一種泰萬菌素的提純方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于抗生素純化領(lǐng)域，主要涉及抗生素泰萬菌素的提純技術(shù)。
【背景技術(shù)】
[0002] 泰萬菌素又稱超級泰樂菌素，化學(xué)名為3-0-乙酰-4"-O-異戊酰泰樂菌素，為 畜禽專用抗生素，結(jié)構(gòu)式如下所示。泰萬菌素是泰樂菌素經(jīng)耐熱鏈霉菌（Streptomyces thermotolerans)生物轉(zhuǎn)化，在3位乙?；?"位異戊?；玫降男滦痛蟓h(huán)內(nèi)醋類抗生素， 因其化學(xué)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化使其在抗菌譜、抗菌活性、耐藥性、化學(xué)穩(wěn)定性、口服吸收性和血藥 濃度等方面與泰樂菌素相比較具有明顯的優(yōu)勢。
【主權(quán)項】
1. 一種泰萬菌素的提純方法，所述提純方法包括： 以柱層層析硅膠為分離介質(zhì)，以下述物質(zhì)組成的混合液為洗脫液，對泰萬菌素粗品進 行純化：1)石油醚；2)乙酸乙酯和/或乙酸丁酯；和3)二乙胺、三乙胺和N，N-二異丙基乙 基胺中的一種或多種。
2. 如權(quán)利要求1所述的提純方法，其特征在于，所述提純方法包括以下步驟： (1) 將泰萬菌素粗品利用乙酸乙酯和/或乙酸丁酯溶解，加入柱層層析硅膠充分混合， 旋蒸干燥后干法上柱； (2) 利用所述洗脫液對上柱后的硅膠柱進行梯度洗脫，分段收集所得洗脫級分并進行 監(jiān)測； (3) 將含有高純度泰萬菌素的洗脫級分進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到高純度泰萬菌素。
3. 如權(quán)利要求1或2所述的提純方法，其特征在于，所述步驟⑴中： 所述泰萬菌素粗品溶液與柱層層析硅膠以1:1-1:4的質(zhì)量比混合。
4. 如權(quán)利要求1至3中任一項所述的提純方法，其特征在于，所述步驟（1)中： 所述柱層層析硅膠的規(guī)格為粒徑100目-300目； 優(yōu)選地，所述混有泰萬菌素的柱層層析硅膠與硅膠柱中預(yù)填充的柱層層析硅膠之間的 質(zhì)量比為1:5-1:10,然后以石油醚對裝填后的硅膠層析柱進行潤洗。
5. 如權(quán)利要求1至4中任一項所述的提純方法，其特征在于，所述步驟⑵中所述梯度 洗脫包括：先用低極性洗脫液洗脫以去除泰萬菌素粗品中的雜質(zhì)，再用高極性洗脫液洗脫 以得到高純度泰萬菌素。
6. 如權(quán)利要求1至5中任一項所述的提純方法，其特征在于，所述步驟⑵中所述洗脫 液為石油醚與乙酸乙酯并加入0.01%-0.1% (體積比）的二乙胺、三乙胺和N，N-二異丙 基乙基胺中的一種或多種形成的混合液； 優(yōu)選地，所述步驟（2)包括： 在洗脫開始時采用其中乙酸乙酯與石油醚的體積比為1:1-1.5:1并加入 0. 01%-0. 1% (體積比）的二乙胺、三乙胺和N，N-二異丙基乙基胺中的一種或多種的混合 液作為低極性洗脫液，洗脫3-5個柱體積；然后使洗脫液中的乙酸乙酯與石油醚的體積比 增大至2:1形成高極性洗脫液，洗脫4-6個柱體積； 優(yōu)選地，洗脫過程中以高效液相色譜或薄層層析監(jiān)測不同洗脫級份中的泰萬菌素。
7. 如權(quán)利要求1至5中任一項所述的提純方法，其特征在于，所述步驟⑵中所述洗脫 液為石油醚與乙酸丁酯并加入0.01%-0.1% (體積比）的二乙胺、三乙胺和N，N-二異丙 基乙基胺中的一種或多種形成的混合液； 優(yōu)選地，所述步驟（3)包括： 在洗脫開始時采用其中乙酸丁酯與石油醚的體積比為1:1-1.5:1并加入 0. 01%-0. 1% (體積比）的二乙胺、三乙胺和N，N-二異丙基乙基胺中的一種或多種的混合 液作為低極性洗脫液，洗脫3-5個柱體積；然后使洗脫液中的乙酸丁酯與石油醚的體積比 增大至2:1形成高極性洗脫液，洗脫4-6個柱體積； 優(yōu)選地，洗脫過程中以高效液相色譜或薄層層析監(jiān)測不同洗脫級份中的泰萬菌素。
8. 如權(quán)利要求1至7中任一項所述的提純方法，其特征在于，所述步驟（3)中收集采用 高極性洗脫液的洗脫級分進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到高純度泰萬菌素。
9. 如權(quán)利要求1至8中任一項所述的提純方法，其特征在于，所述高純度泰萬菌素的純 度為97%以上。
10. 通過權(quán)利要求1至9中任一項所述的提純方法得到的泰萬菌素。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種利用硅膠層析純化泰萬菌素的新方法，該方法是以柱層層析硅膠為分離介質(zhì)，以下述物質(zhì)組成的混合液為洗脫液，對泰萬菌素粗品進行純化：1)石油醚；2)乙酸乙酯和/或乙酸丁酯；和3)二乙胺、三乙胺和N,N-二異丙基乙基胺中的一種或多種，對泰萬菌素粗品進行純化，并通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)以獲得高純度泰萬菌素。本發(fā)明所述方法可以有效去除雜質(zhì)，克服了現(xiàn)有泰萬菌素提純工藝制得的產(chǎn)品純度過低的問題。應(yīng)用本發(fā)明提供的方法制備泰萬菌素，其產(chǎn)品純度可以達到97％以上。
【IPC分類】C07H1-06, C07H17-08
【公開號】CN104610403
【申請?zhí)枴緾N201510034280
【發(fā)明人】張國棟, 吳家鑫, 張傳良, 徐金雷, 張剛, 王大旭, 齊鵬, 鄭應(yīng)華, 趙梅仙, 葛辛玫, 馬佳穎, 宋敏, 張淼
【申請人】中牧實業(yè)股份有限公司
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年1月23日