Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)、該蛋白質(zhì)的制造方法和使用了該蛋白質(zhì)的抗體吸附劑、以及使用了該吸 ...的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及對(duì)免疫球蛋白具有親和性的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)、使用了該蛋白質(zhì)的抗體 吸附劑、W及使用了該吸附劑的抗體的純化方法和識(shí)別方法。更詳細(xì)而言，本發(fā)明設(shè)及對(duì) 熱、酸的穩(wěn)定性高于野生型的化結(jié)合性蛋白質(zhì)、該蛋白質(zhì)的制造方法W及將該蛋白質(zhì)固定 化于不溶性載體而得到的抗體吸附劑。特別是，本發(fā)明設(shè)及能夠特異地吸附抗體中具有糖 鏈的抗體的吸附劑、W及使用了該吸附劑的、具有糖鏈的抗體的純化方法W及識(shí)別糖鏈有 無(wú)附加于抗體的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 化受體是與免疫球蛋白分子的化區(qū)域結(jié)合的一組分子。各個(gè)分子通過(guò)屬于免疫球 蛋白超家族的識(shí)別結(jié)構(gòu)域，利用Fc受體上的識(shí)別結(jié)構(gòu)域識(shí)別單一或相同組的免疫球蛋白同 種型。由此決定免疫應(yīng)答中何種輔助細(xì)胞起作用。Fc受體可進(jìn)一步分類(lèi)成幾種亞型，有IgG (免疫球蛋白G)的受體即化丫受體、與I巧的化區(qū)域結(jié)合的Fee受體、與IgA的化區(qū)域結(jié)合的 Fca受體等。另外，各受體更詳細(xì)地分類(lèi)，F(xiàn)c 丫受體有Fc 丫 RI、Fc 丫 RIIa、Fc 丫 Rllb和Fc 丫 RlllaJc 丫 Rinb 的存在被報(bào)導(dǎo)（非專(zhuān)利文獻(xiàn) l:Takai.T. Jpn.J.Clin. Immunol. ,28,318- 326,2005)〇
[0003] Fc 丫受體中Jc 丫 Rllla存在于自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞）、巨隧細(xì)胞等細(xì)胞表面，是 人免疫機(jī)構(gòu)中參與十分重要的ADCC(抗體依賴(lài)性細(xì)胞損傷)活性的重要的受體。有報(bào)導(dǎo)稱(chēng)， 該Fc 丫 Rllla與人IgG的親和性為表示結(jié)合強(qiáng)度的結(jié)合常數(shù)化A)為107M-1W下(非專(zhuān)利文獻(xiàn) 2 :J. Galon 等，Eur.J. Immunol.，27,1928-1932,1997)。人 Fc 丫 Rllla 的氨基酸序列（序列號(hào) 1)被UniP;rot(Accession number :P08637)等公共數(shù)據(jù)庫(kù)發(fā)布。另外，對(duì)于人Fc 丫 Rllla的結(jié) 構(gòu)上的功能結(jié)構(gòu)域、用于貫穿細(xì)胞膜的信號(hào)膚序列、細(xì)胞膜貫穿區(qū)域的位置，也同樣被發(fā) 布。圖1表示人化丫 Rllla的結(jié)構(gòu)示意圖。需要說(shuō)明的是，圖1中的氨基酸號(hào)對(duì)應(yīng)于序列號(hào)1中 記載的氨基酸號(hào)。即，序列號(hào)1中的第1位的甲硫氨酸(Met)至第16位的丙氨酸(Ala)為止為 信號(hào)序列（S);第17位的甘氨酸(Gly)至第208位的谷氨酷胺(Gin)為止為細(xì)胞外區(qū)域化C); 第209位的鄉(xiāng)氨酸(Val)至第229位的鄉(xiāng)氨酸(化1)為止為細(xì)胞膜貫穿區(qū)域(TM)W及第230位 的賴(lài)氨酸化ys)至第254位的賴(lài)氨酸化ys)為止為細(xì)胞內(nèi)區(qū)域(C)。需要說(shuō)明的是，已知化丫 Rllla與IgGl至IgG4的人IgG亞類(lèi)中特別是IgGl和IgG3強(qiáng)結(jié)合、而與IgG2和IgG4的結(jié)合弱。
[0004] 另一方面，近年來(lái)，利用單克隆抗體所具有的特異性的藥物(抗體藥物）的開(kāi)發(fā)有 所進(jìn)展。已知，報(bào)導(dǎo)了在抗體藥物中所使用的人IgG中，根據(jù)化區(qū)域的第297位的天冬酷胺殘 基上附加的N型糖鏈的差異，ADCC(抗體依賴(lài)性細(xì)胞損傷)活性變化，特別是用去除了作為糖 鏈的一種的巖藻糖的抗體，ADCC活性提高（非專(zhuān)利文獻(xiàn)3: Shinkawa. T.，J. Biol. Chem.，278， 3466-3473,2003)。即，抗體藥物中，抗體所具有的糖鏈結(jié)構(gòu)具有重要的意義。然而，抗體藥 物通常是使用W動(dòng)物細(xì)胞作為宿主的基因重組技術(shù)而制造的，難W控制在宿主內(nèi)附加于抗 體的糖鏈。另外，對(duì)制造的抗體的糖鏈進(jìn)行分析需要很多時(shí)間和勞力。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0006] 非專(zhuān)利文獻(xiàn)
[0007] 非專(zhuān)利文獻(xiàn)l:Takai.T. Jpn.J.Clin. Immunol.，28,318-326,2005 [000引 非專(zhuān)利文獻(xiàn)2: J.Galon等，Eur. J. Immunol.，27，1928-1932，1997
[0009] 非專(zhuān)利文獻(xiàn)3:aii址awa.T. J.Biol.Chem.，278，：M66-3473,2003

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010] 發(fā)明要解決的問(wèn)題
[0011] 本發(fā)明的第一課題在于提供特別是對(duì)熱、酸的穩(wěn)定性提高了的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)、 該蛋白質(zhì)的制造方法、W及使用了該蛋白質(zhì)的抗體吸附劑。進(jìn)而，本發(fā)明的第二課題在于提 供能夠識(shí)別對(duì)于抗體有無(wú)附加糖鏈的方法W及該方法中使用的材料。
[00。] 用于解決問(wèn)題的方案
[0013] 本發(fā)明人等為了解決上述第一課題進(jìn)行了深入研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，確定了人Fc 丫 Rllla中的設(shè)及穩(wěn)定性提高的氨基酸殘基，并且將該氨基酸殘基置換為其他的氨基酸殘基 的突變體具有對(duì)熱、酸優(yōu)異的穩(wěn)定性，至此完成了本發(fā)明。
[0014] 本發(fā)明人等為了解決上述的第二課題進(jìn)行了深入研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，通過(guò)使用將 IgG受體(化丫受體)之一的Fc 丫 Rllla固定化于不溶性載體而得到的吸附劑，能夠識(shí)別有無(wú) 糖鏈附加于抗體，至此完成了本發(fā)明。
[0015] 旨P，本發(fā)明包含W下的(A)至(Z)中所述的方式：
[0016] (A)-種Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)，其包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中由第17位至第 192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生W下的（1)至 (40)中至少任一種氨基酸置換；
[0017] (1)序列號(hào)1的第18位的甲硫氨酸置換為精氨酸
[0018] (2)序列號(hào)1的第27位的鄉(xiāng)氨酸置換為谷氨酸
[0019] (3)序列號(hào)1的第29位的苯丙氨酸置換為亮氨酸或絲氨酸
[0020] (4)序列號(hào)1的第30位的亮氨酸置換為谷氨酷胺
[0021] (5)序列號(hào)1的第35位的酪氨酸置換為天冬氨酸、甘氨酸、賴(lài)氨酸、亮氨酸、天冬酷 胺、脯氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、組氨酸的任一者
[0022] (6)序列號(hào)1的第46位的賴(lài)氨酸置換為異亮氨酸或蘇氨酸
[0023] (7)序列號(hào)1的第48位的谷氨酷胺置換為組氨酸或亮氨酸
[0024] (8)序列號(hào)1的第50位的丙氨酸置換為組氨酸
[0025] (9)序列號(hào)1的第51位的酪氨酸置換為天冬氨酸或組氨酸
[0026] (10)序列號(hào)1的第54位的谷氨酸置換為天冬氨酸或甘氨酸
[0027] (11)序列號(hào)1的第56位的天冬酷胺置換為蘇氨酸
[0028] (12)序列號(hào)1的第59位的谷氨酷胺置換為精氨酸
[0029] (13)序列號(hào)1的第61位的苯丙氨酸置換為酪氨酸
[0030] (14)序列號(hào)1的第64位的谷氨酸置換為天冬氨酸
[0031] (15)序列號(hào)1的第65位的絲氨酸置換為精氨酸
[0032] (16)序列號(hào)1的第71位的丙氨酸置換為天冬氨酸
[0033] (17)序列號(hào)1的第75位的苯丙氨酸置換為亮氨酸、絲氨酸、酪氨酸的任一者
[0034] (18)序列號(hào)1的第77位的天冬氨酸置換為天冬酷胺
[0035] (19)序列號(hào)1的第78位的丙氨酸置換為絲氨酸
[0036] (20)序列號(hào)1的第82位的天冬氨酸置換為谷氨酸或鄉(xiāng)氨酸
[0037] (21)序列號(hào)1的第90位的谷氨酷胺置換為精氨酸
[0038] (22)序列號(hào)1的第92位的天冬酷胺置換為絲氨酸
[0039] (23)序列號(hào)1的第93位的亮氨酸置換為精氨酸或甲硫氨酸
[0040] (24)序列號(hào)1的第95位的蘇氨酸置換為丙氨酸或絲氨酸
[0041] (25)序列號(hào)1的第110位的亮氨酸置換為谷氨酷胺
[0042] (26)序列號(hào)1的第115位的精氨酸置換為谷氨酷胺
[0043] (27)序列號(hào)1的第116位的色氨酸置換為亮氨酸
[0044] (28)序列號(hào)1的第118位的苯丙氨酸置換為酪氨酸
[0045] (29)序列號(hào)1的第119位的賴(lài)氨酸置換為谷氨酸
[0046] (30)序列號(hào)1的第120位的谷氨酸置換為鄉(xiāng)氨酸
[0047] (31)序列號(hào)1的第121位的谷氨酸置換為天冬氨酸或甘氨酸
[0048] (32)序列號(hào)1的第151位的苯丙氨酸置換為絲氨酸或酪氨酸
[0049] (33)序列號(hào)1的第155位的絲氨酸置換為蘇氨酸
[0050] (34)序列號(hào)1的第163位的蘇氨酸置換為絲氨酸
[0051] (35)序列號(hào)1的第167位的絲氨酸置換為甘氨酸
[0052] (36)序列號(hào)1的第169位的絲氨酸置換為甘氨酸
[0053] (37)序列號(hào)1的第171位的苯丙氨酸置換為酪氨酸
[0054] (38)序列號(hào)1的第180位的天冬酷胺置換為賴(lài)氨酸、絲氨酸、異亮氨酸的任一者
[0055] (39)序列號(hào)1的第185位的蘇氨酸置換為絲氨酸
[0056] (40)序列號(hào)1的第192位的谷氨酷胺置換為賴(lài)氨酸。
[0057] (B)根據(jù)(A)所述的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)，其中，包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第 17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中至少序列 號(hào)1的第35位的酪氨酸置換為天冬氨酸、甘氨酸、賴(lài)氨酸、亮氨酸、天冬酷胺、脯氨酸、絲氨 酸、蘇氨酸、組氨酸的任一者。
[005引（C)根據(jù)(B)所述的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)，其中，包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第 17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中至少序列 號(hào)1的第35位的酪氨酸置換為天冬酷胺或脯氨酸。
[0059] (D)根據(jù)(C)所述的化結(jié)合性蛋白質(zhì)，其包含序列號(hào)27、序列號(hào)31、序列號(hào)33、序列 號(hào)37、序列號(hào)41、序列號(hào)43、序列號(hào)47、序列號(hào)49的任一者中記載的氨基酸序列中由第33位 至第208位為止的氨基酸殘基。
[0060] 化)根據(jù)(D)所述的化結(jié)合性蛋白質(zhì)，其包含序列號(hào)27、序列號(hào)31、序列號(hào)33、序列 號(hào)37、序列號(hào)41、序列號(hào)43、序列號(hào)47、序列號(hào)49的任一者中記載的氨基酸序列。
[0061] (F)根據(jù)(A)至（C)的任一項(xiàng)所述的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)，進(jìn)一步產(chǎn)生W下的（41)至 (44)中至少任一個(gè)氨基酸置換；
[0062] (41)序列號(hào)1的第66位的亮氨酸置換為組氨酸或精氨酸
[0063] (42)序列號(hào)1的第147位的甘氨酸置換為天冬氨酸
[0064] (43)序列號(hào)1的第158位的酪氨酸置換為組氨酸
[0065] (44)序列號(hào)1的第176位的鄉(xiāng)氨酸置換為苯丙氨酸
[0066] (G)-種吸附劑，其是將(A)至(F)的任一項(xiàng)所述的化結(jié)合性蛋白質(zhì)固定化于不溶 性載體而得到的。
[0067] 化)一種抗體的純化方法，其使用了 (G)所述的吸附劑。
[0068] (I)-種識(shí)別方法，使用(G)所述的吸附劑分離抗體，從而識(shí)別抗體所具有的糖鏈 結(jié)構(gòu)的差異。
[0069] (J) -種抗體，其是用化)所述的純化方法得到的。
[0070] 化)一種糖鏈的分離方法，其使用了 (G)所述的吸附劑。
[0071] (L) -種糖鏈，其是用化)所述的分離方法得到的。
[0072] (M)-種多聚核巧酸，其編碼(A)至(F)的任一項(xiàng)所述的化結(jié)合性蛋白質(zhì)。
[0073] (N)-種表達(dá)載體，其包含(M)所述的多聚核巧酸。
[0074] (0)-種轉(zhuǎn)化體，其是W(N)所述的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化宿主而得到的。
[0075] (P)根據(jù)(0)所述的轉(zhuǎn)化體，其中，宿主為大腸桿菌。
[0076] (Q)-種化結(jié)合性蛋白質(zhì)的制造方法，通過(guò)對(duì)(0)或(P)所述的轉(zhuǎn)化體進(jìn)行培養(yǎng)而 使Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)表達(dá)，從該培養(yǎng)物中回收表達(dá)的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)。
[0077] (R) -種具有糖鏈的抗體的吸附劑，其是將人Fc 丫 Rllla固定化于不溶性載體而得 到的。
[007引（S)根據(jù)(R)所述的吸附劑，其中，人化丫 Rllla為包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序 列中至少第17位的甘氨酸至第192位的谷氨酷胺為止的氨基酸殘基的多膚。
[0079] (T)根據(jù)(R)所述的吸附劑，其中，人化丫 Rllla為包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序 列中至少第17位的甘氨酸至第192位的谷氨酷胺為止的氨基酸殘基，并且前述氨基酸殘基 中的一個(gè)W上被其他的氨基酸殘基置換、插入、或缺失了前述氨基酸殘基中的一個(gè)W上的 多膚。
[0080] (U)根據(jù)(T)所述的吸附劑，其中，人化丫 Rllla為包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序 列中至少第17位的甘氨酸至第192位的谷氨酷胺為止的氨基酸殘基并且該第17位至第192 位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生了 W下（i)至(iv)中至少任一種氨基酸置換的多膚。
[0081] (i)序列號(hào)1的第66位的亮氨酸置換為組氨酸或精氨酸
[0082] (ii)序列號(hào)1的第147位的甘氨酸置換為天冬氨酸
[0083] (iii)序列號(hào)1的第158位的酪氨酸置換為組氨酸
[0084] (iv)序列號(hào)1的第176位的鄉(xiāng)氨酸置換為苯丙氨酸
[0085] (V)-種具有糖鏈的抗體的純化方法，其包括:將包含具有糖鏈的抗體的溶液添加 至(R)至化)的任一項(xiàng)所述的吸附劑中并使具有糖鏈的抗體吸附于該吸附劑的工序;和、使 用洗脫液將吸附于前述吸附劑的具有糖鏈的抗體洗脫的工序。
[0086] (W)-種抗體，其是用(V)所述的純化方法得到的。
[0087] (X)-種識(shí)別方法，使用(R)至(U)的任一項(xiàng)所述的吸附劑來(lái)識(shí)別有無(wú)糖鏈附加于 抗體。
[0088] (Υ)-種糖鏈的分離方法，其使用了 (R)至化)的任一項(xiàng)所述的吸附劑。
[0089] (Z)-種糖鏈，其是用(Y)所述的分離方法得到的。
[0090] W下，對(duì)本發(fā)明詳細(xì)地進(jìn)行說(shuō)明。
[0091] 本發(fā)明的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)是具有與抗體的Fc區(qū)域的結(jié)合性的蛋白質(zhì)，是包含含有 序列號(hào)1中記載的氨基酸序列的人Fc 丫 Rllla的細(xì)胞外區(qū)域(圖1的EC的區(qū)域)中至少第17位 的甘氨酸至第192位的谷氨酷胺為止的氨基酸殘基的蛋白質(zhì)，是該第17位至第192位為止的 氨基酸殘基中的特定位點(diǎn)產(chǎn)生了氨基酸置換的蛋白質(zhì)。因此，本發(fā)明的化結(jié)合性蛋白質(zhì)可 W包含位于細(xì)胞外區(qū)域的N末端側(cè)的信號(hào)膚區(qū)域（圖1的S)的全部或者一部分，也可W包含 位于細(xì)胞外區(qū)域的C末端側(cè)的細(xì)胞膜貫穿區(qū)域（圖1的TM)和細(xì)胞外區(qū)域（圖1的C)的全部或 者一部分。前述特定位點(diǎn)中的氨基酸置換具體而言，是指序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中下 述至少任一種置換:MetlSArg(該標(biāo)記表示序列號(hào)1的第18位的甲硫氨酸置換為精氨酸，W 下相同）、Val27Glu、Phe29Leu、F*he29Se;r、Leu30Gln、Tyr35Asp、Tyr35Gly、Tyr35Lys、 Tyr35Leu、Tyr35Asn、Tyr35Pro、Tyr35Ser、Tyr35Thr、Tyr35His、Lys46Ile、Lys46Thr、 Gln48His、Gln48Leu、Ala50His、Tyr51Asp、Tyr51His、Glu54Asp、Glu54Gly、Asn56Thr、 Gln59Arg、Phe61Tyr、Glu64Asp、Ser65Arg、Ala71Asp、Phe75Leu、Phe75Ser、Phe75Tyr、 Asp77Asn、Ala78Se;r、Asp82Glu、Asp82Val、Gln90Arg、Asn92Se;r、Leu93Arg、Leu93Met、 Thr95Ala、Thr95Ser、LeullOGln、Argl15Gln、Trpl16Leu、Phell8Tyr、Lysl19Glu、 Glul20Val、Glul21Asp、Glul21Gly、Phel51Ser、Phel51Tyr、Serl55Thr、Thrl63Ser、 Se;rl67Gly、Se;rl69Gly、Phel71Ty;r、Asnl80Lys 'AsnlSOSer'AsnISOIle'ThrlSSSer、 61]11921^73。其中，產(chǎn)生了7的5439、了7扣5617、了7的化73、了7'351^611、了7'3543]1、了7'35口1'〇、 了7^556'、了7扣5化'、了7^5化3、6111121617中任一置換時(shí)，熱穩(wěn)定性提高，因而優(yōu)選。另外， 已知野生型人Fc 丫 Rllla中有產(chǎn)生了Leu66His、Leu66Arg、Glyl47Asp、Tyrl58His或 Vall76化e的置換的突變體，但除了前述特定位點(diǎn)中的氨基酸置換W外，也可W含有運(yùn)些氨 基酸置換。
[0092] 需要說(shuō)明的是，通過(guò)進(jìn)行氨基酸置換來(lái)制備本發(fā)明的化結(jié)合性蛋白質(zhì)時(shí)，對(duì)于特 定位點(diǎn)的氨基酸殘基，只要具有抗體結(jié)合活性，也可W置換為前述的氨基酸W外的氨基酸。 作為其一例，可列舉出保守的置換即兩氨基酸的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)或者其一類(lèi)似的氨基 酸間進(jìn)行置換。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)已知的是，保守的置換不限定于化結(jié)合性蛋白質(zhì)， 通常在產(chǎn)生置換的蛋白質(zhì)與沒(méi)有產(chǎn)生置換的蛋白質(zhì)之間維持了蛋白質(zhì)的功能。作為保守的 置換的一例，可列舉出甘氨酸與丙氨酸之間、天冬氨酸與谷氨酸之間、絲氨酸與脯氨酸之 間、或者谷氨酸與丙氨酸之間產(chǎn)生的置換（蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能，MEDICAL SCIENCES INTERNATIONA^LTD. ,9,2005)。
[0093] 本發(fā)明的化結(jié)合性蛋白質(zhì)中，對(duì)于置換的氨基酸的個(gè)數(shù)沒(méi)有特別的限制。作為一 例，可列舉出W下的（a)至化)所示的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)。運(yùn)些Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)從對(duì)熱和酸的 穩(wěn)定性提高的觀點(diǎn)出而優(yōu)選。（a)包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第17位至第192位為 止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生Val27Glu和Tyr35Asn 的氨基酸置換的化結(jié)合性蛋白質(zhì)(包含序列號(hào)27中記載的氨基酸序列中第33位至第208位 為止的氨基酸序列的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)）。化)包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第17位至 第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生化127G1U、 Tyr35Asn和化e7化eu的氨基酸置換的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)(包含序列號(hào)31中記載的氨基酸序列 中第33位至第208位為止的氨基酸序列的化結(jié)合性蛋白質(zhì)）。山)包含序列號(hào)1中記載的氨基 酸序列中第17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基 中產(chǎn)生Val27Glu、Tyr35Asn、化e7化eu和Glul21Gly的氨基酸置換的化結(jié)合性蛋白質(zhì)（包含 序列號(hào)33中記載的氨基酸序列中第33位至第208位為止的氨基酸序列的化結(jié)合性蛋白質(zhì)）。 (d)包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17 位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生了 ￥曰1276111、了7'354311、？}167化611、43119256'和 Glul21Gly的氨基酸置換的化結(jié)合性蛋白質(zhì)(包含序列號(hào)37中記載的氨基酸序列中第33位 至第208位為止的氨基酸序列的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)）。（6)包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中 第17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生 化127Glu、Tyr35Asn、Glu54Asp、Phe75Leu和Glul21Gly的氨基酸置換的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)（包 含序列號(hào)41中記載的氨基酸序列中第33位至第208位為止的氨基酸序列的Fc結(jié)合性蛋白 質(zhì)）。（門(mén)包含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該 第17位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生Val27Glu、Tyr35Asn、Glu54Asp、Phe75Leu、 Asn92Ser和Glul21Gly的氨基酸置換的化結(jié)合性蛋白質(zhì)（包含序列號(hào)43中記載的氨基酸序 列中第33位至第208位為止的氨基酸序列的化結(jié)合性蛋白質(zhì)）。（旨)包含序列號(hào)1中記載的氨 基酸序列中第17位至第192位為止的氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘 基中產(chǎn)生 ￥曰1276111、了7切54311、611154439、？}16751^611、6111120化1和6111121617的氨基酸置換 的Fc結(jié)合性蛋白質(zhì)（包含序列號(hào)47中記載的氨基酸序列中第33位至第208位為止的氨基酸 序列的化結(jié)合性蛋白質(zhì)）。化飽含序列號(hào)1中記載的氨基酸序列中第17位至第192位為止的 氨基酸殘基，并且該第17位至第192位為止的氨基酸殘基中產(chǎn)生Val27Glu、Tyr35Asn、 611154439、？}16751^611、43119256'、6111120￥日1和6111121617的氨基酸置換的。。結(jié)合性蛋白質(zhì) (包含序列號(hào)49中記載的氨基酸序列中第33位至第208位為止的氨基酸序列的化結(jié)合