一種枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基及其制備方法
【專利說明】_種枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基及其制備方法
[0001]
技術領域
[0002] 本發(fā)明涉及培養(yǎng)基領域，特別涉及一種枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基及其制備方法。
[0003]
【背景技術】
[0004] 枯草芽胞桿菌，是芽胞桿菌屬的一種。單個細胞0. 7~0. 8X2~3微米，著色均勻。 無莢膜，周生鞭毛，能運動。革蘭氏陽性菌，芽孢0. 6~0. 9 X I. 0~1. 5微米，橢圓到柱狀，位于 菌體中央或稍偏，芽孢形成后菌體不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黃色，在液體 培養(yǎng)基中生長時，常形成皺醭。需氧菌?？衫玫鞍踪|、多種糖及淀粉，分解色氨酸形成吲 哚。在遺傳學研究中應用廣泛，對此菌的嘌呤核苷酸的合成途徑與其調節(jié)機制研究較清楚。 廣泛分布在土壤及腐敗的有機物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。
[0005] 作用機理：1.枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌 素、短桿菌肽等活性物質，這些活性物質對致病菌或內源性感染的條件致病菌有明顯的抑 制作用。2.枯草芽孢桿菌迅速消耗環(huán)境中的游離氧，造成腸道低氧，促進有益厭氧菌生長， 并產生乳酸等有機酸類，降低腸道PH值，間接抑制其它致病菌生長。3.刺激動物免疫器官 的生長發(fā)育，激活T、B淋巴細胞，提高免疫球蛋白和抗體水平，增強細胞免疫和體液免疫功 能，提高群體免疫力。4.枯草芽孢桿菌菌體自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶 等酶類，在消化道中與動物體內的消化酶類一同發(fā)揮作用。5.能合成維生素價、82、86、煙 酸等多種B族維生素，提高動物體內干擾素和巨噬細胞的活性。
[0006] 枯草芽孢桿菌作為有益的微生物，目前在凈化水產養(yǎng)殖環(huán)境、寧作物病害防治、畜 禽飼料添加劑等方面取得了很好的應用效果，近年來越來越受到人們的廣泛關注。
[0007]目前，枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)基，存在芽孢產率低、成本高，并且生成的枯草芽孢桿 菌活性低，穩(wěn)定性不高。這些問題，是本發(fā)明需要解決的問題。
[0008]

【發(fā)明內容】

[0009] 本發(fā)明的目的在于提供一種枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基及其制備方法，從而解決芽孢產 率低、成本高，枯草芽孢桿菌活性低，穩(wěn)定性不高的問題。
[0010] 為了達到上述目的，本發(fā)明提供了一種枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基，其中，由以下重量份 數(shù)的原料制得：甘薯4-8份、蛋白胨7-13份、硝酸銨0. 05-0. 3份、氫氧化鉀0. 4-0. 8份、磷 酸氫鈣0. 5-1份、碳酸氫鎂0. 3-0. 6份、枸杞8-12份、甘蔗6-13份、茅栗7-10份、天花粉 5-8份、鎖陽7-10份、鄰羥基苯甲酸鈉0. 05-0. 2份、8-羥基喹啉0. 01-0. 3份和去離子水 150-200 份。
[0011] 其中，有以下重量份數(shù)的原料制得：甘薯5-7份、蛋白胨8-12份、硝酸銨0. 1-0. 2 份、氫氧化鉀0. 4-0. 8份、磷酸氫|丐0. 5-1份、碳酸氫鎂0. 3-0. 6份、枸杞9-12份、甘鹿6-10 份、茅栗7-10份、天花粉5-8份、鎖陽8-10份、鄰羥基苯甲酸鈉0. 1-0. 2份、8-羥基喹啉 0. 1-0. 3份和去離子水150-180份。
[0012] 其中，有以下重量份數(shù)的原料制得：甘薯6份、蛋白胨10份、硝酸銨0. 15份、氫氧 化鉀0. 5份、磷酸氫鈣0. 6份、碳酸氫鎂0. 5份、枸杞10份、甘蔗8份、茅栗8份、天花粉7 份、鎖陽8份、鄰羥基苯甲酸鈉0. 1份、8-羥基喹啉0. 2份和去離子水160份。
[0013] 為了達到上述目的，本發(fā)明還提供了一種所述的枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基的制備方 法，其中， 第一步，按照配比取甘薯、枸杞和鎖陽，加入去離子水，浸泡1-2小時，然后煮沸并持續(xù) 20-30分鐘，過濾，取濾液備用； 第二步，將甘蔗、天花粉和茅栗混合研磨粉碎，并過過濾〇. 2-0. 22um，過濾得到細粉，細 粉過濾率達到100% ; 第三步，冷卻第一步得到的濾液到溫度為80-90°C，將第二步得到的細粉和其他所述剩 余原料按照配比混合，將混合物均勻攪拌30-40分鐘，使用濃度為60-80%的NaOH溶液進行 PH調節(jié)，調節(jié)到7. 2-7. 3,然后在100-110°C、100-120kPa條件下滅菌10-12分鐘，得到枯草 芽孢桿菌培養(yǎng)基。
[0014] 枸杞：【來源】本品為茄科植物寧夏枸杞的干燥成熟果實。秋季果實呈紅色時采收， 熱風烘干，除去果梗?！拘晕丁扛?，平。枸杞中含胡蘿卜素3. 39毫克％，硫胺素0.23毫克％， 核黃素0.33毫克％，煙酸1.7毫克％，抗壞血酸3毫克％。尚分離出β-谷留醇、亞油酸。 【功能主治】滋腎，潤肺，補肝，明目。
[0015] 甘蔗：【來源】為禾本科植物甘蔗的莖桿。秋后采收，砍取地上部分。削去上部梢 葉捆扎，風干失去水分。【生境分布】南方各省?！净瘜W成份】含蔗醣13~27%、己酸、乙醇 酸（gallcollic acid)、甘氨酸、烏頭酸等?！旧撤植肌磕戏礁魇　！净瘜W成份】含蔗醣13~ 27%、己酸、乙醇酸（gallcollic acid)、甘氨酸、烏頭酸等。
[0016] 茅栗：【來源】為殼斗科植物茅栗的總苞、樹皮、根?！旧撤植肌亢幽?、陜西及長江 流域以南各省?！净瘜W成份】樹皮含有鞣質?！竟δ苤髦巍渴撸郴瘹?，肺結核，肺炎。
[0017] 天花粉：【來源】本品為萌蘆科植物栝樓或雙邊栝樓的干燥根。秋、冬二季采挖，洗 凈，除去外皮，切段，干燥?！净瘜W成份】分離出天花粉蛋白。還得到多種氨基酸：α羥甲基 絲氨酸，天冬氨酸，瓜氨酸，絲氨酸，谷氨酸，蘇氨酸，甘氨酸，纈氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸，組 氨酸，賴氨酸，精氨酸，鳥氨酸以及肽類核糖，木糖，阿拉伯糖，葡萄糖，半乳糖等。【性味】味 甘；微苦；性微寒?！練w經】歸肺；胃經?！竟δ苤髦巍壳鍩嵘?；潤肺化痰；消腫排濃。
[0018] 鎖陽：【來源】本品為鎖陽科植物鎖陽的干燥肉質莖。春季采挖，除去花序，切段， 曬干?！净瘜W成份】含花色甙、三萜皂甙和鞣質?！拘晕丁扛?，溫。①《本草衍義》：〃甘?！á?《綱目》:〃甘，溫，無毒。〃③《本草求真》:〃甘咸，性溫?！á堋秾幭闹胁菟幨謨浴?〃甘澀，沮。 〃【歸經】入肝、腎經。【功能主治】補腎潤腸。
[0019] 本發(fā)明的技術方案帶來的有益效果是：本發(fā)明的培養(yǎng)基應用于枯草芽孢桿菌的培 養(yǎng)，芽孢產率高，成本低，并且得到的枯草芽孢桿菌具有較高的抑菌性能，穩(wěn)定性好。
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【具體實施方式】
[0021] 為了解決上述目的，本發(fā)明列舉以下實施例進行說明。
[0022] 實施例1 配方：甘薯4g、蛋白胨7g、硝酸銨0. 05g、氫氧化鉀0. 4g、磷酸氫鈣0. 5g、碳酸氫鎂 0. 3g、枸杞8g、甘鹿6g、茅栗7g、天花粉5g、鎖陽7g、鄰羥基苯甲酸鈉0. 05g、8-羥基喹啉 0.0 lg和去離子水150g。
[0023] 制備過程： 第一步，取甘薯、枸杞和鎖陽，加入去離子水，浸泡1小時，然后煮沸并持續(xù)20分鐘，過 濾，取濾液備用； 第二步，將甘蔗、天花粉和茅栗混合研磨粉碎，并過過濾〇. 2um，過濾得到細粉，細粉過 濾率達到100% ; 第三步，冷卻第一步得到的濾液到溫度為80°C，將第二步得到的細粉和其他所述剩余 原料按照配比混合，將混合物均勻攪拌30分鐘，使用濃度為60%的NaOH溶液進行PH調節(jié)， 調節(jié)到7. 2,然后在100°C、IOOkPa條件下滅菌10分鐘，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基。
[0024] 實施例2 配方：甘薯8g、蛋白胨13g、硝酸銨0. 3g、氫氧化鉀0. 8g、磷酸氫鈣lg、碳酸氫鎂0. 6g、 枸杞12g、甘鹿13g、茅栗10g、天花粉8g、鎖陽10g、鄰羥基苯甲酸鈉0. 2g、8-羥基喹啉0. 3g 和去離子水200g。
[0025] 制備過程： 第一步，取甘薯、枸杞和鎖陽，加入去離子水，浸泡2小時，然后煮沸并持續(xù)30分鐘，過 濾，取濾液備用； 第二步，將甘蔗、天花粉和茅栗混合研磨粉碎，并過過濾〇. 22um，過濾得到細粉，細粉過 濾率達到100% ; 第三步，冷卻第一步得到的濾液到