專利名稱:微生物方法
發(fā)明背景白三烯(leukotriene)構(gòu)成一組由生命系統(tǒng)中花生四烯酸產(chǎn)生的，在局部起作用的激素。主要的白三烯是白三烯B4(縮寫為LTB4)，LTC4，LTD4和LTE4。這些白三烯的生物合成，是從5-脂肪氧合酶對花生四烯酸作用生成被稱為白三烯A4(LTA4)的環(huán)氧化物開始，然后再通過后續(xù)的酶促反應(yīng)步驟，轉(zhuǎn)變成其它的白三烯。有關(guān)白三烯生物合成及其代謝的進(jìn)一步詳情，可參閱《白三烯和脂肪氧合酶》(J.Rokach編輯，Elsevier，阿姆斯特丹(1989))。在Rokach的這本書中，還論述了白三烯在生命系統(tǒng)中的作用和它們與各種病癥的關(guān)系。
在美國專利5,270,324中，報導(dǎo)了一種喹啉類型的白三烯拮抗劑，其中的一組是具有式(I)結(jié)構(gòu)的化合物 其中Ra、Rb特別是氫或鹵素；Rc可能是CO2Rd，CORd或C(Re)2-OH；Rd可能是氫或低級烷基，Re也可能是低級烷基；而ALK是例如環(huán)丙基-1，1-(雙)亞甲基，異丙基等等。
在歐洲已公開申請604114中，這種白三烯拮抗劑被進(jìn)一步公開，其中的一組是具有式(II)結(jié)構(gòu)的化合物 其中的Ra、Rb、Rc和ALK是如上所述的基團(tuán)。
以下式(III)的(S)-羥基化合物，是合成式(I)和(II)化合物過程中的中間體。式(III)結(jié)構(gòu)的化合物可以通過使用手性還原劑如二異蒎莰氯甲硼烷，從相應(yīng)的具有如下式(IV)結(jié)構(gòu)的酮來制備。手性化學(xué)還原作用通常需要使用昂貴的手性還原劑；因此，有必要尋找另一種比化學(xué)方法更經(jīng)濟(jì)和/或更方便的方法來制備式(III)結(jié)構(gòu)的手性化合物。
更具體地說，本發(fā)明提供了一種制備式(III)化合物的方法， 它包括使式(IV)的化合物與具有ATCC55557鑒定特征的微桿菌MB5614，或者其突變體或變異體相接觸； 其中A是-CH＝CH-S-或-CH＝CH-CH＝CH-；R1和R2獨立地是氫或鹵素；R3是CO2R6，COR6或C(R7)2-O-R8；R6是氫或低級烷基，R7是低級烷基，R8是氫或羥基保護(hù)基。
在一個優(yōu)選的實施方案中，A是-CH＝CH-CH＝CH-，R1和R2中的一個是氫，另一個是鹵素，R3是CO2R6。
在一個更優(yōu)選的實施方案中，A是-CH＝CH-CH＝CH-，R1和R2中的一個是氫，另一個是氯，R3是CO2CH3。
本發(fā)明的另一方面，是提供了具有ATCC 55557鑒定特征的微桿菌MB5614，或者其突變體或變異體的生物學(xué)純培養(yǎng)物。縮寫和定義在本申請中，除非另有特殊說明，下列縮寫和定義都是適用的。
FAB-MS＝快速原子轟擊質(zhì)譜測定法HPLC＝高壓液相色譜法
MES＝N-嗎啉代乙烷磺酸MSG＝谷氨酸單鈉NMR＝核磁共振法TLC＝薄層色譜法UVC＝紫外線“烷基”包括直鏈、分枝和環(huán)狀結(jié)構(gòu)及其組合。
“低級烷基”意指1-7個碳原子的烷基。低級烷基包括例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，仲-和叔-丁基，戊基，己基，庚基，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基甲基，環(huán)己基，等等。
“鹵素”包括氟，氯，溴和碘。
“羥基保護(hù)基”可以是例如醚，如甲氧基甲基，四氫吡喃基，乙氧基乙基，三氯乙基，叔丁基，烯丙基，芐基，三甲基甲硅烷基乙基，二苯基甲基，和三苯基甲基；也可能是甲硅烷基醚，如三甲基甲硅烷基，二甲基異丙基甲硅烷基，叔丁基二甲基甲硅烷基和叔丁基二苯基甲硅烷基；還可能是酯，如甲?；纫阴；郊柞；腿阴；?；還可能是碳酸酯，如三氯乙基，芐基和烯丙基。其他適合的羥保護(hù)基可以在標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)中找到，比如《有機(jī)合成中的保護(hù)基》Green和Wuts編輯，1991，John Wiley & Sons公司，紐約。應(yīng)用式(III)的化合物是制備式(I)和(II)的白三烯拮抗劑的中間體；用這種中間體制備這些白三烯拮抗劑的方法已在如下專利中公開了美國專利5,270,324和歐洲已公開申請604114，以及正在共同申請中的美國申請序列號08/174,931。式(I)和(II)的化合物可用作抗氣喘劑，抗過敏反應(yīng)劑，抗炎癥劑和細(xì)胞保護(hù)性治療劑?；|(zhì)(substrate)的制備在本發(fā)明用于酮的微生物手性還原方法中，微桿菌的基質(zhì)、式(IV)的化合物，可按照本專業(yè)人員熟悉的方法制備。制備其中A是-CH＝CH-CH＝CH-的式(IV)化合物的方法，在美國專利5,270,324中公開了；制備其中A是-S-CH＝CH-的式(IV)化合物的方法，在歐洲已公開申請604114中公開了。微生物描述微桿菌MB5614是從土壤樣品中分離出的，此土壤樣品取自一個公園(圣羅薩紀(jì)念公園，Guanacaste Pr.，哥斯達(dá)黎加)的場地。在采樣之前，此場地已經(jīng)過48小時焚燒。該培養(yǎng)物的樣品已據(jù)布達(dá)佩斯協(xié)議，以如下形式保存美國典型培養(yǎng)物保藏中心，Rockville，MD，保藏號ATCC55557，以及Merck微生物資源培養(yǎng)物保藏中心，Rahway，NJ，保藏號MB 5614。
在下列文獻(xiàn)中，對這種微生物進(jìn)行了如下的分析研究生長和一般培養(yǎng)特征的觀察Cure和Keddie，1969，需氧桿菌的形態(tài)學(xué)測定方法，Board和Lovelock(編輯)環(huán)境的取樣和微生物監(jiān)測，學(xué)術(shù)出版社，倫敦，pp.123-135。碳源利用的研究Kamagata和Suzuki，1986，Sneath，P.H，N.S.Mair，M.F.Sharpe，和J.G Holt(編輯)伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊V.II.pp.1314。其它生理學(xué)測定Jones，1975，桿形菌及其相關(guān)菌的數(shù)字分類學(xué)研究，普通微生物學(xué)雜志，8752～96。用如下所述方法進(jìn)行的細(xì)胞壁分析Lechevalier和Lechevalier，1980，放線菌綱的化學(xué)分類學(xué)，Dietz，A.和D.W.Thayer(編輯)放線菌分類學(xué)。工業(yè)微生物學(xué)協(xié)會，Arlington，VA.pp.225-291，以及Uchida和Aida，1984，一種改進(jìn)的用于?；图?xì)菌細(xì)胞壁簡易鑒定的甘醇酸酯測定法，普通及應(yīng)用微生物學(xué)雜志，30131-134。用如下方法進(jìn)行的甲基萘醌分析Hiraishi等，1992，用二維薄層色譜法對細(xì)菌醌的快速檢測，應(yīng)用微生物學(xué)通訊14170-173。用如下方法進(jìn)行的脂肪酸分析Miller和Berger，1985，惠普應(yīng)用簡訊，pp.228-241，惠普公司，Palo Alto.CA。
細(xì)胞形態(tài)學(xué)。非運(yùn)動的，革蘭氏陽性，棒狀的多形性桿菌(1.14×0.38μm)。在生長周期中發(fā)生初級分枝，但不產(chǎn)生菌絲體。不存在明顯的桿狀-球狀生長周期。不產(chǎn)生內(nèi)生孢子。培養(yǎng)和生理學(xué)特征。嗜溫性的，在28℃和37℃下生長。耐熱性好，60℃加熱30分鐘后的仍然存活。嚴(yán)格需氧菌，過氧化氫酶陽性，氧化酶陰性。雖然也可以進(jìn)行發(fā)酵代謝，但主要是呼吸代謝。從下列碳水化合物代謝產(chǎn)酸纖維二糖，果糖，半乳糖，D-葡萄糖，甘油，甘露糖，麥芽糖，D-核糖，蔗糖，海藻糖，和D-木糖，不能從下列碳水化合物代謝產(chǎn)酸阿拉伯糖，肌醇，乳糖，蜜二糖，D-棉子糖，鼠李糖，可溶性淀粉，D-山梨醇，L-山梨糖，或L-木糖。對明膠有微弱的水解液化作用，但不水解殼多糖，淀粉，酪蛋白，尿素，或纖維素。復(fù)合性營養(yǎng)，能在蛋白胨基本培養(yǎng)基中生長。生長還可能需要B-復(fù)合維生素和氨基酸。在蛋白胨基本培養(yǎng)基上，菌落直徑1-3mm，黃色，透明，隆起，并具有光滑的邊緣。菌落表面有閃光，呈粘液狀結(jié)構(gòu)。不產(chǎn)生擴(kuò)散性色素。
細(xì)胞壁化學(xué)。細(xì)胞壁中的二氨基酸是賴氨酸。還存在甘氨酸，丙氨酸和谷氨酸。細(xì)胞壁類型很可能是Blα。主要的細(xì)胞壁糖是鼠李糖，還存在低濃度的甘露糖，核糖和一種尚未鑒定的糖(R半乳糖＝0.75)。細(xì)胞壁的聚糖部分包含羥乙酰殘基。主要的甲基萘醌類是MK10和MK11。主要的脂肪酸是15∶0反異，17∶0反異，和16∶0異。
化學(xué)分類學(xué)研究揭示，MB5614屬于微桿菌屬細(xì)菌，但是，其生長特征和碳水化合物發(fā)酵的方式，與這個屬的六個目前已知的種相比較又不一致(表1)?；谶@點，我們提議這株菌是一個新種campoquemadoensis微桿菌。
表1特征 MB5614 laevaniformans imperiale乳酸微桿菌1微桿菌 微桿菌1顏色 黃 淡黃 黃 桔紅酸產(chǎn)自纖維二糖 + + + +D-阿拉伯糖用于培養(yǎng)微桿菌的營養(yǎng)培養(yǎng)基應(yīng)該含有適當(dāng)?shù)目赏荚?，如葡萄糖，果糖，蔗糖和纖維二糖。氯化銨，硫酸銨，尿素，硝酸銨，硝酸鈉，谷氨酸鈉等可作為氮源單獨使用，或者與如下有機(jī)氮源結(jié)合使用蛋白胨，肉膏，酵母膏，玉米漿，大豆粉，棉籽粉等。如果有必要，還可以加入營養(yǎng)性無機(jī)鹽，用于供給如下成分鈉，鉀，鈣，銨，磷，硫酸鹽，氯化物，溴化物，碳酸鹽，鋅，鎂，錳，鈷，鐵等。
該微桿菌可以在任何適宜生長的溫度下生長，如25℃-40℃，而通常是在27-32℃的溫度范圍內(nèi)培養(yǎng)。如果在發(fā)酵罐內(nèi)進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng).最好用來自斜面培養(yǎng)物或冷凍干燥培養(yǎng)物的營養(yǎng)接種物，接種在營養(yǎng)肉湯內(nèi)。按此方法得到活性接種物之后，再利用無菌操作，轉(zhuǎn)移到發(fā)酵罐的發(fā)酵培養(yǎng)基內(nèi)。對發(fā)酵罐提供攪拌振蕩，通氣可通過對振蕩的培養(yǎng)基注入空氣或氧氣來實現(xiàn)。
在本發(fā)明方法的一個實施方案中，酮基質(zhì)(IV)被置于液體營養(yǎng)培養(yǎng)基內(nèi)，與在其中培養(yǎng)的微桿菌相接觸。可以在任何時間將該酮基質(zhì)加入微桿菌培養(yǎng)物中，但優(yōu)選地是當(dāng)微生物達(dá)到足夠的生物量時加入該基質(zhì)。生物量濃度易于被監(jiān)測，例如可用分光光度計，測定培養(yǎng)樣品在波長660nm的光吸收度。通常是在接種后大約3-5天達(dá)到最大生物量。生物轉(zhuǎn)化過程可以用常規(guī)的方法進(jìn)行監(jiān)測，例如可先用HPLC技術(shù)，接著用分光光譜技術(shù)。在加入基質(zhì)后大約3-4天，立體有擇還原產(chǎn)物的濃度達(dá)到最大值。酮基質(zhì)變成相應(yīng)的(S)-羥基化合物的生物轉(zhuǎn)化過程可連續(xù)地進(jìn)行，例如可持續(xù)達(dá)500個小時，間斷地加入酮基質(zhì)。這樣產(chǎn)生的目的(S)-羥基化合物，可通過任何適當(dāng)?shù)幕厥蘸头蛛x方法從發(fā)酵液體培養(yǎng)基中回收，這些方法包括萃取，沉淀，層析，和其它常規(guī)技術(shù)。
在本發(fā)明方法的另一個實施方案中，使酮基質(zhì)與靜止?fàn)顟B(tài)的微桿菌接觸。這里所說的靜止?fàn)顟B(tài)，是指微生物在不含生長支持因子的緩沖溶液中，不能活躍地生長，但仍具有所需要的功能。靜止的微桿菌細(xì)胞，可通過收獲生長的微桿菌細(xì)胞來制備，例如可用離心的方法收集細(xì)胞；被收集的細(xì)胞還可以冷凍干燥后，貯存于-80℃?zhèn)溆?。靜止細(xì)胞是在適當(dāng)?shù)木彌_溶液，如磷酸鹽緩沖液或Tris緩沖液(pH6-8)中，以細(xì)胞懸液的形式被應(yīng)用。將酮基質(zhì)加入到細(xì)胞懸液中，此混合物在20-40℃的溫度下培育，引起還原作用。任選地可對細(xì)胞懸液加入葡萄糖，以促進(jìn)生物轉(zhuǎn)化的效率。通過物理學(xué)方法吸附或富集在載體上的固定化細(xì)胞，也可以用于手性還原過程。用常規(guī)的方法可以使細(xì)胞固定化，例如以下文獻(xiàn)中所報導(dǎo)的方法Karsten，G.和Simon，H，應(yīng)用微生物技術(shù)，1993，38441-446，以及其中引用的參考文獻(xiàn)。
應(yīng)該理解，對于生物轉(zhuǎn)化作用，本發(fā)明不限于上述的特殊細(xì)菌，還應(yīng)包括保留著酮還原能力的這種細(xì)菌的變異體和突變體。這種變異體和突變體，可以借助各種處理方法從親本產(chǎn)生，例如X-射線照射，UV-照射，以及用化學(xué)誘變劑，如N-甲基-N’-硝基-N-亞硝基胍處理。
下述實施例將對本發(fā)明作更充分的說明，而不應(yīng)認(rèn)為是以任何方式對本發(fā)明的范圍進(jìn)行限制。實施例1微桿菌MB5614菌種培養(yǎng)物將在SG培養(yǎng)基(其組成成分將在下述實施例4中提供)中冷凍的微桿菌MB5614菌種1.5ml小時、瓶，在室溫下融化，然后轉(zhuǎn)入加有50mlKE培養(yǎng)基的250ml錐形瓶內(nèi)，KE培養(yǎng)基由下列成分組成(每升培養(yǎng)基的含量)10g 糊精5g pH亞當(dāng)胺(ardamine)5g E型NZ胺3g 牛肉膏1g 右旋糖0.37g K2HPO40.05g MgSO4·7H2O加去離子水使體積為1升用NaOH調(diào)pH7.10.5g CaCO3將培養(yǎng)瓶置于有軌搖床上，在28℃培育24小時，搖振速度220rpm。然后，從培養(yǎng)瓶內(nèi)取1.0ml等分量培養(yǎng)物，接種到加有500mlKE培養(yǎng)基的2.0升錐形瓶內(nèi)。將此2.0升培養(yǎng)瓶置于有軌搖床上，28℃培育24小時，搖振速度220rpm。實施例2甲基2-(3-(3-(2-(7-氯-2-喹啉)乙烯基)苯基)-3-氧代丙基)苯甲酸酯(以下稱為酮酯)轉(zhuǎn)變成甲基2-(3-(3-(2-(7-氯-2-喹啉)乙烯基)苯基)-3(S)-羥基丙基)苯甲酸酯(以下稱為羥基酯)的生物轉(zhuǎn)化(方法A)將實施例1的菌種培養(yǎng)物2ml等分量轉(zhuǎn)移到250ml的隔離培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶中加有50ml生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基，其組成如下(每升培養(yǎng)基的含量)20g 葡萄糖5g 大豆粉5g 酵母膏5g NaCl9.8g N-嗎啉代乙烷磺酸(MES)用去離子水配成1升體積，pH調(diào)至7.0將溶于丙酮(0.5ml)的酮酯(5mg)溶液加入到該培養(yǎng)基內(nèi)，此培養(yǎng)瓶置于在搖床上，在黑暗中27℃培育，振搖速度220rpm。用如下方法監(jiān)測生物轉(zhuǎn)化過程在不同的時間間隔，從培養(yǎng)瓶內(nèi)取出1ml樣品，與1ml異丙醇混合。將此混合物旋轉(zhuǎn)混勻后再離心，從上清液中取出等分量用HPLC法測定(Whatman Partisil 10 ODS-3分析柱；洗脫液線性梯度的乙腈水溶液(55％-95％，30分鐘內(nèi))，流速1ml/分鐘，柱溫45℃)。實施例3羥基酯的分離和質(zhì)量鑒定培育48小時之后，將4個培養(yǎng)瓶中的生物轉(zhuǎn)化液體培養(yǎng)基合并(總量200ml)，調(diào)整pH至6.0。將該液體培養(yǎng)基離心(速度3700rpm，20分鐘)，回收上清液。然后將沉淀物懸浮于150ml甲醇中，在黑暗中攪拌30分鐘。將此懸浮液如上離心，再回收上清液。將沉淀物再提取一次，得到的上清液同前面回收的上清液合并。
將此合并提取液與等體積二氯甲烷混合，劇烈振搖后回收二氯甲烷相，并減壓干燥。將此干燥殘留物在半預(yù)制硅膠板上點樣，硅膠板在二氯甲烷溶液系統(tǒng)中展開。在紫外燈下測定展開后的TLC板，將比基質(zhì)具有較低Rf值的主要UV-吸收帶定位。刮去該區(qū)域內(nèi)的硅膠，用二氯甲烷作徹底的抽提。將該提取物減壓濃縮，并過濾。
將過濾的提取物，通過幾次對半預(yù)制的Whatman Partisil 10ODS-3(9.4mm×25cm)柱加樣作進(jìn)一步純化。對該柱用與分析柱相類似的條件進(jìn)行展開，只是流速不同，為3ml/分鐘(見實施例2)。將經(jīng)HPLC純化的分合并并用二氯甲烷徹底抽提。用Na2SO4干燥二氯甲烷抽提物，再在氮氣下濃縮至完全干燥，得到最后的干燥產(chǎn)物3.5mg(對基質(zhì)的產(chǎn)物的直接HPLC定量表明，據(jù)收獲的時間不同，轉(zhuǎn)化率為30-40％)。NMR和FAB-MS色譜分析證明產(chǎn)物是甲基2-(3(S)-3-(2-(7-氯-2-喹啉)乙烯基)苯基)-3-羥基)丙基)苯甲酸酯，HPLC純化級分在Chiralcel OD柱上的手性色譜分析(洗脫液90％己烷/異丙醇，流速2ml/分鐘，保留時間(S)-羥基酯17.9分鐘，(R)-羥基酯19.8分鐘)表明存在95％的過量對映體。實施例4酮酯轉(zhuǎn)變成羥基酯的生物轉(zhuǎn)化(方法B)將實施例1的菌種培養(yǎng)物10ml等分量接種到2.0升錐形培養(yǎng)瓶內(nèi)，瓶中加有500ml生產(chǎn)培養(yǎng)基(SG培養(yǎng)基)，該培養(yǎng)基組成如下(每升培養(yǎng)基的含量)0.5g FeCl3·6H2O30g 右旋糖20g 谷氨酸單鈉(MSG)9.8g MES5g 酵母膏5g NaCl加去離子水至1升(pH7.0用NaOH調(diào)整)將此培養(yǎng)瓶置于有軌搖床上，在28℃培育，振搖速度200rpm。
該生產(chǎn)培養(yǎng)物被培育5天之后，加入酮酯(250mg，溶于二甲基亞砜，形成25mg/ml的溶液)。在接種后的第8天和第9天，加入追加量酮酯(每次250mg)。通過測定培養(yǎng)物中酮酯和羥基酯的濃度，可監(jiān)測生成羥基酯的生物轉(zhuǎn)化過程。簡單地說，取等分量培養(yǎng)物液體培養(yǎng)基，用二倍體積的乙酸乙酯萃取。然后將此提取物在氮氣中干燥，并再懸浮于乙腈中，將此乙腈溶液在Zorbax RX-C8 HPLC柱上進(jìn)行色譜分析(流動相10-90％的乙腈水溶液，用0.1％H3PO4酸化液體培養(yǎng)基，流速1.5ml/分鐘)。保留時間(酮酯)＝5分鐘，保留時間(羥基酯)＝12分鐘。在這些條件下的生物轉(zhuǎn)化，在接種后的第10天，產(chǎn)生的羥基酯大約500mg/l，反應(yīng)過程中的生產(chǎn)速率大約100mg/天。實施例5用微桿菌MB5614靜止細(xì)胞將酮酯轉(zhuǎn)變成羥基酯的生物轉(zhuǎn)化使微桿菌MB5614培養(yǎng)物按照在實施例1和2中所述的步驟培養(yǎng)生長。培養(yǎng)物在生物轉(zhuǎn)化培養(yǎng)基內(nèi)，置于有軌搖床上，在28℃培育44小時，振搖速度220rpm，以15000rpm的速度離心120分鐘收集細(xì)胞。得到的沉淀物用pH7.2的0.1M磷酸鹽緩沖液洗3次，然后冷凍干燥，貯存于-80℃。
使細(xì)胞融化解凍，制成4∶5g/V緩沖液的懸浮液，然后向細(xì)胞懸浮液加入酮酯(5mg/0.5ml DMSO)。將此混合物在27℃下培育。如上所述監(jiān)測生物轉(zhuǎn)化過程。培育40小時之后，觀測到大于50％的轉(zhuǎn)化率(HPLC的測定結(jié)果)。
對細(xì)胞懸浮液加入葡萄糖(0.1M)，培養(yǎng)40小時之后，得到大約60％的轉(zhuǎn)化率。
權(quán)利要求
1.一種制備式(III)化合物的方法， 它包括使式(IV)的化合物與微桿菌MB5614ATCC55557或者具有酮還原能力的其突變體或變異體相接觸 其中A是-CH＝CH-S-或-CH＝CH-CH＝CH-；R1和R2獨立地是氫或鹵素；R3是CO2R6，COR6或C(R7)2-O-R8；R6是氫或低級烷基；R7是低級烷基；R8是氫或羥基保護(hù)基。
2.權(quán)利要求
1的方法，其中A是-CH＝CH-CH＝CH-，R1和R2中的一個是氫，另一個是鹵素，而R3是CO2R6。
3.權(quán)利要求
1的方法，其中A是-CH＝CH-CH＝CH-，R1和R2中的一個是氫，另一個是氯，R3是CO2CH3。
4.權(quán)利要求
1的方法，其中所說的微桿菌是培養(yǎng)在含有可同化的碳源和氮源的水營養(yǎng)培養(yǎng)基中的。
5.權(quán)利要求
1的方法，其中所說的微桿菌處于靜止?fàn)顟B(tài)。
6.權(quán)利要求
4的方法，其中所說的營養(yǎng)培養(yǎng)基還含有FeCl3。
7.權(quán)利要求
4的方法，其中所說的營養(yǎng)培養(yǎng)基還含有谷氨酸單鈉。
8.權(quán)利要求
4的方法，其中所說的營養(yǎng)培養(yǎng)基還含有FeCl3和谷氨酸單鈉。
9.微桿菌MB5614 ATCC 55557或者具有酮還原能力的其突變體或變異體的生物學(xué)純培養(yǎng)物。
專利摘要
本發(fā)明提供了一種用于將苯基烷基酮立體有擇還原成其相應(yīng)的(S)-羥基化合物的方法。此方法是利用新的微桿菌(Microbacterum)MB5614來實現(xiàn)這種手性還原作用的，本發(fā)明還提供了這種新的微生物，它已保藏于ATCC，保藏號為ATCC55557。
文檔編號C12N1/20GKCN1078249SQ95194254
公開日2002年1月23日 申請日期1995年7月14日
發(fā)明者M·M·沙特雷恩, 陳世上, G·M·加里蒂, B·亨布殊, C·勒貝格, A·沙菲 申請人:麥克公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan