作為熒光參考標(biāo)準(zhǔn)品的ddao化合物的制作方法
【專利摘要】根據(jù)本教導(dǎo)，提供了利用至少一種式(I)的參比染料的方法和組合物：在一些實(shí)施方案中，方法包括測(cè)量報(bào)告染料和至少一種式(I)的參比染料的檢測(cè)信號(hào)。在一些實(shí)施方案中，組合物包含式(I)的參比染料、緩沖劑、核苷酸和蛋白的選擇物。
【專利說(shuō)明】作為熒光參考標(biāo)準(zhǔn)品的DDAO化合物
[0001]直量
[0002]在許多不同的測(cè)定中，參比染料可以是有益的。參比染料可以用于校準(zhǔn)、歸一化，和用于確保測(cè)定正被正確地進(jìn)行。在可以包含多種染料來(lái)確定多個(gè)目標(biāo)的多重反應(yīng)中，可能難以找到發(fā)出與其他染料不同的波長(zhǎng)且不會(huì)干擾反應(yīng)的穩(wěn)定的參比染料。
[0003]
[0004]在一些實(shí)施方案中，提供了一種方法，其中該方法可以包括(a)形成包括至少一種探針和參比染料的混合物，其中至少一種探針中的每種包括目標(biāo)特異性部分和報(bào)告染料，其中每個(gè)目標(biāo)特異性部分對(duì)不同的目標(biāo)是特異性的，且每種報(bào)告染料與其他報(bào)告染料不同，且其中參比染料具有式(I):
[0005]
【權(quán)利要求】
1.一種方法，包括: (a)形成包括至少一種探針和參比染料的混合物，其中所述至少一種探針中的每種包括目標(biāo)特異性部分和報(bào)告染料，其中每種目標(biāo)特異性部分對(duì)不同的目標(biāo)是特異性的，且每種報(bào)告染料與其他報(bào)告染料不同，且其中所述參比染料具有式(I):
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，還包括基于由所述參比染料發(fā)出的經(jīng)測(cè)量的熒光來(lái)調(diào)節(jié)由所述至少一種報(bào)告染料發(fā)出的所述經(jīng)測(cè)量的熒光，以形成經(jīng)調(diào)節(jié)的測(cè)量結(jié)果。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述目標(biāo)特異性部分是寡核苷酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述探針包括寡核苷酸、報(bào)告染料和淬滅染料。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述方法包括: 用第一激發(fā)波長(zhǎng)范圍照射所述混合物； 檢測(cè)由至少第一報(bào)告染料發(fā)出的輻射；和 檢測(cè)由至少第二報(bào)告染料發(fā)出的輻射； 其中由每種報(bào)告染料發(fā)出的所述輻射可以在所述混合物中的其他報(bào)告染料和所述參比染料的存在下被測(cè)量。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中R1選自氫、鹵素、甲基和乙基；R2和R3各自獨(dú)立地是鹵素；RJPR5各自獨(dú)立地選自甲基和乙基；r6選自氫、鹵素、甲基和乙基；r7選自氫、鹵素、甲基、乙基和SO3Hj R8選自氫、鹵素、甲基和乙基。
7.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中R2和R3各自是氯，且R7是氫或S03H。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述參比染料選自:
9.一種組合物，包含: 具有式⑴的參比染料:
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物,其中所述緩沖劑選自tris、tricene、bicene、HEPES和 MOPS。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的組合物，其中所述緩沖劑還包括選自鉀、鋰、鎂和錳的氯鹽、以及表面活性劑。
12.根據(jù)權(quán)利要求12所述的組合物，其中所述表面活性劑選自聚山梨醇酯表面活性劑、聚氧乙烯表面活性劑、聚乙氧基化苯酚表面活性劑、和兩性離子表面活性劑。
13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述核苷酸的選擇物來(lái)自脫氧核苷酸(dNPT)。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的組合物，其中所述核苷酸的選擇物還來(lái)自二脫氧核苷酸(didNTP)、去氮-GTP、去氮-dGTP、和2’ -脫氧肌苷5’ -三磷酸鹽(dITP)。
15.根據(jù)權(quán)利要求9所述的組合物，其中所述蛋白選自DNA聚合酶、連接酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、核糖核酸酶、糖基化酶、單鏈結(jié)合蛋白、焦磷酸酶、白蛋白和明膠。
【文檔編號(hào)】C09B15/00GK103597093SQ201180066331
【公開日】2014年2月19日 申請(qǐng)日期:2011年12月28日 優(yōu)先權(quán)日:2010年12月29日
【發(fā)明者】S·C·本森, C·莫尼和蒂, S·M·凱普夫 申請(qǐng)人:生命技術(shù)公司