薄的白色菌膜，得到固定化白腐菌的改性細(xì)菌 纖維素膜；(4)固定化菌株編號(hào)為CGMCCNO: 5.776的白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)甲基橙染 料廢水的處理將1 2g步驟(3)得到的固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜，加入到50mL甲基橙染 料廢水中，上述甲基橙染料廢水的制備過(guò)程如下稱(chēng)取80 160mg/L甲基橙，溶于IL 上述步驟(3)所述的白腐菌液體限制性培養(yǎng)基中，得到甲基橙染料廢水；于30°C下，在 氣浴恒溫?fù)u床上以120rpm處理5天，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，5天后，棄掉處 理后的染料廢水，保留固定化菌，再加入50mL新配制的相同濃度的染料廢水，處理?xiàng)l件 同上，每隔24小時(shí)測(cè)定染料廢水的色度，以5天為一循環(huán)，如此重復(fù)5次，染料廢水色度的去除率始終維 持在81%以上。
全文摘要
一種甲基橙染料廢水的處理方法，經(jīng)細(xì)菌纖維素膜的制備、細(xì)菌纖維素膜的改性處理、改性細(xì)菌纖維素膜對(duì)白腐菌的固定化，將得到的1～2克固定化白腐菌的改性細(xì)菌纖維素膜，加至50mL染料廢水中。取80～160mg/L甲基橙，溶于1L白腐菌液體限制性培養(yǎng)基中，于30℃下，在氣浴恒溫?fù)u床上以120rpm處理5天，每隔24小時(shí)測(cè)定廢水的色度，5天后棄掉處理后的廢水，保留固定化菌，再加入50mL新配制的相同濃度的染料廢水，處理?xiàng)l件同上，每隔24小時(shí)測(cè)定廢水的色度，以5天為一循環(huán)，如此重復(fù)5次，廢水色度的去除率始終為81％以上。涉及的木醋桿菌、白腐菌購(gòu)自中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心。
文檔編號(hào)C02F101/38GK102010069SQ20101029063
公開(kāi)日2011年4月13日 申請(qǐng)日期2010年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月21日
發(fā)明者喬楠, 于大禹, 關(guān)曉輝, 張金榜 申請(qǐng)人:東北電力大學(xué)