一種茶籽低聚糖及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種茶籽低聚糖及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]茶籽中含有20%的多糖成分，由阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、葡萄糖等多種組成的雜多糖，分子量在3000?12000Da。雖然茶籽多糖表現(xiàn)出降血糖、增強特異性免疫力等作用，但由于其穩(wěn)定性差，易降解破壞，導(dǎo)致難以得到組成和質(zhì)量均一的產(chǎn)品。
[0003]功能性低聚糖是由2?10個相同或不同的單糖聚合而成的寡聚糖；它具有糖類某些共同特性，可直接代替蔗糖，作為甜食配料，但不被人體胃酸、胃酶降解，不在小腸吸收，可到達(dá)大腸；并具有促進人體雙歧桿菌增殖等生理特性。功能性低聚糖還具有低熱值、非致齲齒性及良好的口感等優(yōu)點，因此越來越多的做為功能性食品添加劑應(yīng)用于功能性食品中。
[0004]低聚糖可以通過多糖的降解制備。目前的制備方法主要有酸降解法、氧化降解法和酶降解法。前兩種方法反應(yīng)劇烈，降解程度難以控制，而酶降解法反應(yīng)溫和，通過合適的條件控制，可以獲得質(zhì)量均一的低聚糖。
[0005]從茶籽柏中直接制備低聚糖的方法未見報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]為了克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點與不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種茶籽低聚糖的制備方法。
[0007]本發(fā)明的另一目的在于提供上述制備方法獲得的茶籽低聚糖。
[0008]本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實現(xiàn):一種茶籽低聚糖的制備方法，包括如下步驟:
[0009](I)將脫脂茶籽柏用乙醇水溶液回流提取，過濾，得到濾渣和乙醇水提取液；然后將濾渣蒸出乙醇至無醇味，備用；所述乙醇水溶液的體積百分比濃度為80?90% ;
[0010](2)將水加入步驟⑴的濾渣中，然后加入酶制劑1，于50?60°C保溫I?3h，然后升溫至100°C處理0.5?lh，過濾，得到濾液；所述酶制劑I為纖維素酶、半纖維素酶或果膠酶的一種以上；步驟⑵中所述酶制劑I的加入量為每10g脫脂茶籽柏加入活性單位50?150U的酶制劑I ;所述水與脫脂茶籽柏的體積質(zhì)量比為(15?30)mL:lg ;
[0011](3)向步驟⑵的濾液中加入酶制劑2，于50?60°C保溫處理I?3h，得到酶處理液；所述酶制劑2為淀粉酶、葡萄糖苷酶或木聚糖酶的一種以上；步驟(3)所述酶制劑2的加入量為每10g脫脂茶籽柏加入活性單位5?50U的酶制劑2 ;
[0012](4)將步驟(3)的酶處理液用2000Da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用大孔樹脂吸附，然后用乙醇水溶液解吸，得到解吸液；將解吸液減壓濃縮干燥，得到茶籽低聚糖。步驟(4)所述乙醇水溶液的體積百分?jǐn)?shù)為30?60%，所述解吸液為大孔樹脂體積的I?3倍，所述干燥的條件為干燥溫度為60?80°C，干燥時間為3?5h。
[0013]步驟(I)中所述脫脂茶籽柏為脫脂油茶籽柏或脫脂茶葉籽柏；
[0014]步驟⑴中所述乙醇水溶液與脫脂茶籽柏的液固比為(10?20)mL:lg ;所述提取條件為于60?80°C提取I?3h ;
[0015]步驟(4)中所述的大孔樹脂為弱極性或非極性的大孔樹脂，優(yōu)選型號AB-8、HPD-722、X-5、D101 或 HPD100 中的一種；
[0016]步驟(4)中所述大孔樹脂用量與濾液的固液比為Ig:(10?20)mL;吸附時間為12?24h ;乙醇水溶液與大孔樹脂的液固比為(5?10)mL:lgo
[0017]一種茶籽低聚糖，通過上述方法制備得到，由2?8個單糖組成，其純度為85?95%。
[0018]本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點及效果:
[0019](I)本發(fā)明采用同一原料先經(jīng)80?90%乙醇水溶液提取除去了脫脂原料中皂素和其他脂溶性成分，再經(jīng)水提取濾渣中多糖，這樣可顯著提高多糖的純度；
[0020](2)本發(fā)明采用二步酶解方法，第一步酶解細(xì)胞壁，使多糖溶解；第二步酶解多糖，將其轉(zhuǎn)變成低聚糖；并通過膜分離和大孔樹脂進一步純化，這樣可獲得較高純度的低聚糖，產(chǎn)品均一性好、質(zhì)量穩(wěn)定；
[0021](3)本發(fā)明制備工藝簡單，反應(yīng)條件溫和，便于工業(yè)化生產(chǎn)。
【具體實施方式】
[0022]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0023]實施例1
[0024]取Ikg的市售脫脂茶葉籽柏，加入1L的體積分?jǐn)?shù)80 %的乙醇水溶液，70°C回流提取3小時，過濾，然后將濾渣于80°C蒸出乙醇至無醇味；再將濾渣用30L水浸泡，加入500U纖維素酶，60°C保溫3h，升溫至100°C處理0.5h，過濾，得到濾液；向濾液中加入100U葡萄糖苷酶，60°C保溫lh，得到酶處理液；將酶處理液用2000Da的超濾膜超濾，得到超濾液；將超濾液用1.5kg AB-8大孔樹脂吸附12h后，再用15L的體積分?jǐn)?shù)為60%乙醇水溶液解吸，得到解吸液；將解吸液于80°C減壓濃縮干燥5h，得到茶籽低聚糖365g。
[0025]采用HPLC法，色譜柱為Dextro-PakTM色譜柱(8 X 100mm)，流動相為雙蒸水；流速為lml/min ;進樣量10 μ I ;檢測器為RID ;溫度為室溫。精密稱取葡萄糖、麥芽糖、3?10聚糖標(biāo)準(zhǔn)品，用水配成2%溶液。按外標(biāo)法定量測定產(chǎn)品中2?8個單糖組成的低聚糖含量為95%。
[0026]實施例2
[0027]取Ikg的市售脫脂油茶籽柏，加入15L的體積分?jǐn)?shù)90 %的乙醇水溶液，60°C回流提取2小時，過濾，然后將濾渣于80°C蒸出乙醇至無醇味；再將濾渣用15L水浸泡，加入300U纖維素酶和200U果膠酶，50°C保溫2h，升溫至100°C處理lh，過濾，得到濾液；向濾液中加入500U木聚糖酶，50°C保溫2h ;用2000Da的超濾膜超濾，得到超濾液；再將超濾液用1.5kgHPD-100大孔樹脂吸附24h后，再用7.5L體積分?jǐn)?shù)為50 %乙醇水溶液解吸，得到解吸液；將解吸液于70°C減壓濃縮干燥4h，得到茶籽低聚糖352g。
[0028]同實施例1產(chǎn)品測定方法，得2?8個單糖組成的茶籽低聚糖總含量為87%。
[0029]實施例3
[0030]取Ikg的市售脫脂茶葉籽柏，加入12L的體積分?jǐn)?shù)85 %的乙醇水溶液，65°C回流提取I小時，過濾，然后將濾渣于80°C蒸出乙醇至無醇味；再將濾渣用20L水