一種塞來昔布的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種塞來昔布的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的塞來昔布的藥物組合物中含有塞來昔布和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，塞來昔布、化合物(Ⅰ)單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)癲癇具有治療作用；塞來昔布和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時(shí)，對(duì)癲癇的治療效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療癲癇的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專利說明】
一種塞來昔布的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及塞來昔布的新用途，具體涉及塞來昔布的藥物組 合物及其醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 塞來昔布臨床用于緩解骨關(guān)節(jié)炎的癥狀和體征、緩解成人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的癥狀和 體征、治療成人急性疼痛。
[0003] 塞來昔布是非留體類抗炎藥，動(dòng)物模型中觀察到其有抗炎、鎮(zhèn)痛和退熱的作用。塞 來昔布的作用機(jī)理是通過抑制環(huán)氧化酶-2(C0X_2)來抑制前列腺素生成。且在人體治療濃 度下，本品對(duì)同工酶-環(huán)氧化酶-I(COX-I)沒有抑制作用。
[0004] 在動(dòng)物結(jié)腸腫瘤模型中塞來昔布減緩了腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種塞來昔布的藥物組合物，該藥物組合物中含有塞來昔 布和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，塞來昔布和該天然產(chǎn)物可以協(xié)同治療癲癇。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 一軸目.右?^太娃拔]才的O各物im _
[0008]
[0009] -種塞來昔布的藥物組合物，包括塞來昔布、如權(quán)利要求1所述的化合物（I)和藥 學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0010] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤(rùn)滑劑。
[0011] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0012] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將亞麻子粉碎，用75~85%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹脂除雜，先用25 %乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70 %乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集70 %洗 脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步 驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得 到化合物(I)。
[0013]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)用80%乙醇熱回流提取，合并提取 液。
[0014]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為DlOl型大孔吸附樹脂。
[0015]進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，步驟(a)中用二氯甲烷代替乙酸乙酯進(jìn)行萃 取，得到二氯甲烷萃取物。
[0016] 上述化合物(I)在制備治療癲癇的藥物中的應(yīng)用。
[0017] 上述塞來昔布的藥物組合物在制備治療癲癇的藥物中的應(yīng)用。
[0018] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0019] 本發(fā)明提供的塞來昔布的藥物組合物中含有塞來昔布和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn) 物，塞來昔布和該天然產(chǎn)物單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)癲癇具有治療作用；二者聯(lián)合作用時(shí)，對(duì)癲癇的 治療效果進(jìn)一步提尚，可以開發(fā)成治療癒瘤的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0021 ]實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022]分離方法：（a)將亞麻子(2kg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取（15LX 3次），合并提取 液，濃縮至無(wú)醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用DlOl型大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1 (10個(gè)柱體積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、25:1 (10 個(gè)柱體積)和15:1 (8個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分 4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (10個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積)和1:1 (6個(gè) 柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0023] 結(jié)構(gòu)確證:HR-ESI-MS顯示[Μ+Na]+為m/z 377.1467,結(jié)合核磁特征可得分子式為 C21H22O5,不飽和度為11。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρπι，CD 3COCD3,500MHz) :Η-3(7· 12,s)，H-4 (7.24，s)，H-7(6.75，s)，H-2'（7.04，d，J=1.8Hz)，H-4'（6.41，t，J = 2.1Hz)，H-6'（7.04，d， J=1.8Hz)，H-4"（2.78，dd，J=15.6,8.4Hz)，H-4"（2.43，dd，J=15.6,9.0Hz)，H-5"（3.62， dd，J = 8.4,9.0Hz)，H-7"（1.31，s)，H-8"（1.32，s)，0CH3-3'（3.85，s)，0CH 3-5'（3.83，s);核 磁共振碳譜數(shù)據(jù)^(ppm，CD3COCD3，125MHz): 156 · 4(C，2-C)，103 · 5 (CH，3-C)，122 · I (C，3a- C)，117.1(CH，4-C)，125.1(C，5-C)，161.2(C，6-C)，93.8(CH，7-C)，154.1(C，7a-C)，132.1 (C，1'-C)，107.4(CH，2'-C)，162.2(C，3'-C)，105.4(CH，4'-C)，162.2(C，5'-C)，107.4(CH， 6'-C)，35.5(CH2,4"-C)，66.7(CH，5"-C)，71.4(C，6"-C)，25.2(CH 3,7"-C)，25.7(CH3,8"-C)， 56.6(CH3，3 ' -OCH3)，56.6(CH3，5 ' -OCH3)。該化合物的氫譜顯示二取代2-芳基苯并呋喃結(jié)構(gòu) [SH7.12(lH，s，H-3)，7.24(lH，s，H-4)，6.75(lH，s，H-7)，7.04(lH，d，J=1.8Hz，H-2'），6.41 (1!1，^ = 2.1抱，!1-4'），7.04(1!1，(1，了=1.8抱，!1-6'）]，兩個(gè)甲氧基質(zhì)子信號(hào)[3113.85(3!1， s)和 3.83(3H，s)]，以及一個(gè)2,3環(huán)氧-3-甲基-丁基取代基[2.78(lH，dd，J=15.6,8.4Hz，H-4"），2·43(lH，dd，J=15·6,9·0Hz，H-4"），3·62(lH，dd，J=8·4,9·0Hz，H-5"），l·31(lH，s，H-7"），1.32(lH，s，H-8"）]。該化合物的碳譜顯示該化合物具有21個(gè)碳譜信號(hào)，包括四個(gè)甲基 (兩個(gè)甲氧基），一個(gè)亞甲基，七個(gè)次甲基以及九個(gè)季碳。HMBC譜中甲氧基質(zhì)子信號(hào)與C-3'和 C-5'的相關(guān)性表明C-3'和C-5'位分別連有一個(gè)甲氧基。HMBC譜中，H2-4"/C-5"，H3-7"/C-5"， H3-8" /C-5"之間的相關(guān)性說明該化合物的C-5"和C-6"位為環(huán)氧結(jié)構(gòu)。綜合氫譜、碳譜、HMBC 譜和NOESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構(gòu)型 進(jìn)一步通過ECD試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。
[0024] 該化合物化學(xué)式及碳原子編號(hào)如下：
[0025]
[0026] 實(shí)施例2:藥理作用
[0027]本實(shí)施例以大鼠腹腔注射青霉素 600萬(wàn)U/kg制作癲癇模型，觀察藥物治療癲癇的 效果。
[0028] 1、材料與方法
[0029] 1.1動(dòng)物
[0030] Wistar大鼠90只，雌雄各半，體重120±20g，由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提 供。
[0031] 1.2試劑與樣品
[0032] 塞來昔布購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所?；衔铮↖)自制，制備方法見實(shí)施例1。苯 妥英鈉:天津市力生制藥總廠生產(chǎn);青霉素:哈爾濱制藥總廠;烏拉坦:哈爾濱制藥總廠。
[0033] 1.3儀器
[0034] LMB-2B型二道生理記錄儀:成都儀器廠生產(chǎn)。
[0035] 1.4動(dòng)物分組及模型制備
[0036] 取大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為:模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組 (苯妥英鈉4.2mg · kg-4、塞來昔布組(80mg · kg-4、化合物（I)組(80mg · kg-4、塞來昔布與 化合物（I)組合物組【40mg · kg<塞來昔布+40mg · kg<化合物（I)】。各組給藥組按照各自劑 量給藥，均為口服灌胃給藥。模型組灌服同體積水。各組動(dòng)物均在給藥或蒸餾水Ih后，腹腔 注射青霉素 600萬(wàn)U/kg，觀察大鼠行為。
[0037] 1.5癲癇大鼠驚厥潛伏期測(cè)定實(shí)驗(yàn)
[0038] 腹腔注射青霉素后，觀測(cè)各組小鼠癇性發(fā)作行為及癇性發(fā)作的潛伏期。
[0039] 1.6大鼠癇性發(fā)作程度觀測(cè)實(shí)驗(yàn)
[0040] 癇性發(fā)作行為觀察，參照Racine標(biāo)準(zhǔn):0級(jí):無(wú)反應(yīng)或抽搐停止。I級(jí):節(jié)律性嘴或面 部抽動(dòng)。Π 級(jí)：點(diǎn)頭或甩尾。ΙΠ 級(jí):單肢抽動(dòng)。IV級(jí)：多肢抽動(dòng)或強(qiáng)直。V級(jí):全面性強(qiáng)直-陣攣 發(fā)作。
[0041 ] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0042]實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差（i±s)表示，應(yīng)用SPSS18.0版統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差 分析和t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0043] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0044] 2.1對(duì)青霉素誘導(dǎo)癲癇大鼠驚厥潛伏期的影響
[0045]與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組大鼠驚厥潛伏期顯著延長(zhǎng)(P<0.01);與模型對(duì)照 組相比，塞來昔布與化合物（I)組合物組大鼠驚厥潛伏期顯著延長(zhǎng)(P<〇.01);與模型對(duì)照 組比較，塞來昔布組、化合物（I)組大鼠驚厥潛伏期延長(zhǎng)(P < 0.05)。結(jié)果見表1。
[0046] 2.2對(duì)青霉素誘導(dǎo)大鼠癇性發(fā)作程度的影響
[0047]與模型對(duì)照組比較，陽(yáng)性對(duì)照組大鼠癇性發(fā)作程度顯著減小(P<0.01);與模型對(duì) 照組相比，塞來昔布與化合物（I)組合物組大鼠癇性發(fā)作程度顯著減小(P<〇.01);與模型 對(duì)照組比較，塞來昔布組、化合物(I)組大鼠癇性發(fā)作程度減小(P<〇.05)。結(jié)果見表2。
[0048]表1對(duì)青霉素誘導(dǎo)癲癇大鼠驚厥潛伏期的影響
[0052] 青霉素是經(jīng)典的致癇劑，其急性或點(diǎn)燃癲癇動(dòng)物模型已獲公認(rèn)。青霉素能抑制 GABA能神經(jīng)元，引起抑制性突觸活動(dòng)減弱或興奮性突觸活動(dòng)增強(qiáng)，從而導(dǎo)致神經(jīng)元興奮性 增高。當(dāng)神經(jīng)元興奮性突觸后電位(EPSP)綜合超過一定閾值即可產(chǎn)生陣發(fā)性去極化飄移 (PDS)0
[0053] 上述結(jié)果表明，塞來昔布、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，對(duì)癲癇具有治療作用;塞來昔布 和化合物(I)聯(lián)合作用時(shí)，對(duì)癲癇的治療效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療癲癇的藥物。 [0054]上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物α)，2. -種塞來昔布的藥物組合物，其特征在于:包括塞來昔布、如權(quán)利要求1所述的化合 物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的塞來昔布的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受的載體 包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體 或潤(rùn)滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的塞來昔布的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片劑、膠 囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、 栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將亞 麻子粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無(wú)醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1 和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)用80%乙醇熱回 流提取，合并提取液。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:步驟(a)中用二氯甲烷代 替乙酸乙酯進(jìn)行萃取，得到二氯甲烷萃取物。9. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療癲癇的藥物中的應(yīng)用。10. 權(quán)利要求2~4任一所述的塞來昔布的藥物組合物在制備治療癲癇的藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】A61K31/635GK105859702SQ201610340405
【公開日】2016年8月17日
【申請(qǐng)日】2016年5月20日
【發(fā)明人】秦勇, 李波, 朱亞芳, 牛紹雄, 王聲音, 徐成, 王 琦, 陳建芳
【申請(qǐng)人】江蘇神龍藥業(yè)有限公司