一種高性能文萊膠菌株及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及文萊膠生產(chǎn)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種高性能文萊膠菌株及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 文萊膠作為一種新型的微生物多糖，它具有許多優(yōu)良而獨(dú)特的理化特性，在石油、 化工、食品、化妝品等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。其中，文萊膠特有的懸浮、穩(wěn)定、增稠等性能，并 廣泛應(yīng)用于鉆井泥漿配劑、建筑混泥土及砂漿配劑、涂料及自流平砂漿配劑等領(lǐng)域，與黃原 膠相比具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。在國(guó)內(nèi)許多科研機(jī)構(gòu)及相關(guān)企業(yè)也早已認(rèn)識(shí)到了這一點(diǎn)，并 對(duì)其進(jìn)行了廣泛的研宄，但其核心技術(shù)一直被美國(guó)公司牢牢控制，所以國(guó)內(nèi)的文萊膠產(chǎn)業(yè) 一直處于起步摸索階段，沒(méi)有形成大的規(guī)模，質(zhì)量方面也遠(yuǎn)遠(yuǎn)落后于美國(guó)公司標(biāo)準(zhǔn)。
[0003] 菌種是發(fā)酵行業(yè)的龍頭，沒(méi)有好的菌種發(fā)酵也就無(wú)從談起。
[0004] 有鑒于此，特提出本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的第一目的在于提供一種高性能文萊膠菌株，該菌株生長(zhǎng)周期短，發(fā)酵產(chǎn) 生的文萊膠綜合性能優(yōu)良。
[0006] 本發(fā)明的第二目的在于提供一種所述的高性能文萊膠菌株的應(yīng)用，該高性能文萊 膠菌株發(fā)酵生產(chǎn)的文萊膠，出膠率高；得到的文萊膠粘度更高、更耐鹽和更耐高溫。
[0007] 為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：
[0008] 一種高性能文萊膠菌株，2014年11月03日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委 員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCCNo. 9919,保藏名稱(chēng)為鞘氨醇單胞菌（Sphingomonas sp.)W-l;地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研宄所，郵編： 100101。
[0009] 本發(fā)明提供的高性能文萊膠菌株，通過(guò)將原始菌株進(jìn)行紫外誘變篩選獲得，相對(duì) 于原始菌株，該菌株生長(zhǎng)周期短，發(fā)酵生產(chǎn)的文萊膠出膠率高，得到的文萊膠粘度更高、更 耐鹽和更耐高溫。
[0010] 本發(fā)明還提供了所述高性能文萊膠菌株在文萊膠發(fā)酵中的應(yīng)用。
[0011] 本發(fā)明提供的高性能文萊膠菌株，發(fā)酵生產(chǎn)的文萊膠出膠率高，得到的文萊膠粘 度更高、更耐鹽和更耐高溫。
[0012] 為了使高性能文萊膠菌株生長(zhǎng)更為旺盛，優(yōu)選地，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采 用搖床培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為150-400r/min。
[0013] 更優(yōu)選地，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采用搖床培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為 300-350r/min。
[0014] 為了使高性能文萊膠菌株在發(fā)酵罐內(nèi)生長(zhǎng)更為旺盛，優(yōu)選地，所述高性能文萊膠 菌株發(fā)酵采用發(fā)酵罐進(jìn)行，發(fā)酵過(guò)程中的溶氧不低于10%。
[0015] 更優(yōu)選地，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采用發(fā)酵罐進(jìn)行，發(fā)酵過(guò)程中的溶氧為 25-30 %〇
[0016] 進(jìn)一步地，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵完成得到的文萊膠發(fā)酵液粘度達(dá)到 10000-10500cp〇
[0017] 進(jìn)一步地，所述文萊膠的出膠率為3. 2% -3. 5%。比原始菌株發(fā)酵的出膠率提高 了10%左右。
[0018] 進(jìn)一步地，所述文萊膠的耐溫達(dá)到100°C。將發(fā)酵得到的文萊膠經(jīng)100°C的高溫處 理后，文萊膠的粘度基本沒(méi)變化，表現(xiàn)了很好的耐高溫性能。
[0019] 進(jìn)一步地，所述文萊膠耐鹽濃度達(dá)到42g/L。將發(fā)酵得到的文萊膠在鹽濃度為 42g/L的溶液中測(cè)粘度，明顯優(yōu)越于原始菌株產(chǎn)生的文萊膠。
[0020] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：
[0021] (1)本發(fā)明提供了一種高性能文萊膠菌株，該菌株生長(zhǎng)周期短，發(fā)酵生產(chǎn)的文萊膠 出膠率高，得到的文萊膠綜合性能優(yōu)良；
[0022] (2)通過(guò)調(diào)整高性能文萊膠菌株的發(fā)酵條件，提高了其出膠率以及綜合性能。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面將結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì) 理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體 條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為 可以通過(guò)市售獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
[0024]實(shí)施例1
[0025] 高性能文萊膠菌株的獲得
[0026] 1.原始菌種活化：原始菌種為鞘氨醇單胞菌屬（SphingomonasSpecies. ATCC31555)，從江南大學(xué)購(gòu)買(mǎi)，該菌株也可通過(guò)市售購(gòu)買(mǎi)；原始菌種為凍干粉狀，在無(wú)菌操 作臺(tái)中利用無(wú)菌操作技術(shù)將其轉(zhuǎn)接于斜面培養(yǎng)基中，30°C培養(yǎng)72h;其中，斜面培養(yǎng)基配 方：蔗糖1%，大豆蛋白胨2%，酵母膏0.5%，瓊脂2%，其余為蒸餾水，pH控制：7. 0-7. 2 ;
[0027] 2.斜面培養(yǎng)后的狀態(tài)：菌苔黃色，較薄，表面濕潤(rùn)，進(jìn)一步培養(yǎng)后顏色加深，表面 干燥；
[0028] 3.斜面再次培養(yǎng)：將72h后的斜面培養(yǎng)物再次轉(zhuǎn)接于斜面進(jìn)行二次培養(yǎng)，培養(yǎng)溫 度30°C，時(shí)間72h;
[0029] 4.斜面二次培養(yǎng)后的狀態(tài)：菌苔黃色，較厚，表面濕潤(rùn)，進(jìn)一步培養(yǎng)后顏色加深， 表面干燥；
[0030] 5.平板培養(yǎng)：將生長(zhǎng)好的斜面菌體劃線于平板中，采用分區(qū)劃線法劃出單個(gè)菌 落，30°C平板培養(yǎng)72h;
[0031] 6.挑選個(gè)大飽滿的單個(gè)菌落，接種于500ml搖瓶中，搖床培養(yǎng)，搖床培養(yǎng)條件：溫 度30°C，轉(zhuǎn)速200轉(zhuǎn)/分，接種量為2環(huán)/100ml，搖瓶中培養(yǎng)基為100ml，搖瓶培養(yǎng)基配方： 葡萄糖2. 5%，硝酸銨0. 05%，酵母粉0. 05%，蛋白胨0. 02%，磷酸二氫鉀0. 5%，磷酸氫二 鉀0. 3%，硫酸亞鐵0. 0005%，余量為蒸餾水；搖瓶期間每隔4小時(shí)檢測(cè)種子密度，結(jié)果如表 1所示。
[0032] 表1搖瓶不同時(shí)間中的菌體密度
[0033]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高性能文萊膠菌株，其特征在于，2014年11月03日保藏于中國(guó)微生物菌種保 藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC No. 9919，保藏名稱(chēng)為鞘氨醇單胞菌W-1。
2. 權(quán)利要求1所述的高性能文萊膠菌株在文萊膠發(fā)酵中的應(yīng)用。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采用搖床培 養(yǎng)，搖床培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為150_400r/min。
4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采用搖床培 養(yǎng)，搖床培養(yǎng)的轉(zhuǎn)速為300-350r/min。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采用發(fā)酵罐 進(jìn)行，發(fā)酵過(guò)程中的溶氧不低于10%。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵采用發(fā)酵罐 進(jìn)行，發(fā)酵過(guò)程中的溶氧為25-30%。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述高性能文萊膠菌株發(fā)酵完成得到的 文萊膠發(fā)酵液粘度達(dá)到l〇〇〇〇-l〇500cp。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述文萊膠的出膠率為3. 2% -3. 5%。
9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述文萊膠的耐溫達(dá)到100°C。
10. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，所述文萊膠在鹽濃度為42g/L的條件下， 粘度值均在45cp以上。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及文萊膠生產(chǎn)領(lǐng)域，特別涉及一種高性能文萊膠菌株及其應(yīng)用。一種高性能文萊膠菌株，2014年11月03日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC No.9919，保藏名稱(chēng)為鞘氨醇單胞菌(Sphingomonas sp.)W-1。本發(fā)明提供的高性能文萊膠菌株，通過(guò)將原始菌株進(jìn)行紫外誘變篩選獲得，相對(duì)于原始菌株，該菌株生長(zhǎng)周期短，發(fā)酵生產(chǎn)的文萊膠出膠率高，得到的文萊膠粘度更高、更耐鹽和更耐高溫。本發(fā)明還提供了所述高性能文萊膠菌株在文萊膠發(fā)酵中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的高性能文萊膠菌株，發(fā)酵生產(chǎn)的文萊膠出膠率高，得到的文萊膠粘度更高、更耐鹽和更耐高溫。CGMCC No.991920141103
【IPC分類(lèi)】C12N1-20, C12R1-01, C12P19-04
【公開(kāi)號(hào)】CN104531580
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410835174
【發(fā)明人】古立謙
【申請(qǐng)人】古立謙
【公開(kāi)日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年12月29日