咪唑并吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl，其合成，活性和應(yīng)用
【專利說明】咪唑并吡啶-6-甲釀-Met-Ser-OBzl,其合成，活性和應(yīng)用 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl，涉及它們的制備 方法，進(jìn)一步涉及它們對SD大鼠的抗血栓活性，因而本發(fā)明涉及它們作為抗血栓藥物的應(yīng) 用。本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 血栓性疾病是一種嚴(yán)重威脅人類健康的心腦血管疾病，每年均會有3%。的人發(fā)生 不同程度的血栓性疾病，其發(fā)病率及致死率均較高。
[0003]目前臨床上治療血栓性疾病的藥物主要分為抗血小板藥物、溶栓藥物及抗凝血藥 物三類。從防治角度來看，抗栓藥物更能針對疾病本身，減輕臨床治療壓力，從而得到廣泛 應(yīng)用。但由于傳統(tǒng)的抗血栓藥物的安全性及依從性都有待優(yōu)化，研究療效更高且毒副作用 更低的新型藥物已成為抗栓藥物研究的熱點。從天然產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)咪唑并吡啶類衍生物具有 廣泛的生物學(xué)活性，以此作為先導(dǎo)結(jié)構(gòu)對其進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化，以期得到療效更好安全性更高 的抗栓藥物。
[0004] 發(fā)明人曾經(jīng)公開下式代表的3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-AA-〇Bzl(其中AA 代表甘氨基酸或其它L-氨基酸殘基）在1μmol/kg劑量下顯示良好的抗腫瘤活性。通過進(jìn) 一步研究發(fā)明人認(rèn)識到，將Met-Ser-OBzl代替3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酰-AA-〇Bzl 中的AA-OBzl，可以使抗腫瘤活性化合物轉(zhuǎn)變?yōu)榭寡ɑ钚曰衔?。根?jù)這些認(rèn)識，發(fā)明人 提出了本發(fā)明。
[0005]

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的第一個內(nèi)容是提供3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl。
[0007]
[0008] 本發(fā)明的第二個內(nèi)容是提供3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl的 合成方法，該方法包括：
[0009] (1)L-組氨酸在稀硫酸催化下與甲酸進(jìn)行Pictet-Spengler縮合生成6S-4,5,6, 7-四氫-3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-羧酸；
[0010] (2)63-4,5,6,7-四氫-3!1-咪唑并[4,5-(3]吡啶-6-羧酸轉(zhuǎn)化為63-4,5,6,7-四 氫-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酸甲酯；
[0011] (3)63-4,5,6,7-四氫-3!1-咪唑并[4,5-(3]吡啶-6-甲酯用高錳酸鉀氧化為3!1-咪 唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯；
[0012] (4) 3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯在NaOH溶液（2N)中皂化成3H-咪唑并 [4,5-c]吡啶-6-甲酸；
[0013] (5)Boc-Met-OH與絲氨酸節(jié)酯偶聯(lián)得到Boc-Met-Ser-OBzl;
[0014] (6)Boc-Met-Ser-OBzl在4N氯化氫的乙酸乙酯溶液中得到H-Met-Ser-OBzl;
[0015] (7) 3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸與L-Met-Ser-OBzl偶聯(lián)得到3H-咪唑并[4， 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl。
[0016] 本發(fā)明的第三個內(nèi)容是評價3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl對 SD大鼠的抗血栓作用。
[0017] 本發(fā)明的第四個內(nèi)容是評價3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl在 制備抗血栓藥物中的應(yīng)用。
【附圖說明】
[0018] 圖 1. 3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酰-Met-Ser-OBzl的合成路線.i)HCH0，H20， H2S04,65°C;ii)Me0H，S0C12,0°C;iii)DMF，三乙胺，KMn04 ;iv)Na0H，H20,0°C;v)二環(huán)己基碳 二亞胺（DCC)，1-羥基苯并三唑（HOBt)，N-甲基嗎啉（NMM)，四氫呋喃（THF) ;vi)4N氯化氫 的乙酸乙酯溶液，0°C;vii)二環(huán)己基碳二亞胺（DCC)，1-羥基苯并三唑（HOBt)，N-甲基嗎 啉（NMM)，DMF〇
【具體實施方式】
[0019] 為了進(jìn)一步闡述本發(fā)明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它 們僅用來對本發(fā)明進(jìn)行具體描述，不應(yīng)當(dāng)理解為對本發(fā)明的限制。
[0020] 實施例1化合物6S-4,5,6,7-四氫-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-羧酸（1)的制 備
[0021] 10. 00g(64. 5mmol)L-組氨酸，30mL水混合于100mL爺瓶中，冰浴下，用恒壓漏斗 逐滴加入2mL濃硫酸，隨濃硫酸的加入，原料逐漸洛解，待其完全洛解后，向反應(yīng)液中加入 40 %的甲醛溶液10mL，在微波加速反應(yīng)儀65°C下反應(yīng)5小時。反應(yīng)完畢后，冰浴下緩慢滴加 濃氨水調(diào)溶液pH= 6-7,有大量白色沉淀析出，減壓過濾，得到無色固體10. 76g(99. 2% )。 ESI-MS(m/z) :168[M+H]+。
[0022] 實施例2化合物6S-4, 5,6, 7-四氫-3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯（2) 的制備
[0023] 冰浴下在100mL茄瓶里加15. 6mL甲醇，冰浴下，用恒壓漏斗緩慢滴加1. 56mL二 氯亞砜，30min后加入1.00g(6mmol)6S-4,5,6,7-四氫-3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-羧酸 (2)，室溫反應(yīng)3天后，TLC監(jiān)測反應(yīng)完全，反應(yīng)混合物減壓濃縮，殘留物加甲醇溶解并減壓 濃縮。該操作重復(fù)3次得白色泡狀固體，再加乙醚抽干重復(fù)3次得無色粉末，最后用甲醇/ 乙醚重結(jié)晶得〇. 58g(53% )標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/z) 181[M+H] +。
[0024] 實施例3化合物3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-甲酸甲酯（3)的制備
[0025]冰浴下在lOOmL茄瓶里加 1.lg(6.lmmol)6S-4,5,6,7-四氫-3H-咪唑并[4,5-c] 吡啶-6-甲酸甲酯（3)，加DMF使溶解。向該溶液中滴加lmL三乙胺調(diào)pH到8,分三次加 入1.2g(7. 6_〇1)高錳酸鉀。反應(yīng)6小時后，TLC監(jiān)測反應(yīng)完畢。反應(yīng)物吹干，得到的黑 色固體用INHC1溶液溶解，冰浴下滴加2NNaOH溶液調(diào)pH到7,析出大量無色固體。該固 體以二氯甲烷/甲醇為洗脫劑用硅膠柱純化，得〇. 68g(63. 2% )標(biāo)題化合物，為無色固體。 ESI-MS(m/z)177[M+H]+〇
[0026] 實施例4化合物3H-咪唑并[4, 5-c]吡啶-6-羧酸（4)的制備
[0027]冰浴下在lOOmL茄瓶里力卩40mLNa0H溶液（2N)，lOmin后力卩入 5. 30g(29. 9mmol)3H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酸甲酯（4)，反應(yīng)1小時后TLC顯示反應(yīng) 完畢，冰浴下向反應(yīng)液中滴加2NHC1溶液調(diào)pH到7,析出大量無色固體。該固體以二氯甲 烷/甲醇為洗脫劑用硅膠柱純化，得1.50g(30% )標(biāo)題化合物，為無色固體。ESI-MS(m/ z)162[M-H]。
[0028] 實施例5化合物Boc-Met-Ser-OBzl的制備
[0029]稱取 3. 49g(14.Ommol)Boc-Met-OH于 250mL茄形瓶中，加 入 50mLTHF。在冰 浴和攪拌下依次加入 2. 39g(17. 7mmol)H0Bt及 3. 44g(16