18] 圖4檢測(cè)皿制備流程圖。
[0019]圖5檢測(cè)皿使用流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0020]下面結(jié)合具體的實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本 發(fā)明，而不是來(lái)限制本發(fā)明的范圍。
[0021 ] 實(shí)施例1 一種用于快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿，包括無(wú)菌培養(yǎng)皿和測(cè)試片，測(cè)試片平鋪于 無(wú)菌培養(yǎng)皿底部，測(cè)試片上附著有霉菌和酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基； 其中培養(yǎng)基的組成，每1 〇〇g蒸餾水中含有:胰蛋白胨〇. 8g、酵母粉0.4g、葡萄糖1 g、磷酸 氫二鉀0.05g、氯化鈉0.05g、磷酸二氫鉀0.2g、硫酸鎂0.2g、孟加拉紅0.04g、氯霉素0.1g、N， N-二甲基甲酰胺2g、酶解底物混合劑0.015g。酶解底物混合劑由5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸 鹽與NBT按2:1比例溶解于N，N-二甲基甲酰胺得到。測(cè)試片是直徑為70mm的白色中速濾紙， 每片濾紙使用0.05 Mol/L Triton-Tris緩沖生理鹽水處理液進(jìn)行處理，處理液用量為 1 .OmL。所述的無(wú)菌培養(yǎng)皿是單次使用的培養(yǎng)皿。
[0022] 這種快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿的制備方法，按下列步驟制備： A.配制霉菌和酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基:按照配方配置培養(yǎng)基加熱溶解后，采用高 壓滅菌鍋在121°C滅菌15min，冷卻至室溫后依次加入經(jīng)過(guò)濾滅菌的氯霉素及酶解底物混合 劑，得到液體培養(yǎng)基，在〇-4°C下冷藏備用。
[0023] B.制備測(cè)試片： 濾紙片前處理：將吸附濾紙切成面積為直徑為70mm的測(cè)試片，加入l.OmL0.0 5 Mol/L Triton-Tris緩沖生理鹽水處理后，放入37°C恒溫箱或干燥箱中干燥4h，用自封袋放入干燥 劑，室溫保存?zhèn)溆?。培養(yǎng)液吸附：取上述處理濾紙，121°C滅菌15min，將滅菌后的測(cè)試片浸入 到步驟A所配好的霉菌酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基中，浸泡5min后，將測(cè)試片用鑷子夾出， 平放在干凈的超凈工作臺(tái)上，無(wú)菌條件下烘干后，在〇-4°C的無(wú)菌冷藏箱內(nèi)，保存?zhèn)溆茫?C.組裝測(cè)試片:將步驟B中所制備的測(cè)試片，裝入到無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，蓋好培養(yǎng)皿蓋后，將 培養(yǎng)皿置于鋁箱包裝袋中，抽真空包裝，即可得到產(chǎn)品。
[0024]使用這種快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿時(shí)，首先，取樣品25mL(g)放入225 mL滅 菌稀釋液(磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)的取樣器或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用lmL的 滅菌吸管吸取1:10樣品勻液lmL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，搖勻后得到1:100的樣品稀 釋液，依次往下稀釋。一般樣品選1~2個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水 和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。其次接菌:將測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，打開(kāi)培養(yǎng) 皿上蓋，用滅菌槍頭或滴管吸取lmL樣品勻液加到測(cè)試片上，調(diào)整測(cè)試片角度使樣品液濕潤(rùn) 整張測(cè)試片，蓋上蓋即可培養(yǎng)。每個(gè)稀釋度接種兩片，同時(shí)取lmL稀釋液接種另一測(cè)試片作 空白對(duì)照。然后培養(yǎng):將接種好的測(cè)試片放置于28±1°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72h。最后分析檢 測(cè)結(jié)果:霉菌在測(cè)試片上呈現(xiàn)灰白色、黑色、藍(lán)綠色等菌落，且菌落較大呈現(xiàn)其自身的形態(tài)； 酵母菌在測(cè)試片上呈現(xiàn)綠色菌落，且菌落較小較平滑。
[0025] 實(shí)施例2 一種用于快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿，包括無(wú)菌培養(yǎng)皿和測(cè)試片，測(cè)試片平鋪于 無(wú)菌培養(yǎng)皿底部，測(cè)試片上附著有霉菌和酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基； 其中培養(yǎng)基的組成，每1 〇〇g蒸餾水中含有:胰蛋白胨1.2g、酵母粉0.6g、葡萄糖3g、磷酸 氫二鉀0.08g、氯化鈉 O.lg、磷酸二氫鉀0.3g、硫酸鎂0.3g、孟加拉紅0.06g、氯霉素0.2g、N， N-二甲基甲酰胺3g、酶解底物混合劑0.02g。酶解底物混合劑由5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸 鹽與NBT按1:1比例溶解于N，N-二甲基甲酰胺得到。測(cè)試片是直徑為70mm的白色中速濾紙， 每片濾紙使用0.05 Mol/L Triton-Tris緩沖生理鹽水處理液進(jìn)行處理，處理液用量為 1.2mL。所述的無(wú)菌培養(yǎng)皿是單次使用的培養(yǎng)皿。
[0026]這種快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿的制備方法，按下列步驟制備： A.配制霉菌和酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基:按照配方配置培養(yǎng)基加熱溶解后，采用高 壓滅菌鍋在121°C滅菌15min，冷卻至室溫后依次加入經(jīng)過(guò)濾滅菌的氯霉素及酶解底物混合 劑，得到液體培養(yǎng)基，在3°C下冷藏備用。
[0027] B.制備測(cè)試片： 濾紙片前處理：將吸附濾紙切成面積為直徑為70mm的測(cè)試片，加入1.2mL0.05 Mol/L Triton-Tris緩沖生理鹽水處理后，放入37°C恒溫箱或干燥箱中干燥4h，用自封袋放入干燥 劑，室溫保存?zhèn)溆?。培養(yǎng)液吸附：取上述處理濾紙，121°C滅菌15min，將滅菌后的測(cè)試片浸入 到步驟A所配好的霉菌酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基中，浸泡5min后，將測(cè)試片用鑷子夾出， 平放在干凈的超凈工作臺(tái)上，無(wú)菌條件下烘干后，在〇-4°C的無(wú)菌冷藏箱內(nèi)，保存?zhèn)溆茫?C.組裝測(cè)試片:將步驟B中所制備的測(cè)試片，裝入到無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，蓋好培養(yǎng)皿蓋后，將 培養(yǎng)皿置于鋁箱包裝袋中，抽真空包裝，即可得到產(chǎn)品。
[0028]使用這種快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿時(shí)，首先，取樣品25mL(g)放入225 mL滅 菌稀釋液(磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)的取樣器或均質(zhì)杯內(nèi)，制成1:10的樣品勻液，用lmL的 滅菌吸管吸取1:10樣品勻液lmL，注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi)，搖勻后得到1:100的樣品稀 釋液，依次往下稀釋。一般樣品選1~2個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如飲用純水 和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。其次接菌:將測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，打開(kāi)培養(yǎng) 皿上蓋，用滅菌槍頭或滴管吸取lmL樣品勻液加到測(cè)試片上，調(diào)整測(cè)試片角度使樣品液濕潤(rùn) 整張測(cè)試片，蓋上蓋即可培養(yǎng)。每個(gè)稀釋度接種兩片，同時(shí)取lmL稀釋液接種另一測(cè)試片作 空白對(duì)照。然后培養(yǎng):將接種好的測(cè)試片放置于28±1°C培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72h。最后分析檢 測(cè)結(jié)果:霉菌在測(cè)試片上呈現(xiàn)灰白色、黑色、藍(lán)綠色等菌落，且菌落較大呈現(xiàn)其自身的形態(tài)； 酵母菌在測(cè)試片上呈現(xiàn)綠色菌落，且菌落較小較平滑。
[0029] 實(shí)施例3 一種用于快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿，包括無(wú)菌培養(yǎng)皿和測(cè)試片，測(cè)試片平鋪于 無(wú)菌培養(yǎng)皿底部，測(cè)試片上附著有霉菌和酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基； 其中培養(yǎng)基的組成，每1 〇〇g蒸餾水中含有:胰蛋白胨2.0g、酵母粉0.8g、葡萄糖4g、磷酸 氫二鉀0. lg、氯化鈉0.2g、磷酸二氫鉀0.4g、硫酸鎂0.4g、孟加拉紅0. lg、氯霉素0.3g、N，N-二甲基甲酰胺4g、酶解底物混合劑0.04g。酶解底物混合劑由5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸鹽 與NBT按1:2比例溶解于N，N-二甲基甲酰胺得到。測(cè)試片是直徑為70mm的白色中速濾紙，每 片濾紙使用0.05 Mol/L Triton-Tris緩沖生理鹽水處理液進(jìn)行處理，處理液用量為1.5mL。 所述的無(wú)菌培養(yǎng)皿是單次使用的培養(yǎng)皿。
[0030] 這種快速檢測(cè)霉菌和酵母菌的檢測(cè)皿的制備方法，按下列步驟制備： A.配制霉菌和酵母菌特征顯色液體培養(yǎng)基:按照配方配置培養(yǎng)基加熱溶解后，采用高 壓滅菌鍋在121°C滅菌15min，冷卻至室溫后依次加入經(jīng)過(guò)濾滅菌的氯霉素及酶解底物混合 劑，得到液體培養(yǎng)基，在〇-4°C下冷藏備用。
[0031] B.制備測(cè)試片： 濾紙片前處理:將吸附濾紙切成面積為直徑為70mm的測(cè)試片，加入1.5mL 0.05 Mol/L Triton-Tris緩沖生理鹽水處理后，放入37°C恒溫箱或干燥箱中干燥