丹酚酸a的合成方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體而言，涉及丹酚酸A的合成方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 中藥丹參為唇形科（Labiatae)鼠尾草屬（Salvia)植物丹參（Salviam iltiorrhizaBunge)的干燥根部。味苦、性微寒，丹參是最常用的藥材之一，用于治療心 絞痛、高血壓、冠心病和中風(fēng)等心腦血管疾病，具有活血化癖、養(yǎng)血安神、涼血排癰和排毒 生肌的功效，是中藥活血化癖的常用藥味。臨床研究也證實，丹參含有多種化學(xué)成分并具 有廣泛的生物活性，其傳統(tǒng)藥理以擴血管，活血化瘀，改善微循環(huán)為主?，F(xiàn)代藥理研究表 明，丹參尚具有抗腫瘤，抗菌消炎，抗雄性激素，抑制皮脂腺增生，抗肝硬化，抗纖維化，促 進組織修復(fù)和再生等多種藥理活性。丹參的化學(xué)成分主要可分為水溶性成分和脂溶性 成分，其中水溶性成份主要為丹參素以及丹酚酸A，B，C，D，E等，丹參水溶性成分多具 有酚酸性結(jié)構(gòu)。自國內(nèi)學(xué)者首次從丹參水提液中得到抗心肌缺血成分丹參素以來（江 文德，丹參素及另兩種水溶性丹參成分抗心肌缺血和對冠狀動脈作用的研究，上海第一 醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1982, 9(1): 13)，1984年又首次報導(dǎo)了從丹參中分離出的另一水溶性有效 成分一丹酌酸 A (Li L N，Tan R，ChenW M. Salvianolic acid A，anewdepside fromrootsof Salviamiltiorrhiza[J] ? PlantaMed，1984, 50 (3) : 227)。經(jīng)多年藥理研究證明，丹酌酸 A 在 治療冠心病、心絞痛方面有獨特的療效。并且具有廣泛的藥理活性（楊勤，趙朝偉.丹參 藥理作用研究現(xiàn)狀.中國藥業(yè)，2003, 12(10) : 78)，為臨床開發(fā)新藥提供了理論依據(jù)。
[0003] 據(jù)報道丹酚酸是丹參水溶性成分中最重要的活性成分（杜冠華.丹參水溶性有 效成分一丹酚酸研究進展，基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床，2000, 20 (5):10-14)。丹參總酚酸中以丹 酚酸B含量最高，因此，人們開發(fā)的重點集中于丹酚酸B，而含量較低、活性較強的丹酚酸 A(salvianolic acidA)因為無法進行工業(yè)化生產(chǎn)被人們忽略。查閱文獻,我們可以得知丹 參中丹酚酸A的含量在萬分之五左右，因此，即使通過一系列的方法將其提取出來，只能得 到微量的丹參丹酚酸A，將其應(yīng)用于臨床中，因為其價格太高而不能被患者接受；但丹參丹 酚酸A具有很好的藥理活性（宋延平等，丹酚酸A與丹酚酸B改善大鼠心肌缺血作用比較 [J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2007,14 (9):36)，可以應(yīng)用于藥品、保健食品中，因此，很多醫(yī)藥 工作者希望將丹酚酸A進行工業(yè)化生產(chǎn)，開發(fā)為成藥制劑。
[0004] 由于丹酚酸A有顯著的抗氧化、心肌缺血保護、抗血栓、神經(jīng)保護、抗肝纖維化和 防治糖尿病及并發(fā)癥等藥理活性，多年以來一直是科研工作者研究的熱點。現(xiàn)在對于丹酚 酸A的制備方法主要是從天然藥材中提取。王金輝等在CN 1352985A公開了中藥丹參有效 部位及其緩釋制劑與醫(yī)藥用途和制備方法，它的丹參有效部位丹參總酚酸含量90%以上， 且丹酚酸A含量在10%以上。王金輝等在CN 1397276A公開了中藥丹參中SLA-A及其組 合物的制備方法和醫(yī)藥用途，它具有療效明確，副作用小，服用方便的特點。丹參有效部位 A(SLA-A)其含量大于等于90 %。朱長福等在CN 1830947A公開了一種丹酚酸A的提取方法， 將丹參藥材用水或醇提取，提取濃縮液后，采用高溫高壓反應(yīng)，過柱色譜純化丹酚酸A，再經(jīng) 調(diào)pH值，用有機溶劑萃取，濃縮干燥，即得丹酚酸A，提取物中丹酚酸A含量可達80%以上， 并可實現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。瞿海斌等在CN 101353306A公開了一種丹酚酸A的精制方法，采用 有機溶劑萃取法萃取丹參水提液獲取丹酚酸A粗提物、用酸水萃取去雜質(zhì)、有機相經(jīng)濃縮、 干燥后獲得高純度丹酚酸A。本發(fā)明方法純化回收率達95%以上，丹酚酸A的純度達90% 以上。孫隆儒等在CN 102793745A中提供了一種丹酚酸A高含量的藥材及其制備方法和用 途，以丹參或在不同地區(qū)也作丹參使用的其他含有丹酚酸B的植物藥材為原料通過高溫、 高壓、高濕條件處理，使藥材所含的丹酚酸B在植物組織細胞中進行水解、脫去一個苯丙酸 基和一個羧基、轉(zhuǎn)化成丹酚酸A。
[0005] 現(xiàn)有文獻和專利中公開了丹參丹酚酸A提取純化的工藝方法，雖然能夠得到丹酚 酸A，但其重點都放在如何將丹參丹酚酸A與雜質(zhì)的分離上，其提取率很低，無法在工業(yè)化 生產(chǎn)中實現(xiàn)，也無法得到"成藥"級的丹酚酸A，這是擺在很多科研工作者面前的一道難關(guān)。
[0006] 由于直接從丹參提取得到的物質(zhì)為水溶性成分的混合物，純度低，各種成分相互 作用造成性質(zhì)不穩(wěn)定，易氧化，且丹參中丹酚酸A的含量較低，加之丹參資源有限，提取純 化困難，這些影響了臨床用藥的質(zhì)量和天然藥物的進一步開發(fā)和持續(xù)利用。所以人工全合 成丹酚酸A及其衍生物具有一定的學(xué)術(shù)價值和實際意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)中難以從天然產(chǎn)物獲得丹酚酸A的問題，本發(fā)明提供了一種合 成丹酚酸A的方法。
用三甲基氫氧化錫除去酯甲基，純化得中間體10,利用三溴化硼脫甲基最終獲得丹酚酸A。 合成路線如下所示：
[0009]
[0011] 具體而言，本發(fā)明提供了一種丹酚酸A的合成方法，其特征在于，由丹酚酸A合成 前體（10)經(jīng)過脫甲基反應(yīng)制備丹酚酸A，合成路線如下：
[0012]
[0013] 在上述合成方法，所述脫甲基反應(yīng)的具體過程為：將所述丹酚酸A合成前體溶解 在二氯甲烷中，在室溫下緩慢加入鹵化物的溶液，室溫攪拌至反應(yīng)完成，經(jīng)后處理后，通過 硅膠柱和凝膠柱純化得到丹酚酸A。
[0014] 在上述合成方法，其中所述鹵化物為碘化鋰、氯化鋰、三氯化鋁、三溴化鋁、氫化 氫、三氟化硼、三氯化硼、三溴化硼、三碘化硼、三甲基硅碘、二甲基溴化硼、四氯化硅、三氯 化鈰或二碘化鎂。
[0015] 在上述合成方法，其中所述鹵化物的溶液為鹵化物在二氯甲烷、三氯甲烷、水、乙 腈、乙醇或1，2-二氯乙烷中的溶液。
[0016] 在上述合成方法，其中，由化合物（A)和化合物（B)合成所述丹酚酸A合成前體 (10)，其中化合物（A)和化合物（B)分別具有以下結(jié)構(gòu)式：
[0017]
[0018] 在上述合成方法，其中由化合物（A)和化合物（B)合成所述丹酚酸A合成前體 (10)的合成路線如下：
[0019]
[0020] 在上述合成方法，其中，由化合物（A)和化合物（B)制備化合物（9)的具體過程 為：在氮氣保護下將化合物（A)、化合物（B)、和縮合劑溶于干燥的氯仿中，在室溫條件下攪 拌至反應(yīng)完成，經(jīng)后處理，過硅膠柱純化，真空干燥得到化合物（9)。
[0021] 在上述合成方法，其中，所述縮合劑為DMAP/DCC、HOBt/EDCI或EDC/DMAP。
[0022] 在上述合成方法，其中，由化合物（9)制備丹酚酸A合成前體（10)的具體過程為： 將化合物（9)和錫化合物加入1，2-二氯乙烷中，回流24小時，冷卻至室溫，用稀鹽酸和乙 酸乙酯的混合液稀釋，分液，水相用乙酸乙酯萃取，合并有機相，用無水硫酸鎂干燥，濃縮， 硅膠柱純化得到丹酚酸A合成前體。
[0023] 在上述合成方法，其中，所述錫化合物為三烷基氫氧化錫、二烷基二氫氧化錫或烷 基三氫氧化錫。
[0024] 本發(fā)明設(shè)計了丹酚酸A的較為合理的合成路線并進行了制備，為在此領(lǐng)域的進一 步深入研究人工全合成丹酚酸A提供了一個必要的基礎(chǔ)和參考，并為工業(yè)化生產(chǎn)提供了生 產(chǎn)路線。本發(fā)明得到的丹酚酸A的純度為90~94%，并且該90~94%的樣品經(jīng)制備型 HPLC純化后純度可提高到97 %。
【具體實施方式】
[0025] 下面通過具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0026] 下述非限制性實施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以 任何方式限制本發(fā)明。
[0027] 實施例1化合物2的合成
[0028]
[0029] 將34. Og (0? 21mol)的2, 3-二甲氧基苯甲醛（1)溶于120ml的甲醇中，不停攪拌。 稱取4. 7g(0. 124mol)的硼氫化鈉分批小心地加入反應(yīng)液中。然后，在室溫下攪拌lh，TLC分 析，反應(yīng)完全。停止反應(yīng)，旋蒸將溶劑甲醇除去。殘留物用二氯甲烷溶解，水洗，飽和食鹽水 洗滌，無水硫酸鎂干燥。過濾，除去溶劑，得到淺灰色粘稠液體，靜置成固體，稱重34. Og (收 率99% )。備用。
[0030] 實施例2化合物3的合成
[0031]
[0032] 稱取16. 8g(0.1mol) 2, 3-二甲氧基芐醇（2)溶于450ml的二氯甲烷中，使其完全 溶解，并冰浴降溫至〇°C。將17. 6g(5. 64ml)的液溴溶于50ml的二氯甲烷中并置于恒壓滴 液漏斗中。滴加的過程保持溫度始終低于5°C，大約0. 5h后滴加完畢，開始除去冰浴，升至 室溫。隨時TLC監(jiān)測反應(yīng)。大約2h后，反應(yīng)完畢，立刻將100mL的IM碳酸氫鈉溶液加入溶 液中，萃取，水洗，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥。旋蒸除去溶劑，得到黃色粘稠物，甲醇 中重結(jié)晶，得黃色晶體，過濾干燥。得到22g黃色固體，產(chǎn)率71%。Mp74°C，1H-NMR(400MH z，CDC13) : 3. 88 (3H, s)，3. 99 (3H, s)，4. 73 (2H, s)，6. 80 (1H, d, J = 8. 8Hz)，7. 29 (1H, d, J = 8. 8Hz) 〇
[0033] 實施例3化合物4的合成
[0034]
[0035] 將22g化合物3溶于500ml的甲苯中，并加入18. 6g的三苯基膦，劇烈攪拌。并開始 升溫至回流，大約攪拌10分鐘后，溶液開始變渾濁，產(chǎn)生了白色固體?；亓?h后，冷卻至室 溫，有大量的白色沉淀生成，過濾，真空干燥。得到38. 5g的白色固體，產(chǎn)率95%。Mpl69°C。 IH-NMR (400MHz, CDC13) : 3. 75 (s, 3H), 3. 79 (s, 3H), 5. 16 (d, 2H, J = 14Hz), 6. 75 (d, 1H, J = 8. 8Hz)，7. 05 (d, 1H, J = 8. 8Hz)，7. 58-7. 82 (m, 15H)。
[0036] 實施例4化合物5的合成
[0037]
[0038] 將18. 6ml (5. 4M)甲醇鈉的甲醇溶液置于100mL干燥的甲醇中，劇烈攪拌。同時將 57. 2g化合物4溶于200ml干燥的甲醇中，滴加進去，攪拌0. 5h。16. 6g的3, 4-二甲氧基 苯甲醛也溶于200ml干燥的甲醇中滴加進去，滴加完畢后，升溫回流5h。TLC分析。除去溶 劑，在甲醇中重結(jié)晶，過濾，干燥，得到30.0 g淡黃色固體。Mp80°C IH-NMR(400MHz，CDC13) : 3 .80 (s, 3H), 3. 89 (s, 3H), 3. 93 (s, 3H), 3. 98 (s, 3H), 6. 71 (d, 1H, J = 8. 8Hz), 6. 90 (d, 1H, J = 8. 8Hz), 7. 07 (d, 1H, J = 16. 4Hz), 7. 09-7. 13 (m, 2H), 7. 33 (d, 1H, J = 8. 8Hz), 7. 39 (d, 1H, J =16. 4Hz)〇
[0039] 實施例5化合物6的合成
[0040]